无菌隔离器技术分析

无菌实验动物隔离器
无菌隔离技术是在完全密封的环境下,实现对药品和生物制品的控制并将其处理成无菌状态的一种技术。

一个完整的操作过程可能需要若干个隔离器组成的系统来完成,从而将整个流程与可能的污染源彻底分开。

这一技术为无菌试验、无菌生产及高致敏性、毒性药物生产防护提供完美的环境控制技术解决方案。

将无菌的产品(容器、产品、封闭物)放入一个无菌环境，由于没有操作人员进入无菌隔离器，也没有非无菌物品带入无菌隔离器，这些物品在整个加工过程中始终保持无菌。

无菌隔离器屏障是一个屏障，它将无菌产品与操作人员和外界环境相隔离，阻止产品与外界进行交换。

无菌隔离器除通过物理密封阻隔外部污染物的进入，还采用内室正压的方法达到有效密封的目的。

浅谈无菌检查用隔离器摘要：通过参照《中国药典》三部（2015版），利用无菌检查法对药品，医疗器械，原材料进行无菌检查，综合检查制品的安全。

通过参照实验培养基中是否含有微生物，来断定样品中的无菌性能，在实验开展初级阶段，通过对无菌培养皿进行取样调查，利用酒精灯保护等操作方法，保证整个过程的无菌性。

在之后的发展过程中，可定向转移到干净无菌的工作台，保证整个工作室操作干净整洁。

确定整体操作符合国家标准，无菌操作应在B级背景下进行定向操作，按照A级系统中所规定的要求完成隔离器系统的定向处理。

在指定区域进行准确操作，防止出现交叉感染等状况或者出现假阴性假阳性的问题。

通过参照《中国药典》三部（2015版）中所说的要求，利用B级背景来提高实验室整体净化效率，根据系统所规定，要求重点检查实验室环境，在此过程中需要投入大量资金费用。

对于实验区域，需要与背景间进行隔离，防止出现污染风险。

无菌检查室是为实验提供无菌环境，能够较好的降低微生物污染的风险，防止实验试剂和设备出现污染，更好的增强无菌检查室试验结果的准确性，在全球范围内得到有效利用。

基于此，本篇文章对无菌检查用隔离器进行研究，以供参考。

关键词：无菌检查；隔离器；应用分析引言无菌检查用隔离器能够将检验环境与外部的人员和环境完全隔离开来。

它不只配备单独的高效过滤器和空气处理单元，还配备过氧化氢灭菌系统，能对舱体内表面和设备表面进行灭菌，可达到生物指示剂下降6个对数级甚至更低水平的效果，因此可以避免实验用物品和辅助设备被污染，提高无菌试验结果的准确性。

汽化过氧化氢的灭菌循环包括预处理、充气、保压灭菌和通风4个阶段。

①预处理阶段：对管道、蒸发器和舱体进行预热去湿，防止过氧化氢气体冷凝；②充气阶段：往舱体内注入汽化过氧化氢，直至达到饱和状态，对微生物有杀灭作用；③保压阶段：维持汽化过氧化氢的饱和状态，以实现对灭菌表面的持续覆盖和对微生物的杀灭作用；④通风阶段：将残留的汽化过氧化氢通过催化过滤器排至室外，直至其浓度小于1×10-9并无异味。

无菌隔离系统的相关技术研究摘要：ISOLATOR隔离器适用范围广、安装背景级别低、完全隔离密闭、内部压力可正负压调节、独立自循环回风形式、操作简易、能耗降低、管控成本减少、无菌污染风险低。

经隔离器VHP CDCV后，隔离器VHP灭菌效果可行、有效。

关键词：ISOLATOR隔离器αβ阀RTPs CDCV1隔离系统的概述1.1隔离系统的相关定义隔离是指采用物理屏蔽的手段将受控有限的空间与外部环境相互隔绝的技术，是一种绝对的隔离[1]。

而隔离系统是指在原有隔离的基础上，通过密封或者有微生物过滤系统（高效过滤系统HEPA）提供空气并且可以实现空气交换（自净化）的一种系统。

所谓的隔离系统是指：当密闭时，仅使用已净化过的内部表面或使用快速转移通道系统（RTPs）进行物料的传递转移；当打开时，仅允许物料或工器具等物品通过特定的并已经过设计和验证的开口进行进出传递，以排出污染的传递。

而隔离系统通常被用于无菌操作时隔离活性混合物或者同时用于灭菌处理和隔离。

目前为止，市面上流通常用的隔离器有许多种，包括手套型、半身服型、全身服型等；在这里，主要探讨下当今较为先进的ISOLATOR隔离器。

1.2 ISOLATOR隔离器的利弊优势ISOLATOR隔离器是当前制药领域内发展的一种趋势化，凡是新建厂房车间的制造型药企，大多都会考虑上线一套完整的隔离系统，从而代替传统的、旧式的open-RABS或者close-RABS（包括A级层流防护门及RABS）。

与传统的ORABS相比，保护对象不同，ORABS主要保护的是产品，而隔离器保护的则是产品与人（岗位操作人员）的双重保护；二者的密闭性也不相同，ORABS是可以打开的，做不到完全的密封，采用的是一种非密闭的模式，而隔离器则是完全密封的，是一种绝对的隔离、完全的密闭，采用的是一种密闭的模式；内部压力也不相同，ORABS因无法密闭内部压力只能为正压，而隔离器因是一种绝对的隔离、完全的密闭，内部的压力可以是正负压调节，实现正负压可调型隔离器；两种设备或系统的回风形式不同，ORABS采用洁净区内直接取房间风，经过顶部高效过滤器过滤流通至均流膜后，均匀垂直送至操作区域，是一种直接房间取排式，而隔离器则大不相同，隔离器会配备完整的一套循环系统和空调机组，循环系统包括送风组件、排风组件、循环组件，所有的新风、排风、回风均经过高效过滤器（H14级、0.3μm的截留率＞99.995%）进行送风、排风、回风，隔离器独立配置的一套空调机组，保证空调的送风机组、排风机组、回风机组的所有空气经过初、中、高效过滤以及表冷除湿、加热加湿处理（此处空气处理方式主要针对双表冷加转轮除湿的空调机组），是一种完全自循环的方式。

隔离器在无菌检验中的应用分析摘要：无菌检查是无菌药品质量控制的关键项目，对检测环境和检测人员操作都有相当高的要求。

由于供试品在无菌生产过程中被污染为小概率性事件，因此供试品的无菌检查对检测环境的洁净级别提出了相当严格的要求。

为避免人员带来的污染，许多单位都选择无菌隔离器来规避污染风险。

本文对隔离器在无菌检验中的应用进行了阐述。

关键词：隔离器；无菌检验；应用1导言在即将颁布的中国药典2015年版中，首次提到了无菌检查隔离器。

本文结合了国内的技术条件，详述了无菌检查隔离器的相关验证要求。

在这样的法规背景下，无菌检查隔离器越来越受到制药企业的关注，而无菌检查隔离器在可控、先进、低能耗的QC无菌检查实验室中的应用也将成为趋势。

2隔离器的类别和使用范围隔离器系统（Isolator system）是无菌制药领域的关键设备。

隔离器系统最早从二十世纪八十年代开始使用以来，逐渐完善和发展。

在近十年中，获得长足技术进步。

在2002年5月，USP微生物方面的开放会议中，仅有两项无菌技术被冠予“高级的（advanced）”名号来进行讨论：隔离器技术（Isolator technology）和吹-填-封技术（Blow-fll-sealtechnology）。

由此可见，隔离器技术在无菌制药领域的地位。

目前，在无菌制药领域中，主要有如下几种隔离器在使用，分别是无菌取样隔离器、无菌分装隔离器，无菌检验隔离器等。

3隔离系统的结构3.1屏护装置屏护装置一般采用柔韧性塑胶薄膜或刚性材质，柔韧性塑胶薄膜材质的屏护装置主要用于无菌检测隔离系统，以透明聚氯乙烯（PVC）居多。

刚性屏护装置主要用于无菌生产过程，主要材质有聚碳酸酯（PC）、丙烯酸树脂/亚克力、钢化玻璃或不锈钢。

3.2传递/转移技术常见的传递/转移技术主要有简易门、鼠洞、闸室—舱口—传递箱、装袋口、快速传输端口（RTP）以及服务系统，隔离器通常所需的服务有电源、水、气、真空、压缩空气、灭菌排水等。

附件一无菌操作用隔离器APPENDIX 1: ASEPTIC PROCESSING ISOLATORS 无菌操作用隔离器将无菌操作生产线和外部的洁净室环境隔离，并且将无菌生产过程中操作者直接接触（无菌生产线或产品）的可能性降到最低。

一个设计良好的保持正压的隔离器，在有适宜的规程维持、监测、控制的情况下，与传统的无菌操作相比，有显著的优势。

尤其在操作过程中微生物污染的机会极低。

然而，使用者仍然需要注意操作中潜在的风险。

应当意识到建立一个新的针对隔离器使用的规程是必须的。

A 维护1.通则与传统的非隔离器无菌操作相比，隔离器系统的维持在一些侧重点上是不同的。

虽然隔离器在形式上没有绝对的密封，但一个设计良好的隔离器单元可以达到很高的完整性。

然而，隔离器系统上的一个位置的泄露就能够破坏其完整性。

除了手套、半身衣、衔接处的完整性应当通过全面的预防维护程序进行日常关注和记录之外。

对于隔离器的各部位，要有一个定期更换的书面规定，以确保这些部位在破损或老化之前被更换。

传递系统、垫圈和密封处以及其他部位的维护要包括在书面维护程序中。

2.手套完整性一个有缺陷的手套或袖子（长手套）会形成污染的通道，也是隔离器完整性的一个关键的破损。

手套完整性的预防性维护程序应当被建立。

选择持久耐用的手套材料、进行周期性适宜的更换，是保持手套完整性，维持优良生产操作的关键。

每次使用，应当对手套目视检查肉眼可见的破损。

物理性的完整性测试也应当周期性进行。

手套破损能够产生严重后果。

合适的监控和维护程序能够识别手套的完整性，并且能够更换任何破损的手套，从而将无菌产品的风险降到最低。

由于手套上可能存在潜在的可以通过微生物的孔洞，同时缺乏高灵敏度的完整性检测方法。

我们建议对于隔离器上安装的手套内表面消毒质量引起关注，同时配合使用第二副薄手套。

B．设计1.气流有两种类型的无菌操作隔离器：开放型和密闭型。

密闭型隔离器使用辅助设备进行连接，解决材料的传递问题。

dzprc无菌隔离检测系统技术文件苏州东中机械设备有限公司1目的1.1本文件参照2015版新药典要求设计，并且满足2015版药典规划标准。

我公司的用户需求说明为依据进行的设计、制造、安装、验证，为将来设备的良好使用提供文件性的保证。

2范围2.1该文件适用于无菌检测隔离系统的技术资料，最终解释权为苏州东中机械设备有限公司。

3设备规范语录3.1GAMP ：生产自动化管理规范。

3.2GMP：药品生产质量管理规范。

3.3IQ：安装确认。

3.4OQ：运行确认。

3.5PQ：性能确认。

3.6HDS：硬件设计标准。

3.7SDS：软件设计标准。

3.8FAT：工厂接收测试。

3.9SAT：现场接收测试。

3.10HEPA：高效空气过滤器4、技术要求：1.功率：2500W.2.外形尺寸：实验舱：长1800mm*宽950mm*高1900mm,缓冲舱：500*600*600mm3.系统运行时最大工作噪声<68dB；，对嗜热脂肪芽孢杆菌达到 6-log 的杀灭率；5.CIP ：人工擦拭，通过操作手套可实现对操作舱体人工冲洗。

6.通风排残：通风排残后舱体内VHP 浓度<10ppm ，此浓度条件对微生物检查结果无显著性影响；7.洁净度：灭菌后，舱体内尘埃粒子，沉降菌，浮游菌测试结果符合静态A 级标准； *8.舱体密封性（压降试验）：舱体在1.5倍的工作压力下，小时泄漏率<0.5%；9.压力维持：0~80Pa 可调节，无菌操作时保持40~60Pa ，静态条件下压力维持至设定值±5Pa ；10.汽化过氧化氢分布均匀性测试；10.1控制系统操作处设置急停按钮；10.2设备外表面温度不高于45℃；10.3控制系统能够抵抗手持无线电设备和设备周围1米范围内的手机信号干扰；*11.通风及空气过滤系统：11.1隔离器内部为紊流式气流模型，送风与排风单元均位于隔离器的顶部；11.2送风与排风均采用德国原装进口 EBM 风机，轴流风机（型号为12038B2）2只。

【技术篇】浅谈无菌检验隔离器系统验证之（一）在19世纪80年代中期，建立一个无菌检验环境的隔离器就已经开始使用。

隔离器可以通过密封的方法或者采用过滤除菌空气保持正压的方法，创造一个无菌的环境。

当隔离器处于密闭状态时，仅仅能够在隔离器内部和快速传递仓传递物品；当隔离器打开时，允许通过一个特殊设计的并经过验证可以避免污染物进入的开口递出物品。

隔离器采用柔软的塑料（例如聚氯乙烯）、硬塑料、玻璃或不锈钢制造。

由于隔离器系统从根本上避免了分析人员与物品的直接接触，因此在无菌检验操作时可以避免物品和辅助设备被污染。

当隔离器内部与环境完全隔离时，隔离器内部的物品是无菌条件下的传递。

操作者穿着半身衣在隔离器内部进行无菌操作，半身衣是连接在隔离器墙体上的柔软的部分，操作者穿着半身衣有足够的范围在隔离器内部进行操作，操作者也可以通过连接在隔离器墙体上的袖子和手套进行操作。

在隔离器中，不要求操作者穿着特殊的无菌衣进行操作，允许操作者穿着标准的实验室服装进行操作。

为确保隔离器内部无菌，通常使用杀孢子剂对隔离器内部进行灭菌处理。

一．隔离器设计和建造1.空气处理系统用于无菌检验的隔离器需要配备除菌过滤器（HEPA过滤器是被要求的）。

静态时，要求隔离器尘埃粒子符合美国联邦标准209E的100级空气质量要求（看洁净室微生物评价和其他环境控制《1116》）。

动态时，不要求隔离器符合100级空气质量要求，不要求隔离器内部的空气流速或者空气交换频率。

用于无菌检验的隔离器内部空气流可以是单向流或者湍流。

2.传输仓和门隔离器有一个附属的“传递通路”杀菌器，通过传输通道杀菌器可以直接将无菌的培养基、无菌的稀释液、无菌的装备等传递进隔离器系统。

一般设计成快速传递仓或门（RTPs），通过快速传递仓或门可以把两个隔离器彼此相连，无菌的物品就能够从一个隔离器传递到另一个隔离器。

通过快速传递仓，两个隔离器或者一个隔离器和一个容器就可以在普通环境中连接。

无菌隔离器的技术参数无菌隔离器是一种用于实验室操作中的无菌环境下进行病原菌培养和传染病研究的仪器。

它采用高效过滤器和负压系统，可以有效隔离操作区域内的空气，防止污染物的进入。

下面将介绍无菌隔离器的主要技术参数。

一、外部尺寸和重量：无菌隔离器的外部尺寸和重量是选择仪器时的重要考虑因素。

通常，无菌隔离器的尺寸会根据不同的实验需求有所不同，一般会有标准型和大型两种规格可供选择。

在选择时，需要根据实验室的空间以及工作人员的操作需求来确定合适的尺寸。

二、无菌操作区域尺寸：无菌操作区域是无菌隔离器内部的一个封闭空间，进行实验操作时需要将手臂伸入其中。

因此，无菌操作区域的尺寸影响着操作的舒适性和便捷性。

一般情况下，无菌操作区域的尺寸应能满足实验操作的需要，并考虑到无菌操作时的人体工程学要求。

三、过滤效率和洁净度：无菌隔离器的过滤器是维持无菌环境的关键部件，其过滤效率直接影响着操作区域内微生物的污染程度。

无菌隔离器的过滤效率应满足相关的国家标准要求，通常要求对直径大于0.3微米的颗粒物过滤效率在99.99%以上。

洁净度是指无菌隔离器内部的空气中微生物的数量，通常以空气中的微生物落点数来表示。

洁净度越高，表示无菌隔离器内部的空气越干净。

一般情况下，洁净度要求符合ISO 5级别以上。

四、操作方式：无菌隔离器的操作方式一般有两种：手动和自动。

手动操作需要人工控制，并可能导致人为误操作。

自动操作则是通过设置相应的程序，由仪器自动控制运行，操作简便且减少了误操作的风险。

五、照明系统：无菌隔离器内部的照明系统是保证操作区域内有足够光照的关键。

一般来说，照明系统应具备高亮度和均匀性，能提供足够的照明效果，以确保操作者能清晰地观察操作区域。

此外，照明系统还应具备防爆、防水等功能，以确保实验操作的安全性和稳定性。

六、负压系统：无菌隔离器内部的负压系统是实现隔离区域空气流通的关键。

负压系统能够通过循环将无菌操作区域内的空气排出并净化后重新循环，从而使无菌区域内的空气保持洁净。

【手把手教你】验证（六）—无菌隔离器【手把手教你】验证（六）—无菌隔离器隔离器：以下是对于使用以及这些系统适用性的简要介绍，环境控制系统的主要目标之一是通过防止可能会改变产品纯度、含量与安全性的污染来保证工艺的完整性和质量。

使用内置或附加灭菌系统的隔离技术能够提供高度的无菌保证水平，因为其消除了微生物污。

染的主要来源之一：人。

为达到此目的，这些单元设计应当取得实际效果。

考虑所有这些要素内部的相互作用，需要在设计阶段审慎研究。

对于使用无菌工艺的大容量产品尤其如此。

机械设备的整合，监控设备，产品与容器的传递装置、灭菌装置，清洁装置以及人员，都需要仔细考虑。

一般情况下，这些单元是预先焊接、自我密闭的仓室或手套箱，对其能够进行原位灭菌，以防止无菌产品直接暴露到人员与周围环境中。

为了能提供适当隔离，这些装置配备微生物过滤器（高效过滤器或更高）来保持仓室的压力以及完整性。

输送装置设计用来避免在无菌工艺需要的部件进人或传出时周围环境直接地接触仓室。

所使用的建筑材料应当与清洁和灭菌程序兼容。

周围环境不应直接影响隔离器保持内部环境条件的效率。

制造后以及在操作的连续监测中，仓室的完整性必须核实。

这些系统通常已经安装有接收在线灭菌(S IP )或在线清洁（C IP )所需要的无菌气体或液体，以及内部部件进人的装置。

隔离器原位灭菌的验证与确认的注意事项：所使用的灭菌系统作为屏障或隔离器的一部分要用特定的验证程序来证明其能够有适当的安装、运行与性能。

虽然安装与运行的验证程序类似于空调净化系统，但性能确认需要使用适当的微生物进行挑战试验。

为此目的，生物指示剂在内部受控环境中应有足够的数量，来证明所有关键单元内部灭菌的有效性(致死性）及灭菌剂的穿透性，特别是那些被认为难以达到的部位。

隔离器完整性确认：有各种方法来测试与证实手套箱或隔离器的部件完整性。

验证程序应当考虑挑战试验来证明所保护的产品与周围环境“直接隔离” ，以及达到隔离器工艺活动与周围环境（生物危害工艺）“ 反向隔离” 。

假阳性的终结者－无菌检查隔离器-隔离技术在无菌检查中的应用Abstract: As the change and update of the China GMP and Pharmacopeia, the requirement of the aseptic process and sterility testing is higher and higher. And the Isolation technology is widely used in pharmaceutical in China. More and more attentions are paid to Sterility Testing Isolator by the pharmaceutical industry. Although the sterility testing has the limitation itself, but it still will be the regulatory required test for release the sterile products. In this paper, the related regulations in the world are introduced. And advantages of apply isolator technology to sterility testing, structure and distinguishing features are also listed.Keywords: Sterility Testing Isolator ，Gas Hydrogen Peroxide Generator，false positive摘要：随着中国GMP、中国药典相关行业法规的改版，对于无菌生产、无菌检查等要求的提高，隔离技术已经在国内得到了广泛的应用。