根癌农杆菌介导转化水稻成熟胚及转Metr基因植株的获得
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农杆菌介导的氮高效利用转基因水稻植株的获得查中萍;万丙良;殷得所;杜雪树;戚华雄【摘要】NAT3 gene coding protein with high nitrate combining ability cloned from Cylindrotheca fusiformis was transmitted into rice ' zhonghua 11' via Agrobacterium-mediated transformation. 456 regenerated rice plants with resistance were obtained by screening on the culture medium with 30 mg/L basta. 313 positive transgenetic plants were gained by PCR amplification analysis targeting at NA T3 gene. It was confirmed that NA T3 gene had been integrated into the genome of ' zhonghua 11'.%将从深海硅藻中克隆的与氮具有高度亲和性的硝酸盐转运蛋白基因NAT3通过农杆菌介导的遗传转化方法,转入水稻品种中花11,在含30 mg/L Basta的选择培养基上筛选,获得456棵抗性植株,对NAT3目标基因检测,获得313棵阳性植株,初步证明目标基因已整合到中花11基因组中.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2011(050)024【总页数】3页(P5247-5249)【关键词】转基因水稻;硝酸盐转运蛋白;氮高效利用【作者】查中萍;万丙良;殷得所;杜雪树;戚华雄【作者单位】湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉 430064;湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉 430064;湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉 430064;湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉 430064;湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉 430064【正文语种】中文【中图分类】S511;Q78植物的生长需要合适的氮量,氮是限制植物生长的重要因素[1]。
根癌农杆菌介导的高效水稻遗传转化影响因素研究进展韩光明;李三和;陈志军;游艾青;陈温福【摘要】对影响农杆菌介导水稻基因转化效率的各种因素进行了综述,并对转化过程中存在的问题进行了讨论,认为农杆菌菌株和载体、水稻基因型、转化受体、共培养条件、选择标记基因和转化程序等均是农杆菌介导高效水稻遗传转化必不可或缺的环节.要建立一个高效的农杆菌介导的植物转化系统,需要针对特定品种(品系)、特定组织和组培条件等诸多因素进行优化.%Influencing factors of rice genetic transformation mediated by Agrobacterium were reviewed in this paper, and problems in process of transformation were discussed. Agrobacterium tumefaciens strains and vectors, rice genotypes, transform receptors, co -culture conditions, selectable marker genes and transformation processes are considered as indispensable links of high efficiency Agrobacterium tumefaciens -mediated rice genetic transformation. Many factors shouldbe optimized in genetic transformation of rice before building up a high efficient Agrobacterium mediated transformation system for special varieties (lines) and tissue, as well as culture conditions.【期刊名称】《沈阳农业大学学报》【年(卷),期】2012(043)006【总页数】6页(P725-730)【关键词】根癌农杆菌;遗传转化;高效;影响因素;水稻【作者】韩光明;李三和;陈志军;游艾青;陈温福【作者单位】沈阳农业大学水稻研究所/农业部东北水稻生物与遗传重点实验室/北方超级粳稻育种教育部重点实验室,沈阳110161;湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉430064;湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉430064;湖北省农业科学院粮食作物研究所,武汉430064;【正文语种】中文【中图分类】S511;S503.53由于稻属种质资源的局限性及传统育种方法的不足,人们试图通过常规育种与基因工程相结合的手段来提高水稻产量和品质,自农杆菌转化水稻获得转化细胞或转基因植株以来[1-2],随着农杆菌转化技术的不断完善及应用的日益增多,农杆菌在转化禾本科作物应用方面显示出巨大的潜力[3-5]。
农杆菌介导的水稻遗传转化与植株再生王玉珍;罗景兰;徐进;刘香玲【期刊名称】《华北农学报》【年(卷),期】2005(020)002【摘要】以水稻品种ZH11和RBQ为材料,通过水稻成熟胚盾片诱导有效愈伤组织及农杆菌介导的遗传转化技术,获得水稻转基因植株,为水稻转基因体系的建立和完善奠定基础.结果表明:NMB培养基适合水稻成熟胚盾片愈伤组织诱导,MS培养基适合愈伤分化;500 mg/L谷氨酰胺或精氨酸有利于愈伤组织的形成;培养条件:愈伤组织诱导时温度25~28 ℃,暗培养,pH 5.8;分化时温度25~28 ℃,光照1 500~2 000 lx,12~14 h/d,pH 5.8;6-BA对继代过程中愈伤组织的生长有促进作用;潮霉素筛选的最佳浓度为50 mg/L.【总页数】4页(P8-11)【作者】王玉珍;罗景兰;徐进;刘香玲【作者单位】中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心,河北,石家庄,050021;中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心,河北,石家庄,050021;中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心,河北,石家庄,050021;中国科学院研究生院,北京,100039;中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心,河北,石家庄,050021;中国科学院研究生院,北京,100039【正文语种】中文【中图分类】S511.01【相关文献】1.农杆菌介导的玉米愈伤组织遗传转化影响因子和植株再生条件 [J], 张莹莹;吴连成;张赛赛;安允权;崔新建;陈彦惠2.农杆菌介导白三叶草高效遗传转化和转基因植株再生 [J], 谷俊涛;赵红梅;刘祝玲;肖凯3.果蔗'拔地拉'植株再生与农杆菌介导的遗传转化研究 [J], 李瑞美;何炎森4.水稻植株再生与农杆菌介导的遗传转化研究 [J], 向阳;赵德刚;朱冬雪;余显权5.发根农杆菌介导山定子遗传转化及发根再生植株 [J], 武姣;孔瑾;王忆;韩振海;许雪峰因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
根癌农杆菌介导的水稻遗传转化体系的研究张燕红;赵志强;吴泽新;袁杰;布哈丽且木;王奉斌【期刊名称】《新疆农业科学》【年(卷),期】2014(051)008【摘要】[目的]对新疆推广种植的水稻品种进行组织培养,探索适合新疆水稻品种的遗传转化条件,为新疆水稻的遗传改良工作奠定基础.[方法]以新疆3个水稻品种成熟胚诱导的良好胚性愈伤组织为受体,以SiPEBP为目的基因,应用农杆菌介导法对水稻进行遗传转化,同时以抗性愈伤率为依据,对影响转化的愈伤诱导率、农杆菌侵染浓度、时间和共培时间进行优化研究.[结果]在NB培养基中添加2 mg/L的2,4-D的愈伤诱导率高;相比25℃、暗培养,28℃、持续光照培养可使诱导率提高到100%,且缩短了诱导周期;在OD600值为0.3的农杆菌菌液浓度,侵染愈伤30 min,共培养2d,同时添加一张无菌滤纸,有利于提高转化效率;通过培养条件的优化,3个水稻品种的抗性愈伤率均达到40%以上.[结论]新疆水稻农杆菌转化的几个主要因素,建立了农杆菌转化体系.【总页数】6页(P1457-1462)【作者】张燕红;赵志强;吴泽新;袁杰;布哈丽且木;王奉斌【作者单位】新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐830091;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐830091;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐830091;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐830091;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐830091;新疆农业科学院核技术生物技术研究所,乌鲁木齐830091【正文语种】中文【中图分类】S511【相关文献】1.根癌农杆菌介导的高效水稻遗传转化影响因素研究进展 [J], 韩光明;李三和;陈志军;游艾青;陈温福2.根癌农杆菌介导的水稻遗传转化研究进展 [J], 王兰;田华3.根癌农杆菌介导的水稻遗传转化体系探索 [J], 尹梅;张伟媚;程在全;陈善娜4.根癌农杆菌介导的百脉根遗传转化体系的优化研究 [J], 孙艳香;杨红梅;耿云红;朱晔荣;王宁宁;王勇5.根癌农杆菌介导的水稻两用不育系培矮64S遗传转化体系的建立 [J], 肖媛;李落叶;徐孟亮;崔延春;夏新界因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
利用根瘤农杆菌制备转基因植物的方法一、背景介绍1. 转基因植物简介随着生物技术的发展,转基因植物已在农业生产中得到广泛应用。
转基因植物是指将外源基因导入植物基因组,从而赋予植物新的性状或改善原有性状的植物。
转基因植物具有抗病虫害、耐逆境、提高产量等特点,在农业生产中具有重要的应用价值。
2. 根瘤农杆菌简介根瘤农杆菌是一种土壤中常见的细菌,它具有特殊的DNA转移酶,能够将外源基因导入植物细胞核。
根瘤农杆菌被广泛应用于制备转基因植物的过程中。
二、根瘤农杆菌制备转基因植物的方法1. 选择表达载体在利用根瘤农杆菌制备转基因植物的过程中,首先需要选择合适的表达载体。
表达载体是一种携带外源基因并能够在植物细胞内表达的载体。
常用的表达载体包括质粒和农杆菌头部。
2. 构建重组质粒将外源基因插入表达载体中,构建重组质粒。
在构建重组质粒时,需要考虑外源基因的稳定性、表达水平和对植物生长发育的影响。
3. 选择合适的宿主植物选择适合的植物作为宿主植物。
在选择宿主植物时,需要考虑植物的再生能力、组织培养条件和对外源基因的接受性。
4. 根瘤农杆菌介导的遗传转化将构建好的重组质粒介导至根瘤农杆菌中,使其在植物组织中导入外源基因。
通过适当的方法,将根瘤农杆菌转化入宿主植物细胞内,实现外源基因的导入。
5. 诱导再生植株待外源基因在植物细胞内表达后,通过诱导再生植株的方式,培养出带有外源基因的植株。
6. 筛选转基因植株通过对转基因植株进行筛选,筛选出带有目标性状的植株。
筛选过程中,通常使用抗性标记基因或荧光标记基因作为筛选标志。
7. 鉴定转基因植物对转基因植物进行鉴定,确认其确实带有外源基因并且表达稳定。
鉴定方法包括PCR、Southern blot等分子生物学技术和生化分析。
三、根瘤农杆菌制备转基因植物的优势1. 高效性根瘤农杆菌介导的遗传转化具有高效性,能够快速、准确地将外源基因导入植物细胞内。
2. 多样性根瘤农杆菌制备转基因植物的方法适用于多种植物,包括大豆、玉米、水稻等重要农作物。
利用根癌农杆菌介导转化大豆成熟种子胚尖获得转基因植株刘海坤;卫志明【期刊名称】《植物生理与分子生物学学报》【年(卷),期】2004(30)6【摘要】利用根癌土壤农杆菌EHA105/pCAMBIA2301对来自大豆成熟种子的胚尖外植体进行遗传转化,并对农杆菌侵染时间长短以及乙酰丁香酮(AS)浓度等影响转化频率的条件进行了探讨.发现浸染时间以20 h为佳,乙酰丁香酮最佳浓度为200 umo1/L,并探讨了恢复培养的重要性.分别从3个大豆品种合丰35、合丰39、东农42得到了转基因植株,GUS染色及Southern杂交结果证明外源基因整合到大豆基因组中,获得转基因大豆的频率达6.4%~12.1%.【总页数】6页(P631-636)【作者】刘海坤;卫志明【作者单位】中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所,植物分子遗传国家重点实验室,中国科学院研究生院,上海,200032;中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所,植物分子遗传国家重点实验室,中国科学院研究生院,上海,200032【正文语种】中文【中图分类】Q74【相关文献】1.根癌农杆菌介导转化获得耐逆性增强的高羊茅转基因植株 [J], 吴关庭;陈锦清;胡张华;郎春秀;陈笑芸;王伏林;金卫;夏英武2.根癌农杆菌介导转化水稻成熟胚及转Metr基因植株的获得 [J], 于恒秀;刘巧泉;王玲;黄健;龚志云;汤述翥;王为成;李凝;顾铭洪3.根癌农杆菌介导转化川草二号老芒麦胚性愈伤组织 [J], 李达旭;张杰;赵建;张艺;李力;刘素君;陈飞;杨志荣4.根癌农杆菌介导转化诸葛菜获得转基因植株 [J], 周冀明;卫志明;许智宏;刘世贵;罗鹏5.农杆菌介导法转化大豆体细胞胚获得转基因植株 [J], 王晓春;王罡;王萍;季静;刘尚前因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
农杆菌介导的水稻基因转化
王世全;李平;刘熔山
【期刊名称】《西南农业学报》
【年(卷),期】1999(0)S2
【摘要】以水稻的两个亚种籼稻和粳稻作为受体, 比较了不同外值体、vir诱导物等对根癌农杆菌转化的影响, 建立了农杆菌介导的水稻高效转基因实验体系。
依据该体系,以粳籼DREW 的幼愈伤组织和籼稻D汕B的幼穗愈伤组织为受体,经农杆菌AGL1/pCAMBIA1301转化后, 获得了超过50% 的潮霉素抗性愈伤筛选率, 并获得再生植株。
【总页数】5页(P86-90)
【关键词】根癌农杆菌;水稻;基因转化;再生植株
【作者】王世全;李平;刘熔山
【作者单位】四川农业大学水稻研究所;四川农业大学
【正文语种】中文
【中图分类】S511.02;Q943.2
【相关文献】
1.利用农杆菌介导的共转化法获得含双Bt基因转基因水稻 [J], 金永梅;马瑞;于志晶;林秀峰
2.农杆菌介导bar基因转化水稻胚性愈伤组织的研究 [J], 何少海;姚盛存;丰宇凯;汪轲;李飞飞;
3.通过根癌农杆菌介导的共转化获得具有蜡质基因反义片段的转基因水稻 [J], 沈革志;殷丽青;王新其;蔡秀玲;王宗阳
4.农杆菌介导的水稻快速高效基因转化系统 [J], 高璐;薛永来
5.农杆菌介导的冷诱导基因水稻遗传转化体系的建立 [J], 崔永祯;赵红;黄格;郑爱清;李社萍;李鸣
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根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展植物真菌是一类重要的微生物,在自然界中具有重要的地位,它们可以在植物体内或外引起多种作物的病害。
为了有效防治和控制植物真菌的病害,基因转化技术已经成为一种重要的手段。
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术具有高效、简单、灵活等特点,在植物真菌遗传改良研究中得到了广泛应用。
本文将对根癌农杆菌介导的真菌遗传转化研究进展进行综述。
根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术是利用根癌农杆菌T-DNA插入真菌染色体中,实现外源基因的导入。
根癌农杆菌T-DNA在感染植物组织过程中,T-DNA的两侧的重复序列对应产生质粒的头部和尾部,T-DNA插入到植物基因组中去除了生发区和生殖区基因的调节因子,导致细胞无法分化造成根癌,自然或人工去除这些基因后,再将目的基因嵌合到T-DNA后导入目标植物组织并在细胞层或组织层产生效应。
1. 研究目的明确根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术的研究目的是为了利用该技术将外源基因导入真菌细胞中,从而使真菌获得新的性状或功能。
目前,根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术已被成功应用于多种真菌,如白僵菌、酿酒酵母、木霉等。
这些研究表明,根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术在真菌改良中具有广阔的应用前景。
2. 技术改进在根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术的研究过程中,研究人员还对该技术进行了不断改进,以提高其转化效率和稳定性。
通过对根癌农杆菌T-DNA的结构和功能进行深入研究,研究人员已成功构建了一些具有高效转化能力的根癌农杆菌株系,并利用这些株系进行了真菌遗传转化研究。
研究人员还对真菌遗传转化的各个环节进行了逐一优化,从而取得了一系列令人满意的研究成果。
3. 应用领域拓展三、面临的挑战与未来展望尽管根癌农杆菌介导的真菌遗传转化技术在植物真菌遗传改良研究中取得了一系列的进展,但在实际应用中仍然面临着一些挑战。
由于真菌的遗传特性复杂,其遗传转化技术相对于细菌和植物来说较为困难,因此对真菌的遗传机制和代谢途径的研究仍需要进一步加强。