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诊断学(第9版)第四篇-实验诊断-第八章-临床常用免疫学检测

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第八章 常用免疫学检查3-23

第八章 常用免疫学检查3-23
肿瘤标志物分类大致有两种:其一按肿瘤标志物的来源，第 二个肿瘤标志物本身的化学特性。 按后者的分类主要包括: ①肿瘤胚胎性抗原标志物; 肿瘤胚胎性抗原标志物 ②糖类标志物; 糖类标志物 ③酶类标志物; 酶类标志物 ④激素类标志物; 激素类标志物 ⑤蛋白质类标志物; 蛋白质类标志物 ⑥基因标志物。 基因标志物。
乙型肝炎病毒 （HBV)的实验室诊断 的实验室诊断
HBV 为 乙 型 肝 炎 的 病原 体 ， 归 类 于 Hepadna病毒科(1981年Robinson提倡的 新病毒科)，为一直径42nm的球形颗粒， 病毒核酸由两条不完全的环状DNA组成， 有 3200 个 碱 基 对 。 HBV 外 层 为 一 厚 约 7nm 的 包 膜 ， 称 为 乙 型 肝 炎 表 面 抗 原 (HBsAg)， 内层的抗原称为乙型肝炎核 ， 心 抗 原 (HbcAg) 和 乙 型 肝 炎 e 抗 原 (HBeAg)， 两者组成 ， 两者组成HBV的核心部分 ， 的核心部分， 的核心部分 HBeAg是HBcAg的一部分被切断后由149 个氨基酸组成的多肤。核心内部还包含有 双股DNA和DNA聚合酶见下图。
临床常用免疫学检查
胡正军 浙江省中医院检验科 hu209ster@
基本概念
免疫
免疫是指机体接触“抗原性异物” 免疫是指机体接触“抗原性异物或
异己成分” 的一种特异性生理反应， “ 异己成分 ” 的一种特异性生理反应 ， 其作用是 识别和排除抗原性异物， 识别和排除抗原性异物， 以此维持机体的生理平 这些维持机体稳定性的反应， 衡 。 这些维持机体稳定性的反应 ， 通常对机体是 有利的：但在某些条件下也可以是有害的。 有利的：但在某些条件下也可以是有害的。
甲型肝炎病毒标志物 RNA病毒，粪-口传播 检测指标：抗HAV抗体（保护性抗体） HAVAg（粪） HAV-RNA

实验-诊断临床常用免疫学检查课件

实验-诊断临床常用免疫学检查课件

8
补体 (complement ，C)
概念： ----组成： ----作用： ----- (两面性)
9
10
补体C3 (complement C3 ， C3 )
▪ 肝脏合成，含量最多。 ▪ 是经典\旁路途径被激活的关键物质 ▪ 比总补体活性更敏感。
11
▪ 降低：
补体C3
① 原料不足: 如营养不良； ② 合成降低: 如慢性肝病 ③ 消耗: 自身免疫性疾病 ④ 丢失：大面积烧伤等；
一组具有
活 性 或 抗 体 样 结 构 的 蛋白质
筛查试验敏感性高，确认试验阳性才能确认
大量丢失: 肾病综合征、大面积烧伤等； ② 合成降低: 如慢性肝病
③ 消耗: 自身免疫性疾病 76g/L ，IgM为0.
破坏骨质
(X线、高钙血症)
(3)新生儿和婴幼儿 ：较低 针对真核细胞核成分的自身抗体总称。
体液免疫(Ig 、C3)
▪ 血沉：
45mm／1h。
▪ 免疫学检查：RF + ，ANA +，抗ds-DNA + ，
ASO 160。
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艾滋病病毒抗体检查
▪ 筛查试验敏感性高，确认试验阳性才能确认 窗口期1~3个月。
▪ 其他检查： CD4 、CD8 、CD4/CD8 机会性感染病原体检测
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▪ 某男，发热、剧烈腹泻20余天，近期表现 为反复感染、消瘦、衰竭，有输血史。
一阳组性具率有25％~4活0％性。或抗体样结构的蛋白质 6风9湿g/L热，病Ig人A为，9C. RP增高、血沉加快、白细胞增多，考虑风湿活动。 9S5L%E特＜异20性0µ标g/志L，之一一过，性特，异与性9A9L％T同；步
▪ 活动期SLE效价较高 3免．疫观球察蛋风白湿热( i、mmSuLnEog、lobRuAli等n，疾I病g)是否活动期

实验诊断学临床常用免疫学检测PPT课件

实验诊断学临床常用免疫学检测PPT课件

cANCA（乙醇固定）
cANCA（Hep2细胞）
cANCA（小鼠肝）
PANCቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ（甲醛固定）
PANCA（乙醇固定）
PANCA（Hep2细胞）
PANCA（小鼠肝）
诊断学
第8章 临床常用免疫学检测
抗核抗体荧光核型图片 核均质型（Hep2细胞）
核均质型（小鼠肝）
核粗颗粒型
核细颗粒型
核点型
核膜核型，均质型（Hep-2细胞）
核膜型，核均质型（小鼠肝）
核仁型
核仁型（Scl70）
着丝点型，线粒体型
抗胞质抗体测定 抗线粒体抗体（Hep 2细胞）
抗线粒体抗体（大鼠肝）
抗线粒体抗体（大鼠肾）
抗肌动蛋白抗体
抗Jo1抗体
抗原肌球蛋白抗体
抗胞浆抗体（高尔基复合体）
抗胞浆抗体（溶酶体）
抗肾小球基底膜抗体
抗胃壁细胞抗体（大鼠胃）
抗平滑肌抗体（大鼠胃）
抗平滑肌抗体（大鼠肾）
抗心肌抗体
抗心肌闰盘抗体
肝肾微粒体抗体 （大鼠肝）
肝肾微粒体抗体（大鼠肾）
cANCA（甲醛固定）

实验诊断学--临床常用免疫学检查 ppt课件

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IgM 约占血清总Ig的 5%~10%
分子量最大（900000），由五个IgM 单体连接而成，故又称巨球蛋白。
脾脏是它的主要合成部位，IgM主要分 布于血液中，防止发生菌血症方面起重 要作用，半衰期5天左右。
天然同族凝集素抗 A抗B、冷凝集素及 伤寒沙门菌的抗体
均属此类。
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17
百分比
参考值
正常人群各年龄 段个体中血清 IgG、IgA、IgM 的含量有很大差
异
70%-80% 7.0-16.6g/L
10%-15% 0.7-3. 5g/L
5%-10% 0.5-2.6g/L
0.02%-1% 0.6-2.0mg/L
0.002% 0.1-0.9mg/L
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13
测定方法
❖ 血清中含量较高的 IgG、IgA、IgM多 采用单向免疫扩散法、火箭免疫电泳法和免 疫比浊法，而标本中含量极微的IgD和IgE则 采用敏感度较高的放射免疫法和酶免疫法等 进行定量测定。
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14
IgG 占总Ig的70%~80%
是血清中的主要抗体，主要由脾脏和 淋巴结合成，在机体的免疫防御中起重要作 用，抗细菌、病毒和寄生虫等，还具抗毒素 作用，为不完全抗体，分子量小 （150000），唯一能自由地通过胎盘。
半衰期约为23天， 故临床上使用丙球 作治疗时以2～3周
注射一次
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高Ig血症
❖ 慢性细菌感染:肺结核,麻风,慢性支气管炎, 感染早期IgM显著升高，以后IgG升高，IgA 也可升高。
15
IgA 约占血清总Ig 10%~15%
分为血清型与分泌型两种，具有抗细 菌、抗病毒、抗毒素作用，其中的分泌 型（SIgA）在局部与抗呼吸道、消化道 和泌尿生殖道感染、炎症或肿瘤等病变 密切相关,是抗过敏的重要免疫屏障。

实验诊断学：临床常用免疫学检测

实验诊断学：临床常用免疫学检测
（CH50）。 增高见于急性炎症和某些恶性肿瘤等；减低见于
各种免疫复合物性疾病等。
二、补体C3 、C4检测
C3：含量最高，是补体系统经典激活途径与旁路激活途径的 汇合点和关键物质，为急性时相反应蛋白。
C4：参与经典途径，多种生物学功能。 临床意义： （1）增高：急性炎症、传染病早期、组织损伤、移植排斥反应
(一)正常血清免疫球蛋白（五大类） ：有抗体活性
IgG---含量最多、比例最高、唯一通过胎盘的主力抗体。 IgA---分泌型IgA（SIgA）主控黏膜局部免疫，存在于外
分泌液中（如唾液、泪液、母乳等）。 IgM---分子量最大、凝集和溶解力最强。 IgD---含量很低功能不祥。 IgE---含量最低、亲细胞、参与变态反应（如寄生虫感染、
NK细胞活性：减低见于血液系统肿瘤、实体瘤、免疫缺 陷病、艾滋病和某些病毒感染等；升高见于宿主抗移植 物反应。
抗体依赖性细胞介导的细胞毒（ADCC）:由细胞表面的抗 体Fc受体介导。
四、细胞因子（cytokine,CK）检测
概念：细胞因子是一类由免疫细胞和相关细胞产生的调节细胞功能的 高活性、多功能、低分子的分泌性蛋白质，属于微量免疫调节因子。
参考值：形态学法的转化百分率为（60.1±7.6）%。 临床意义：同前，但Down综合征时明显升高。
（三）T细胞分化抗原（CD）测定
1.T细胞分化抗原主要类别： CD3+ —代表总T细胞、 CD4+ —代表T辅助性 细胞（Th）、 CD8+ —代表T抑制性细胞（Ts）。
2.临床意义： CD3+降低：自身免疫性疾病（AID），如SLE、RA等。 CD4+降低：恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、 AIDS、应用免疫抑制剂者

8 第八章 临床常用免疫学检测_诊断学(十三五_第9版)

8 第八章 临床常用免疫学检测_诊断学(十三五_第9版)
哮喘、过敏性鼻炎、间质性肺炎、荨麻疹、嗜酸性粒细胞增多症、疱疹样皮炎、 寄生虫感染、支气管肺曲菌病等疾病。 ➢ 降低：见于先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤、长期用免疫抑制剂和共济失 调性毛细血管扩张症等。
诊断学（第9版）
一、免疫球蛋白
（五）M蛋白
M蛋白或称单克隆免疫球蛋白，一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移 率的免疫球蛋白分子及其分子片段。 1.参考值 阴性 2.临床意义 检测到M蛋白，提示单克隆免疫球蛋白增值并，见于： ➢ 多发性骨髓瘤 ➢ 巨球蛋白血症 ➢ 重链病 ➢ 轻链病 ➢ 半分子病 ➢ 恶性淋巴瘤 ➢ 良性M蛋白血症
诊断学（第9版）
二、补 体 系 统
（六）补体结合试验（CFT）
补体结合试验（CFT)是用免疫溶血机制做指示系统，来检测另一反应系统抗原或抗体的 试验。早在1906年Wasermann就将其应用于梅毒的诊断，即著名的华氏反应。这一传统的 试验经不断改进，除了用于传染病诊断和流行病学调查以外，在一些自身抗体、肿瘤相关抗 原以及HLA的检测和分析中也有应用。
诊断学（第9版）
二、补 体 系 统
（一）总补体溶血活性（C50）检测
总补体溶血活性（CH50)检测的是补体经典途径的溶血活性，主要反映经典途径补体的 综合水平。补体最主要的活性是溶细胞作用，溶血程度与补体量呈正相关，一般以50%溶血 作为检测终点（CH50)。 1.参考值 50-100kU/L（试管法） 2.临床意义 主要反映补体经典途径（C1-C9)的综合水平 ➢ CH50增高 见于急性炎症、组织损伤和某些恶性肿瘤。 ➢ CH50减低 见于各种免疫复合物性疾病、自身免疫性疾病活动期、感染性心内膜炎、病
毒性肝炎、慢性肝病、肝硬化、重症营养不良和遗传性补体成分缺乏症等。

临床常用免疫学检查新ppt课件


临床常编用辑免版疫pp学t 检查
9
•
IgG最多、主力军 IgA血清型和分泌型 IgM最早出现 IgD功能尚不完全清楚 IgE与变态反应有关
2020/8/20
临床常编用辑免版疫pp学t 检查
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正常值： 单向免疫扩散法— IgG 7.0~16.6 g/L IgA 0.7~3.5g/L IgM 0.5~2.6 g/L ELISA法— IgE 0.1~0.9mg/L
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编辑版ppt
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2020/8/20
编辑版ppt
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二、维持机体内环境稳定
•促进免疫复合物清除 •清除凋亡细胞
2020/8/20
编辑版ppt
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3、清除免疫复合物
2020/8/20
编辑版ppt
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清除凋亡细胞的机制 C1q、MBL、C3b等可与凋亡细胞的分子结合
2020/8/20
2020/8/20
编辑版ppt
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第三节 免疫细胞检测
针对细胞的数量(amount)、活性（功 能 function）、表面标志物(membrane molecules )表达(express)程度～
T细胞免疫检测 B细胞免疫检测 自然杀伤细胞检测 细胞因子检测 中性粒细胞吞噬杀菌功能检测
2020/8/20
第四节 肿瘤标志物 （tumor marker）检测
1、是由肿瘤细胞本身合成、释放或机体对肿瘤细 胞反应而产生的一类物质
2、可反映细胞恶变各阶段的表型及基因特征性 3、包括蛋白类（甲胎蛋白、癌胚抗原等）、糖类、 酶类肿瘤标志物
2020/8/20
临床常编用辑免版疫pp学t 检查
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恶性肿瘤增长的检测

诊断学(第9版)第八篇 临床常用诊断技术 第四章 腹膜腔穿刺术


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诊断学（第9版）
二、操作前准备和方法
5.麻醉 自皮肤至腹膜壁层用2％利多卡因逐层作局部浸润麻醉。 6.穿刺 医生左手固定穿刺处皮肤，右手持针经麻醉处逐步刺入腹壁，待感到针尖抵抗感突然消失 时，表示针尖已穿过腹膜壁层，即可行抽取和引流腹腔积液，并置腹腔积液于消毒试管中以备检验用， 诊断性穿刺可直接用无菌的20ml或50ml注射器和7号针头进行穿刺。大量放液时可用针尾连接橡皮管 的8号或9号针头，助手用消毒血管钳固定针头，并夹持橡皮管，用输液夹子调整放液速度，将腹腔积 液引流入容器中计量或送检。放液结束后拔出穿刺针，常规消毒后，盖上消毒纱布，并用多头绷带将腹 部包扎，如遇穿刺孔继续有腹腔积液渗漏时，可用蝶形胶布封闭。 7.术后的处理 术后测量血压、脉搏、腹围。交代病人注意事项。医疗垃圾分类处理。
诊断学（第9版）
一、适应证和禁忌证
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腹膜腔穿刺术（abdominocentesis）是指对有腹腔积液的病人，为了诊断和治疗疾病
．诊进断行性腹腔穿刺，抽取积液进行检验的操作过程。
1.适应证
➢ 抽取腹腔积液进行各种实验室检验，以便寻找病因，协助临床诊断
➢ 大量腹腔积液引起严重胸闷、气促、少尿等症状，病人难以忍受时，可适当抽放腹腔积液以缓
第四章
腹膜腔穿刺术
作者 : 曾锐
单位 :四川大学华西医院
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重点难点
掌握
腹膜腔穿刺术的临床应用。
熟悉
腹膜腔穿刺术操作方法。
了解
腹膜腔穿刺术注意事项。
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临床常用免疫学检查ppt课件


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6
二.血清M蛋白(monoclonal immunoglobulins)测 定
测定方法：蛋白电泳法、免疫比浊法和免疫 电泳法
参考值：阴性
意义：检测到 M蛋白，提示单克隆免疫球蛋 白增殖性疾病。见于多发性骨髓瘤、巨球 蛋白血症、重链病、轻链病和半分子病等
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三.血清补体检测
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2
一.体液免疫功能 检测
• 检测血清免疫球蛋白及其类别（尤 其是IgG、IgA和IgM ）和水平，可为诊 断免疫缺陷性疾病和免疫增殖性疾病 提供重要参数。
• 检测针对疫苗或感染因子的特异性抗 体及其水平，可较直接反映机体特异 性体液免疫功能状态。
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3
1．免疫球蛋白（immunoglobulin,Ig)
3.补体 C 1q
方法：单向免疫扩散法 (0.197-0.04 g/L )
意义：1、增加见于骨髓炎、类风湿性关节炎、痛 风、过敏性紫癜等；2、降低见于SLE和混合性结 缔组织病等。
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4.BF
方法：单向免疫扩散法 (0.1-0.4g/L)
意义：增高见于某些自身免疫病、肾病综合征、慢 性肾炎、恶性肿瘤； 2、减低见于肝病、急性肾 小球肾炎、自身免疫性溶血性贫血。
• 基本概念
补体(complement)：是一组具有酶原活性的糖蛋白，由传 统途径的 9种成分C 1 - C 9 、旁路途径的3种成分及其 衍生物组成，参与灭活病原体的免疫反应，也参与破坏自 身组织和自身细胞而造成的免疫损伤。
1.补体 CH 50
方法：试管法
参考值：50000-100000u/l
意义：反映补体传统途径活化的活性程度。 1、CH 50

实验诊断学---临床常用免疫学检查

临床常用免疫学检查 Immunological tests免疫功能检查(immunological function)血清免疫球蛋白检测血清补体检测细胞免疫检测(immunoglobulin, complements, cell immune)自身免疫检测(auto-antibodies)类风湿因子测定抗核抗体检测组织和细胞抗体检测(RF ANA other antibodies)感染免疫检测(infectious immunology)细菌感染免疫检测病毒感染免疫检测其它(寄生虫感染、性病等）(bacterial , virus and so on )肿瘤标志物检测(tumor markers)蛋白质类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物酶类肿瘤标志物(proteins, glycolipid, enzymes markers)器官与骨髓移植的检测(organ and bone marrow transplantation)病毒肝炎血清标志物(virus hepatitis markers)其它循环免疫复合物检测、冷球蛋白检测、丙种反应性蛋白检测Ⅰ、免疫功能检查(immunological function)一、血清免疫球蛋白检测(Immunoglobulin test)１、Immunoglobulin１）概念：具有抗体活性和抗体样结构的球蛋白，由浆细胞产生，存在于体液，血液，外分泌液和一些细胞膜上。

２）分类: 用超速离心、免疫电泳方法可将免疫球蛋白分为五类：IgG、IgA、IgM、IgD 、IgEIgG最多、占75%～85%抗体活性IgA血清型和分泌型两种IgM是有效的凝聚和溶解细胞的因子。

最早；最先IgD功能尚不完全清楚IgE与变态反应有关(0.002%)３）功能：２、normal range：免疫比浊法、ELISA法多克隆(Polyclonal)增高: IgG IgA IgM均增高单克隆(Monoclonal)增高: 仅某一种Ig增高而其他种不增高3、增高【临床意义】增高：多克隆性增高(polyclonal elevate)慢性感染、慢性肝病、自身免疫性疾病(chronic infection, chronic hepatitis, AID) 单克隆性增高(monoclonal elevate)免疫增殖性疾病( proliferative disease)IgG：感染性疾病、自身免疫性疾病IgA：黏膜炎症、在皮肤病变IgM：毒血症、感染性疾病早期4、M蛋白（Monoclonal protein）1）概念：单克隆B淋巴细胞异常增殖产生免疫球蛋白，具有相同结构和电泳迁徙速度，但不具有抗体活性。

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（四）补体C4
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诊断学（第9版）
（五）补体旁路B因子
二、补 体 系 统
（六）补体结合试验
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第二节
细胞免疫检测
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（五）M蛋白
一、免疫球蛋白
一种单克隆B细胞增殖产生的具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子及其分子片段。
➢ 多发性骨髓瘤 ➢ 巨球蛋白血症 ➢ 重链病 ➢ 轻链病 ➢ 恶性淋巴瘤 ➢ 良性M蛋白血症
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诊断学（第9版）
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一、蛋白质类肿瘤标志物检测
（四）前列腺特异抗原测定
一种由前列腺分泌的单链糖蛋白，它存在于前列腺管道的上皮细胞中，在前列腺癌时可 见血清PSA水平明显升高。血清总PSA（t-PSA）中有80%以结合形式存在，称复合PSA （c-PSA）；20%以游离形式存在，称游离PSA（f-PSA）。
1.前列腺癌时60%～90％病人血清t-PSA水平明显升高 2.部分良性前列腺疾病可见t-PSA轻度升高 3.当t-PSA处于4.0～10.0μg/L时，f-PSA/t-PSA比值对诊断更有价值 4.某些检查及前列腺手术会引起前列腺组织释放PSA而引起血清浓度升高
二、补 体 系 统
（一）总补体溶血活性检测
（二）补体C1q
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诊断学（第9版）
（三）补体C3
二、补 体 系 统
1.生理性变化 随着年龄增长逐渐增加，12岁达成人水平。
2.病理性变化 ➢ 增高：急性时相反应，如炎症，传染病早期，肿瘤等 ➢ 降低：消耗过多，如系统性红斑狼疮；合成减少，如肝脏疾病
诊断学（第9版）
（四）免疫球蛋白E
一、免疫球蛋白
1.生理性变化 不同年龄段参考范围存在差异。
2.病理性变化 ➢ 增高：过敏性疾病，IgE型MM，重链病等 ➢ 降低：先天性或获得性丙种球蛋白缺乏症、恶性肿瘤等
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诊断学（第9版）
重点难点
掌握 临床常用免疫学检测项目的临床意义及应用
熟悉 临床常用免疫学检测项目的检测方法及参考范围
了解 各临床免疫学检测项目的特点
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第一节
体液免疫检测
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诊断学（第9版）
一、蛋白质类肿瘤标志物检测
（二）癌胚抗原测定
一种富含多糖的蛋白复合物，早期胎儿的胃肠道及某些组织均有合成CEA的能力，但妊
娠6个月以后含量逐渐降低，出生后含量极低。
1.升高主要见于主要见于胰腺癌，结肠癌，直肠癌等 2.用于动态观察 3.结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病等良性疾病也常见CEA轻度升高 4.吸烟人群可见轻度升高
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诊断学（第9版）
一、蛋白质类肿瘤标志物检测
（三）组织多肽抗原
是存在于胎盘和大部分肿瘤组织细胞膜和细胞质中的一种单链多肽，在恶性肿瘤病人 血清中的检出率高达70％以上，但它的增高与肿瘤发生部位和组织类型无相关性。
第八章
临床常用免疫学检测
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目录
第一节 体液免疫检测 第二节 细胞免疫检测 第三节 肿瘤免疫检测 第四节 自身免疫检测 第五节 感染免疫检测 第六节 抑制免疫检测 第七节 其他免疫检测
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诊断学（第9版）
一、免疫球蛋白
（一）免疫球蛋白G
1.生理性变化 不同年龄段参考范围存在差异。 2.病理性变化 ➢ 增高：慢性感染，慢性肝病，自身免疫病，免疫增殖病等 ➢ 降低：先天性和获得性体液免疫缺陷病，肾脏疾病等
（二）免疫球蛋白A
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➢ T细胞花结形成试验 ➢ T细胞转化试验 ➢ T细胞分化抗原测定
一、T细胞亚群检测
二、B细胞分化抗原检测
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诊断学（第9版）
三、自然杀伤细胞免疫检测
四、细胞因子检测
➢ IL-2活性及受体检测 ➢ 肿瘤坏死因子测定 ➢ 干扰素测定
诊断学（第9版）
（三）免疫球蛋白M
一、免疫球蛋白
1.生理性变化 不同年龄段参考范围存在差异。
2.病理性变化 ➢ 增高：初期病毒性肝炎，肝硬化，类风湿关节炎，原发性感染等 ➢ 降低：IgG型重链病，IgA型MM，先天性免疫缺陷症等
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1.原发性肝癌病人血清中AFP的含量明显升高，常>300μg/L 2.病毒性肝炎与肝硬化病人血清中AFP有不同程度的升高，但常300μg/L 3.生殖腺胚胎肿瘤病人血清中AFP可升高 4.妊娠3～4个月，孕妇AFP开始升高，7～8个月达高峰，但多低于400μg/L，分 娩后3周恢复正常
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第三节
肿瘤标志物检测
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诊断学（第9版）
一、蛋白质类肿瘤标志物的检测
（一）甲胎蛋白测定
胎儿早期由肝脏和卵黄囊合成的一种血清糖蛋白，出生后，AFP的合成很快受到抑制。