血清透明质酸的测定

老年患者8种疾病血清透明质酸测定
谭小颖;陈远智;吕汉文
【期刊名称】《实用老年医学》
【年(卷),期】1997(11)3
【摘要】老年患者８种疾病血清透明质酸测定谭小颖陈远智吕汉文广东省惠州市中心人民医院（５１６００１）为探讨血清透明质酸（ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ，ＨＡ）测定在老年疾病诊断中的临床意义，我们检测了老年８种疾病患者血清ＨＡ含量，现将结果报告如下。

１材料与方法１...
【总页数】1页(P129)
【作者】谭小颖;陈远智;吕汉文
【作者单位】广东省惠州市中心人民医院;广东省惠州市中心人民医院
【正文语种】中文
【中图分类】R592
【相关文献】
1.放射免疫分析测定血清透明质酸、四型胶原在肝脏疾病诊断中的应用 [J], 张忍贤
2.血清Ⅳ型胶原和透明质酸测定在肾脏疾病中的意义 [J], 吴垚
3.放射免疫分析测定血清透明质酸、四型胶原在肝脏疾病诊断中的应用 [J], 张忍贤
4.血清透明质酸在血液系统疾病中的测定及其临床意义 [J], 尹兆红[1];朱海青[2]
5.慢性肾脏疾病50例血清透明质酸测定的意义 [J], 张晓桂
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透明质酸酶是一种能够分解透明质酸的酶，透明质酸在生物医学领域有着广泛的应用，因此透明质酸酶的检测非常重要。

以下是几种常见的透明质酸酶检测方法：
1. 酶活性测定法：利用透明质酸酶能够催化透明质酸的降解，通过测定酶活性来确定酶的含量。

这种方法需要先提取组织中的透明质酸酶，然后将其与透明质酸混合，经过一定时间后，通过测定反应产物的含量来计算酶活性。

2. 免疫学检测法：利用透明质酸酶抗体与透明质酸酶结合的原理，通过免疫学方法来检测透明质酸酶的含量。

这种方法可以准确地测量透明质酸酶的含量，但需要较长时间来完成。

3. 分子生物学检测法：利用PCR技术来检测透明质酸酶基因的表达情况。

这种方法可以在分子水平上检测透明质酸酶的含量，但需要较高的技术水平和设备支持。

以上是常见的透明质酸酶检测方法，不同方法适用于不同的情况，需要根据具体情况选择合适的方法。

透明质酸检验操作规程透明质酸（hyaluronic acid，简称HA）检验操作规程一、实验目的：通过透明质酸检验，了解样品中透明质酸的含量，判断其质量和纯度。

二、实验原理：透明质酸是一种由N-乙酰-D-葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸通过β-1,3-和β-1,4-糖苷键连接而成的聚糖。

其含量的测定一般采用比色法或溶胀法。

三、实验材料：1. 透明质酸标准溶液2. 待测样品3. 0.1mol/L盐酸溶液4. 稀释剂5. 甲醇6. 氢氧化钠溶液7. 硫酸8. 硫酸铵四、实验步骤：1. 准备工作：（1）将透明质酸标准溶液稀释至一定浓度，制备浓度梯度。

（2）准备待测样品，确保其干燥和无杂质。

2. 比色法测定透明质酸含量：（1）取透明质酸标准溶液的一定体积，加入试管中。

（2）加入足够的稀释剂将溶液稀释至合适浓度。

（3）加入甲醇溶液溶解样品，使其溶解均匀。

（4）加入适量的氢氧化钠溶液，使溶液呈现碱性。

（5）加入硫酸铵溶液，使溶液呈现酸性。

（6）酸性溶液与盐酸溶液反应生成甲胺。

（7）甲胺与硫酸反应生成氮气。

（8）利用氮气生成的浑浊度与透明质酸含量成正比关系，通过比色计测定溶液的浑浊度。

（9）将待测样品按照相同的步骤进行测定。

（10）根据透明质酸标准曲线，计算出待测样品中透明质酸的含量。

3. 溶胀法测定透明质酸含量：（1）取一定量的待测样品，加入容量瓶中。

（2）加入足够的溶胀剂溶解样品，使其溶解均匀。

（3）将容量瓶体积定至一定体积，充分摇匀。

（4）取一定体积的溶液进行取样。

（5）通过比重计或其他方法测定样品的溶液密度。

（6）将样品的溶液密度与标准溶液的溶液密度进行比较，根据比例关系计算出透明质酸的含量。

五、实验注意事项：1. 实验过程应严格按照操作规程进行，避免误差的产生。

2. 透明质酸标准溶液的稀释要根据实验需求进而进行，避免过高或过低的浓度对实验结果的影响。

3. 样品的制备要求干燥和纯净，避免水分和杂质的干扰。

4. 比色法和溶胀法的选择要根据实验要求进行，确保结果的准确性。

透明质酸（HA）测定试剂盒（电化学发光免疫分析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人体血清样本中透明质酸（HA）的含量。

1.1包装规格： 50人份/盒、100人份/盒。

1.2主要组成成分试剂盒由磁分离试剂（M）、试剂a（Ra）、试剂b（Rb）和定标品（HA-Cal）（选配）组成。

组成及含量见下表：注：1、定标品靶值批特异，详见靶值单。

2、试剂盒条码卡内含主校准曲线。

2.1 外观2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；2.1.2 磁分离试剂摇匀后应为棕色含固体微粒的均匀悬浊液，无明显凝集、无絮状物；2.1.3 其它液体组分应澄清，无异物，沉淀物或絮状物；2.1.4 包装标签应清晰、无磨损、易识别。

2.2 空白限应不大于10.0ng/mL。

2.3 准确度将已知浓度的HA标准溶液加入到血清中，其回收率应在(85%～115%)范围内。

2.4 线性在[20.0，1000.0] ng/mL范围内，线性相关系数（r）应不小于0.9900。

2.5 精密度2.5.1 分析内精密度在试剂盒的线性范围内，浓度为（100.0±20.0ng/mL）和（300.0±60.0ng/mL）的样品检测结果的变异系数（CV）应不大于8%。

2.5.2 批间精密度在试剂盒的线性范围内，用3个批号试剂盒分别检测浓度为（100.0±20.0ng/mL）和（300.0±60.0ng/mL）的样品，检测结果的变异系数（CV）应不大于15%。

2.6 效期末稳定性本产品效期为15个月，试剂盒在2～8℃下保存至有效期末进行检测，检测结果应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5.1的要求。

2.7 特异性试剂盒与表1中有关潜在交叉反应物应无显著的交叉反应表1 交叉反应2.8 溯源性依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求提供透明质酸（HA）定标品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容，定标品溯源到企业工作校准品。

肾综合征出血热患者血清透明质酸测定的临床意义
于慧;王新嫣;刘丽萍
【期刊名称】《陕西医学杂志》
【年(卷),期】2000(029)006
【摘要】@@ 透明质酸(Hyaluronic acid,HA)与肝病的关系,国内外屡有报道,但肾病尤其是肾综合征出血热(HFRS)患者血清HA的变化报道很少.本文采用放射免疫方法(RIA)测定HFRS患者血清HA浓度,以判断各期肾功能损害及预后.
【总页数】2页(P366-367)
【作者】于慧;王新嫣;刘丽萍
【作者单位】西安市第八医院西安 710061;西安市第八医院西安 710061;西安市第八医院西安 710061
【正文语种】中文
【中图分类】R69
【相关文献】
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透明质酸ELISA试剂盒产品编号：SEKH-0509该试剂盒用于定量检测血清、血浆或细胞上清等样本中Hyaluronan的浓度仅供研究，不用于临床诊断订购热线:400-968-6088﹡技术支持邮箱:公司官网:目录背景介绍 (1)检测原理 (1)检测原理图 (2)注意事项 (2)技术要点 (3)试剂盒组成及储存 (4)自备实验器材（不提供，可代购） (4)样本收集及储存 (5)试剂准备 (6)检测步骤 (8)操作流程图 (10)结果计算 (11)典型数据 (11)常见问题及解决方法 (14)相关产品 (15)发表优秀文献 (15)透明质酸，又称透明质酸(HA)或透明质酸钠，是一种天然存在的线性聚合物。

透明质酸是一种糖胺聚糖(GAG)，广泛存在于所有脊椎动物的细胞外基质中，也存在于链球菌的某些菌株的囊中。

哺乳动物透明质酸是由三种不同的透明质酸合成酶(HAS1、2和3)之一合成的，它们产生不同链长和不同合成速率的HA聚合物。

高分子量HA(>；500kDa)具有抗血管生成、抗炎和免疫抑制作用，低分子量HA(10-500kDa)具有高血管生成和促炎作用。

HA寡聚体具有抗凋亡和上调热休克蛋白表达的作用。

在功能上，透明质酸分子对于维持组织中高度水化的细胞外基质很重要，它参与细胞粘附，支持细胞迁移。

检测原理Solarbio（Solarbio®）ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。

将抗Hyaluronan单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的Hyaluronan 会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗Hyaluronan 抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的Hyaluronan 发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的Hyaluronan，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的Hyaluronan浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中Hyaluronan的浓度。

大鼠透明质酸(HA)酶联免疫分析ELISA试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用—北京奇松生物科技有限公司产品编号：QS42052预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆以及蛋清和蛋黄中透明质酸（HA）含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中透明质酸水平。

用纯化的透明质酸结合蛋白(HABP)包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入透明质酸、生物素化的抗大鼠透明质酸结合蛋白（HABP）、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的透明质酸呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 nmol/L，做系列倍比稀释后，分别稀释成100 nmol/L，50 nmol/L ，25 nmol/L，12.5 nmol/L，6.25 nmol/L，3.12 nmol/L，1.56 nmol/L，其原液直接作为最高标准浓度，样品稀释液直接作为标准浓度0 nmol/L，临用前15分钟内配制。

如配制50 nmol/L标准品：取0.5ml 100 nmol/L的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

2.样品稀释液：1×20ml/瓶。

3.检测稀释液A：1×10ml/瓶。

4.检测稀释液B：1×10ml/瓶。

5.检测溶液A：1×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如1ul 检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。