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无菌检验隔离器安全操作及保养规程一、前言无菌检验隔离器（Sterility Testing Isolator，简称STI）是一种广泛应用于生物制品无菌检测的设备，用于防止样品受到外界污染和保护操作人员免受生物制品的暴露。
本文档旨在规范STI的使用和保养，避免不必要的设备事故和样品污染，旨在更好地维护生产环境的卫生和健康。
二、 STI的安全操作1. 人员要求使用STI的操作人员应通过相关培训并持有相关的证件或资格证书。
被安排操作STI的人员应定期接受相关技能培训，只有在完全掌握专业知识和具备必要的操作技能后，才可使用该设备进行实验操作。
2. 操作前准备在操作STI前，应先确认STI的密封性和过滤系统的正常工作状态。
对于密封性检查，可以将压力计置于STI内口并进行检查。
对于过滤系统的检查，可以通过紫外线灯对过滤效率进行检测。
同时需要在STI 内部放置无菌工作台准备好所需的操作设备和材料。
3. 操作过程在进行操作STI实验前，必须先穿戴好必要的个人防护装备。
在操作过程中要特别注意防止STI内部与外部环境之间的污染，提高对样本的保护和实验的精度。
当实验结束后，还需在设备内进行过渡残留物和样品的删除、设备内部的消毒和清洁。
4. 操作注意事项•禁止在STI内部进行磕碰等激烈操作；•禁止在STI内部使用含有粉尘的物品；•避免使用含有重金属的物质；•禁止在STI内部使用化学物品，如酸、碱等强腐蚀性物质；•对样品进行采样时需注意气压平衡；•切勿在STI内吸烟或进食；•确保操作过程中无人将手指伸入STI内部或放入其他设备。
三、 STI的保养1. 定期保养STI应按厂家要求定期进行保养和进行相关部件的更换。
通常可根据操作手册要求在实验后对设备进行排查和检测，及时更换个部件，检查起动装置和出料装置等各项设备的工作状态。
2. 日常维护日常维护包括使用完毕后要对STI进行清理、洗涤和消毒。
并要检查后可以启动对设备的LED灯、过滤系统和压力计等进行检查。
无菌隔离器的标准随着医疗科技的不断发展，无菌隔离器作为一种关键的医疗设备，在临床和实验室中扮演着重要的角色。
本文将探讨无菌隔离器的标准以及其在医疗和实验室环境中的应用。
一、无菌隔离器的标准国际标准：无菌隔离器的制造和应用通常要符合国际标准，如ISO 14644-1标准，该标准规定了洁净室的空气洁净度等级，确保在无菌操作环境中工作的可靠性。
安全性标准：无菌隔离器在设计和制造上需符合相关的安全标准，确保操作人员和环境的安全。
例如，符合CE认证标准，保障产品的安全性和可靠性。
空气流速标准：无菌隔离器的空气流速是关键的参数，通常需要符合国际洁净室设计和操作的相关标准，确保工作区域的洁净度。
材料标准：无菌隔离器的制造材料需要符合医疗器械的相关标准，以保证其不产生对人体有害的化学物质，同时易于清洁和消毒。
二、无菌隔离器的应用医疗领域：无菌隔离器在手术室、病房等医疗环境中被广泛应用。
它可以为医护人员提供一个洁净、无菌的工作空间，确保手术操作的成功和患者的安全。
实验室应用：在生物实验室中，无菌隔离器用于处理对外界环境要求极高的生物样品，确保实验结果的准确性和可重复性。
药品制造：在制药行业，无菌隔离器被用于药品的生产和包装过程，以防止微生物的污染，确保药品的质量和安全性。
生物安全领域：用于处理潜在有害生物的实验，无菌隔离器在生物安全级别实验室中发挥着不可替代的作用，保护实验人员和环境安全。
结论：无菌隔离器作为现代医疗和实验室领域中不可或缺的设备，其标准与应用至关重要。
只有在符合严格标准的前提下，无菌隔离器才能真正发挥其应有的作用，为医疗和科研工作提供可靠的支持，确保工作环境的洁净和安全。
无菌检查隔离器安全操作及保养规程1. 前言为了确保实验室内无菌检查的准确性，确保实验过程的安全性和实验人员的身体健康，严格遵守无菌检查隔离器的安全操作规程及保养规程是必要的。
2. 安全操作规程2.1 设备准备1.打开检查隔离器外部电源。
2.仔细检查隔离器内外部分为洁净以及工作面积为空气净化。
3.准备相关消毒液、培养基和试剂等实验材料，并将它们放置在操作台上，准备进行实验操作。
4.穿戴好操作手套和实验服，消毒双手和隔离器表面。
2.2 实验操作1.打开隔离器门，轻轻将待检样品放入操作台内。
注意：当隔离器内无气流时，应在放置待检样品前用紫外线灯消毒操作台上方一分钟。
2.开启操作区域的风扇，产生气流并将样品向下排放。
3.进行实验操作，操作过程中应保证操作手套、操作工具、培养基等实验材料和试剂不会碰到隔离器内部，并且不要高温灼烧，以免污染操作区域。
4.实验操作结束后，关闭风扇，关闭隔离器门。
2.3 清洁消毒1.实验操作完成后，关闭隔离器内部工作面积空气净化设备，并让电机工作15分钟，以确保操作区域内的气流彻底被排出。
2.用70%的酒精或其他消毒液清洁隔离器的表面及内部操作区域，特别是粘有试剂、培养基的区域。
3.每个实验结束后，应当对试验隔离器做深层次的无菌检查。
4.每半年进行隔离器的彻底清洁，拆卸所有可拆卸的部件，使用专门的清洗工具进行清洗消毒。
3. 保养规程3.1 每日维护1.每天都要对隔离器进行仔细的检查，查看灯光亮着是否正常，查看送风口是否有异物，检查其它各个部件是否正常运转。
2.每天都要对气流口纸带是否交叉，交叉口是否磨损是否正常使用进行观察。
3.每天晚上外部电源关闭前彻底清洁隔离器表面。
3.2 定期保养1.隔离器内部有多个过滤器，按照对应的保养周期更换，每6个月进行一次。
可以请厂家或专业人员提供服务。
2.隔离器使用一段时间后，需要人工打蜡，可以使用蜡布的方式，涂抹外观部分。
3.隔离器的电路功能部件也需要定期进行检修保养，由生产厂家专业人员负责。
无菌隔离器验证安全操作及保养规程前言无菌隔离器是分离和培养微生物时必不可少的工具。
在使用无菌隔离器时，必需严格遵守安全操作规程以避免意外伤害和污染。
此外，无菌隔离器需要定期维护和保养，以确保其正常工作。
验证安全操作规程在使用之前在使用无菌隔离器之前，确保做好以下准备：•保持室内环境干燥，避免在潮湿环境下使用•检查无菌隔离器的电源及光照，确保工作正常且操作者能够清楚地看到工作区域•准备好消毒杀菌剂、无菌医用手套、面罩、护目镜等个人防护用品及消毒用品操作规程1.确保无菌隔离器工作区域外没有杂物、较高的物品和过多的人员等，以免产生安全隐患。
2.进入工作区域后，戴上无菌医用手套、面罩、护目镜等个人防护用品，同时用消毒杀菌剂清洁双手并擦干。
3.打开无菌隔离器，灯光打开并调节至合适亮度，启动UVC杀菌灯。
4.将待处理的菌落直接置于工作台上或在无菌医用手套内操作，通过操作孔以及可能的缓冲区等确保无菌条件。
5.将需要开启的仪器，如移液器，环钳等通过 UVC 杀菌灯及操作孔紫外线消毒 5-10 分钟，方可进入无菌区域。
6.操作完成后，消毒工作台表面，用消毒剂消毒工作区域。
保养规程1.建议每周对无菌隔离器进行彻底清洁和消毒。
2.将无菌隔离器内的混合沟、内部工作面板、观察口、养菌箱体等部位用消毒剂彻底清洗。
3.对无菌隔离器的各项系统进行测试，确保其正常运行。
4.记录每次保养的时间和内容，以便及时维护和更换易损件。
结语遵守无菌隔离器安全操作规程和定期维护保养无菌隔离器，是保证工作安全和提高实验效果的必要手段。
因此，操作者需深刻理解并严格遵守上述安全操作规程和保养规程。
无菌检测隔离器安全操作及保养规程一、前言无菌检测隔离器是实验室中常用的设备之一，广泛应用于微生物学、细胞学等领域。
如何正确操作和保养无菌检测隔离器，对于实验结果的准确性和实验人员的安全保障都有至关重要的影响。
因此，为了确保实验过程中的安全和稳定性，我们制定了该操作及保养规程。
二、安全操作2.1 准备工作在使用无菌检测隔离器前，应先对隔离器进行检查，确保其内外干净、无异味、无明显损坏或泄漏点，检查前端灯光是否正常，操作门是否正常。
若存在以上情况，应停止使用。
准备完毕后，将操作台面消毒处理，放置工具和实验物品，穿戴好实验用具，正确佩戴口罩和手套，以保证实验操作过程的无菌性。
2.2 操作流程打开前端门，并通过 UV 灯照射 30 分钟左右，使空气流通，杀灭空气中的微生物。
然后将实验物品放入操作区，并注意常规消毒措施。
实验进行过程中，应避免操作区的污染，特别是手套与物品表面的接触，应尽可能避免。
操作完毕后，可通过将前端门再次关闭，并在隔离器内开启紫外线灯照射 30 分钟或以上，杀灭操作区内可能残留的微生物。
最后，关闭隔离器并清洗操作台、工具和操作区表面，定期检查隔离器的过滤器和紫外线灯，确认是否需要更换。
2.3 注意事项在使用无菌检测隔离器过程中，需要注意以下事项：•严格遵循操作规程，避免出现污染情况；•操作时注意防止气压坍塌导致气流逆流；•避免在隔离器内操作化学试剂等有腐蚀性、易燃性的物品；•注意隔离器内有害气体的排放和防护；•避免在操作过程中产生过多灰尘。
三、保养规程3.1 日常保养隔离器保养应该按照日常保养和常规保养两种方式。
日常保养包括隔离器的清洗和消毒，直接用干净的毛巾或纸巾将操作区表面的污垢擦拭干净，再用 75% 酒精消毒，注意不要在紫外线灯下消毒。
对于易污染的实验或者对卫生要求比较高的实验，建议每次实验完毕后都进行清洗和消毒处理。
3.2 常规保养常规保养包括过滤器的更换和紫外线灯的更换，一般建议每 6 个月对过滤器进行更换，或者可以根据使用情况来确定更换时间。
无菌检验——隔离器系统验证USP <1208>Sterility Testing—Validation of Isolator System/General informance这部分是用于无菌检验隔离器系统的简明验证指南（注意：在这个章节中，“已灭菌”指的是物品或者表面的微生物被清除的状态）在19世纪80年代中期，建立一个无菌检验环境的隔离器就已经开始使用。
隔离器可以通过密封的方法或者采用过滤除菌空气保持正压的方法，创造一个无菌的环境。
当隔离器处于密闭状态时，仅仅能够在隔离器内部和快速传递仓传递物品；当隔离器打开时，允许通过一个特殊设计的并经过验证可以避免污染物进入的开口递出物品。
隔离器采用柔软的塑料（例如聚氯乙烯）、硬塑料、玻璃或不锈钢制造。
由于隔离器系统从根本上避免了分析人员与物品的直接接触，因此在无菌检验操作时可以避免物品和辅助设备被污染。
当隔离器内部与环境完全隔离时，隔离器内部的物品是无菌条件下的传递。
操作者穿着半身衣在隔离器内部进行无菌操作，半身衣是连接在隔离器墙体上的柔软的部分，操作者穿着半身衣有足够的范围在隔离器内部进行操作，操作者也可以通过连接在隔离器墙体上的袖子和手套进行操作。
在隔离器中，不要求操作者穿着特殊的无菌衣进行操作，允许操作者穿着标准的实验室服装进行操作。
为确保隔离器内部无菌。
使用杀孢子剂对隔离器内部进行灭菌处理。
隔离器设计和建造空气处理系统用于无菌检验的隔离器需要配备除菌过滤器（HEPA过滤器是被要求的）。
静态时，要求隔离器尘埃粒子符合美国联邦标准209E的100级空气质量要求（看洁净室微生物评价和其他环境控制《1116》）。
动态时，不要求隔离器符合100级空气质量要求，不要求隔离器内部的空气流速或者空气交换频率。
隔离器系统是要求防止泄漏的，然而，它不是通常意义上的防止隔离器与外界环境进行的空气交换。
当与外界环境直接相连的门打开时，隔离器内部的正压保证隔离器内部的无菌环境不被污染。
对无菌隔离操作器及其结构与确认的探讨作者：李晓雪梁毅来源：《机电信息》 2015年第23期李晓雪梁毅（中国药科大学医药发展研究中心，江苏南京210009）摘要：从隔离操作器的概念引入着手，对隔离器的发展和标准作了简要介绍，阐述了隔离器的结构、确认和应用情况，以期隔离技术在中国制药行业得到快速发展。
关键词：隔离操作器；无菌；GMP0引言新版GMP于2011年3月1日起正式执行。
此次GMP修订结合国内企业的实际情况，保留了部分1998年版GMP的条款，不仅参考了WHO、欧盟、美国FDA的GMP及其附录，还参考了ICHQ7A等。
新版GMP修订涉及基本要求部分和5个附录，即无菌药品、生物制品、血液制品、中药制剂及原料药。
其中，GMP基本要求和无菌药品附录是本次修订的重点。
可以说，无菌药品部分是新版GMP对1998年版GMP作出实质性修改最多的部分，也是企业需要相应改动硬件最多的部分。
1隔离操作器概念的引入在此次修订中，新版GMP对无菌产品的生产标准进行了大幅度的提高。
新版GMP细化了培养基模拟灌装、灭菌验证和管理的要求；将先进的隔离操作技术、吹灌封技术首次列入规范，对无菌保证水平、无菌检查等提出了详细和具体的要求；净化级别采用WHO的标准，实行A、B、C、D四级标准；对悬浮粒子的静态、动态监测，浮游菌、沉降菌和表面微生物监测都设定了详细的规定，并对监测条件给出了明确的说明，要求在生产过程中对环境进行实时监测。
新版GMP的实施推进了制药机械行业技术的进一步发展，附录1第4章节为隔离操作技术，这是国内首次正式提出隔离操作器的概念。
1.1隔离操作器我国食品药品监督管理局对隔离操作器的定义：配备B级或更高级别的通风，并能使其内部环境始终与外界环境（如其所在洁净室和操作人员）完全隔离的装置或系统。
1.2无菌隔离操作器的发展隔离操作器于20世纪50年代开始应用于核工业手套箱技术，20世纪80年代应用于医药产业，隔离技术作为生产无菌产品工厂采用洁净室之外的另一种方法而重新受到关注。
无菌检测隔离器再确认方案
目录
1 再确认目的
2 再确认依据
3 再确认判断标准
4 再确认小组人员及职责
5 再确认过程的培训
6 再确认条件
7.1性能确认
7.2尘埃粒子测试再确认
7.3除湿性能确认
7.4过氧化氢气体浓度及分布状态再确认
7.5过氧化氢气体排空效果再确认
7.6沉降菌测试再确认
8.再确认
9再确认结论
正文：
仪器名称：无菌检测隔离器
型号及编号：
生产厂家：
2 再确认依据
《药品生产质量管理规范》（2010年）
GB/T 16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法
3 再确认判断标准符合再确认项目的标准规定
4 再确认小组人员及职责
5 再确认过程的培训
5.1.1 培训内容
本再确认方案
5.1.2 培训人员名单
6、再确认条件
6.1 测试所用仪器仪表、检验仪器已校验且在有效期内
7.再确认内容
7.1性能确认
7.1.1低压报警功能再确认
7.1.1.1再确认方法：
开启无菌隔离器，进入手动运行界面，开启手动通风程序，当压力显示高于95Pa时，观察蜂鸣器是否鸣叫，显示屏报警状态显示是否正常；
开启无菌隔离器，进入手动运行界面，设置保压压力40Pa,开启手动保压，稳定3min；缓慢开启物料大门，使舱内压力缓慢下降，当压力显示低于12.5Pa 时，观察蜂鸣器是否鸣叫，显示屏报警状态显示是否正常；
7.1.1.2再确认结果：
7.1.1.3结论：
7.1.2压差维持能力再确认
7.1.2.1再确认方法：
所有手套支架安装到位，开启设备，进入手动运行界面，设置保压压力20Pa，启动压力保持，稳定2min以上后，观察压力波动的最高值和最低值3min 以上，于工作表中记录相应设定压力值的压力波动范围；
将保压压力设置为40Pa,重复以上操作；
将保压压力设置为60Pa，重复以上操作。
注:记录过程中，不得进行手套操作，不得对舱体进行挤压，否则须重新稳定后再记录。
7.1.2.2再确认结果
实验舱
7.1.2.3结论：
7.1.3舱体密闭性再确认
7.1.3.1再确认方法：
关闭实验舱体大门、传递门及所有检测口，开启无菌隔离器，进入压力测试界面，点击【开压力测试】后舱体开始自动充气压力上升至60Pa以上；当显示压力缓慢降至60Pa时，自动开始计时，压力下降至42Pa时自动停止计时，点击【压力测试结果】打印按键，打印测试结果；
注：1.传递舱密闭性测试程序同实验舱
2.为避免测试周期过之长，若保持时间超过30min，压力仍在42Pa
以上，则停止测试，结果以大于30min表示。
计算：小时体积泄漏率
Q/V=60(Ps-Pt)/(Pt×t)
式中：Q/V--小时体积泄漏率；
Ps--起始绝对压力，101385Pa
Pt--结束时的绝对压力，101367Pa
t--压力下降时间均值，min
7.1.3.2再确认结果
7.1.3.3结论：
7.2 尘埃粒子测试再确认：测定静态下隔离器内部的粒子数，保证粒子数能达到要求。
7.2.1再确认方法：在测试之前，要对隔离系统相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试悬浮粒子的环境条件，例如：这种预先测试或可包括：
a）温度和相对湿度的测试。
隔离系统的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18℃~26℃，相对湿度在45%~65%为宜），同时应满足测试仪器的使用范围；
b）隔离系统放置环境需达到D级及以上环境要求。
测试依据：GB/T 16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法。
测试时间：对于紊流隔离系统，测试在净化空气调节系统（保压系统）正常运行时间30min后开始。
采样点数目为2点，采样点布置方式如下图：
采样点的位置：采样点选择在距离工作台面20~40cm高度（手套操作时的高度）水平面上均匀布置。
采样次数：每个点连续3次。
采样量：测试仪器的流量（以流量为100L/min的粒子运行数器为例），各点单次取样量和取样时间规定如下：
100L/min粒子运行数器
洁净级别A级B级C级D级
单次取样量 1 m3/次0.7m3/次0.1 m3/次0.1 m3/次
单次取样时间10min 7min 1min 1min
测试方法：
a）对隔离舱内进行清洁；
b）将激光尘埃粒子计数器采样支架及采样管放入待测试隔离器舱体内，采样管从隔离器测试端口接出并连接尘埃粒子计数器，采样头置于进风高效过滤器下方，管口向上，高度应距离操作平台约20~40cm，然后关闭舱门，进入隔离器手动界面，开启通风程序。
c）系统运行时，可将舱门稍开（门钩不要脱开），使隔离器舱体内压力在通风程序运行过程中维持在10~30 Pa的正压范围内，运行不少于20min。
d）关闭物料大门，关闭手动通风程，开启手动保压程序，紧扣物料大门，稳定3min 以上，用激光尘埃粒子计数器进行检测，检测方法参照激光尘埃粒子计数器说明书或SOP 文件，检测时，采样管通过隔离舱的测试口与采样支架上的等动力采样头连接。
e）依次测试每个点的悬浮粒子。
注意事项：
a）在确认隔离舱内压力达到设定要求(维持压力应20~40Pa)时，方可进行采样。
b）在采样中，采样管口要向上。
c）环境相对湿度、温度等因素对激光尘埃粒子计数器的测试结果有一定影响，应避免在不符合测试仪器使用环境的条件下进行测试。
d）若测试结果不稳定，可能属舱内不够清洁所致，可对舱内进行清洁并进行再次测试。
结果计算方法参考GB/T 16292-2010 医药工业洁净室（区）悬浮粒子的测试方法。
结果评定：
判断悬浮粒子洁净度级别应依据以下条件：
a）每个采样点的平均粒子浓度必须低于或等于确认要求界限。
b）全部采样点的粒子浓度平均值均值的95%置信上限（UCL）必须低于或等于确认要求界限。
7.2.2测试结果：
7.2.3结论：
7.3除湿性能再确认
7.3.1再确认方法
将汽化过氧化氢灭菌器与待测无菌隔离器舱体连接，检查干燥剂是否装载并检查干燥腔室密封性；
核对温湿度计及其校验证书，确认其编码一致且在校验有效期内。
点击进入手动运行界面，点击手动除湿，进入手动除湿界面，点击设置值项下的湿度设置框，设置除湿湿度值为40%。
点击启动，开始手动除湿；
每间隔1min记录一次隔离器舱体内湿度，间隔5min记录一次隔离器温度数值。
7.3.2除湿记录表
7.3.3结论：
7.4过氧化氢气体浓度及分布状态再确认
7.4.1再确认方法
按说明书要求进行系统设置，确认后开启设备自动运行程序运行；在灭菌阶段开始时，记录舱内初始过氧化氢浓度及相对湿度读数，直至灭菌阶段结束；按照化学指示剂放置示意图将过氧化氢灭菌过程中观察其变色情况，并对各点颜色进行比对。
可接受标准过氧化氢灭菌系统在正常运行情况下，灭菌初始调节后舱内气态H2O2浓度应不低于125ppm。
分布于舱内各测试点的过氧化氢蒸气化学指示剂均能显著变色，各指示条变色后颜色基本一致，无肉眼可见的显著性差异。
7.4.2舱内过氧化氢浓度监测记录
数据粘贴处
7.4.3化学指示剂布点图
7.4.4实验舱化学指示剂留样
7.4.5结论：
7.5过氧化氢气体排空效果再确认
7.5.1再确认方法
在“自动运行”控制程序中，设定通风时间；待灭菌程序完成，通风开始时，通过采用过氧化氢检探头进行测试，记录通风初始阶段舱内过氧化氢浓度读数（初始读数）及通风时间设定值，然后每间隔5min记录一次过氧化氢浓度变化值，然后每间隔5min记录一次过氧化氢浓度变化值。
设定通风时间结束应能使过氧化氢浓度降至≤10ppm。
7.5.2结果记录
7.5.3结论：
7.6沉降菌测试
7.6.1测试仪器应包括：
a）Φ90mm规格的培养皿
b）胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）
c）恒温培养箱（必须定期校验）
d）高压蒸汽灭菌器
e）5-10倍放大镜
在测试之前，要对隔离系统相关参数进行预先测试，这类测试将会提供测试沉降菌的环境条件，例如：这种预先测试或可包括：
a）温度和相对湿度的测试。
隔离系统的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18℃~26℃，相对湿度在45%~65%为宜），同时应满足测试仪器的使用范围；
b）高效过滤器的泄漏测试；
c）隔离系统放置环境需达到D级及以上环境要求。
7.5.2测试依据：GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法。
7.5.3将直径90mm的TSA平板14个编号，放于隔离舱内操作平台上，以进、出风高效下端为中心，分为A、B三区，每区各均布7个平皿，见图示:平皿分布示意图。
平皿分布示意图
7.6.4测试结果：
7.6.5结论：
8 再确认
8.1在一般正常情况下，每年再确认一次。
8.2 如遇任何重大变更：如更换重要零件或重大维修项目，完成后均需要再次确
认，以证明各种重大变更不会对现有使用效果产生影响。
9 确认结论：。
