各级菌种制作方法

菌种怎么制作，菌种保藏方法1、将土豆切成块，放入烧杯中煮半个多小时，煮好后过滤溶液备用。

2、将琼脂放入溶液中，然后重新将其烧开，琼脂完全溶化后继续煮一段时间。

3、煮好后将汁液分放至试管内，并用高压锅消毒杀菌，消毒后斜放试管，待凝固后开始接种。

4、用酒精对嫩蘑菇进行杀菌，并在无菌箱内将其切成小块，切好后可接种至琼脂基质上。

5、堵上试管口，将琼脂基质放入培养箱，长满菌丝后便可形成一级菌种。

一、菌种怎么制作1、一级菌种（1）向烧杯内放入切成块的土豆，然后煮30多分钟，煮好后过滤溶液备用。

（2）向溶液内放入琼脂，再将其烧开，待琼脂完全溶化后继续煮一段时间。

（3）煮好后，将汁液分放至试管，再用高压锅消毒杀菌。

消毒后将试管斜放，直到冷凉凝固后即可开始接种。

（4）用酒精对嫩蘑菇做杀菌处理，然后在无菌箱内切成小块，接种至琼脂基质上面。

（5）用塞子堵上试管口，再将琼脂基质放入培养箱内，待长满菌丝后即可形成一级菌种。

2、二级菌种（1）将煮熟的大豆和谷粒置于无菌的条件下晾干，再装入经过高温杀菌的玻璃瓶内。

（2）将瓶子封口，放入高压锅中，经高压灭菌后放在无菌室冷凉。

（3）将培养瓶放至无菌箱内，再放入一级菌种，用的小匙挖出黄豆大小的菌种接种入玻璃瓶。

（4）接种后要封口，再将玻璃瓶放到培养室中，待长满菌丝后即可备用。

3、三级菌种（1）制备方法与二级菌种基本一致，培养基可使用煮熟的麦粒、玉米粒及棉籽。

（2）三级菌种的菌丝长满后即可取出来培育，经历三级菌种的培育后可完全制成平菇菌。

二、菌种保藏方法1、斜面低温保藏法将菌种接种至适宜的固体斜面培养基上，待菌种充分生长后用油纸将棉塞部分包扎好，然后放入冰箱，温度控制在2-8°C即可。

2、甘油管保存法（1）将80%甘油用高压蒸汽做灭菌处理，再将菌种放置在斜面培养基上培养，用无菌水制成高浓度的菌悬液。

（2）将1毫升甘油与菌液混匀，使甘油的浓度达到10-30%，然后放在-70°C的环境中冻存。

食用菌菌种分类和固液菌种制作方法一、固体菌种母种→原种→栽培种1、母种母种：在试管或平皿琼脂培养基上生长的纯菌种称为母种，因为是用试管制作的，也称之为试管种，因为是最早一级的菌种，也称之为一级种。

试管的规格一般为22mm×220mm、20mm×200mm、18mm×180mm三种，如果采用液体菌种建议使用18mm×180mm，封口用棉花或硅胶塞。

平皿的规格为直径90mm，封口用Parafilm封口膜。

为了扩大生产，母种可以转接成更多的母种，叫做母种的扩繁。

在各级菌种中，母种的纯度最高，决不允许有杂菌污染。

衰老和退化的母种也不能投入生产，出现不纯或者退化的母种要进行提纯和复壮，提纯和复壮不能达到效果就应该淘汰。

母种的来源有两种，一种是从科研单位及菌种生产机构购买的，一种是组织或孢子分离后经出菇试验确认遗传稳定和高产的母种。

母种培养时间：7-10天，不同品种有差异。

食用菌菌种分类和固液菌种制作方法2、原种原种：原种是母种的菌丝体转接到棉籽壳、玉米芯、木屑或高粱粒、麦粒、枝条等固体培养基上培养而成的食用菌菌种，也叫做二级种。

原种制作的容器有：500ml罐头瓶、750ml罐头瓶、点滴瓶、专用菌种瓶等，罐头瓶封口用菌袋裁成见方封口，点滴瓶用棉花封口。

原种的用途是扩繁栽培种用的，即母种→原种→栽培种→栽培袋，也可以用原种直接转接到栽培袋中，即：母种→原种→栽培袋，这样不仅能够缩短菌种制作周期，也能更好的保证菌种纯度。

原种培养时间：20-30天，根据制作容器和品种不同而有差异。

3、栽培种栽培种：原种经过转接扩大繁殖后称之为栽培种，栽培种用于转接栽培袋，是生产中使用量最大的食用菌菌种，也叫做三级种。

三级种制作的容器有：500ml罐头瓶、750ml罐头瓶、点滴瓶、专用菌种瓶等，除了这些和原种一样的容器，栽培种使用最多的是15cm×30cm、17cm×33cm的折角袋，封口用棉花或者专用的无棉盖体。

自制菌种有窍门随着食用菌产业的蓬勃发展，菌种需要量随之增加，而现有菌种生产单位明显偏少，许多菇农不得不在外地引种。

长途购运菌种不仅花费大、成本高，而且菌种因破瓶易引起杂菌污染，从而严重影响栽培食用菌的经济效益。

菇农若能掌握菌种生产程序和制种技术，实行自行制种，逐步发展成制种专业户，也是一条很好的致富门路。

菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。

其中母种的分离选育技术性强，要求精化；而原种和栽培种的制作则相对比较简单。

下面介绍各级菌种的制作技术。

母种的分离选育方法是：母种主要采用人工选择、诱变育种、杂交育种和原生质融合等手段获得。

作为一般制种专业户，可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下。

1.采集种源。

从野生或人工栽培群体中选择有代表性的优良菇体作为种源。

①种菇选择时间。

一般在11月上中旬，在第一批和第二批菇中挑选。

因为这段时间蘑菇生长正是旺盛时期，菌丝生活力强，子实体健壮，质量好，加之气温适宜，蘑菇能正常成熟。

②种菇的标准是：八成熟，朵形圆正，肉质肥厚，颜色洁白，无病虫害。

采集一二朵符合上述标准的种菇编上号码，作为分离母种的材料。

从栽培室采集的应标有原菌株代号。

2.培养基配制。

琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200克、琼脂16～18克、葡萄糖20克、水1000毫升。

先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于铝锅内加水煮沸15～30分钟至薯块酥而不烂为止。

煮后用6～8层事先浸湿拧干的纱布过滤，过滤后加入琼脂16～18克（气温低时加16克，气温高时加18克）再煮，并不断搅拌，使固体琼脂完全溶化，再用4～6层纱布过滤。

将滤液加水至1000毫升加入20克葡萄糖，搅拌溶化趁热分装试管。

装入量为试管高度的1/4～1/5，注意培养基不要粘着试管口，管口用棉塞塞紧，或将汁液装入玻璃三角瓶内，每瓶装量为20毫升。

然后置于高压锅内，在压力达108千帕，锅内温度为121℃灭菌30分钟左右。

不同类型平菇菌种制作方法
棉籽壳菌种、麦粒菌种、枝条菌种、液体菌种在发菌、出菇以及接种成本、效率等方面都具有很大的差异，为提高种植户的经济效益，相关专家整理出了不同类型平菇菌种制作的方法，供广大种植朋友们参考。

1.麦粒种制备
配方：麦粒99%，石膏1%，麦粒先用温水加1%石灰浸泡至无白心，然后捞出加石膏拌匀装瓶(350g/瓶)，126°C灭菌120min，冷却后无菌接种(每瓶接种量为四分之一平板母种)，接种后25°C恒温培养至菌丝满瓶。

2.棉籽壳种制备
配方：棉籽壳85%，麸皮13%，石灰1%，石膏1%，原料预湿后拌料装袋(17cmX35cm聚丙烯袋，每袋装湿料0.9kg)，料含水量为62%，料装袋后于126°C灭菌120min，两头接种，每个平板菌种接2袋。

接种后25°C恒温培养至菌丝满袋。

3.枝条种制备
杨木枝条（规格12cmx0.4cmx0.7cm）扎捆后放入桶内，再加1%石灰水浸泡24h以上，捞出沥水撒麸皮，使每根枝条均匀粘上麸皮后装袋。

枝条装袋前后各在袋底部和顶部铺一层棉籽壳种培养基。

装袋后126°C灭菌120min，冷却后一头接种（袋接种量为四分之一平板母种）。

接种后于25°C恒温培养至菌丝满袋。

4.液体种制备
培养基配方：葡萄糖20g、蛋白胨2g、硫酸镁0.5g、氯化钙0.1g、磷酸二氢钾0.5g、B族维生素100ug、蒸馏水100ml。

准确称量原料后煮沸定容，分装三角瓶后每瓶加玻璃珠10粒，121℃灭菌30min，冷却后接种，每瓶接打孔母种块10块，接种后置于转速160r/min、25°C的恒温振荡培养箱中培养7天。

[基础]食用菌菌种制作技术图文1图文食用菌菌种制作技术一、菌种生产程序母种繁殖栽培种示意图菌种生产程序，通常分为母种、原种和栽培种3个层次，也就是通常所说的一级、二级、三级菌种。

其中母种的分离选育技术性强，一般由专业制种单位制作。

而原种和栽培种的制作则比较简单。

下面介绍各级菌种的制作技术。

二、母种的分离选育母种可以采用人工选择方式分离培育母种，具体步骤与操作方法如下：1、采集种源采集种源用具选择有八成熟、朵形圆正、肉质肥厚、无病虫害的优良菇体作为种源。

采集1～2朵装入灭菌纸袋，带回接种箱进行消毒。

2、母种培养基配制母种培养基常用的是琼脂培养基又叫PDA培养基，常用配方为：马铃薯200～250g，琼脂15～20g，葡萄糖20～25g，清水1000ml。

也可以加硫酸镁1～1.5g，维生素B1微量，磷酸二氢钾2～3g。

先将马铃薯洗净去皮，切成薄片，置于烧杯（或铝锅）内加水煮沸30分钟，捞起后用4层纱布过滤，取汁。

然后将琼脂加入汁内，边加热边搅拌，让琼脂充分溶化。

再将葡萄糖等加入，并补水至1000ml。

稍煮几分钟后，同样用4层纱布过滤，取其汁液。

将汁液趁热装入玻璃试管内，装至管长的1/5。

管口用棉花塞塞紧。

或将汁液装入玻璃三角瓶内，装量为20ml。

然后置于高压锅内，在98～108千帕/cm2的压力下灭菌30分钟左右。

灭菌后及时取出，趁热将试管斜排于桌上，冷却后即成为固体斜面培养基。

3、母种分离方法①、孢子弹射法将种菇表面消毒，吸干水分后，将菇体悬挂于装有琼脂培养基的三角瓶内，让菇体内的孢子自然散落在培养基上萌发菌丝。

也可以剪取一小块菇体，贴附在试管斜面培养基表面，让孢子散落在培养基上萌发菌丝，即能获得母种。

②、组织分离法将消毒过的种菇，在接种箱内用手从菇柄处对半掰开，或用刀片切开，使菇体形成对开。

在菌盖和菌柄交界处或菌褶处，用接种刀切取一小块菇体，然后纵切成5mm×10mm的小薄片，用接种针挑取1块薄片，接入斜面培养基的中央，每支试管接种一小块薄片，待其萌发菌丝，即可得到母种。

食用菌原种的制作方法食用菌原种是培育高品质食用菌的开始，其制作方法关系到菌种的品质和生长效果。

下面将介绍10种关于食用菌原种的制作方法，并详细讲解每种方法的具体操作步骤、注意事项和优缺点。

1. 伏击法制种法伏击法制种法是一种常见的食用菌原种制作方法，其操作简单，适用于多种食用菌的原种制作。

具体方法如下：步骤一：准备原料。

选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，尽量选用种粒外形完整、表面干净、无病害的菌盖和菌蒂。

步骤二：将菌盖和菌蒂归并，放到70%酒精中清洗30秒，然后取出沥干。

步骤三：将菌盖和菌蒂放到滤纸上，擦干表面水分，放到蒸汽锅中蒸10分钟，杀灭病菌和杂菌。

步骤四：将蒸好的菌盖和菌蒂拿出来，再次擦干表面水分，放到培养基上。

步骤五：放到恒温摇床上培养，震荡180rpm，28℃，恒温培养7-14天，即可获得食用菌原种。

优点：操作简单，适用范围广，菌株易保存。

缺点：成活率较低，制作时间较长。

2. 含砂蒸法制种法含砂蒸法制种法是应用含石英砂的菌种培养基来制作食用菌原种，能提高种粒触蒸面积，提高出菌率和菌株的品质。

具体方法如下：步骤一：准备含砂菌种培养基。

将玉米粉、蔗糖、石英砂和蒸馏水按一定比例混合，制作含砂菌种培养基。

步骤二：准备原料。

选一定数量的食用菌菌盖和菌蒂，按照比例加入含砂菌种培养基中。

步骤三：将含菌培养基放在琼脂板上，在30℃下反复震动震荡搅拌。

步骤四：将培养好的固体菌种放在75%-80%的相对湿度内，保持湿润并置于通风且恒温保持在22℃下。

步骤五：待菌体生长到一定大小时，再将其移植到适宜的菌床中。

优点：出菌率高，菌株品质好。

缺点：制备过程中需掌握好配方和稠度。

3. 傅里叶红外辐射制种法傅里叶红外辐射制种法是利用电极辐射灯产生的热量来使制种容器内的培养液升降温，低温使菌体沉积在液表面，高温则使其下沉到液底，实现制种的目的。

具体方法如下：步骤一：将食用菌种子与蔓茎切片、米糠混合后，加入到恒温恒湿的发酵箱内。

食用菌菌种制备技术菌种：原意是指孢子(相当于植物的种子) ，但在实际生产中，常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。

菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。

母种（一级）：将纯菌丝体或孢子在试管培养基中繁殖而成。

可以繁殖原种，也适宜菌种保藏。

原种（二级）：母种菌丝在固体培养基上繁殖而成。

这一过程增强菌丝对培养环境的适应性，又起到扩繁的作用。

原种可以直接出菇。

栽培种（三级）：由原种扩繁而成。

主要是为了扩繁，为生产提供足够的菌种。

菌种制备：也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。

以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

种子制备包括孢子制备和菌丝体制备（见图）。

其中(1)～(4)为孢子制备过程。

保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，无菌操作挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天(或较长时间)。

所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子，对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基。

将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。

将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入4℃冰箱中备用。

一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

放线菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、牛肉膏及无机盐与琼脂制成的。

将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中，于28～37℃培养5～14天。

所获得的大量孢子可直接作为种子罐(6)的种子。

如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶（5）液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。

种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。

其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆等），及无机盐(如磷酸盐)等。

作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。

简述三级菌种的制作流程三级菌种的制作流程可有趣啦，就像一场小小的微生物冒险呢。

一、准备工作。

咱们得先把材料准备齐全呀。

需要有合适的基质，就像微生物的小床一样。

这个基质可以是麦粒呀、木屑之类的。

麦粒要选那种饱满的，就像挑小胖子麦粒似的，它们营养丰富，能让微生物吃得饱饱的。

木屑呢，要新鲜的，可不能是那种受潮发霉的哦，不然微生物会很不开心的。

然后还有装基质的容器，像小瓶子或者小袋子都可以。

当然啦，也不能少了接种的工具，比如接种针之类的，这可是把微生物种子种到基质里的重要家伙。

另外，还得有个干净卫生的环境，就像给微生物盖个小城堡，要把制作的地方打扫得干干净净的，细菌灰尘啥的都不能有太多，不然会打扰到微生物的生活的。

二、基质处理。

麦粒要先泡一泡，就像给它们洗个舒服的澡。

泡的时间可不能太长也不能太短，大概几个小时就好，让它们吸饱水。

然后要煮一煮，煮到麦粒变得软软的，但是又不能太烂，这就很考验功夫啦。

煮好之后还要沥干水分，就像把麦粒从水里捞出来擦干身子。

木屑呢，要是太粗了就得粉碎一下，让它变得细细的，这样微生物住起来才舒服。

处理好的基质还要加点营养物质，就像给微生物加餐一样，可以加些石膏粉之类的，能让它们长得更壮实。

三、灭菌。

这一步可重要啦。

要把装有基质的容器放到灭菌锅里，就像把微生物的小床放进大蒸锅里一样。

然后高温灭菌，这个温度要足够高，时间也要足够长，把那些杂菌都统统消灭掉。

就好像是在给微生物的小世界来一场大扫除，只留下干净的空间给我们想要的菌种。

灭菌完了之后，可不能马上打开，要让它慢慢降温，就像让刚蒸完桑拿的小容器冷静一下。

四、接种。

等基质冷却好了，就可以接种啦。

把我们的二级菌种像宝贝一样小心翼翼地接到基质上。

用接种针挑一点点二级菌种，轻轻地放到基质里，就像把小种子种到土里一样。

这个过程要快，而且要在很干净的环境里进行，不然那些杂菌又会趁机跑进来捣乱了。

五、培养。

接种好之后，就要把这些小容器放到合适的地方去培养啦。

各级菌种制作方法菌种制作是指将其中一种菌株培养并保存下来，以便于进一步研究或应用。

下面是各级菌种制作方法的详细介绍。

一、纯菌种制备方法纯菌种是指由单一菌株组成的菌种，制备纯菌种的方法有多种，下面介绍两种常见的方法。

1.1分生培养法该方法适用于无色泽的菌株。

步骤如下：1)从菌落中选取一个单一菌落，用培养棒沾取并悬浮于无菌水中。

2)取适量的悬浮液在琼脂平板上均匀涂布，待菌落分开成单个菌落后进行分离。

3)通过连续分离单个菌落的方法，分离纯菌株。

4)将纯菌株进行培养、鉴定以及保存。

1.2筛选法该方法适用于具有色泽的菌株。

步骤如下：1)从菌落中选取一个单一菌落，用培养棒沾取并悬浮于无菌水中。

2)将悬浮液均匀涂布在琼脂平板上。

3)在菌落上加覆一层深色染料，如卢戈尔液或磷酸钠溴酚蓝溶液。

4)观察菌落的颜色变化，选取与其它菌落颜色不同的菌落进一步培养、鉴定和保存。

二、菌种保存方法菌种的保存可以使用不同的方法，主要包括以下几种。

2.1低温保存法低温保存法是最常用的保存菌种的方法，其原理是通过将菌种置于低温环境中，减缓菌落的生长速度，以达到保存的目的。

常用的低温保存方法包括冷冻保存和液氮冷冻保存。

2.2干燥保存法干燥保存法是将菌种培养后的菌落通过空气干燥或冷冻干燥的方法，得到菌种粉末或冻干菌种。

该方法的优点是保存周期长、操作方便，适用于许多菌种的保存。

2.3阳离子凝胶保存法阳离子凝胶保存法是将菌液用阳离子树脂凝胶包裹，并置于低温环境中保存。

该方法适用于保存不能耐受冷冻或冷冻干燥的菌种，保存时间较长。

2.4液态保存法液态保存法是将菌液置于无菌平板或培养基中，倒入试管或培养瓶中，密封保存。

该方法适用于快速生长的菌种，操作简便，但菌种保存时间相对较短。

母菌种是指在菌种制备过程中，从纯菌种中培养得到的大量菌液。

母菌种的制备方法有多种，下面介绍两种常见的方法。

3.1瓶培法瓶培法适用于产菌量较多的菌株。

步骤如下：1)在无菌条件下，将纯菌株接种于试管中的液体培养基中。