梅毒实验室检测 课件

确保样本标记清晰，记录受检者的基本信息，如姓名、年龄 、性别等。
样本处理
将采集的血液样本进行离心，分离出血清，用于后续的实验 检测。
实验操作步骤
抗原检测
利用酶联免疫吸附试验（ELISA）或化学发光法等检测血清中的梅毒螺旋体抗原。
抗体检测
通过检测血清中的特异性抗体来判断是否感染梅毒，常用方法包括快速血浆反应素试验（RPR） 和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）。
血清学检测
总结词
血清学检测是通过检测患者血清中的特异性抗体，用于诊断和监测梅毒的方法。
详细描述
血清学检测包括非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验。非螺旋体抗原试验包括快速血浆反应素试验（RPR）等， 用于初筛和疗效观察；螺旋体抗原试验包括梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）等，用于确诊和滴度测定。血清 学检测具有较高的敏感性和特异性，适用于大多数梅毒病例的检测。
$number {01} 汇报人：可编辑
2024-01-11
梅毒实验室检验
目录
• 梅毒概述 • 梅毒实验室检验方法 • 实验室检验流程 • 实验室检验注意事项 • 实验室检验的应用与价值
01 梅毒概述
总结词
梅毒是一种由苍白（梅毒）螺旋体引起的慢性系统性性传播疾病，主要通过性接触 传播。
详细描述
鉴别诊断
与其他性传播疾病的鉴别 诊断，如淋病、尖锐湿疣 等。
在流行病学调查中的应用
流行病学调查
通过大规模的实验室检验，了解 梅毒的流行趋势和传播情况。
追踪传染源
通过检验患者的血液样本，追踪 传染源，防止疾病进一步传播。
在预防控制中的作用与价值
预防控制策略制定
基于实验室检验的数据， 制定和调整预防控制策略 。

明确检测是为了诊断、筛查还 是复查，不同的目的可能影响 检测方法和解读结果的方式。
避免潜伏干扰因素
在检测前应避免性行为、阴道 灌洗及局部用药等，以免影响 检测结果。
选择合适的检测方法
根据个人情况和检测目的，选 择合适的检测方法，如血清学 检测、核酸检测等。
遵循医护人员的指导
依照医护人员的指导正确采集 样本，确保样本质量和准确性
。
检测结果的解读
阳性结果解读
阴性结果解读
如果检测结果为阳性，需要进一步确诊和 了解病情，建议进行确证实验和滴度测定 。
如果检测结果为阴性，通常表示未感染或 治愈后低风险，但也要注意排除窗口期和 假阴性情况。
了解不同检测方法的敏锐性和特 异性
不同的检测方法有不同的敏锐性和特异性 ，了解这些有助于更准确地解读结果。
精准医疗
结合基因组学、蛋白质组学等多 组学研究，实现精准诊断和治疗 ，提高梅毒患者的治愈率和生活 质量。
梅毒检测的重要性
早期发现和治疗梅毒对于控制病情发 展和预防并发症至关重要。
梅毒检测是预防、控制和监测梅毒传 播的重要手段，有助于保护个人和社 会的健康。
梅毒检测的分类
梅毒检测分为初筛实验和确证实验两 类。
确证实验采取螺旋体抗原血清学实验 ，用于确认初筛实验阳性结果的准确 性。
初筛实验通常采取非螺旋体抗原血清 学实验，用于初步判断是否感染梅毒 。
梅毒检测课件
汇报人：
202X-12-31
目录
CONTENTS
• 梅毒检测概述 • 梅毒检测方法 • 梅毒检测的临床应用 • 梅毒检测的注意事项 • 梅毒检测的未来展望
01 梅毒检测概述
梅毒检测的定义
01
梅毒检测是指通过实验室检查方 法来检测人体内是否存在梅毒螺 旋体感染的一系列检查措施。

实验过程中产生的废弃物应按照医疗废物管理规 定进行处理，防止交叉污染。
事故处理
如发生意外事故，应立即报告实验室负责人，采 取相应的处理措施，如清洗伤口、消毒环境等。
CHAPTER 05
梅毒实验室检测结果分析与 解读
检测结果判定原则
明确检测原理
01
了解和掌握梅毒检测的基本原理和方法，包括抗原抗体反应、
梅毒的实验室检测与 技术规范课件
目录
• 概述 • 梅毒的实验室检测技术 • 梅毒实验室规范化操作流程 • 梅毒实验室技术规范与标准操作规程 • 梅毒实验室检测结果分析与解读 • 梅毒实验室检测新技术与发展趋势
CHAPTER 01
概述
定义与背景
梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢 性传染病，可累及全身器官。
基于免疫学技术的检测方法改进与创新
化学发光免疫分析
该技术结合了化学发光和免疫分 析的优点，具有高灵敏度、宽线 性范围和良好的稳定性，已广泛 应用于梅毒血清学检测。
酶联免疫吸附试验
该技术利用酶催化底物反应产生 光信号，从而实现对梅毒抗体的 定量检测，具有操作简便、成本 低等优点。
基于生物信息学在梅毒诊断中的应用前景
合理布局实验室空间，设置独立 的阳性血清和脑脊液检测区域，
以避免交叉污染。
实验器材
使用一次性实验器材，如注射器 、吸管、离心管等，避免交叉感
染。
实验人员
实验人员应接受专业培训，熟悉 梅毒检测的原理、操作流程和质
量控制要求。
标准操作规程
1 2
样本采集
采集血液样本时，应使用真空采血管，避免直接 接触血液。采集脑脊液样本时，应使用无菌穿刺 技术。
血清学筛查
血清学确证
使用酶联免疫吸附试验（ELISA）等血清学 方法筛查患者血清中的梅毒抗体。

2
抗原分为三类：
1.螺旋体表面特异性抗原:刺激机体产生特异的凝集 抗体及密螺旋体制动或溶解抗体，后者加补体可溶解 螺旋体。 2.螺旋体内类属抗原:可产生补体结合抗体，与非病原 性螺旋体有交叉反应。 3.螺旋体与宿主组织磷脂形成的复合抗原:复合抗原可 刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗体，称为反应素。 可与牛心肌或其他正常动物心肌提取的类脂质抗原起 沉淀反应(康氏试验)或补体结合反应(华氏试验)。
确诊病例：疑似病例加⑶任何一项为确诊病例。
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梅毒的诊断与分期
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梅毒的诊断与分期

4、潜伏梅毒（隐性梅毒）⑴源自有感染史，可有一期、二期、或三期梅毒史。 ⑵ 无任何梅毒性的临床症状和体征。 ⑶ 非梅毒螺旋体抗原试验2次以上阳性或梅毒螺旋体抗原试 验阳性（需排除生物学假阳性）。脑脊液检查阴性。
⑷ 病期2年内为早期潜伏梅毒，2年以上为晚期潜伏梅毒。
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梅毒的诊断与分期

5、先天梅毒（胎传梅毒）
⑴ 生母为梅毒患者。
⑵ 临床表现：①早期先天梅毒（2岁以内）：相似获得性二 期梅毒，可有梅毒性鼻炎及喉炎、淋巴结肿大、肝脾肿大、 贫血等。②晚期先天梅毒（2岁以上）：相似获得性三期 梅毒，但以间质性角膜炎、赫秦生齿、马鞍鼻、神经性耳 聋等为较常见的特征，还可出现皮肤、粘膜树胶肿及骨膜 炎等。 ⑶ 实验室检查：①早期先天梅毒皮肤及粘膜损害中可查到梅

器官大量繁殖导致流产、早产、死胎或出生活的梅毒儿。早期病变有
梅毒性鼻炎，梅毒性天疱疮和斑丘疹:晚期呈现锯状形牙、先天性耳聋 和间质性角膜炎等。

获得性梅毒:又称后天梅毒。主要经性接触传染，少数也可通过接吻、
哺乳和接触有传染性损害的病人带菌的日常用品而传染。此外，输带 病原体的新鲜血也可传染(血源性传播）。

晚期良性梅毒、神经梅毒、眼梅毒、心血管梅毒 隐性梅毒（潜伏梅毒）：无任何梅毒性的临床表现，可分为早期隐性
梅毒和晚期隐性梅毒。 胎传梅毒（先天梅毒）：早期胎传梅毒（2岁以内发病，类似于获得性
二期梅毒）、晚期胎传梅毒（2岁以后发病，类似于获得性三期梅毒）、 隐性胎传梅毒（无临床症状）
梅毒血清学试验的临床意义
合要求、在有效期内使用。 光线较好的环境 实验环境温度 ➢ 可能造成假阴性（漏检）风险。建议配备空调等恒温设施。 在规定的时间内判定结果 ➢ 反应时间不宜过短，一般不少于15分钟，不超过试剂说明要求最长时
间。 必须出现质控带才可判定结果 仔细观察检测线位置是否出现反应线 ➢ 主观因素影响：对有疑问的结果建议多人判读 符合生物安全要求 ➢ 应配备生物安全柜，建立健康监护档案。重视个人防护和污物处理。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ梅毒
梅毒是苍白密螺旋体苍白亚种（treponema pallidum，梅毒螺旋体） 感染人体所引起的一种系统性、慢性性传播疾病，可引起人体多系统 多器官的损害，产生多种临床表现，导致组织破坏、功能失常，甚至 危及生命。（WS273-2018)
感染梅毒的妊娠期妇女可发生流产、死胎、早产，以及分娩先天梅毒 患儿。
煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒剂如双氧水、酒精等 很容易将其杀灭
梅毒分期
一期梅毒：外生殖器硬下疳（潜伏期2～4周，平均3周） 腹股沟淋巴结肿大。
二期梅毒：全身多形性梅毒疹 全身浅表淋巴结可肿大
可出现梅毒性骨关节损害、眼损害、神经系统及其他内脏损害等。 三期梅毒：可有一、二期梅毒史，病期2年以上。
基本流程：
用一次性滴管或移液器滴加一定量待检标本(全血、血清或血 浆)于加样孔中；
立即在加样孔中加入一定量的缓冲液； 置室温反应 15 min～20 min。

梅毒实验室检验
谢 谢！
梅毒实验室检验
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梅毒实验室诊断检测策略新进展
梅毒实验室检验
《全国梅毒检测技术规范》目录
梅毒及其病原体 样品的采集和处理 梅毒病原体检测
梅毒血清学检测
梅毒核酸检测 实验室生物安全 梅毒血清学检测实验室质量管理
梅毒实验室检验
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梅毒血清学检测方法分类
• 梅毒螺旋体抗体试验
梅毒螺旋体试验 (treponemal tests)
报告检测 方法及阳 性结果
梅毒螺旋 体试验 （具 体方法）
阴性
报告检测方法及阴 性结果
阳性报Biblioteka 检测方法及阳 性结果梅毒实验室检验
阴性
报告检测方法及阴 性结果
梅毒实验室检验
梅毒实验室检验
以临床诊断为目的的检测策略二
梅毒螺旋体抗体试验（TPPA）
阳性
报告检测 方法及阳 性结果
非梅毒螺旋 体抗体（具 体方法）
梅毒螺旋体抗原血清学试验 特异性梅毒螺旋体抗体血清学试验
• 非梅毒螺旋体抗体试验
非梅毒螺旋体试验(nontreponemal tests)
非梅毒螺旋体抗原血清学试验 非特异性梅毒螺旋体抗梅毒体实验血室检清验 学试验
梅毒螺旋体抗体试验方法
• 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) √ • 梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） • 化学发光试验（CLIA） • 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (TP-RT) • 荧光螺旋体抗体吸收试验 FTA-ABS √ • 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) √
• 实验室评估 • 临床评估 • 现场应用评估
梅毒实验室检验
梅毒实验室检测策略选择
• 根据目的选择检测方法及检测策略。 • 可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查

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非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义
非梅毒螺旋体抗原血清试验方法简单、快速、 敏感性和特异性较好。适用于大量人群的筛查。
早期梅毒硬下疳出现1周-2周后，血清可呈阳性。 经治疗后血清滴度可下降并阴性，故可作为疗
效观察、判愈、复发或再感染的指征。
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非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点
非梅毒患者的梅毒血清反应呈阳性，此现象称为梅 毒血清反应假阳性。
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TP—ELISA试验原理
TP—ELISA试验是用重组梅毒螺旋体抗原 包被固相板条，加上梅毒血清和单克隆抗 体酶标记物，形成抗原抗体复合物与酶标 记物结合，用酶联检测仪判定试验阳性反 应。本法可用于大规模血清检测。
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梅毒免疫层析快速检测方法
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梅毒螺旋体抗原血清试验的临床意义
梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT)
荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）
化学发光免疫分析法（CLIA）
梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
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TPPA/TPHA
TPPA试验原理与TPHA试验基本相同。TPPA试 验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代TPHA试验中致 敏羊红细胞，此致敏颗粒与人血清中的抗梅毒螺旋 体抗体结合，产生可见的凝集反应，具有较高的敏 感性。明胶粒子为洋红色，在操作上也较为方便， 出结果较快。
方法：
暗视显微镜检查
镀银染色法：梅毒螺旋体具有亲银性，可
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被银溶液染色
病原学检查的临床意义
病原学方法直接镜检到梅毒螺旋体， 在临床可确诊梅毒，且具有快速、 方便、易操作的特点。

➢ 我国解放后，基本上消灭了此病，但近年来又 有新的病例发现
➢ 2009年广东省报告梅毒39112例，报告数占全 国报告总数的11.95%，位居全国第二位，较 2008年增长10.44%。
病原体为梅毒螺旋体，属于密螺旋体属，苍白 密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum)
苍白亚种 梅毒 苍白螺旋体 地方亚种 地方性梅毒
极细亚种 雅司病 密螺旋体属
品他螺旋体
品他病
5、抵抗力极弱，对温度和干燥特别敏感；对青霉 素、四环素、红霉素等抗生素敏感。
梅毒螺旋体
梅毒的传播途径
1、直接性接触 2、血液传播：输血 3、垂直传播：胎盘传播。 4、间接传播：日常用品、接吻、哺乳、
定性试验
(1)加样：吸取50微升血清（浆）放在卡片 圈中，并均匀地涂布在整个圈中。
(2)加抗原：将抗原轻轻摇匀，用9号针头 加1滴抗原。
(3)反应：将卡片置水平旋转仪旋转8分钟 [(100±5)转/分钟]，立即在亮光下观察结果
定量试验
（1）稀释液准备：在圈内加入50微升 生理盐水（根据需要确定稀释度），勿 将盐水涂开。
梅毒螺旋体抗原血清试验
（1）FTA-ABS （2）TPPA/ TPHA （3）TP-ELISA （4）发光法 （5）胶体金法
暗视野显微镜检查
标本类型：梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等 皮损的渗出液、淋巴结穿刺液
方法：暗视野显微镜下查找梅毒螺旋体。 结果：典型的梅毒螺旋体呈白色发光, 其螺旋
较密而均匀。运动方式： ①伸缩其螺旋间距离 而移动（主要方式）②蛇行式③旋转式 评价：
形态：园形或椭园形，直径约1～2cm，边界清楚，周围稍隆起，
内含大量梅毒螺旋体，传染性极强。

–性病研究实验室玻片试验（VDRL） –血清不需加热的反应素玻片试验（USR） –快速血浆反应素环状卡片试验（RPR） –甲苯胺红血清不需加热试验（TRUST）
RPR/TRUST
• 原理:
–RPR:以黑色的炭颗粒作为指示标记物 –TRUST:以红色的甲苯胺红颗粒作为指示标记物
• 检测成分：血清梅毒反应素
暗视野显微镜检查
• 制片
标本置于载玻片上，加一滴生理盐水，盖 上盖玻片，在暗室中于暗视野显微镜上油镜 观察
• 观察
先用低倍镜，再转至高倍镜 梅毒螺旋体在暗背景上呈白色发光，螺 旋整齐，运动规律（旋转、伸缩或蛇行 运动）
暗视野显微镜检查
• 结果解释—阳性
–暗视野显微镜查阳性，临床上可确诊梅
梅毒暗视野采样暗视野显微镜检查?制片标本置于载玻片上加一滴生理盐水盖上盖玻片在暗室中于暗视野显微镜上油镜观察?观察?先用低倍镜再转至高倍镜?梅毒螺旋体在暗背景上呈白色发光螺旋整齐运动规律旋转伸缩或蛇行运动暗视野显微镜检查?结果解释阳性暗视野显微镜查阳性临床上可确诊梅毒特别对一期梅毒硬下疳肿大淋巴结二期梅毒皮肤粘膜损害的诊断有重要价值尤其使用于早期梅毒血清学阴性时暗视野显微镜检查?结果解释阴性阴性结果不能排除梅毒?螺旋体数量不足?已用过抗生素或某些外用药?损害接近自然消退?损害不是梅毒?检验人员技术暗视野显微镜检查?特点该方法具有快速方便可靠的特点已被who确定为性病实验室必备项目之一口腔中含有其他密螺旋体与梅毒螺旋体不易区别暗视野显微镜查不推荐于口腔皮损材料梅毒血清学检查?血清学方法是诊断各期梅毒的主要方法包括
RPR/TRUST
• 生物学假阳性：
① 急性或慢性传染病：风疹、麻疹、水痘、疟疾、上呼吸道 感染、病毒性肝炎，活动性肺结核、麻风，肺炎球菌性肺 炎等； ②其它疾病：SLE、类风湿性关节炎、风心病、DLE、肝硬化、 慢性肾炎、系统性硬化症、自身免疫性溶血性贫血等； ③身体状况改变：麻醉剂成瘾、妊娠、年老等

排除梅毒感染
实验室梅毒检验结果分析
新生儿血清RPR和TPPA检测为阳性，不能 诊断为胎传梅毒。
实验室梅毒检验结果分析
胎传梅毒的实验诊断
具有下列实验室四个指标之一，可确诊为胎 传梅毒： 暗视野检查梅毒螺旋体阳性； 患儿非梅毒螺旋体血清抗体滴度持续上升； 患儿非梅毒螺旋体血清学定量试验结果比母 亲高2个稀释度（4倍），(低于或等于该值 并不排除胎传梅毒)； 患儿检出19（s）-IgM
仪器材料
1.试剂：梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）试 剂盒（日本富士100人份），内有： “A”溶解用液； “B”血清稀释液； “C”致敏颗粒（冻干）； “D” 非致敏颗粒（冻干）； “E”阳性质控血清（液体）。
仪器材料
“C”致敏颗粒（冻干） “D” 非致敏颗粒（冻干) 试验前30分钟按说明书规定量加“A”溶液混匀。
操作步骤
加“D” 非致敏颗粒：第3孔加D液25uL，第4
孔加“C” 致敏颗粒25uL。
混合：将反应板置震荡器震荡30秒。 反应：放湿盒内，室温孵育2小时后观察结果。
结果判定：
试验结果未致敏颗粒不出现凝集者， 才可做出结果判定。如果孔内标本非致 敏和致敏颗粒均产生凝集者，标本需做 重吸收试验。
做最后确定。
实验室梅毒检验结果分析
梅毒的诊断：必须依靠病史、临床症状、实 验检查进行综合分析。
实验室检查结果对诊断梅毒起决定性意义。
实验室梅毒检验结果分析
RPR＋、 TPPA-
RPR假阳性
RPR＋、 TPPA + 现症梅毒
RPR－、 TPPA+ 既往感染，极早期梅毒
RPR－、 TPPA-
加样：吸取50ul血清(浆)分别与各圈中盐水作 稀释度后，然后涂布整个圈内。