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学术研究doi:10.3969/j.issn.1008-4754.2014.05.007氟喹诺酮类药物属第3代喹诺酮类抗菌药，适应于敏感病原菌所致的呼吸道、胃肠道等感染，具有吸收好、组织浓度高、半衰期长、抗菌谱广等优点，已成为兽医临床的常用药。
但随着临床用量的不断增长，因不合理用药或滥用药而导致的畜产品质量安全问题时有发生，并越来越引起社会的广泛关注。
本文在运用“农业部1025号公告-14-2008”标准[1]的基础上，结合本实验室的工作实际，随机选取8名本实验室的化验员，同时并独立完成猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留检测工作，得出检测回收率，分析和判断测定结果的准确性。
1仪器与试药1.1仪器天平，感应0.01g；分析天平，感应0.00001g；Aglient1200高效液相色谱仪-配荧光检测器；振荡器；组织匀浆机；离心机；Varian BondElut C18柱（100mg/mL）固相萃取柱；0.45μm微孔滤膜。
猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留检测张漫1,李娜2,高木珍1,张宁1,刘晓辉1,王辉1（1.天津市兽药饲料监察所天津300402；2.天津市农产品质量监督检验测试中心天津300381）摘要：随机选取本实验室内的8名化验员，分别测定猪肉组织中氟喹诺酮类药物残留量，通过对结果数据的分析，得出本实验室测定结果的准确程度。
通过磷酸盐缓冲溶液提取猪肉组织中的氟喹诺酮类药物残留，经C18柱净化后，用高效液相色谱法测定含量。
环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星和沙拉沙星的平均回收率（%）分别为：95.6、86.9、89.3和95.6，批内变异系数均≤14%，批间变异系数均≤6%。
结果数据满足标准要求，证明本实验室能准确开展此项检测活动。
关键词：氟喹诺酮类药物；达氟沙星；恩诺沙星；环丙沙星；沙拉沙星；残留检测Determination of Fluoroquinolones Residues in Pork TissueZhang Man1,Li Na2,Gao Muzhen1,Zhang Ning1,Liu Xiaohui1,Wang Hui1（1.Tianjin Institute of Veterinary Drugs and Feed Control,Tianjin,300402.2.Tianjin supervision and Testing Center of Agricultural Product Quality,Tianjin,300384）Abstract:We selecting8technicians in our laboratory randomly,letting they determine fluoroquinolonesresidues in pork tissues separately.Based on the analysis of the experimental data,we concluded the accuracy ofmy determination results.The Fluoroquinolones residues are extracted with phosphate buffer solution,cleaned byC18SPE cartridge,then content was determined by HPLC.The average recoveries of four components were95.6%,86.9%,89.3%,95.6%.The variation coefficient of inter-assay were below14%,intra-assay were below6%.The results meet requirements,so we can carry out the test.Key word:fluoroquinolones;danofloxacin;enrofloxacin;ciprofloxacin;sarafloxacin;residues determination. All Rights Reserved.学术研究1.2药品与试剂达氟沙星，批号10301，含量93.5%,Dr.Ehren-storfer Gmbh公司；恩诺沙星，批号H0081206，含量99.9%,中国兽医药品监察所；环丙沙星，批号130451-201203，含量84.2%,中国食品药品检定研究所；沙拉沙星，批号20629，含量95.0%,Dr. Ehrenstorfer Gmbh公司。
喹诺酮类药物残留量的测定标准一、引言喹诺酮类药物是一类常用的抗菌药物，被广泛应用于畜禽养殖业和养殖水产业中，以预防和治疗动物植物的感染疾病。
然而，由于长期和滥用使用，喹诺酮类药物在畜禽产品中的残留量问题日益严重，给食品安全带来了一定的挑战。
为了保障消费者的健康和食品安全，加强对喹诺酮类药物残留量的测定标准显得尤为重要。
二、国内外对喹诺酮类药物残留量的测定标准1. 国际标准在国际上，对于喹诺酮类药物残留量的测定标准，主要是由国际食品安全标准委员会（Codex Alimentarius Commission）和世界卫生组织（WHO）制定并发布的《动物兽药残留限量国际标准》。
在该标准中，对不同种类的喹诺酮类药物在畜禽产品中的残留量都有详细的规定和限定，以确保产品的安全合格。
2. 国内标准在我国，对于喹诺酮类药物残留量的测定标准主要由国家食品安全标准委员会负责制定和管理。
国家食品安全标准委员会及其下属的各专业委员会，根据国家食品安全相关法律法规的要求，不断进行标准的修订和完善，以适应国内外食品安全形势的发展和变化。
三、喹诺酮类药物残留量的测定方法1. 高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前国际上常用的一种喹诺酮类药物残留量测定方法。
该方法准确、灵敏度高，并且可对多种喹诺酮类药物进行同时测定，适用于不同类型的畜禽产品。
2. 超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）超高效液相色谱-串联质谱法是一种新型的分析技术，具有分辨率高、灵敏度高和分析速度快的特点。
该方法适用于对喹诺酮类药物残留量进行快速准确的测定，是当前国内外研究和应用的热点之一。
四、个人观点和理解在我看来，喹诺酮类药物残留量的测定标准是食品安全监管中的重要环节，它不仅关乎着畜禽产品的质量和安全，更关系着广大消费者的身体健康和生命安全。
当前，我国在食品安全监管方面已取得了一定的成绩，但也面临着一些挑战和问题，如标准的实施和监管不到位等。
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测黄 立（昆明市食品药品检验所，云南昆明 650032）摘 要：建立了猪肉、牛肉、鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类共15种兽药残留量的快速检测方法。
样品经过Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液-2.5%乙酸乙腈溶液提取，经氯化钠、无水硫酸钠除水盐析后取乙腈相用高含碳量的C18吸附粉吸附净化，再用0.1%甲酸水乙腈（75+25）定容后上机检测。
结果显示，本方法测定三类混合药物的回收率在63.9%～104.0%，RSD在1.1%～12.2%，检测快速、灵敏度高、重复性好，定性定量准确可靠，适用于猪肉、牛肉及鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类药物残留的快速检测。
关键词：液相色谱-串联质谱法；磺胺；四环素；喹诺酮Rapid Detection of Multiple Types of Veterinary Drug Residues in Livestock and Poultry MeatHUANG Li(Kunming Institute for Food and Drug Control, Kunming 650032, China) Abstract: A rapid method was established for the determination of 15 veterinary drug residues of sulfonamides, tetracyclines and quinolones in pork, beef and chicken. The samples were extracted by Na2EDTA-Mcllvaine buffer-2.5% acetic acid acetonitrile solution, and the acetonitrile phase was purified by adsorption with high carbon content C18 adsorbent powder after dehydration salting by sodium chloride and anhydrous sodium sulfate, and then fixed with 0.1% formic acid aqueous acetonitrile (75+25) and detected on the machine. The results showed that the method determines the recovery of the three types of mixed were 63.9%～104.0%, RSD were 1.1%～12.2%, rapid detection, high sensitivity, good repeatability, accurate and reliable qualitative and quantitative, suitable for the rapid detection of sulfonamides, tetracyclines, quinolones drug residues in pork, beef and chicken.Keywords: liquid chromatography-tandem mass spectrometry; sulfonamide; tetracycline; quinolone合理使用兽药可以提高畜禽养殖效率，节省成本，缩短出栏周期，进而增加收益，但越来越多的人为追求经济效益滥用药物，导致了一些兽药以残留的形式流入人体，从而对身体健康造成威胁[1]。
固相萃取-UPLC-MS MS法测定猪肉中11种喹诺酮类兽药残留作者：何瑞雪来源：《现代食品》 2019年第1期在畜牧业生产、禽类饲养以及水产品养殖中,经常会使用大量兽药,主要有喹诺酮类、青霉素类等。
这些药物违规会通过食物链在人体内蓄积,从而在人体内产生耐药性和抗药性,严重的还会致突变、致畸和致癌[1]。
喹诺酮类药物具有广谱抗菌作用,大量用于人和的动物医疗以及饲料添加剂,以提高饲料利用率和促进动物生长[2-3]。
从1962 年萘啶酸问世以来,已经合成了数以千计的喹诺酮类化合物[4]。
近年来,喹诺酮类药物已在水、土壤和畜禽中均有不同程度的检出,因此要加强对此类药物残留的监控。
目前,用于喹诺酮类药物残留的检测方法有微生物法[5]、酶联免疫分析法[6]、高效液相色谱法[7]、高效液相色谱/ 质谱联用法[8]、毛细管电泳法[9-10] 和荧光分光光度法[11]等。
其中,高效液相色谱/ 质谱联用法定性更准确,灵敏度更高,国家标准检测方法中也其为主,但国标方法样品前处理复杂,耗时长,且干扰物净化效率低,因此对样品前处理方法的简化及提升净化效率,可大大缩短检验时长,提高检测的准确性。
1 材料与方法1.1 材料与试剂甲醇、乙腈、甲酸均为色谱纯,购自默克公司;喹诺酮类兽药标准品,包括诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、培氟沙星、洛美沙星、丹诺沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、双氟沙星,购自上海安谱实验科技股份有限公司和农业部环境保护科研监测所。
1.2 仪器与设备XEVO-TQ-S Micro 三重四级杆质谱仪( 配有AcquityUPLC 超高效液相色谱仪及电喷雾离子源),Oasis Prime HLB 200mg/6mL 固相萃取柱(美国Waters公司);SIGMA 高速冷冻离心机(美国SIGMA);Milli Q 超纯水系统(美国Millipore 公司);IKA 刀式研磨仪(美国IKA);IKA 旋转蒸发仪(美国IKA)。
I ustry科技文苑行业肉制品中喹诺酮残留检测□ 张宏博 王洋 王燕 王岩 靳志敏 范鑫 郑玉山（通讯作者） 内蒙古自治区食品检验检测中心摘 要：喹诺酮类药物是具有4-喹诺酮基本结构并且由人工合成的抗生素类药物，是一种人畜共用药，食用含有喹诺酮残留的食品会对人体造成危害。
本实验参照G B/T 21312-2007，采用液相色谱-质谱/质谱法对羊肉中6种喹诺酮类药物的残留量进行检测。
检测结果显示，环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、洛美沙星检出限分别为0.06μg/kg、0.02μg/kg、0.07μg/kg、0.05μg/kg、0.06μg/kg、0.05μg/kg；回收率为84.1%~102.1%，各物质的精密度依次是10.5%、7.4%、8.5%、6.8%、6.9%、7.2%；空白对照值为零；本次实验所采集的12种羊肉样品均未检出环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、洛美沙星这6种抗生素类药物，符合农业部标准。
关键词：液相色谱-质谱/质谱法 喹诺酮类药物 氧氟沙星 环丙沙星 诺氟沙星1 引言抗生素类兽药长期无节制的使用会导致动物免疫力下降，同时降低了疫苗的作用，进而使细菌疾病成为家禽的重点传染疾病[1]。
喹诺酮是一类人畜通用药，因其具有组织浓度高、药物保留性好、抵抗多种细菌、杀菌作用强、抗菌时间长等特点而被广泛应用于水产和畜禽等疾病的治疗[7]。
尽管喹诺酮药物有诸多优良品质，但仍需重视其毒副作用，如造成肝损害、引发周围神经病变时间加快，甚至可能产生不可逆的转变——导致肌无力症状的患者病情加重等[8]。
喹诺酮是羊肉检测中最为常见的一种兽药残留，其严重影响羊肉制品的安全及羊养殖业的发5 建议本调查仅检测了食品原料中硼的本底值水平，不能反映加工食品中的硼含量。
此外，本次调查的样品多采自市售产品，对生产过程中是否施用硼肥等信息不明，因此未考虑硼肥施用对结果的影响。
在监管过程中，若产品的硼检测值高于该值则可以考虑存在人为添加的可能，但监管应考虑地域差异、加工过程中硼的减损或带入、原料与加工食品间干湿重的转换等因素，制订合理的监管值。
依据 GB /T 22388-2008
1. 前处理（以猪肉为例）
预处理：
准确称取2g 猪肉样品，加入10mL 磷酸盐提取液（pH=7），水平振荡5min，10000g 离心 5min，吸取上层液，重复提取一次，合并上层液，上层液中加入10mL 正己烷，涡旋1min， 10000g 离心5min，吸取下层液体，待净化。
净化：
固相萃取小柱：
InertSep Pharma 3ml/60mg 货号5010-27101（品牌：岛津技迩）
活化、平衡：3ml 甲醇、3mL 磷酸盐提取液
上样：取预处理的5ml 下层液体过柱
淋洗：3ml 水
抽干
洗脱：2mL 流动相 0.05M 磷酸三乙胺：乙腈=18：82
过滤上机
2. 色谱分析
色谱柱：C18 , 250×4.6mm（i.d.）, 5μm
流动相：A:0.05M 磷酸三乙胺+B:乙腈=18+82，等度洗脱
柱温：35℃
检测波长：Ex:280nm; Em450nm
3. 基质加标回收率结果
三次平行实验结果的回收率（基质加标浓度均为0.05mg/kg）：
4. 结论
在此实验条件下，将固相萃取小柱InertSep Pharma 3ml/60mg 应用于猪肉中氟喹诺酮类残留前处理，基质去除效果好，回收率完全满足要求。
氟喹诺酮类药物残留限量及检测技术研究进展张运尚，杜加茹，王伟东，樊剑鸣*（郑州大学公共卫生学院，河南郑州 450001）摘 要：氟喹诺酮类药物（FQS）是第3代喹诺酮类抗生素，具有良好的生物利用度和耐受性，不仅对革兰氏阳性菌和阴性菌有杀菌作用，还具有抗真菌和抗病毒活性，因此被广泛应用于治疗畜牧动物养殖过程中的细菌性感染。
但当人类过多食用含有FQS残留的食品后，将会损害身体多个系统并引起细菌耐药性，因此建立灵敏度高、简便的检测方法十分必要。
本文综述了FQS残留的检测标准和常用的检测方法及优缺点，酶联免疫分析法（ELISA）具有灵敏度高、操作简便等优势，预测ELISA法在今后FQS残留检测中发挥重要作用。
关键词：氟喹诺酮类药物；药物残留限量；残留检测技术；酶联免疫分析法中图分类号：S816.7 文献标识码：A DOI编号：10.19556/j.0258-7033.20200516-05氟喹诺酮类药物（Fluoroquinolones，FQS）是第3代喹诺酮药物，其化学结构是在喹啉环的6位上加入了氟原子，7位上连有哌嗪基的一类衍生物，此特点使得原本亲脂性的吡酮类药物增加了适度的亲水性，同时降低了蛋白结合率，提高生物利用度[1-2]。
该类药物通过抑制细菌的DNA和RNA合成从而达到抑菌作用[3]。
相比第1代及第2代喹诺酮药物，FQS的抗菌活性明显增加，抗菌谱显著扩大，对革兰氏阳性菌（金葡球菌、链球菌、肺炎球菌）和革兰氏阴性菌（肠杆菌科、流感杆菌和奈瑟菌属）[4]以及一些衣原体、支原体和螺旋体均有抗菌作用[5]，因此被广泛应用在临床上治疗细菌感染性疾病。
FQS代表药物主要包括恩诺沙星（Enrofloxacin，ENR）、环丙沙星（Ciprofloxacin，CIP）、诺氟沙星（Norfloxacin，NOR）、达氟沙星（Danofloxacin，DAN）、氟罗沙星（Flero xacin，FLE）、沙拉沙星（Saraflaxacin，SFX）、依诺沙星（Enoxacin，EX）等。
第14卷第02期 南方农业2020年1月Vol.14 No.02 South China Agriculture Jan. 2020氟喹诺酮是一类化学合成抗菌药物，1962年合成第一代喹诺酮类药物，只对大肠杆菌、痢疾杆菌、克雷白杆菌等少数菌有效，吸收效果差，副作用多，仅用于治疗尿路感染。
1974年合成第二代喹诺酮类药物，对革兰氏阴性杆菌致病菌的作用明显，抗菌活性也大大提高，口服少量吸收，不良反应也明显减少，用于治疗尿路和肠道感染等疾病。
1979年合成第三代喹诺酮类药，其母体都含有喹诺酮结构，母核6位C 上被氟取代，氟喹诺酮因此而得名[1]。
第三代药物结构发生了改变，增加了脂溶性，增强了对组织细胞的穿透力，因而吸收好，大大增加了该类药物的抗菌谱和杀菌效果。
随着构效关系的研究进一步展开，新的氟喹诺酮类药物如雨后春笋，成为一个十分活跃的研究领域[2]。
自1979年合成第三代喹诺酮（即诺氟沙星）以来，经过40年的发展，氟喹诺酮已成为在临床上应用广泛的广谱、高效、低毒抗菌药，常用于细菌性感染疾病，如呼吸道感染、消化道感染、泌尿系统感染等疾病的治疗[3]。
喹诺酮类抗生素也广泛用于治疗牲畜疾病。
喹诺酮类药物具有抗菌谱广、抗菌活性强、与其 他抗菌药物无交叉耐药性以及毒副作用小等特点，被广泛应用于水产、畜牧等养殖业中，包括在牛、鸡、鸭、猪等的养殖中用于疾病防治[4]。
恩诺沙星是喹诺酮类抗生素的一种，对于预防和治疗畜禽的细菌性感染及支原体病有良好的效果，在猪病防治中，对包括大肠杆菌、克雷伯氏菌、肠杆菌属、弯曲杆菌属、绿脓杆菌、沙门氏菌属、气单胞菌属、嗜血杆菌属、耶尔森菌属、沙雷氏菌属、弧菌属、变形杆菌属等在内的革兰氏阴性杆菌和球菌，对布鲁氏菌属、巴斯德氏菌属、丹毒丝菌、博德特氏菌、葡萄球菌、支原体属和衣原体也有效[5-7]。
近年来，氟喹诺酮类药物被养殖户广泛使用，作为饲料添加剂来预防动物疾病的发生，随之新的问题出现了，过度使用该类药物，致使动物体内该药物的残留量积累的越来越多。
检验项目及其意义1、挥发性盐基氮指动物性食品由于酶和细菌的作用，在腐败过程中，使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。
挥发性盐基氮是动物性食品腐败变质的指示性指标。
挥发性盐基氮含量越高，表明氨基酸破坏的越多，营养价值等受到的影响也就越大。
挥发性盐基氮超标说明生产中可能使用了不新鲜的原料；也可能是肉制品在腌制过程中卫生条件控制不当，受细菌污染，导致超标。
2、喹诺酮类药物喹诺酮类药物是人工合成的抗菌药，主要包括恩诺沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星、氟罗沙星等，属于广谱抑菌剂，在预防和治疗畜禽的细菌性感染及支原体病方面有良好效果。
喹诺酮类药物若在人体内残留蓄积，可能引起人体的耐药性，长期摄入含有喹诺酮类药物的动物源食品，可引起轻度胃肠道刺激或不适，头痛、头晕、睡眠不良等，大剂量或长期摄入可能引起肝损害。
鉴于长期食用可能导致的健康危害，农业部规定了“该类药物在动物肌肉中的最大残留限量为≤100μg/kg（以恩诺沙星+环丙沙星之和计）”。
3、达氟沙星又名单诺沙星。
本品是动物专用药。
内服、肌注和皮下注射的吸收是较迅速和完全。
本品主要通过肾脏排泄。
应用：本品为广谱杀菌药。
对巴氏杆菌、支原体、大肠杆菌均有较强的抗菌活性。
4、硝基呋喃类药物硝基呋喃类药物（呋喃它酮、呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃西林）是一种广谱抗生素，对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌、真菌和原虫等病原体均有杀灭作用。
曾广泛应用于畜禽及水产养殖业，以治疗由大肠杆菌或沙门氏菌所引起的肠炎、疥疮、赤鳍病、溃疡病等。
由于硝基呋喃类药物及其代谢物对人体有致癌、致畸胎副作用，农业部规定该类药物为“禁止使用的药物，在动物性食品中不得检出”。
5、磺胺类药物磺胺类药物是合成的广谱抑菌药，对大多数革兰氏阳性和许多革兰氏阴性细菌有效，对于治疗禽类球虫病和鸡白细胞虫病疗效较好。
鉴于长期食用可能导致的健康危害，农业部规定了“该类药物在动物肌肉中的最大残留限量为≤100μg/kg”。
动物源性食品中喹诺酮类物质快速检测胶体金免疫层析法（KJ202206）附件6动物源性食品中喹诺酮类物质的快速检测胶体金免疫层析法(KJ202206)1 范围本方法规定了动物源性食品中喹诺酮类物质的胶体金免疫层析快速检测方法。
本方法适用于生乳、巴氏杀菌乳、灭菌乳、猪肉、猪肝、猪肾中洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星、诺氟沙星、达氟沙星、二氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氟甲喹、噁喹酸残留的快速测定。
2 原理本方法采用竞争抑制免疫层析原理。
样品中的喹诺酮类物质与胶体金标记的特异性抗体结合，抑制了抗体和检测线（T线）上抗原的结合，从而导致检测线颜色深浅的变化，通过检测线与控制线（C线）颜色深浅比较，对样品中喹诺酮类物质进行定性判定。
3 试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。
3.1 试剂3.1.1 乙腈。
3.1.2 甲酸。
3.1.3 分散固相萃取剂I：分别称取硫酸镁18g、醋酸钠4.5g放于研钵中研碎。
3.1.4 分散固相萃取剂II：分别称取硫酸镁27g、N-丙基乙二胺（PSA）4.5g放于研钵中研碎。
3.1.5 甲酸-乙腈溶液：98mL乙腈中加入2mL甲酸，混匀。
3.1.6 甲醇。
3.1.7 稀释液：脱脂奶粉︰水（1︰10）。
3.2 参考物质喹诺酮类参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量见表1，纯度≥99%。
表1喹诺酮类参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子量序号中文名称英文名称CAS登录号分子式相对分子量1洛美沙星Lomefloxacin98079-51-7C17H19F2N3O3351.352培氟沙星Pefloxacin70458-92-3C17H20FN3O3333.363氧氟沙星Ofloxacin82419-36-1C18H20FN3O4361.374诺氟沙星Norfloxacin70458-96-7C16H18FN3O3319.335达氟沙星Danofloxacin112398-08-0C19H20FN3O3357.386二氟沙星Difloxacin5522-39-4C28H33N3F2449.587恩诺沙星Enrofloxacin93106-60-6C19H22FN3O3359.168环丙沙星Ciprofloxacin85721-33-1C17H18FN3O3331.139氟甲喹Flumequine42835-25-6C14H12FNO3261.2510噁喹酸OxolinicAcid14698-29-4C13H11NO5261.23注：或等同可溯源物质。
猪肉兽药残留检测技术防控措施随着我国经济水平的不断提升，人们的生活质量也有了很大的提高，猪肉作为我国居民的主要食用肉类，其安全性受到广大人民群众的重视，尤其是猪肉中兽药残留问题，成为了人们日常注重的重点问题。
为了提高猪肉的安全性，必须要做好猪肉中兽药残留的检测工作，并依据检测结果加强对容易出现问题的环节的防控工作，从而保障市场上猪肉的安全性，让人们吃上安全、放心的猪肉。
一、猪肉中兽药残留检测技术介绍在生猪的养殖过程中，兽药是必不可少的一种物质。
兽药能够有效提髙生猪的存活率，但是因为很多养殖户并没有对兽药的危害性有正确认识，所以在生猪养殖过程中大量使用兽药，最终导致猪肉中兽药残留严重，近年来猪肉中兽药残留严重超标的问题时有发生。
人们若经常食用这种兽药残留超标的肉类，会对身体健康有很大的负面影响，严重时甚至致畸、致癌。
不过，随着我国技术的进步，畜牧养殖行业也在不断朝着集约化、规模化、自动化方向发展，肉制品中药物残留问题也在慢慢减少。
猪肉中最常见的残留兽药有磺胺类、四环素类、佛喳诺酮类以及各种抗生素类药物。
当前，我国已经将兽药残留检测作为猪肉流通前的重要一环，通过专业的检测不但能够及时发现猪肉中存在的问题，还能最大程度保证猪肉的安全性。
下面，作者简单介绍一下猪肉中兽药残留的相关检测技术。
1・免疫分析法。
我国用于检测猪肉中兽药残留的技术有很多，大多都是对猪肉中一些元素成分的含量进行分析，免疫分析法就是我国最常见的猪肉兽药残留检测方法。
免疫分析法主要是利用了抗原和抗体，能够进行特异性结合和可逆性反应的特点而进行兽药残留检测。
这种检测方法的优点在于能够快速筛选，同时还有很高的选择性，且操作简单。
常见的免疫分析法主要包括酶免疫测定法、荧光免疫测定法、胶体金免疫测定法。
其中酶免疫测定法是使用范围相对较广、操作步骤也比较简单的测定方法，这种方法的具体原理是用特定的酶标记猪肉兽药残留中的一些元素以及同位素。
酶联免疫吸附法就是其中被大力推广的检测方法，它能够很好地测定猪肾脏中残留的镇静剂、氯丙嗪、B阻断剂卡拉洛尔等的含量，是我国当前猪肉兽药检测的主要方法。
动物源性食品中喹诺酮类药物测定的标准操作程序（LC/MS/MS法）1.1 范围本操作程序规定了肉与肉制品、蛋与蛋制品、乳与乳制品及蜂产品中喹诺酮药物残留量检测的高效液相色谱一质谱/质谱检测方法。
本操作程序适用于猪肉、猪肝、猪肾、牛肉、羊肉、牛奶、鸡蛋、蜂蜜等食品中恩诺沙星、沙拉沙星、氟甲喹、双氟沙星、噁喹酸、达氟沙星6种喹诺酮类兽药残留量的液相色谱一质谱/质谱法测定和确证。
表1 喹诺酮药物检出限和定量限1.2原理动物肌肉组织、肝脏、肾脏、牛奶、鸡蛋用0.1 mol/L EDTA-Mcllvaine缓冲液(pH4.0) 提取样品中的喹诺酮类抗生素，经过滤和离心后，上清液经HLB固相萃取柱净化，高效液相色谱-质谱/质谱测定，同位素内标法定量。
蜂产品用氢氧化钠溶解后，离子化的喹诺酮类抗生素用HLB固相萃取柱净化，高效液相色谱-质谱/质谱测定，同位素内标法定量。
1.3试剂除特殊注明外，本法所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。
1.3.1柠檬酸：分析纯。
1.3.2磷酸氢二钠：分析纯。
1.3.3甲醇：色谱纯。
1.3.4乙腈：色谱纯。
1.3.5甲醇一乙腈溶液：40+60（体积比）。
1.3.6 甲酸(99%)。
1.3.7氢氧化钠：分析纯。
1.3.8乙二胺四乙酸二钠：分析纯。
1.3.9 氢氧化钠溶液（0.1mol/L）取4g氢氧化钠，溶解于1L水中。
1.3.10磷酸氢二钠溶液：0.2 mol/L。
称取71.63 g磷酸氢二钠，用水溶解，定容至1000 mL。
1.3.11柠檬酸溶液：0.1mol/L。
称取21.01g柠檬酸，用水溶解，定容至1000 mL。
1.3.12 Mcllvaine缓冲溶液：将1000mL0.1mol/L柠檬酸溶液(4.3.10))与625 mL0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液4.3.9)混合，必要时用盐酸或氢氧化钠调节pH至4.0士0.05。
1.3.13 EDTA-Mcllvaine缓冲溶液：0.1mol/L。
动物性食品中氟喹诺酮类药物残留检测高效液相色谱法1 范围本标准适用于猪的肌肉、脂肪、肝脏和肾脏，鸡的肌肉、肝脏和肾脏组织中达氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星药物残留量检测。
2测定方法方法提要或原理用磷酸盐缓冲溶液提取试料中的药物，C18柱净化，流动相洗脱。
以磷酸—乙腈为流动相。
用高效液相色谱—荧光检测法测定，外标法定量。
试剂和材料5mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠饱和液14mL，加水稀释至50mL。
0.03mol/L氢氧化钠溶液：取5mol/L氢氧化钠溶液0.6 mL，加水稀释至100 mL。
0.05mol/L磷酸—三乙胺溶液：取浓磷酸3.4 mL，用水稀释至1000 mL。
用三乙胺调节pH值至2.4（以配4L溶液为例，取浓磷酸3.4 mL×4=13.6 mL，加水使成4000 mL，用三乙胺调pH值至2.4）。
磷酸盐缓冲溶液（用于肌肉、脂肪组织）：取磷酸二氢钾6.8g,加水使溶解并稀释至500 mL，用5mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0。
磷酸盐溶液（用于肝脏、肾脏组织）：取磷酸二氢钾6.8g,加水使溶解并稀释至500 mL，pH值为4.0~5.0。
标准储备液：分别取达氟沙星对照品约10mg,恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星对照品各约50mg,精密称定，用0.03mol/L氢氧化钠溶液溶解并稀释成浓度为0.2mg/mL(达氟沙星)和1 mg/mL（恩诺沙星、环丙沙星和沙拉沙星）的标准工作液。
置2℃~8℃冰箱中保存，有效期为1周。
对照品溶液稀释步骤（1）对照品储备液浓度：1 mg/mL（2）最大残留限量（100μg/kg→100ng/g）上机浓度为0.05μg/kg：1 mg/mL×1mL50 →20μg/mL20μg/mL ×0.5mL200→0.05μg/kg（此浓度对应最大残留限量浓度，因为20mL提取液只有5mL上柱）（3）阳性添加（100μg/kg→100ng/g 样品/2g→200ng/2g）20μg/mL×0.5mL10mL →1μg/mL1μg/mL×0.2mL →200ng注：甲磺酸达氟沙星（C19H20FN3O3▪CH4O3S）：C19H20FN3O3= 357.39 =78.81%C19H20FN3O3▪CH4O3S 453.49盐酸环丙沙星（C17H18FN3O3▪Hcl）：C17H18FN3O3= 331.35 = 90.09%C17H18FN3O3▪Hcl 367.81测定步骤试料的制备绞碎后的供试样品、空白样品、空白添加试料样品提取取（2±0.05g）试料，置50mL离心管中，加磷酸盐缓冲溶液10.0mL，10000r/min 匀浆1min。
养殖与饲料2018年第1期的血浆淀粉酶活性最高，其次为七彩山鸡，黑凤鸡最低。
张志等[6]认为淀粉酶活性的高低与机体的化学反应速率有关，而杨华等[7]认为淀粉酶的活性具有较高的遗传力，由此表明珍珠鸡属于代谢水平较高的一种禽类，也是其特有的生物学属性。
而碱性磷酸酶是一种底物特异性不高的酶类，广泛存在于血液和细胞中，其含量大小与成骨细胞的活跃度[6，8]和生产性能与蛋品质有关[9]。
黑凤鸡的碱性磷酸酶活性显著高于野鸡和珍珠鸡的活性（＜0.01），表明本次选定的黑凤鸡处于一个生长快、产蛋旺盛的时期，酯酶作为一种水解低级脂肪酸酯的脂肪酶，在3种鸡血浆中的活性差异不显著（＞0.05），说明酯酶活性没有品种间差异。
参考文献[1]李立，朱开明.野生环颈难与美国七彩山鸡杂交繁殖技术研究[J].湖南林业科技，1996，23（4）：39-42.[2]唐继高，吴松成，黄波.七彩山鸡常规营养成分及氨基酸含量测定与分析[J].黑龙江畜牧兽医，2014（1）：60-62.[3]陈铁桥，欧兰香，谭运华，等.七彩山鸡肌肉及肝脏中12种矿物元素测定分析[J].经济动物学报，2004，8（1）：36-38.[4]陈玉琴，俞诗源.红腹锦鸡、石鸡和雉鸡的部分血液生理生化指标[J].动物学报，2007，53（4）：674-681.[5]崔福生.医学生化检验手册[M].天津：天津科学技术出版社，1982：314-315.[6]张志，谢塔，王润莲，等.隐性白鸡快慢羽系和地方鸡种部分血液酶活力的测定比较[C]//第十一次全国家禽学术讨论会论文集，2003：174-177.[7]杨华，傅衍.猪血液生化指标与生产性能的关系[J].国外畜牧科技，2001，28（1）：34-37.[8]陈彬，陆曼姝，俞渭江.家鸡种内血清同工酶活性的研究[J].山地农业生物学报，1992，11（2）：95-100.[9]王雪燕.蓝孔雀血液生理生化指标及蛋品质特性研究[D].兰州：甘肃农业大学，2009.摘要采集屠宰场65头生猪里脊肉，采用高效液相色谱法进行抗生素检测，测定猪肉中沙星类抗生素残留量。
依据 GB /T 22388-2008
1. 前处理（以猪肉为例）
预处理：
准确称取2g 猪肉样品，加入10mL 磷酸盐提取液（pH=7），水平振荡5min，10000g 离心 5min，吸取上层液，重复提取一次，合并上层液，上层液中加入10mL 正己烷，涡旋1min， 10000g 离心5min，吸取下层液体，待净化。
净化：
固相萃取小柱：
InertSep Pharma 3ml/60mg 货号5010-27101（品牌：岛津技迩）
活化、平衡：3ml 甲醇、3mL 磷酸盐提取液
上样：取预处理的5ml 下层液体过柱
淋洗：3ml 水
抽干
洗脱：2mL 流动相 0.05M 磷酸三乙胺：乙腈=18：82
过滤上机
2. 色谱分析
色谱柱：C18 , 250×4.6mm（i.d.）, 5μm
流动相：A:0.05M 磷酸三乙胺+B:乙腈=18+82，等度洗脱
柱温：35℃
检测波长：Ex:280nm; Em450nm
3. 基质加标回收率结果
三次平行实验结果的回收率（基质加标浓度均为0.05mg/kg）：
4. 结论
在此实验条件下，将固相萃取小柱InertSep Pharma 3ml/60mg 应用于猪肉中氟喹诺酮类残留前处理，基质去除效果好，回收率完全满足要求。
