无菌隔离器技术概论

无菌隔离技术应用及其验证杭州泰林生物技术设备有限公司赵振波2009-5内容摘要一、隔离技术概述二、法规/指南三、隔离系统的类型四、隔离系统结构与关键技术介绍五、用户需求说明（URS）六、隔离器的安装环境七、隔离系统的验证八、隔离系统的无菌维持与环境监测技术九、隔离系统的运行维护一、隔离技术概述1、隔离技术的定义2、隔离技术的发展背景3、隔离技术的应用目的4、隔离技术与传统洁净技术的比较5、隔离技术的一些典型用途6、主要制造商1、隔离技术概述：定义隔离：采用物理屏障的手段将受控空间与外部环境相互隔绝的技术。

为一种绝对隔离。

用于医药保健产品的隔离器：能够利用可再生并且有效的方式去除污染，密封的或是通过高效空气过滤器（HEPA）实现空气交换，以此防止周围环境中微生物的进入及人员带有的污染物进入受控的环境。

系统允许物料通过设计和验证过的通路进入及（或）排出，并排除污染物的进入。

主要用于无菌处理或无菌测试。

2、隔离技术概述：隔离技术的发展背景隔离技术的背景1）源于第二次世界大战时的手套箱主要用于放射性物质处理。

2）战后核工业制药工业医疗领域电子工业航天工业食品工业航天工业2、隔离技术概述：隔离技术的发展背景生物学试验无菌生产制药工业无菌分装致敏性\毒性物质围堵无菌试验生物安全防护SPF 级实验动物饲养2、隔离技术概述：隔离技术的发展背景食品工业：饮料、乳品无菌灌装3、隔离技术概述：应用目的满足产品质量改进的需要安全防护的改进要求降低运行成本提供特殊环境GMP/cGMP资格“可移动的无菌室”4、隔离技术VS传统洁净技术项目传统洁净室无菌隔离技术消毒/灭菌方法消毒剂擦拭/薰蒸/紫外线照射等方法，受空间等诸多因素影响，效果难以验证自动气体灭菌器灭菌，省时省力，气体分布均匀，效果较好，容易验证洁净环境的控制易受人员、物料等诸多因素影响，易受污染，难以控制与外界完全隔离，仅通过HEPA进行空气交换并可恒定舱内压力以阻绝外界污染对操作人员的防护取决于操作人员自身完全物料传送方式传统的传递窗，易导致无菌室环境破坏双门快速传递系统保证在无菌环境中传递人员进出需复杂的换鞋/工作服更换等步骤，带来额外工作量仅通穿戴手套/半身工作服即可运行所需能耗高低误操作导致的无菌环境污染的风险大，与操作人员有关可能性极小操作和维护成本高低4、隔离技术VS 传统洁净技术局部100级工作台工作区的无菌保护无菌隔离器传统洁净室隔离器Class10000Clean room4、隔离技术VS传统洁净技术毒性物质围堵防护非封闭式防护隔离器4、无菌隔离技术VS传统洁净室4、无菌隔离技术VS传统洁净技术≥5KW0.3~3KW传统洁净室隔离器能耗5、隔离技术概述：典型用途无菌测试无菌生产（填充、分装、取样等） 毒性物质围堵生物安全防护实验动物饲养静脉药物配置（PIVAS）外科手术其它6、隔离技术概述：隔离系统主要制造商二、法规和指南中国GMP青霉素类等高致敏性药品、避孕药品、激素类、抗肿瘤类化学药品、放射性药品、强毒微生物及芽胞菌制品加工或操作病原体等任何有致病作用的微生物的作业区空气不得再循环，排气应采用过滤装置。

无菌隔离器的标准随着医疗科技的不断发展，无菌隔离器作为一种关键的医疗设备，在临床和实验室中扮演着重要的角色。

本文将探讨无菌隔离器的标准以及其在医疗和实验室环境中的应用。

一、无菌隔离器的标准国际标准：无菌隔离器的制造和应用通常要符合国际标准，如ISO 14644-1标准，该标准规定了洁净室的空气洁净度等级，确保在无菌操作环境中工作的可靠性。

安全性标准：无菌隔离器在设计和制造上需符合相关的安全标准，确保操作人员和环境的安全。

例如，符合CE认证标准，保障产品的安全性和可靠性。

空气流速标准：无菌隔离器的空气流速是关键的参数，通常需要符合国际洁净室设计和操作的相关标准，确保工作区域的洁净度。

材料标准：无菌隔离器的制造材料需要符合医疗器械的相关标准，以保证其不产生对人体有害的化学物质，同时易于清洁和消毒。

二、无菌隔离器的应用医疗领域：无菌隔离器在手术室、病房等医疗环境中被广泛应用。

它可以为医护人员提供一个洁净、无菌的工作空间，确保手术操作的成功和患者的安全。

实验室应用：在生物实验室中，无菌隔离器用于处理对外界环境要求极高的生物样品，确保实验结果的准确性和可重复性。

药品制造：在制药行业，无菌隔离器被用于药品的生产和包装过程，以防止微生物的污染，确保药品的质量和安全性。

生物安全领域：用于处理潜在有害生物的实验，无菌隔离器在生物安全级别实验室中发挥着不可替代的作用，保护实验人员和环境安全。

结论：无菌隔离器作为现代医疗和实验室领域中不可或缺的设备，其标准与应用至关重要。

只有在符合严格标准的前提下，无菌隔离器才能真正发挥其应有的作用，为医疗和科研工作提供可靠的支持，确保工作环境的洁净和安全。

无菌隔离系统的相关技术研究摘要：ISOLATOR隔离器适用范围广、安装背景级别低、完全隔离密闭、内部压力可正负压调节、独立自循环回风形式、操作简易、能耗降低、管控成本减少、无菌污染风险低。

经隔离器VHP CDCV后，隔离器VHP灭菌效果可行、有效。

关键词：ISOLATOR隔离器αβ阀RTPs CDCV1隔离系统的概述1.1隔离系统的相关定义隔离是指采用物理屏蔽的手段将受控有限的空间与外部环境相互隔绝的技术，是一种绝对的隔离[1]。

而隔离系统是指在原有隔离的基础上，通过密封或者有微生物过滤系统（高效过滤系统HEPA）提供空气并且可以实现空气交换（自净化）的一种系统。

所谓的隔离系统是指：当密闭时，仅使用已净化过的内部表面或使用快速转移通道系统（RTPs）进行物料的传递转移；当打开时，仅允许物料或工器具等物品通过特定的并已经过设计和验证的开口进行进出传递，以排出污染的传递。

而隔离系统通常被用于无菌操作时隔离活性混合物或者同时用于灭菌处理和隔离。

目前为止，市面上流通常用的隔离器有许多种，包括手套型、半身服型、全身服型等；在这里，主要探讨下当今较为先进的ISOLATOR隔离器。

1.2 ISOLATOR隔离器的利弊优势ISOLATOR隔离器是当前制药领域内发展的一种趋势化，凡是新建厂房车间的制造型药企，大多都会考虑上线一套完整的隔离系统，从而代替传统的、旧式的open-RABS或者close-RABS（包括A级层流防护门及RABS）。

与传统的ORABS相比，保护对象不同，ORABS主要保护的是产品，而隔离器保护的则是产品与人（岗位操作人员）的双重保护；二者的密闭性也不相同，ORABS是可以打开的，做不到完全的密封，采用的是一种非密闭的模式，而隔离器则是完全密封的，是一种绝对的隔离、完全的密闭，采用的是一种密闭的模式；内部压力也不相同，ORABS因无法密闭内部压力只能为正压，而隔离器因是一种绝对的隔离、完全的密闭，内部的压力可以是正负压调节，实现正负压可调型隔离器；两种设备或系统的回风形式不同，ORABS采用洁净区内直接取房间风，经过顶部高效过滤器过滤流通至均流膜后，均匀垂直送至操作区域，是一种直接房间取排式，而隔离器则大不相同，隔离器会配备完整的一套循环系统和空调机组，循环系统包括送风组件、排风组件、循环组件，所有的新风、排风、回风均经过高效过滤器（H14级、0.3μm的截留率＞99.995%）进行送风、排风、回风，隔离器独立配置的一套空调机组，保证空调的送风机组、排风机组、回风机组的所有空气经过初、中、高效过滤以及表冷除湿、加热加湿处理（此处空气处理方式主要针对双表冷加转轮除湿的空调机组），是一种完全自循环的方式。

【技术篇】浅谈无菌检验隔离器系统验证之（一）在19世纪80年代中期，建立一个无菌检验环境的隔离器就已经开始使用。

隔离器可以通过密封的方法或者采用过滤除菌空气保持正压的方法，创造一个无菌的环境。

当隔离器处于密闭状态时，仅仅能够在隔离器内部和快速传递仓传递物品；当隔离器打开时，允许通过一个特殊设计的并经过验证可以避免污染物进入的开口递出物品。

隔离器采用柔软的塑料（例如聚氯乙烯）、硬塑料、玻璃或不锈钢制造。

由于隔离器系统从根本上避免了分析人员与物品的直接接触，因此在无菌检验操作时可以避免物品和辅助设备被污染。

当隔离器内部与环境完全隔离时，隔离器内部的物品是无菌条件下的传递。

操作者穿着半身衣在隔离器内部进行无菌操作，半身衣是连接在隔离器墙体上的柔软的部分，操作者穿着半身衣有足够的范围在隔离器内部进行操作，操作者也可以通过连接在隔离器墙体上的袖子和手套进行操作。

在隔离器中，不要求操作者穿着特殊的无菌衣进行操作，允许操作者穿着标准的实验室服装进行操作。

为确保隔离器内部无菌，通常使用杀孢子剂对隔离器内部进行灭菌处理。

一．隔离器设计和建造1.空气处理系统用于无菌检验的隔离器需要配备除菌过滤器（HEPA过滤器是被要求的）。

静态时，要求隔离器尘埃粒子符合美国联邦标准209E的100级空气质量要求（看洁净室微生物评价和其他环境控制《1116》）。

动态时，不要求隔离器符合100级空气质量要求，不要求隔离器内部的空气流速或者空气交换频率。

用于无菌检验的隔离器内部空气流可以是单向流或者湍流。

2.传输仓和门隔离器有一个附属的“传递通路”杀菌器，通过传输通道杀菌器可以直接将无菌的培养基、无菌的稀释液、无菌的装备等传递进隔离器系统。

一般设计成快速传递仓或门（RTPs），通过快速传递仓或门可以把两个隔离器彼此相连，无菌的物品就能够从一个隔离器传递到另一个隔离器。

通过快速传递仓，两个隔离器或者一个隔离器和一个容器就可以在普通环境中连接。

1 无菌隔离技术的概念及分类1.1 无菌隔离技术的概念。

无菌隔离技术是在完全密封的环境下，实现对药品和生物制品的控制并将其处理成无菌状态的一种技术。

一个完整的操作过程可能需要若干个隔离器组成的系统来完成，从而将整个流程与可能的污染源彻底分开。

无菌隔离技术是根据药品生产质量的管理规范要求，经专门设计制造用于医药保健产品及需要更高级别的环境控制防护的屏障技术，该技术可最大限度的防治产品受到污染，保护操作者的安全，避免受到毒性物质的伤害。

这一技术为无菌试验、无菌生产及高致敏性、毒性药物生产防护提供完美的环境控制技术解决方案。

1.2 无菌隔离技术的分类。

目前无菌隔离技术主要有OPENCLEANROOM（开放式洁净室）、LABS（受限隔离系统）、RABS（限制进出屏障系统）、ISOLATORS（完全隔离装置）。

按照FDA 法规规定污染概率及系统完整性由高至低分别是ISOLATORS、RABS、LABS、开放式洁净室。

1.2.1 开放式洁净室。

开放式洁净室是在B 级区域内通过安装百级层流罩来实现局部A 级，并依靠屏风及幕帘等装置使A 级与B 级分开。

此种方法安装简便快捷，而且造价相对来说比较低，但是采取这种方法要求操作人员需要进入A 级区域进行无菌操作，这就加大了A 级区域受污染的概率，使得风险可控性较差。

1.2.2受限隔离系统。

受限隔离系统是在B 级区域内通过安装手套箱式的阻隔器进行操作，操作人员已可以与A 级区形成初步隔离。

这种方法安装简便、相对造价也较低，但是与开放式洁净室相比，在A 级区域污染的概率相对降低，有一定的风险可控性。

1.2.3 限制进出屏障系统。

限制进出屏障系统是在D 级或更高级别的洁净环境中通过安装手套箱式的阻隔器，内部通过洁净空气气流来保护并采用手动操作进行消毒与清洁来实现局部A 级。

这一方法安装复杂，造价也较高，但此设计容许在操作过程中进行连续或半连续的物料进出，因此对A 级区域有一定的污染风险，但此风险可控性非常高。

无菌隔离器的技术参数无菌隔离器是一种用于实验室操作中的无菌环境下进行病原菌培养和传染病研究的仪器。

它采用高效过滤器和负压系统，可以有效隔离操作区域内的空气，防止污染物的进入。

下面将介绍无菌隔离器的主要技术参数。

一、外部尺寸和重量：无菌隔离器的外部尺寸和重量是选择仪器时的重要考虑因素。

通常，无菌隔离器的尺寸会根据不同的实验需求有所不同，一般会有标准型和大型两种规格可供选择。

在选择时，需要根据实验室的空间以及工作人员的操作需求来确定合适的尺寸。

二、无菌操作区域尺寸：无菌操作区域是无菌隔离器内部的一个封闭空间，进行实验操作时需要将手臂伸入其中。

因此，无菌操作区域的尺寸影响着操作的舒适性和便捷性。

一般情况下，无菌操作区域的尺寸应能满足实验操作的需要，并考虑到无菌操作时的人体工程学要求。

三、过滤效率和洁净度：无菌隔离器的过滤器是维持无菌环境的关键部件，其过滤效率直接影响着操作区域内微生物的污染程度。

无菌隔离器的过滤效率应满足相关的国家标准要求，通常要求对直径大于0.3微米的颗粒物过滤效率在99.99%以上。

洁净度是指无菌隔离器内部的空气中微生物的数量，通常以空气中的微生物落点数来表示。

洁净度越高，表示无菌隔离器内部的空气越干净。

一般情况下，洁净度要求符合ISO 5级别以上。

四、操作方式：无菌隔离器的操作方式一般有两种：手动和自动。

手动操作需要人工控制，并可能导致人为误操作。

自动操作则是通过设置相应的程序，由仪器自动控制运行，操作简便且减少了误操作的风险。

五、照明系统：无菌隔离器内部的照明系统是保证操作区域内有足够光照的关键。

一般来说，照明系统应具备高亮度和均匀性，能提供足够的照明效果，以确保操作者能清晰地观察操作区域。

此外，照明系统还应具备防爆、防水等功能，以确保实验操作的安全性和稳定性。

六、负压系统：无菌隔离器内部的负压系统是实现隔离区域空气流通的关键。

负压系统能够通过循环将无菌操作区域内的空气排出并净化后重新循环，从而使无菌区域内的空气保持洁净。

【手把手教你】验证（六）—无菌隔离器【手把手教你】验证（六）—无菌隔离器隔离器：以下是对于使用以及这些系统适用性的简要介绍，环境控制系统的主要目标之一是通过防止可能会改变产品纯度、含量与安全性的污染来保证工艺的完整性和质量。

使用内置或附加灭菌系统的隔离技术能够提供高度的无菌保证水平，因为其消除了微生物污。

染的主要来源之一：人。

为达到此目的，这些单元设计应当取得实际效果。

考虑所有这些要素内部的相互作用，需要在设计阶段审慎研究。

对于使用无菌工艺的大容量产品尤其如此。

机械设备的整合，监控设备，产品与容器的传递装置、灭菌装置，清洁装置以及人员，都需要仔细考虑。

一般情况下，这些单元是预先焊接、自我密闭的仓室或手套箱，对其能够进行原位灭菌，以防止无菌产品直接暴露到人员与周围环境中。

为了能提供适当隔离，这些装置配备微生物过滤器（高效过滤器或更高）来保持仓室的压力以及完整性。

输送装置设计用来避免在无菌工艺需要的部件进人或传出时周围环境直接地接触仓室。

所使用的建筑材料应当与清洁和灭菌程序兼容。

周围环境不应直接影响隔离器保持内部环境条件的效率。

制造后以及在操作的连续监测中，仓室的完整性必须核实。

这些系统通常已经安装有接收在线灭菌(S IP )或在线清洁（C IP )所需要的无菌气体或液体，以及内部部件进人的装置。

隔离器原位灭菌的验证与确认的注意事项：所使用的灭菌系统作为屏障或隔离器的一部分要用特定的验证程序来证明其能够有适当的安装、运行与性能。

虽然安装与运行的验证程序类似于空调净化系统，但性能确认需要使用适当的微生物进行挑战试验。

为此目的，生物指示剂在内部受控环境中应有足够的数量，来证明所有关键单元内部灭菌的有效性(致死性）及灭菌剂的穿透性，特别是那些被认为难以达到的部位。

隔离器完整性确认：有各种方法来测试与证实手套箱或隔离器的部件完整性。

验证程序应当考虑挑战试验来证明所保护的产品与周围环境“直接隔离” ，以及达到隔离器工艺活动与周围环境（生物危害工艺）“ 反向隔离” 。

浅谈无菌检查用隔离器摘要：通过参照《中国药典》三部（2015版），利用无菌检查法对药品，医疗器械，原材料进行无菌检查，综合检查制品的安全。

通过参照实验培养基中是否含有微生物，来断定样品中的无菌性能，在实验开展初级阶段，通过对无菌培养皿进行取样调查，利用酒精灯保护等操作方法，保证整个过程的无菌性。

在之后的发展过程中，可定向转移到干净无菌的工作台，保证整个工作室操作干净整洁。

确定整体操作符合国家标准，无菌操作应在B级背景下进行定向操作，按照A级系统中所规定的要求完成隔离器系统的定向处理。

在指定区域进行准确操作，防止出现交叉感染等状况或者出现假阴性假阳性的问题。

通过参照《中国药典》三部（2015版）中所说的要求，利用B级背景来提高实验室整体净化效率，根据系统所规定，要求重点检查实验室环境，在此过程中需要投入大量资金费用。

对于实验区域，需要与背景间进行隔离，防止出现污染风险。

无菌检查室是为实验提供无菌环境，能够较好的降低微生物污染的风险，防止实验试剂和设备出现污染，更好的增强无菌检查室试验结果的准确性，在全球范围内得到有效利用。

基于此，本篇文章对无菌检查用隔离器进行研究，以供参考。

关键词：无菌检查；隔离器；应用分析引言无菌检查用隔离器能够将检验环境与外部的人员和环境完全隔离开来。

它不只配备单独的高效过滤器和空气处理单元，还配备过氧化氢灭菌系统，能对舱体内表面和设备表面进行灭菌，可达到生物指示剂下降6个对数级甚至更低水平的效果，因此可以避免实验用物品和辅助设备被污染，提高无菌试验结果的准确性。

汽化过氧化氢的灭菌循环包括预处理、充气、保压灭菌和通风4个阶段。

①预处理阶段：对管道、蒸发器和舱体进行预热去湿，防止过氧化氢气体冷凝；②充气阶段：往舱体内注入汽化过氧化氢，直至达到饱和状态，对微生物有杀灭作用；③保压阶段：维持汽化过氧化氢的饱和状态，以实现对灭菌表面的持续覆盖和对微生物的杀灭作用；④通风阶段：将残留的汽化过氧化氢通过催化过滤器排至室外，直至其浓度小于1×10-9并无异味。