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液体菌种制作规程工艺流程：斜面菌种→初级摇瓶种→二级摇瓶种→发酵罐深层发酵种→接种一、摇瓶种的制作1斜面菌种准备：马铃薯200克（去皮切块煮沸过滤取滤液），蔗糖20克，麸皮30克（煮汁过滤取滤液）二氢钾2克，硫酸镁1克，琼脂20克，VB1 10毫克，水1000毫升。
25度培养7天备用。
2、初级摇瓶制作①配方土豆200克葡萄糖20克酵母膏2克蛋白胨3克磷酸二氢钾2克硫酸镁1克V B110毫克水1000毫升。
（配方2：玉米粉4%，蔗糖3%，麸皮2%，酵母膏0.5%，2氢钾0.25%，硫酸镁0.1%，VB1 0.01%，豆油0.05%）。
②制作：土豆去皮切成薄块，煮沸后保持20分钟，四层纱布过滤后取滤液，补足1000毫升水，称取其他成份，与土豆液充分搅匀然后装入三角瓶。
初级摇瓶采用500ml三角瓶，装入200ml,放入玻璃球5粒（0.5cm 直径）用二层纱布包裹制作棉塞，塞紧棉塞后再用二层纱布外层加报纸做罩，扎紧瓶胫，防止摇动时棉塞活动。
③灭菌：把三角瓶放入立式高压锅，加足水紧好盖，开启放气阀，接通电源，有蒸汽冒出时关闭放气阀，待压力表达到0.05MPa时,断掉电源,打开放气阀,放冷空气至压力表回0，再关闭放气阀，接通电源，当压力表显示0.11 MPa，温度达到121℃后开时计时，保持45min。
断电使其自然降至0.02 MPa时放气归0，趁热微开盖，使剩余蒸汽烘干棉塞，然后出锅降温至25℃即可接种。
④接种：首先，封闭接种室，用开启紫外线灯30分钟，再用臭氧灭菌器灭菌60分钟或用烟雾剂每立方5克熏蒸30分钟，进行接种环境灭菌。
把灭菌后的三角瓶放入超净台（或接种箱）,把斜面母种、工具、酒精灯、75%的酒精棉球瓶同时放入，母种用灭过菌的报纸遮盖，打开紫外线灯和无菌风开关，保持15min后，关闭紫外线灯进行接种。
操作人员应着干净的隔离衣，带好卫生帽、口罩，手洗净，用75%酒精擦拭手、母种试管、工具，点燃酒精灯，灼烧工具及试管口20秒，在严格无菌操作程序下，把斜面菌种切割成0.5厘米小块（不带培养基），移入三角瓶中，使其浮在液面，一般接入5-6块，塞好棉塞，接完后重新封好棉塞罩，放到25℃恒温环境净置培养72小时。
食用菌液体菌种生产方法（发酵罐法）传统菌种生产工艺，一般是由试管母种扩繁成二级种、三级种，生产周期长、污染率高、成本高、需大量人工、管理困难。
液体菌种生产具有纯度高、活力强、繁殖快的特点，接种到培养料内有流动性好、萌发点多，发菌迅速等特种点。
应用于生产与固体菌种相比有以下优点：1．菌种生产周期短。
固体种一般需25—40天，而液体种仅需3—7天。
2．接种后，萌发点多萌发点多、发菌快、出菇周期短。
接种24小时菌丝布满料面，3—15天长满菌袋，一般品种10天左右可出菇。
3．接种方便、成本低。
用液体菌种接种一般每袋成本是1—3分，每人每小时可接800袋以上，提高效益4—5倍。
4．适宜工厂化生产。
可直接用于栽培料进行出菇，大批量生产菌袋。
为食用菌集约化、标准化生产创造了条件。
因此，适宜我国国情的液体菌种设备的出现，必将在食用菌生产领域引发一场新的革命。
液体菌种具有固体（颗粒）菌种无可比拟的优势，但是液体菌种生产设备是近几年刚发展起来并逐渐成熟的，因此很多人对此很陌生。
在这里我们对此进行简单介绍一、液体菌种设备基本原理任何一种食用菌自身的生长必须满足其对温度、湿度、需氧量、养分等的需要，同时必须避免杂菌感染。
在深层发酵技术上称之为选择性发酵技术，如啤酒生产技术当属此例，而白酒生产则是生物菌群发酵技术。
液体菌种发酵设备（包括四大系统，温控系统由控制器、电热管等组成；供气系统由空气压缩机、输送管道、空气过滤器等组成；冷却系统由热交换器、进出水管道组成；搅拌系统由射流器、提升管等组成。
二、液体菌种生产的关键技术1、溶氧量液体菌种生产中最关键的是培养液中氧的溶解量，因为在菌丝生长过程中，必须不断的吸收溶解其中的氧气来维持自身的新陈代谢，氧气在液体（水）中的溶解量与压力、温度有关，同时与培养液的接触面积、渗透压有很大的关系。
因此我们设计发酵设备时有效地解决了这些问题，如安装射流器使气泡细碎度增加等。
2、空气过滤技术的关键就是保证进入的空气无菌度高，因此必须选择孔径小、材料先进的过滤膜。
⾷⽤菌液体菌种发酵罐规范化操作规程⾷⽤菌液体菌种由于其有利于⾼效率、⼯⼚化、规范化栽培，解决了⾷⽤菌集约化⽣产中的瓶颈制约难题，且与固体菌种相⽐具有⽣产周期短、菌龄⼀致、出菇齐、成本低、纯度⾼、活⼒强等优点，越来越受到⾷⽤菌栽培者的青睐，已成为⾷⽤菌产业的发展趋势。
但由于发酵罐的操作需要较强的专业知识，提⾼发酵成功率⼀直是普通⽣产者的使⽤难题。
笔者经过⼏年对70型发酵罐的⽣产实践，总结出了该设备⾼成功率的实⽤规范化操作规程，供⼤家借鉴。
⾷⽤菌液体菌种⽣产流程：罐的清洗和检查－煮罐－配料－灭滤芯、⽆菌⽔、接种枪管－上料－灭菌(安装滤芯计时开始时开⽓泵吹⼲滤芯)－降温(先接进⽓管后放，并瓶)－发酵罐接种(第2天装袋灭菌)－培养⼀接菌袋(瓶)。
1 清洗与检查 发酵罐在每次使⽤后或再次使⽤之前都必须进⾏彻底清洗，除去罐擘的菌球、菌块、料液及其它污物。
对于内壁粘附的污物可以⽤⽊棒包扎软布揩拭，洗罐⽔从罐底接种阀排出。
如有⼤的菌料(块)不能排出，可卸下进⽓管的喷嘴排出菌料(块)。
清洗的标准：罐内壁⽆悬挂物，⽆残留菌球，排放的⽔清澈⽆污物。
罐清洗完毕即可加⽔，加⽔量以超过加热管为宜(绝对禁⽌加热管⼲烧)。
然后启动设备，观察检查控制柜、加热管⼯作是否正常，各阀门有⽆渗漏，检查合格⽅能开始⼯作。
2 煮灌 正常⽣产不须煮罐，上⼀次⽣产完只需将罐洗净就可进⼊下⼀批⽣产。
如果有下列情况之⼀者须要煮罐：①新罐，初次使⽤须要煮罐；②上⼀次污染杂菌的罐；③更换⽣产品种的罐；④长时间不⽤的罐。
煮灌是对罐内进⾏预消毒的过程，具体操作⽅法：①关闭罐底部的接种阀和进⽓阀，把⽔从进料⼝加⼊⾄视镜中线，盖上进料⼝盖，拧紧，关闭排⽓⼝。
②启动电源，按控制柜灭菌键4s，屏幕上两个加热指⽰灯亮，此时设备进⼊灭菌状态。
③当温度达到100℃时排放冷⽓，微微打开排⽓阀直⾄灭菌结束。
④当控制柜显⽰屏上的显⽰温度123℃、压⼒表压⼒0.12MPa时，控制柜⾃动计时，显⽰屏上交叉显⽰温度和计时时间。
液体菌肥生产工艺
液体菌肥的生产工艺一般包括以下几个步骤：
1. 菌种培养：选择适合的菌种，进行菌种的培养和繁殖。
常用的菌种有免疫活性菌、氮固定菌、腐生菌等。
2. 发酵培养：将培养好的菌种接种到发酵罐中，添加适当的培养基，控制好温度、酸碱度、通气量等条件，进行真菌发酵培养。
3. 调控发酵过程：根据菌肥生产的需求，可以进行一些调控，如添加适宜的碳源和氮源，调整酸碱度和营养元素等。
4. 发酵液分离：经过一段时间的发酵，菌体和培养液混合在一起。
需要将发酵液分离出来，常用的方法有离心法、滤液法等。
5. 液体菌肥的后处理：将分离出来的发酵液进行适当的处理，如调节一些指标，控制菌体浓度等。
可以根据不同的需求进行进一步的处理，例如添加营养元素、调整PH值等。
6. 包装和贮存：将经过处理的液体菌肥进行包装和贮存。
一般采用塑料瓶等无菌容器进行包装，然后进行密封和贮存。
以上是液体菌肥的一般生产工艺，具体工艺流程可能会因生产厂家和产品类型的不同而有所差异。
液体深层培养方法生产发酵产品主要工艺过程液体深层培养是一种常用的发酵工艺，用于大规模生产各种发酵产品，如酒精、乳酸、酱油等。
它通过在液体培养基中添加适量的发酵菌种，控制温度、氧气供应和pH值等条件，使菌种在液体中快速繁殖和产生目标产物。
液体深层培养的主要工艺过程包括菌种接种、发酵培养、收获和提取等环节。
首先是菌种接种。
选择适宜的菌种，并在无菌条件下将菌种接种到预先配制好的液体培养基中。
菌种接种后，必须严格控制接种量，以确保发酵过程中的菌种数量适宜。
接下来是发酵培养。
在菌种接种后，将培养基装入发酵罐中，并控制好温度、氧气供应和pH值等条件。
温度的控制是非常重要的，不同的菌种对温度有不同的要求。
氧气供应也是必不可少的，因为很多发酵过程需要氧气来进行代谢和生长。
此外，pH值的控制也非常重要，过高或过低的pH值都会对发酵过程产生不利影响。
发酵过程中，菌种会快速繁殖，并在培养基中产生目标产物。
为了保证发酵效果，还需要控制好发酵罐内的搅拌速度和培养基的通气量等参数。
此外，还需要定期对发酵罐进行采样分析，以监测发酵过程中的菌种数量和产物浓度等指标。
当发酵过程达到一定的时间后，就可以进行收获和提取。
收获时，将发酵液从发酵罐中取出，并进行初步的固液分离。
然后，通过离心、过滤、浓缩等步骤，将目标产物从发酵液中提取出来。
最后，对提取得到的产物进行纯化和检测，以确保产品的质量和纯度。
总结起来，液体深层培养方法是一种常用的发酵工艺，它通过在液体培养基中添加适量的菌种，控制好温度、氧气供应和pH值等条件，使菌种在液体中快速繁殖和产生目标产物。
主要的工艺过程包括菌种接种、发酵培养、收获和提取等环节。
通过严格控制这些环节，可以获得高质量的发酵产品。
发酵罐生产工艺
发酵罐的生产工艺一般包括下面几个主要步骤：材料准备、加工制作、焊接、表面处理和包装。
首先，材料准备是发酵罐生产的第一步。
根据客户的要求和产品规格，选择合适的材料，常见的材料有不锈钢、碳钢等。
材料需要经过检测和验收，合格后进行下一步的加工制作。
接下来是加工制作阶段。
首先，根据图纸和客户提供的要求，将材料进行切割、刨光、折弯等加工工序，以制作出罐体的各个部件。
然后，组装这些部件，采用焊接或螺栓连接等方式进行固定，形成整个发酵罐的结构。
然后是焊接阶段。
通过对各个部件进行焊接，将它们连接在一起，使得整个发酵罐的结构更加牢固和稳定。
焊接需要严格按照相关的操作规程和技术要求进行操作，以确保焊缝的质量和强度。
接下来是表面处理。
发酵罐的表面处理通常包括喷砂、抛光、除锈、防腐等工序，以保证罐体的表面光滑、平整，并且具有良好的防腐性能。
这样可以有效防止罐体受到外界的腐蚀和损坏，延长其使用寿命。
最后是包装阶段。
生产完成后，将发酵罐进行清洁和檢修，然后进行包装，常见的包装方式有木箱、纸箱和集装箱等。
包装时需注意保护罐体表面，防止受到碰撞和损坏，在运输过程中保持罐体的完整性和良好的外观。
综上所述，发酵罐的生产工艺主要包括材料准备、加工制作、焊接、表面处理和包装等步骤。
每个步骤都需要严格遵循相关的操作规程和技术要求，以确保罐体的质量和性能符合客户的需求和要求。
简述发酵罐连续生产液体菌种工艺连续发酵使用的发酵罐一般有电控箱，空气压缩机，煮料罐（带夹层），发酵罐（带夹层），过滤器（两套，四级），降温器，热交换器，接种枪及（空气、蒸汽、过料、出种）管道连接组成，各个管道一般用橡胶管、硅胶管、或不锈钢管连接，发酵罐大小一般为煮料罐的3倍，其使用制种技术过程以杏鲍菇为例介绍如下：1、空消1.1、洗罐新购的发酵罐或者使用过的发酵罐，在生产之前，都必须进行彻底的清洗后方可使用。
用过的发酵罐在罐体的内壁和管内所有接触液体菌种的管件表面都有可能粘附污物，洗罐的目的就是清除罐内的污垢和菌苔及培养料的残余物，疏通进气口，排料口等。
1.2、利用高温高压蒸汽进行发酵系统灭菌1.2.1、清洗干净后将其密闭完成向煮料罐加水至总容积的70%-80%，打开电源开关，将温度设定到121度，在发酵罐内加水至总容积的40%，将温度设定到118-120度。
1.2.2、达到设定温度后，关闭进入二级过滤器的空气总阀门，打开蒸汽总阀门，让蒸汽依次进入2、3、4级过滤器，最后进入发酵罐，对过滤器及无菌空气管道等部位进行灭菌，这时每隔五分钟左右排一次过滤器下面的冷凝水。
1.2.3、30分钟后，将煮料罐出料口阀门打开少许将其灭菌。
然后，打开进入过料管道的蒸汽总阀门，用蒸汽将过料管道灭菌，40分钟后（总时间）关闭进入二级过滤器的蒸汽阀门，打开空气总阀门，并将发酵罐的进气阀门关闭，打开空气压缩机，通入无菌空气吹干滤芯。
1.2.4、然后，打开接种枪开关，将发酵罐出种口阀门打开少许，对其预热，然后打开进入接种枪管道的蒸汽阀门，用蒸汽对出种管道及接种枪进行灭菌，30分钟后关闭接种枪开关，用75%酒精袋密闭备用，后将灌顶接种口及呼吸器打开少许对其灭菌30分钟后关闭灌顶所有阀门，用75%酒精棉球密封接种口。
1.2.5、最后，将罐内高温高压水从排污口，取样口不少于30分钟排出，当罐内压力低于0.05MPa后，打开进气阀门，通入无菌空气待罐体吹凉后保压备用。
第四章原种的生产（液体菌种生产）第三节：液体罐菌种的生产市场上液体菌种罐种类很多，从大型工业发酵罐到小型液体发酵罐都向操作简便和高成功率转型。
一、发酵罐型号食用菌液体发酵罐有很多型号：如50L，100L，200L，400L，600L。
各个菌罐生产厂所生产的食用菌罐各有其优缺点，只要是操作技术人员熟悉罐体结构，成功率就很高了。
二、常用的液体罐菌种的生产流程现在菌种生产者常用的液体罐菌种的生产流程：(一)发酵罐培养基配方以1L的培养基配方为例进行计算。
如下：1.红糖10g，玉米粉5g，豆饼粉10g,蛋白胨1.5g，磷酸二氢钾0.8g，硫酸镁0.8g。
2.也可以用煮土豆麦麸培养基。
各种斜面培养基配方都可以做为液体菌培养液配方使用。
一般200L的发酵罐一般可装160L培养料。
（二）液体菌种生产工艺流程：罐的清洗与检查→培养基的配制→上料→灭菌→降温→摇瓶接种→培养→接种栽培袋1.罐的清洗与检查每一罐做完之后，新的一罐做之前。
我们都需要对罐体进行清洗，目的是除去罐内所有污垢。
方法就是用清水冲刷内壁。
然后检查各部件是否完好，有无渗漏，设备能否正常运转。
我们还需要进行煮罐，那在什么时候进行煮罐呢？比如在新罐第一次使用时；在上一罐染菌时；在更换品种时；在长期闲置不用时。
这些时候我们都需要进行煮罐。
具体的操作方法就是：①、加水至试镜中线，扣上接种盖，微开排气阀。
②、打开启动开关，进入灭菌状态，温度升到124℃时，计时，40分钟后，控制柜报警。
③、关闭排气阀，关闭启动开关，闷罐20分钟，放水。
2.如是外置滤芯需要对外置滤芯及无菌水灭菌(1)将进气管管口用8-10层纱布包好。
(2)选择容积是1000ml的广口烧瓶，加水750-780ml，盖棉塞，包牛皮纸。
(3)在压力是0.11-0.15MPa，温度121-126℃的条件下，计时60分钟。
3.培养基的制作配方按生产品种配制。
很多公司现在也有现成的专用培养基。
直接配比水即可。
食用菌液体发酵罐制种技术食用菌制种主要有液体和固体两种制种方式。
液体制种是目前国际上通用的、先进的方法。
液体菌种具有生产周期短、用工成本低、菌丝活力强、接种后萌发吃料快、菌种在培养基中的流动性和分散性好、菌龄一致、出菇整齐、可缩短栽培时间等优点。
在对液体制种与固体制种经济效益分析比较中指出，液体菌种发育时间可以减少24d，接栽培袋菌丝满菌时间缩短约10d，污染率可以降低1.5%，成本利润率可提高42%。
液体菌种作为食用菌基料工厂化生产发展过程中的重要环节，具有重要意义。
而现在食用菌产业受资金和技术的限制，其规模化、工厂化生产仍然以固体菌种为主，液体菌种的应用只有少数较大规模工厂化生产的企业及少数栽培品种工厂化栽培中获得应用，液体菌种的优势完全没有发挥出来。
液体菌种在制作过程中对设备、技术的要求较高，液体菌种发酵罐的操作技术流程复杂，增加了使用者的生产难度。
我们将对食用菌液体菌种发酵罐的生产工艺、操作流程进行技术总结，为食用菌项目的液体菌种提供参考。
1、研发液体菌种发酵罐的构造液体菌种在发酵培养过程中需要充足的氧气，属好氧性发酵。
满足于好氧性发酵的生化反应器主要有两大类即机械搅拌通风发酵罐和气流搅拌发酵罐。
前者利用通风装置和搅拌装置将氧溶入发酵液中，因机械搅拌剪切力而对菌丝产生破坏作用，因此不适于栽培型菌种的应用。
而后者则利用外部供气装置将气体通入发酵罐内形成环流将氧溶入发酵液中，其特点是基质溶液分布均匀、具有较高的溶解氧速率和溶解氧效率、结构简单、易于加工和操作。
而气流搅拌发酵罐的构造主要由电控系统、气体输送系统、发酵培养系统三部分组成。
1.1电控系统。
由控制箱体、微型电脑、集成传感器、报警器、数码显示屏、控制开关等组成，可调控灭菌温度、时间、压力及培养温度等。
1.2气体输送系统。
由无油隔膜泵、气水分离器、空气过滤器、滤芯、止回阀、压力表、硅胶管等组成，可为发酵罐提供纯净、无菌的气源。
1.3发酵培养系统。
液体菌种生产的工艺流程液体菌种与固体菌种在生产工艺流程有着很大的差别，液体菌种对无菌操作要求更严，对技术人员的要求更高。
而且菌龄短、菌龄整齐一致，并且菌种生产量大，可以大规模生产菌种或栽培袋。
液体菌种的生产工艺流程专用试管母种→发酵罐专用母种→发酵罐液体菌种1.专用试管母种生产：液体菌种对试管的纯度要求很高。
生产前,先要将试管种进行纯化,不然很难生产出液体种。
纯化的方法有二种：固体生产法和菌种提纯法。
二者可任选其一。
2.专用母种生产：工艺流程培养基的配制→装瓶→灭菌→接试管种→专用母种专用母种分固体和液体两种。
从生产技术上看，液体专用母种要难一些，是用电磁搅拌器（当然也可以用摇瓶机）进行生产。
整个过程要3-5天时间，生产的液体种稍经加工就可以直接使用。
固体种生产时间要长些，约20天，保存的时间也长，运输方便。
二者的接种效果都是一样的。
3.发酵罐生产：工艺流程空气压缩→过滤↓配料→装罐→灭菌→冷却→接种→培养→液体种↑试管斜面种→三角瓶液体专用母种生产时要先进行培养料的配制。
配料时先将土豆去皮切片，与麸皮混合后用不锈钢锅煮后取汁，再将辅料KH2PO4、MgSO4等溶入，混匀后装入罐中加热，至125℃并维持40分钟左右进行灭菌，灭菌结束后用冷水冷却至培养温度，而后将并瓶后的三角瓶专用母种接上进行培养，培养时根据不同的菌种，设定适宜的温度。
培养期间应注意观察，并做好记录。
包括温度、压力、气流量、排出气体的气味等。
如遇到停电，排气阀自动关闭或人工关闭来保持罐中处于正压状态。
来电后重新启动，并打开排气阀继续培养。
培养过程中，可随时无菌操作采样分析，几天后待菌球密度合适（从视镜观察）即可接种。
液体菌种发酵罐生产工艺流程一、前期准备。
这就像是要做一顿大餐之前，得先把食材和厨具都准备好一样。
对于液体菌种发酵罐生产呢，我们得先把发酵罐好好检查一下。
看看这罐子有没有破损呀，各种阀门、管道是不是都通畅，就像检查汽车上路之前得看看轮胎有没有气一样。
还有哦，那些测量温度、压力的小仪器，也得保证它们是准的，不然就像做饭的时候火候温度计不准，那可就麻烦大了。
接着呢，要准备好培养基。
这培养基啊，就像是菌种的“食物”。
得按照菌种的口味来调配呢。
一般会有各种营养成分在里面，像碳源、氮源之类的。
比如说葡萄糖就常常被用作碳源，就像我们人吃的米饭能提供能量一样，葡萄糖能给菌种提供它们生长需要的能量。
氮源呢，可能是蛋白胨之类的东西，这就像是我们吃的肉，能让菌种长得壮壮的。
二、接种环节。
准备工作做好了，就到了很关键的接种环节啦。
这个时候就像是把小种子种到地里去一样。
我们要把事先培养好的优良菌种小心翼翼地放到发酵罐里。
这个过程得特别小心，要保证菌种的纯净性，不能混进其他杂菌。
要是混进杂菌了，那就像在种好的菜地里突然长了很多杂草，会抢夺养分，影响我们的菌种生长的。
而且接种的量也很有讲究呢，不能太多也不能太少。
太多了可能会导致营养不够分，大家都长不好；太少了呢，又会生长得太慢，效率就低啦。
三、发酵过程。
接种完了，就开始发酵啦。
这时候发酵罐里就像一个小世界，菌种们在里面开始活跃起来。
发酵罐里的温度和搅拌速度可重要啦。
温度就像是给菌种们盖的被子，得刚刚好才行。
不同的菌种适合的温度不一样，就像不同的人对温度的喜好不同。
有的菌种喜欢暖和一点，有的就喜欢稍微凉一点的环境。
搅拌速度呢，就像是给菌种们做按摩，搅拌得合适了，能让菌种们均匀地接触到营养物质，就像我们搅拌粥的时候，让每一粒米都能裹上汤汁一样。
如果搅拌太快了，可能会把菌种给搅坏了，就像按摩的时候太用力会弄疼人一样；搅拌太慢呢，营养物质就不能很好地分散开，菌种们就会有的吃得多，有的没得吃。
液体菌种的的制作过程一、母种纯化1、配方：1000ml为例（1）小麦（麦夫或豆芽）50克，土豆200克，葡萄糖20克，蛋白胨2克，琼脂18-20克，KH2 PO4 1.5克，MgSO4 0.75克，PH自然（6左右）（2）蔗糖24g，蛋白胨2g，酵母膏1g，2、制作小麦煮开花，土豆煮酥而不烂；琼脂剪碎，放入溶解，加入其他配料，总体积称到标准量，装入试管，进行常规灭菌（121℃，40分钟）。
3、接种将所用母种及新制的试管放入接种箱，灭菌20分钟后将手用75%的医用酒精擦洗（消毒），伸入接种箱等待5-10分钟再开始接种（接种前所有接种工具都要在酒精灯火焰上匀烧灭菌），在酒精灯火上方切取0.3cm²一小块菌丝，放入新培养基上，塞好试管口；放在该菌最适合的温度下培养。
4、培养在培养过程中，每天都要仔细逆光观察，发现有任何疑常现象都要淘汰不要。
二、摇瓶种子制作1、配方：1000ml为例a.可以用母种纯化配方（不加琼脂）b.土豆200克，黄豆8克（需打凝浆）或脱脂豆奶8克，葡萄糖30克，蛋白胨2克，KH2PO41.5克，MgSO4 0.75克。
c.玉米小麦各50克，蔗糖20克，葡萄糖10克，蛋白胨2克，酵母膏2克，KH2PO41克，MgSO4 0. 5克。
d．蔗糖24g，蛋白胨2g，酵母膏1g，KH2PO42g,MgSO4 1g, 豆浆50ml.2、制作将以上配方任选一种用类似母种的方法制成液体培养基，装入摇瓶，塞好瓶口，包上放潮纸，放入灭菌锅，封好锅口，打开放气阀，当有大量蒸气排出时关闭放气阀，温度升至121℃后，计时40分钟，让其自然冷却，压力归零时，打开灭菌锅盖，将一边掀起3-5cm，利用余热将棉塞烘干。
3、接种将摇瓶及纯化好的母种一起放入接种箱，灭菌后，去掉防潮纸，扭松棉塞，在酒精灯火焰上方，挑取0.3cm²的菌丝皮左手拿起棉塞,右手迅速将菌丝接入,然后立刻盖上棉塞,用同样的方法一个摇瓶接入15-20块,让其均匀地分布在液体表面。
发酵工艺原理期末复习范围发酵工艺原理期末复习范围一、名词解释1.反馈调节：生物学内容在一个系统中，系统本身的工作效果，反过来又作为信息调节该系统的工作，这种调节方式叫做反馈调节。
2.补料分批培养：是指在分批培养过程中，间歇或连续地补加一种或多种成分的新鲜培养基的培养方法。
3.限速酶：指整条代谢通路中催化反应速度最慢的酶，它不但可以影响整条代谢途径的总速度，还可以改变代谢方向。
4.温度系数（Q10）：为温度升高10℃时的反应速度常数与原温度时的反应速度常数的比值。
5.发酵：是指酵母作用于果汁或发芽谷物时产生CO2的现象。
6.深层培养法：是微生物细胞在液体深层中进行厌氧或需氧的纯种培养的方法。
7.生理性迟延：突变基因由杂合状态变为纯和状态时，还不一定出现突变表型，新的表型必须等到原有基因的产物稀释到某一程度后才能表现出来，而这些原有基因产物的浓度降低到能改变表型的临界水平之前，细胞已经分裂多次，经过了好几个世代的现象。
8.前体：在产物的生物合成过程中被菌体直接用于产物合成而自身结构无显著改变的物质称为前体。
9.能荷调节：指细胞通过改变ATP、ADP、AMP三者比例来调节其代谢活动。
10.诱导酶：只有在它们催化的底物（或底物的结构类似物）存在时才能合成似的酶。
11.分批培养：是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后，接入少量微生物菌种进行培养，使微生物生长繁殖在特定条件下完成一个生长周期的微生物培养方法。
12.连续培养：是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。
13.连续灭菌：培养基在发酵罐外经过一套灭菌设备连续的加热灭菌，冷却后送入已灭菌的发酵罐内的工艺过程称为连续灭菌。
14.摄氧率（γ）：单位体积培养液每小时消耗的氧量，单位为mmol（O2）/（L·h）。
15.呼吸商（RQ）：指生物体在同一时间内释放CO2与吸收O2的体积之比或摩尔数之比，即指呼吸作用所释放的CO2和吸收的O2的分子比。
用发酵罐生产食用菌液体菌种的流程揭秘发酵罐是食用菌液体菌种生产流程的主要设备，发酵罐为液体菌的生长提供均匀、恒定的营养条件，主要包括提高溶氧浓度，对培养基进行充分混匀。
食用菌发酵过程中，菌丝体相互纠结成球状，所以在食用菌液体菌种发酵生产流程上发酵罐需保持干净，清洁，没有污染物。
食用菌液体发酵罐的发酵设备包括：温度控制系统、供气系统、冷却系统、搅拌系统组成。
食用菌液体菌种的生产流程是：发酵罐的清洗检查—发酵罐的消毒—配料—上料—灭菌—降温—发酵—培养—装瓶。
使用发酵罐注意事项1、当发酵罐的各个设备都能正常工作时，必须使用该系统。
2、对过滤器进行消毒时，流经空气过滤器的蒸汽压力不得超过0.17mpa，否则会损坏滤芯，造成过滤器容量损失。
3、发酵过程中，罐内压力不得超过0.17mpa。
4、在实际消耗过程中，当夹套被蒸汽预热时，进汽压力必须控制在设备工作压力范围内（不超过0.2mpa），否则会对发酵罐造成损坏。
5、在排空和实际排空时，必须将剩余的水排尽在发酵罐的护套内。
否则，发酵罐内筒可能被压缩，造成设备损坏。
此外，过多的冷凝水会导致培养基稀释，不能满足工艺要求。
6、发酵罐内的负压严禁在清除空罐和实际清除后的冷却过程中产生，以免对设备造成污染甚至损坏。
7、在发酵过程中，发酵罐的压力应保持在0.03-0.05mpa之间，以避免污染。
8、每次操作时，气管内的压力必须保持高于发酵罐内的压力，否则发酵罐内的液体会回流到过滤器内，堵塞滤芯或使过滤器失效。
9、如果遇到自己无法解决的问题，请直接联系发酵罐售后服务部。
切勿强行拆卸或修理发酵罐。
食用菌液体菌种生产流程上发酵罐的清洗：发酵罐在每次使用后或者再次使用前都必须进行彻底的清洗，除去发酵罐罐壁的菌球、料液及其他的污染物。
清洗后的发酵罐应达到罐内壁没有悬挂物，无残留的菌球、清洗后排放的水清澈没有污染物。
发酵罐的消毒：发酵罐的消毒就是对罐体进行高温的煮罐，新的发酵罐罐体在使用时必须进行煮罐消毒。
简述发酵罐连续生产液体菌种工艺连续发酵使用的发酵罐一般有电控箱，空气压缩机，煮料罐（带夹层），发酵罐（带夹层），过滤器（两套，四级），降温器，热交换器，接种枪及（空气、蒸汽、过料、出种）管道连接组成，各个管道一般用橡胶管、硅胶管、或不锈钢管连接，发酵罐大小一般为煮料罐的3倍，其使用制种技术过程以杏鲍菇为例介绍如下：1、空消1.1、洗罐新购的发酵罐或者使用过的发酵罐，在生产之前，都必须进行彻底的清洗后方可使用。
用过的发酵罐在罐体的内壁和管内所有接触液体菌种的管件表面都有可能粘附污物，洗罐的目的就是清除罐内的污垢和菌苔及培养料的残余物，疏通进气口，排料口等。
1.2、利用高温高压蒸汽进行发酵系统灭菌1.2.1、清洗干净后将其密闭完成向煮料罐加水至总容积的70%-80%，打开电源开关，将温度设定到121度，在发酵罐内加水至总容积的40%，将温度设定到118-120度。
1.2.2、达到设定温度后，关闭进入二级过滤器的空气总阀门，打开蒸汽总阀门，让蒸汽依次进入2、3、4级过滤器，最后进入发酵罐，对过滤器及无菌空气管道等部位进行灭菌，这时每隔五分钟左右排一次过滤器下面的冷凝水。
1.2.3、30分钟后，将煮料罐出料口阀门打开少许将其灭菌。
然后，打开进入过料管道的蒸汽总阀门，用蒸汽将过料管道灭菌，40分钟后（总时间）关闭进入二级过滤器的蒸汽阀门，打开空气总阀门，并将发酵罐的进气阀门关闭，打开空气压缩机，通入无菌空气吹干滤芯。
1.2.4、然后，打开接种枪开关，将发酵罐出种口阀门打开少许，对其预热，然后打开进入接种枪管道的蒸汽阀门，用蒸汽对出种管道及接种枪进行灭菌，30分钟后关闭接种枪开关，用75%酒精袋密闭备用，后将灌顶接种口及呼吸器打开少许对其灭菌30分钟后关闭灌顶所有阀门，用75%酒精棉球密封接种口。
1.2.5、最后，将罐内高温高压水从排污口，取样口不少于30分钟排出，当罐内压力低于0.05MPa后，打开进气阀门，通入无菌空气待罐体吹凉后保压备用。
2、液体培养基制作及灭菌2.1、配方杏鲍菇发酵罐常用配方：黄豆1%，淀粉0.5%，葡萄糖1%，蔗糖2%，蛋白胨0.15%，磷酸二氢钾0.15%，硫酸镁0.075%，消泡剂0.15%。
2.2、配制及灭菌2.2.1、培养基装量视煮料罐大小装入总容量的70-80%。
首先，将煮料罐内加水至淹没加热管3-5厘米后开始加热（水质太差需处理），黄豆提前浸泡后打浆与淀粉其他原料混合在一起，放在不锈钢或铝锅内熬成糊状母液。
2.2.2、当水加热至90度时加入消泡剂，并打开供氧机吹少量无菌空气后，加入母液，并用清水冲洗进料口。
2.2.3、当加热至95度时关闭供氧机，进料口向外排出大量蒸气时关闭灌顶所有阀门，将温控仪表设定到121度，将灭菌继电器设定到2400秒，打开计时开关。
2.2.4、在计时期间将降温器内加满冷水降温循环管道连接好，热交换器通入循环水，当温度升到121度后，将煮料罐顶部排气阀门及进料口阀门打开一点，让蒸汽排出一些对其灭菌。
2.2.5、灭菌计时结束，关闭顶部所有阀门，从罐底排污口以5-10分钟内排除300-500毫升培养基，然后打开煮料罐出料口阀门，让无菌液，通过降温器，热交换器进入发酵罐，无菌液打完后打开发酵罐进气阀门，通入无菌空气，压力调整到0.03-0.05MPa，过料管道要保持正压。
当罐内培养料温度达到杏鲍菇最适生长温度24度时即可接种。
3、接种及发酵培养3.1、无菌液打入发酵罐后要进行取样，检测培养料，灭菌系统是否达标，能否接种，接种前向发酵罐内通入12-24小时的无菌空气后取样，检测过滤系统是否达到无菌状态，能否接种。
3.2、经检验合格后开始接种，将培养好的杏鲍菇摇瓶种子在接种前 (若是低温保藏菌种要先解冻）,用75%医用酒精将其出种铜管口浸泡10分钟以上，在火焰保护下打开接种口将摇瓶种子接入，接种时门窗要关闭以减少空气流通增加成功率。
3.3、接种操作一般二人配合进行，首先，用95%酒精浸湿的火环套在接种口上，打开排气阀门，然后，用镊子拿掉接种阀门口的酒精棉球打开接种阀门，第二人手扶摇瓶，将铜管口放入火焰内，第一人用镊子拔掉管头内的棉塞，第二人将铜管插入接种口内，斜提摇瓶接入菌种，接完后拔出铜管，关闭阀门去掉火环，接种口重新用75%酒精棉球封好。
3.4、完成后，打开供氧机，通入无菌空气，将温控仪温度设定到杏鲍菇最佳生长范围24度，罐压保持在0.03-0.04MPa，通气量前期1：0.3-0.5，后期按1：0.5-0.8进行深层发酵培养。
培养期间要定时观察及取样检测。
4、取样检测4.1、制取样培养基杏鲍菇取样培养基制作工艺流程为：A、配方（木屑79%，麦麸20%，葡萄糖1%）→拌料（将木屑与麦麸拌匀后，将葡萄糖加水融化均匀拌入，含水量55%。
）→装瓶（装入250毫升盐水，料面整平压实后3-5厘米，一般200克装8瓶）→擦瓶身、瓶口→ 塞棉塞→ 包防潮纸→高压灭菌2.5-3小时→风干棉塞→冷却→检验合格后收起备用；B、250毫升空盐水→擦瓶身、瓶口→ 塞棉塞→ 包防潮纸→高压灭菌40分钟→风干棉塞→冷却→检验合格后收起备用。
4.2、取样杏鲍菇液体菌种连续发酵取样检测，一般接种前及接种当天与补料当天，取到空瓶内后转接到PDA培养基上进行细菌检测，接种后第1天及补料后第1天开始取到木屑取样培养基上检测菌种活力及纯度。
其取样工艺流程为：将取样瓶用75%酒精浸湿棉塞，然后用10%以上双氧水或0.25%新洁尔灭溶液在处理一次，20分钟后二人配合取样，第一人手持火环点燃，第二人在火焰内从新洁尔灭瓶内拔出取样管，在火焰保护下放掉管内的残留菌液，第一人将火环套在待取样的瓶口上，用钳子拔掉棉塞，第二人将取样管插入瓶内打开取样阀放入适量液体菌种，动作要快要准，第一人迅速用棉塞封住瓶口，火环移入下一瓶，（一般每次每罐取两瓶）整个取样过程，取样管口不能离开火焰中心，取完后，把取样管口插入新洁尔灭瓶内，放回原处。
4.3、培养、检测细菌检测：把空瓶内取出的样液用无菌操作技术流程接入三支空白PDA试管后，放在30-33度条件下培养48小时后没有任何异常现象及细菌污染即为合格；菌种活力及纯度检测：将取完样的杏鲍菇取样瓶放在25度条件下，培养10小时后表面菌丝发白，24小时后菌丝开始吃料，48小时后吃料0.2厘米以上，表面菌丝洁白，生长有力，72小时后没有其它杂菌，即可使用。
5、补料因培养液中含有大量的颗粒状物质，在培养前期菌液较浑浊，但随着培养时间的延长，营养物质逐渐被利用，菌液变得越来越清澈。
菌种培养时，在发酵罐排气口可闻到杏鲍菇的香味，而染杂菌的培养液则散发出霉臭、酒精等异味。
经检测内菌丝纯度、活力、菌丝球多少和出菇能力等合格后即可补料。
补料量为加料至发酵罐容积的70%-80%。
补料后继续取样检测（补料方法同2）。
6、发酵培养6.1、待补料完成后，打开发酵罐进气阀门，通入无菌空气，将温控仪温度设定到24度，罐压保持0.03-0.04MPa，通气量前期1：0.3-0.5，后期按1：0.5-0.8进行深层发酵培养。
6.2、亦可根据生产需要通过调节温度高低，通气量大小控制培养时间的长短，培养期间要认真观察菌种的生长速度，菌液、PH值的变化及发酵罐是否正常工作等生产细节。
6.3、当罐内菌丝球密度达到视镜70-80%左右时，且培养液清澈，菌丝球较小并均匀，在发酵罐排气口可闻到杏鲍菇的香味无霉臭、酒精等酸臭异味即可用于接种生产。
7、不接种连续发酵培养7.1、连续发酵培养是在培养好的液体菌种接种生产时，在罐内留下5-15%左右液体菌种，作为母种，用补料的方法打入新的液体培养基，继续培育新的液体菌种。
7.2、经生产验证一次接种后如不染菌，不换品种连续发酵培育3-6个月不用再次接种，培育出的依旧是优质菌种。
7.3、为确保连续发酵成功率，最好每3-5天过滤器、10-15天接种管道，接种枪灭一次菌，具体方法与【空消】类似、空气压缩机2-3天、一级过滤器1天排污一次。
7.4、若几个发酵罐生产的是同一个品种，它们的菌种或料液是可以相互补充的，如需更换品种，用同【空消】一样的方法，对发酵系统进行灭菌，然后打入新的培养料，接入新的菌种即可。
8、个人观点8.1、液体菌种使用应注意8.1.1、液体菌种是悬浮在发酵罐内液体培养基中的单个菌丝球组成，具有菌龄一致，渗透性强，萌发早，吃料快等优点，但它不能长期存放，不适应异地运输，现做现用效果最好。
8.1.2、其接入料袋后菌丝与固体料直接接触，适宜的环境能加快吃料速度，提高成品率；反之影响菌丝生长；一般PH值偏高或偏低，培养料含水量过大都会影响菌丝生长，所以接液体菌种的培养料含水量比常规要低5-10%，PH值要在最适范围。
8.1.3、接种后要在最佳温度下培养，以利于菌丝尽快萌发定置，增强其抗杂能力，降低污染几率。
8.1.4、接种后每个菌丝球都暴漏在固体培养料表面，没有任何缓冲保护，所以搬动时要轻拿轻放，不要损伤菌丝，以免影响萌发。
8.2、选择液体培养基时应注意8.2.1、注意碳氮比的协调，氮源过多会引起菌丝生长过于旺盛，不利于代谢产物的积累。
碳源不足，又容易引起菌体衰老和自溶，碳、氮比不当，会影响菌丝按比例地吸收营养物质。
8.2.2、同一种原料因产地不同其营养成分有差异，这在氮源表现得较明显，如大豆、玉米浆、蛋白陈等，必须记下每一种原料的产地、批号、生产厂等，并对原料进行化学成分分析。
8.2.3、水质对发酵生产的影响也很大，自来水、地表水、河水、井水、雪水等，其中所含溶解氧、金属离子及酸碱度等均有差异。
另外，有的水中还含有较多的氯离了。
因此应对水质进行化学分析，以饮用水质为标准进行选择。
8.2.4、高温(或高压)灭菌会引起某些营养成分的破坏，特别是还原糖、氨基酸和肽类等共同加热时，会形成与—羟甲基糠醛及类黑精等物质。
赖氨酸最容易与糖发生反应，形成棕色物。
8.3、工厂化应用液体菌种应注意8.3.1、要选用专门适合食用菌菌丝生长的发酵设备，另外空气导管要便于拆卸清洗，最好采用耐高温透明塑料来替代钢管，便于发现污渍，罐体内的可视性尽可能强些。
8.3.2、在液体菌种生产上思想要高度重视，不抱侥幸心理，需制定严格的食用菌菌丝液体发酵无菌操作规程，并配备发酵所要求的环境设施，同时，摈弃液体菌种生产很简单、谁都可以操作的错误认识，必须配备具有较高专业素质的操作人员来进行生产。
8.3.3、运用液体菌种接种时，要制定适当的接种量，并严格控制接种量。
接种量大或小了在培养阶段液体菌种的优势体现将受到影响，甚至会转化为劣势。
8.3.4、食用菌菌丝与发酵工业的大多数微生物相比较，生长势更弱，对养分的竞争力差，许多工业发酵菌种相对于食用菌菌种来说，都是具有强势竞争力的杂菌，在同样发酵条件下，食用菌发酵更易污染。
