肾性高血压模型复制的方法与常见问题浅析

浅析高血压实验动物模型的研究进展摘要：随着国家经济稳定增长，人们生活质量得到有效提升，其饮食模式、工作方式以及生活习惯也有所改变，导致高血压疾病发病率不断提升。

该疾病属于慢性心脑血管疾病，病程长，不能够根治，需要患者长期服用药物，会严重降低患者生活质量，影响其正常工作与生活。

为了有效治疗高血压疾病，有效控制患者血压症状，高血压疾病相关研究者为其建立了多种高血压实验动物模型，具体分为两大类，分别为基因相关模型与非基因相关性模型。

而基因相关模型又被分为遗传性高血压模型、基因工程高血压动物模型，非基因相关性模型包括环境诱导高血压动物模型、手术性高血压动物模型以及药物性高血压动物模型。

本次研究对高血压基因相关模型、非基因相关性模型进行分析，具体研究结果如下。

关键词：高血压；实验动物模型；研究一、基因相关模型（一）遗传性高血压模型遗传性高血压模型主要依据人类实际遗传特征建立，比较常用的试验对象为高血压大鼠。

成年的高血压大鼠的血压水平在200mmHg左右，试验前期病理性紊乱状况不够明显，试验后期可出现不同程度的高血压靶向损害，与人类原发性高血压具有较高相似性。

不过，高血压大鼠在实际研究中缺乏完善的对照机制，研究中比较常用的Wistar大鼠与高血压大鼠遗传具有较高差异度，进而对高血压大鼠研究带来一定限制[1]。

（二）基因工程高血压动物模型基因工程高血压动物又被称为人为改造动物，主要是指对参与研究动物的基因通过某种手段进行改造。

其基因工程高血压动物被分为转基因与基因敲除动物模型。

转基因常用的研究对象为小鼠，小鼠与人机体中的血管紧张素、肾上腺素具有较高相似性，转基因小鼠通过研究后，小鼠血压出现不同程度升高。

除此之外，如果将研究的小鼠中血管紧张素转化酶进行敲除，血压检测显示小鼠血压出现不同程度降低，由此表明血管紧张素转化酶对高血压发病具有至关重要作用[2]。

另外，相关研究结果显示光传感因子基因在应激性高血压进展中具有一定作用，研究表现为小鼠血管紧张素转化酶敲除后血压出现不同程度升高，并且周围交感神经出现兴奋性改变，由此也可将其作为应激性高血压的治疗点。

肾性高血压模型复制的方法与常见问题浅析白庆云徐颖姚珠星刘树民※黑龙江中医药大学150040E-mail:baiqingyun525@摘要:目的：探讨肾性高血压大鼠模型复制的方法和常见问题并对实验过程中出现的问题以及其他文献有关本方法存在的问题进行分析。

方法：取雄性Wister大鼠,80只，体重200-220g，用二肾一夹(2K1C)法造模。

观察记录各组大鼠的一般情况和术后2、4、6、8周的血压。

结果：术后手术组大鼠较术前毛色光泽度下降，体重增长缓慢甚至减轻，舌色紫绛或有瘀斑瘀点。

其中3只大鼠出现半身不遂症状。

其血压在术后2周开始明显上升，6周达最高峰并保持稳定。

结论：本方法制作高血压大鼠模型成功率高，与相关文献报道相近[2]血压稳定，易于操作。

关键词:二肾一夹肾性高血压模型方法与问题分析1.引言：有关高血压大鼠模型的复制方法有多种，但均存在种种弊端。

目前最为广泛应用的方法是狭窄肾血管造成高血压模型。

本文采用二肾一夹法复制高血压大鼠模型，不仅对实验过程进行了详细的记录，并对实验过程中出现的问题以及其他文献有关本方法存在的问题进行探讨,总结了一定的实践经验和心得体会.实验结果表明:本方法复制高血压大鼠模型再现性好,方法简单,经济实用。

2.材料与方法2.1实验材料常规小动物手术无菌包，包括眼科镊、止血钳、剪刀、手术刀、刀柄、手术针、手术线、纱布、托盘，注射器，手术台，剃须刀，孔巾，手套，口罩，手术服，以上物品均经无菌处理。

另有手术无影灯，酒精、碘伏棉球，0.1％新洁尔灭，青霉素粉针剂，葡萄糖注射液，生理盐水注射液，0.5％戊巴比妥钠。

BESN-IL动物无创测压系统多通道血压测定仪银夹：根据文献〔1〕自制，将白银碾成0.1mm厚的薄片，用剪刀剪成宽0.5cm，长1cm 的矩形，用直径为0.25mm的针灸针做直径围成小环，如图所示1cm0.5cm2.2实验方法取雄性Wister大鼠,80只，体重200-220g（黑龙江中医药大学实验动物中心提供），分为3组，手术组、假手术组和正常组（不手术）。

高血压常用模型及制备方法高血压可是个让人头疼的家伙呀！就好像家里时不时捣乱的小调皮。

那要研究它呀，就得先了解那些常用的模型和制备方法。

咱先说这自发性高血压大鼠模型，这就好比是天生就带着高血压基因的特殊族群。

这些大鼠从生下来就注定和高血压较上劲啦，它们自身的基因就决定了血压会比较高。

这就像是有些人，家族里有高血压病史，那他们患高血压的风险可能就会比别人高一些。

还有肾性高血压模型呢，这就好比是肾脏这个重要的“机器零件”出了问题。

通过对肾脏进行一些操作，比如结扎肾动脉啥的，让肾脏不能正常工作了，血压也就跟着上去啦。

这就像汽车的发动机出了故障，那整个车子的运行都会受到影响呀。

再说说内分泌性高血压模型，这就好像身体里的内分泌系统这个“指挥中心”乱了套。

激素分泌不正常了，血压也就跟着波动起来。

就跟一个团队里指挥的人乱了方寸，那整个团队的秩序不也就乱了嘛。

那这些模型是怎么制备出来的呢？就拿肾性高血压模型来说吧，那可得小心翼翼地在肾脏上动手术呢。

这可不是随便谁都能做的，得是专业的科研人员才行呀。

他们就像技艺高超的工匠，精心雕琢着每一个细节。

自发性高血压大鼠呢，那得精心挑选和培育呀，要保证它们的基因纯正，这样研究出来的数据才可靠呢。

这就像挑选优秀的运动员苗子，得从根上就选好。

内分泌性高血压模型的制备也不简单呀，得准确地调节激素水平，稍有不慎可能就前功尽弃啦。

这多像走钢丝呀，得稳稳地把握好平衡。

这些模型和制备方法可是研究高血压的重要工具呢，通过它们，我们能更深入地了解高血压的发病机制、发展过程，也能为寻找更好的治疗方法提供依据。

它们就像是我们探索高血压这个神秘领域的钥匙，打开一扇扇知识的大门。

所以呀，可别小看了这些模型和制备方法，它们可是为攻克高血压这个难题立下了汗马功劳呢！咱得好好利用它们，让高血压不再那么可怕，让更多的人能摆脱高血压的困扰，过上健康快乐的生活，难道不是吗？。

《基于DGGE和real-time PCR分析肾性高血压大鼠肠道菌群变化》篇一一、引言肾性高血压是一种常见的疾病，其发病机制复杂，涉及多种生理和病理过程。

近年来，越来越多的研究表明，肠道菌群与高血压的发生、发展密切相关。

为了深入探讨肾性高血压大鼠肠道菌群的变化，本研究采用DGGE（变性梯度凝胶电泳）和real-time PCR技术，对肾性高血压大鼠的肠道菌群进行分析。

二、材料与方法1. 实验动物与分组本实验选用健康SD大鼠，随机分为两组：正常组和肾性高血压组。

通过手术方法建立肾性高血压大鼠模型。

2. 肠道菌群分析方法（1）DGGE技术：采集大鼠粪便样本，提取DNA，进行PCR扩增后，利用DGGE技术分析肠道菌群的多样性及组成。

（2）real-time PCR技术：针对不同菌群设计特异性引物，通过real-time PCR技术定量分析各菌群在肠道中的丰度。

三、结果1. DGGE结果分析通过DGGE图谱分析，我们发现肾性高血压组大鼠的肠道菌群多样性较正常组降低，优势菌群发生改变。

具体表现为某些条带的亮度减弱或消失，同时出现新的条带。

这表明肾性高血压大鼠的肠道菌群结构发生了显著变化。

2. real-time PCR结果分析通过real-time PCR技术，我们定量分析了肠道中主要菌群（如厚壁菌门、拟杆菌门、乳酸杆菌等）的丰度。

结果显示，肾性高血压组大鼠的肠道中厚壁菌门和乳酸杆菌的丰度降低，而拟杆菌门的丰度升高。

这进一步证实了肾性高血压大鼠肠道菌群的结构发生了改变。

四、讨论本研究利用DGGE和real-time PCR技术，对肾性高血压大鼠的肠道菌群进行了分析。

结果表明，肾性高血压大鼠的肠道菌群多样性和结构发生了显著变化。

这些变化可能与肾性高血压的发生、发展密切相关。

首先，DGGE图谱分析显示，肾性高血压组大鼠的肠道菌群多样性降低，优势菌群发生改变。

这可能是由于肾性高血压导致大鼠肠道微生态失衡，使得某些菌群的生长受到抑制，而其他菌群得以繁殖。

大鼠高血压模型的制备方法
一、肾血管性高血压模型。

这是比较常见的一种方法哦。

我们可以通过手术来实现呢。

比如说，把大鼠的一侧肾动脉给它弄窄一点，就像给水管子捏一捏，让水流变小一样。

可以用银夹或者丝线来部分结扎肾动脉。

这样肾脏的血流灌注就会减少啦，肾脏就会觉得很“紧张”，然后就会释放出一些物质，让血压升高呢。

不过这个手术可有点考验技术哦，要小心别把肾动脉弄破了，不然大鼠可就遭罪啦。

二、盐敏感性高血压模型。

这个方法就比较简单粗暴啦。

给大鼠喂高盐的食物，超大量的盐哦。

大鼠吃了这么多盐，身体就会发生一些变化。

就像我们人吃太多盐也可能血压升高一样。

通常会给大鼠喂含8% - 10%氯化钠的食物，这可比我们平时吃的盐多多了。

但是这种模型可能需要比较长的时间才能让大鼠的血压明显升高，要有耐心等待哦。

三、自发性高血压大鼠模型。

这个就比较特殊啦。

有一些大鼠天生就容易得高血压，它们的基因就决定了。

这种自发性高血压大鼠是经过很多代选育出来的。

直接用这种大鼠来做研究就很方便啦，不用像前面两种方法那样去折腾大鼠让它得高血压。

不过这种大鼠的价格可能会比普通大鼠贵一些呢。

四、内分泌性高血压模型。

可以通过给大鼠注射一些激素或者药物来让它血压升高。

比如说醛固酮，给大鼠注射醛固酮之后，它体内的水盐代谢就会紊乱，然后血压就蹭蹭往上升啦。

但是这种方法也要注意剂量哦，剂量太大可能会对大鼠有不好的影响，毕竟我们也要爱护这些小实验动物嘛。

高血压动物模型高血压病是全身小动脉痉挛引起血管外周阻力增加的直接后果,小动脉的痉挛与遗传/精神刺激、应激、肾脏缺血、肾上腺皮质的作用及钠的作用等诸多因素有关，目前动物高血压模型的复制多以不同角度模拟高血压这些易患因素而形成。

所用动物模型有自发性高血压大鼠(SHR)、神经原型、肾外包扎型和醋酸脱氧皮质酮(DOCA)盐型高血压大鼠、肾血管型高血压狗、盐敏感性和盐抵抗性高血压大鼠等。

（一）、神经原型高血压模型：可用狗、大白鼠和家兔等，通过机能性方法或物理方法作用于动物神经系统而诱发条件反射性高血压和皮层性高血压模型。

1、神经精神刺激：强烈的声、逛、电刺激，条件反射冲突等可以引起动物高级神经中枢强雷兴奋及血压升高。

缺点是这种血压升高不能持久，同时，动物对相同刺激有适应的倾向，因此不能建立持久的高血压模型。

2、去除压力感受器神经：用电损伤动物的孤束或用6-羟多巴胺破坏孤束核的儿茶酚胺神经元，使减压反射中枢失去调整血压的功能，可建立慢性高血压模型，但是有一部分动物可能在手术后短期内死亡。

（二）自发性高血压大鼠模型Okamoto等将血压为19.3~23.3KPa的雄性Wistar大鼠与血压为17，3~18.6KPa的同种雌鼠交配，其子代选择血压高者作为近亲交配，三代后，多数动物血压超过24KPa，他们称之为自发性高血压大鼠（SHR）。

通过不断选种，到1969年获得了近交系SHR，至1986年该系已传到第80代。

SHR的后代100%发生高血压。

一般在出生后血压随年龄而逐渐升高，据第30~32代统计，生后第10周雄鼠血压平均为24.5±2.3KPa，雌鼠为23.7±1.9KPa，此后还会继续升高，常可超过26.6KPa。

血压升高机制：在高血压大鼠生长的早期，其血管阻力持续增加，血压升高，心肌肥大，机体的肾素-血管紧张素系统激活，这一过程持续到生存晚期，并发展为更严重的心肌肥大和充血性心功能衰退。

肾扎性高血压模型的制作步骤及方法
【操作步骤】常用动物为成年SD或Wistar大鼠，120～150g大鼠，麻醉，俯卧位固定，腹部下方垫一高约2～3cm的棉纱，腹部手术区备皮，消毒皮肤，从第10胸椎到第3腰椎处沿脊柱中线切开皮肤，在左侧季肋下1.5～2cm和距脊柱1cm处用小血管钳分开肌肉，用两指从腹下部将肾脏自创口中挤出，小心地将肾脏与周围组织剥离，将自制的双层乳胶薄膜剪成“X’形，绕肾门将肾脏交叉包扎，然后在相对侧切开，取出右肾，分离后切除，后分层缝合手术切口。

皮下注射1万～2万单位青霉素G。

手术后可加饮1％氯化钠溶液作为促进因素，约经20d，有70％以上大鼠出现持续性高血压，收缩压一般可升高50％以上。

肾外异物包扎，可致肾周围炎，在肾外形成一层纤维素鞘膜，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素形成增加，进而使血液中血管紧张素含量增加，血压升高。

肾扎材料除自制双层乳胶薄膜和玻璃纸外，还可用绸布、乳胶、火棉胶等材料。

肾扎应足够紧，但不能勒破组织。

上述是1肾1扎型操作。

如果要制造2肾1扎型，则一侧肾包扎后无需切除另一侧肾，术后3～6个月10％～20％动物形成高血压。

如果制造2肾2扎型，则一侧肾包扎后同法包扎另一侧肾，术后3～4周70％以上动物形成高血压。

【结果分析】肾性高血压(特别是肾血管性高血压)模型是常用的高血压模型。

具有以下特点：病理生理与人类高血压有许多相似之处；手术操作较简便；高血压稳定，且对降压药物的反应与高血压病人比较相符，适用于抗高血压药物筛选和疗效评价。

建立“二肾一夹”肾性高血压大鼠(2K1C-RHR)模型的体会目的：探讨建立“二肾一夹”肾性高血压大鼠（2K1C-RHR）模型制作过程中的经验体会与技巧。

方法：采用银夹夹闭一侧肾动脉造成其狭窄，导致该侧肾脏缺血，另一侧肾脏不触及，其血压升高主要原因是肾脏缺血而造成肾素增多，肾素—血管紧张素系统激活所致。

结论：“二肾一夹”高血压模型具有造模较为便捷有效，成功率高，同一性强等优点，与人类高血压病理过程具有可比性。

掌握注意事项及其相关技巧有助于高血压相关实验研究进一步更好的开展。

标签：二肾一夹；高血压；模型；大鼠高血压为我国最常见的心血管疾病, 不仅发病因素复杂众多, 且常有诸多并发症,为了更好的研究高血压的发病机制, 阐明各种药物的作用机理, 并且开发出更多有效的药物, 众多医学工作者成功的建立了多种高血压的动物模型,，这对人类高血压病的发病机制、并发症的发生发展规律及防治措施起了重要的作用［1］。

所建立的高血压大鼠模型亦可分为二大类：自发性高血压和继发性大鼠模型，其中又以“二肾一夹”法较为经典、应用较为广泛。

本文即阐述了“二肾一夹”肾性高血压大鼠（2K1C-RHR）模型建立过程中的些体会感悟。

1.器材乙醚,七氟醚，蒸馏水，75%酒精，碘酒，青霉素G，不锈钢U型夹，大鼠固定器，BP-6动物无创血压测量仪2.方法2.1手术过程取体重在180~220g的健康雄性SD大鼠，术前12h禁食不禁水，在七氟醚诱导、乙醚麻醉下，仰卧位固定手术台上，头部及四肢固定，充分暴露腹部，棉花纱布及手术器械经煮沸消毒。

于大鼠左侧腹部肾脏位置备皮减去毛发，先后用碘酒及75%酒精消毒皮肤，行纵向切口，长2.5~3cm，用止血钳钝性分离暴露肾脏，在靠近腹主动脉端用沙氏镊分离出肾动脉（其标志为牵拉肾动脉肾脏会缺血颜色变白，肾脏皱缩)，用浸有生理盐水纱布包住肾脏，用玻璃分针小心分离动脉，用一不锈钢U型夹（内径0.2mm，厚0.5mm）环绕左肾动脉，夹紧，造成左肾动脉狭窄，右肾不触及，复位肾脏，检查有无完全缺血。

姓名 ___________ 专业 ___________ _____ 级 _____ 班学号___________________ 日期 _____________ 指导教师 ___________ 机能学实验设计09级七年制7班组员：梁彬杰Q090100214李洁琪Q090100213殷肖雪Q090100215姜雨汐Q090100216姓名 ___________ 专业 ___________ _____ 级 _____ 班学号___________________ 日期 _____________ 指导教师 ___________ 抗高血压药物对急性肾性高血压的作用【实验目的】1.复制家兔急性肾性高血压的模型。

2.观察抗高血压药物对急性肾性高血压的作用，并解释其机制。

【实验原理】肾性高血压，主要是由于肾脏实质性病变和肾动脉病变引起的血压升高，包括肾实质性高血压病和肾性高血压。

各种病因引起的一侧或双侧肾动脉狭窄到一定的程度，即可引起肾性高血压。

狭窄一侧或两侧肾动脉3~4h后，造成肾脏缺血，肾动脉压力不足，致密斑的NaCl负荷减少，促使球旁细胞分泌肾素增多，激活肾素---血管紧张素---醛固酮系统（RAAS），血管紧张素Ⅱ和Ⅲ能直接使血管收缩，也能经交感神经系统而间接收缩血管，同时醛固酮分泌增加，直接保钠间接保水。

血管紧张素的缩血管作用和醛固酮减少尿生成的作用，使得血压急性升高，造成急性肾性高血压。

本实验通过复制家兔急性肾性高血压的模型，观察并分析不同抗高血压药物对其血压的影响和机制。

氯沙坦的药理作用：氯沙坦是一种选择性的、可逆性的以及竞争性的血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂。

体内血管紧张素ⅡAT1受体相结合，引起血管收缩、醛固酮释放，引起水钠潴留、血压升高。

血管紧张素Ⅱ与AT1受体的结合被氯沙坦阻滞后，血管阻力降低，醛固酮分泌减少，从而降低血压。

卡托普利的药理作用：卡托普利可降低外周阻力，不伴有反射性心率加快，同时可以增加肾血流量降压作用与血浆肾素水平相关，对血浆肾素活性高者疗效较好。

肾性高血压的发病机制及诊治进展安徽医科大学附属医院肾脏内科郝丽概述为了彻底和/或有效治疗高血压,首先要判断是否有继发性高血压的存在,只有祛除原发病才能根治高血压。

值得强调的是：肾血管及肾实质性病变是继发性高血压最重要的原因。

及时发现和治疗肾脏原发病是控制和根治高血压的关键，而控制高血压也是保护肾功能的重要措施之一。

本文就近年来有关肾性高血压的一些诊治进展做一简述。

一、肾性高血压（一）定义及分类：由肾血管和/或肾实质病变引起的高血压称为肾性高血压.按解剖部位可分为肾血管性高血压和肾实质性高血压，按其发病机制可分为容量依赖性和肾素依赖性高血压．（二）发病机制1、肾血管性高血压:主要是由大动脉炎（64%)、肾动脉纤维肌性发育不良（15%）和肾动脉粥样硬化等引起肾动脉口、主干或其主要分支狭窄,引起肾实质缺血，激活肾素—血管紧张素—醛固酮(RAAS）系统而产生的继发性高血压。

2、肾实质性高血压：主要是由各种急慢性肾小球肾炎、糖尿病肾病、慢性肾盂肾炎、结缔组织病、多囊肾、肾移植后等肾实质性疾病引起。

（1）肾炎性:肾小球滤过减少致钠水潴留,以容量依赖性高血压为主。

（2）肾病性：多数与钠、水潴留有关，部分是由于血管内容量不足导致ＲAAS激活使血压升高。

（3）肾功能衰竭:钠水潴留、RAS激活、交感神经兴奋性增加、内源性洋地黄物质增加、血管内皮功能异常—内皮素增高，以及促红素应用等均可导致和加重肾功能衰竭时的高血压。

（4）肾移植后：原病肾过度分泌肾素－血管紧张素、激活交感神经系统;移植肾动脉狭窄、排异反应、移植肾肾小球肾炎复发或新发以及抗免疫药物的应用等,都是肾移植高血压的重要原因.（5）透析相关的高血压（三）基本特征1、肾血管性高血压:发现下述特征需高度怀疑。

（1）３0岁〉年龄〉5０岁时发生的高血压,尤其是年轻而严重的高血压患者；（2）恶性高血压伴严重眼底改变者（3）高血压突然发生或突然升高,而无明显家族史，特别是在一年内舒张压>12０mmHｇ者；（4）严重高血压对常用降压药疗效差（ACEI除外）,并有不明原因肾功能损害；（5）高血压病人经ACEI治疗后，肾功能恶化;（6）高血压伴冠状动脉、颈动脉、脑动脉或周围动脉硬化表现者；（7）严重高血压伴低钾血症者；（8）上腹部、脐周或腰部有连续性或舒张期杂音;（9）影像学检查肾脏:X线或B超显像,双侧肾脏大小不等，长径相差1。

建立肾性高血压大鼠实验模型的一种新方法
尹时华;金延安
【期刊名称】《咸宁医学院学报》
【年(卷),期】1999(013)001
【摘要】目的：探讨建立肾性高血压大鼠实验模型的新方法：方法：采用丝线缩窄方法代替银夹。

结果高血压成功率达８３％，术后两周血压明显增高，术后四周有心肌肥厚形成。

结论：此操作方法简便成功率高，周期较短，经济易行。

【总页数】3页(P15-17)
【作者】尹时华;金延安
【作者单位】咸宁医学院生理教研室;咸宁医学院生理教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R544.140.2
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