饲料中基本营养成分测定标准

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实际上,100多年来世界各国一直沿用的是由德国科学家Hennberg和Stohman所创立的Weende饲料分析体系。该分析体系是把饲料分成6种组分来分析测定:①水分(干物质);

②粗灰分(矿物质);②粗蛋白(N x 6.25);④粗脂肪(乙醚浸出物)⑤粗纤维;⑧无氮浸出物(NFE,计算值)。这种饲料分析体系显然是饲料的概略分析(Feed Proximate Analysis) ,但也是最基本的饲料成分分析。按照GB10648-1999 饲料标签的规定:蛋白质饲料、配合饲料、浓缩饲料和复合顶混料等饲料都要把水分、粗蛋白、粗纤维和粗灰分做为保证值项目进行标注。

饲料组成成分的分析

对饲料组成成分的分析是研究营养物质的利用,评价饲料营养价值最基础的工作。

饲料中最重要的营养物质有碳水化合物、蛋白质、脂类、矿物质和维生素。概略养分分析法把饲料组成成分分为水分、粗灰分、粗蛋白质(CP)、粗脂肪或乙醚浸出物(EE)、粗纤维(CF)和无氮浸出物(NEF)。

(一)水分

饲料中的水分有两种存在形式,游离水和结合水。饲料分析中经常测定总水分,采用干燥失重的方法。对于不同饲料,干燥的方法应考虑其理化性质而有所区别。尽管饲料中的水分营养价值不大,但是测定饲料中的水分可得出饲料干物质的含量,这与饲料的能量含量密切相关,因此水分的测定意义重大。

本方法依据GB6435—86 饲料中水分的测定,它适用于配合饲料和单一饲料水分含量的测定,但不适用于做饲料的奶制品、动植物油中的水分测定。

1.方法原理

试样在(105±2)℃烘箱内和常压条件下烘干至恒重的质量为水分。

2.仪器设备

(1)植物样品粉碎机或研钵;

(2)试验筛:孔径0.42mm(40目)

(3)分析天平:分度值0.0001g;

(4)称量皿:玻璃或铝质,直径40mm、高25mm

(5)电热式恒温烘箱:控制±2℃;

(6)干燥器:变色硅胶干燥剂

3.样品的制备

(1)选取有代表性的原始样品不少于1000g。按四分法缩分到250g,风干或以60℃烘干,用植物样品粉碎机碾细,过0.42mm试验筛(注意一定要将样品全部过筛,并混合均匀)。封入样品袋,放在阴凉处保存,以备测定。

(2)如果饲料样品是含多汁的鲜样,如青贮、牧草等,无法直接粉碎,应进行预干燥处理:称取200-300g(准确至0.01g)鲜样,在105℃烘箱中烘杀15min,立即把温度降至65℃,烘6-8h,取出,在空气中冷却4h,称量。失重即初水分w0(H20)。将得到的烘干样,粉碎,过筛,装袋,以备测定。

4测定步骤

(1)将称量皿洗净,在(105±2) ℃烘箱内烘干1—2h,取出在干燥器内冷却30min,用分析天平称量。再放入烘箱烘干30min,冷却,称量,直至两次称量之差小于0.0005g为恒重。

(2)用分析天平称取2-5g样品,均匀平摊在已恒重的称量皿中,厚度小于0.5cm。不盖称量皿盖,在(105±2) ℃恒温烘箱内烘干2—4h。取出,盖上称量皿盖,放在干燥器内冷却30min,称量,同样再烘1h,冷却、称量。直至两次称量之差小于0.002g为恒重。

5.结果计算

(1)饲料中水分含量按公式(3—1)计算

式中:W(H2O)—饲料中水分的质量分数,%;

m1—105℃烘干前试样和称量皿总质量,

m2一105℃烘干后试样和称量皿总质量,

m0—105℃烘干的称量皿质量,g。

(2)每个试样应取两个平行样测定,以算术平均值为测定结果。两个平行样的相对误差应小于0.2%。

(二)粗灰分

粗灰分是饲料中有机物被全部氧化除去后剩余的残渣,主要为矿物质氧化物和盐类等无机物质。粗灰分的测定方法为高温灼烧法,即将饲料样品放入别550℃±5℃的高温电炉中灼烧,至灰白色,称残渣的重量。测定饲料中的粗灰分含量,对评定饲料矿物质营养价值意义不大。

(三)粗蛋白质

饲料中的一切合氮物质的总称为粗蛋白质,用饲料中的含氮量乘以6.25进行计算。粗蛋白质包括真蛋白质(TP)和非蛋白质性含氮化合物。饲料总氮中的非蛋白氮(NPN)部分对水产动物几乎无用,评定饲料蛋白质营养价值有时需要对饲料中真蛋白质进行分析,如虾粉中含有大量的几丁质氮。

本方法依据GB/T6432—94饲料中粗蛋白测定方法,适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料中粗蛋白的测定。

1原理

凯氏法测定试样蛋白质含量,是在催化剂作用下用浓硫酸将含氮化合物转化为硫酸铵,将生成的硫酸铵在强碱性条件下馏出氨,经硼酸溶液吸收,再用标准酸溶液滴定,将测得的氮含量乘以换算系数6.25,即粗蛋白的含量。

2仪器设备

(1)植物样品粉碎机或研钵。

(2)试验筛:孔径0,42mm(40 目)。

(3)分析天平:分度值0.0001g

(4)专用消煮炉或可调电炉。

(5)酸式滴定管:10mL或25mL。

(6)专用消化管或250mL凯氏瓶。

(7)凯氏蒸馏装置:常量直接蒸馏式或半微量水蒸汽蒸馏也可采用专用定氮仪。

(8)三角烧瓶:150mL或250mL。

3试剂

(1)硫酸(AR,ρ=1.84)。

(2)混合催化剂:0.4硫酸铜(CuSO4·5H2O,AR )和6g硫酸钾(K2SO4,AR),磨细混均。

(3)40%氢氧化钠溶液:称取40g氢氧化钠(NaOH,CP)溶于1mL蒸馏水中。

(4)2%硼酸溶液:称取20g硼酸(H3BO3,AR)1000mL蒸馏水中。

(5)混合指示剂:将0.1%甲基红乙醇溶液与0.5%溴甲酚绿乙醇溶液,按1:1等体积混合。

(6)0.1000mol/L盐酸(HCl)标准溶液:取8.3mL盐酸(AR)注入1000ml蒸馏水。用无水碳酸钠(280℃烘干)法标定准确浓度。称取0.2000g,溶于50mL水,加混合指示剂,用0.1mol/L盐酸滴定至暗红色。同时滴定空白,加以校正。

(7)蔗糖(AR)

(8)硫酸铵(AR)

4操作步骤

(1)选取有代表性的样品用四分法缩分至200g,风干或以65℃烘干后粉碎,过0.42mm 试验筛,封入样品袋,在阴凉处保存,以备分析。

(2)用分析天平准确称取0.3—1.0g制好的试样,放入专用消化管或凯氏瓶中,加入混合催化剂2.0g和12mL硫酸,盖好专用消化管盖或凯氏瓶口盖一漏斗,置于专用消煮炉或可调电炉上消煮,开始用小火加热消煮,待泡沫消失后再加大火力保持微沸状态,直至溶液透明呈蓝绿色并继续消煮2h.

(3)将消化的试样放冷,加入50-60mL蒸馏水,摇匀,冷却。将蒸馏装置冷凝管末端浸入内装25mL 2%硼酸溶液的三角瓶底部,加入2滴混合指示剂。然后小心地向消化液内加入50mL40%氢氧化钠溶液,立即进行加热蒸馏,直至馏出液体体积为100mL为止。取下三角瓶使冷凝管末端离开液面,继续蒸馏1-2min,并用蒸馏水冲洗冷凝管末端,停止蒸馏。

(4)滴定:用0.1mol/L 盐酸标准溶液滴定,溶液由蓝绿色变为红色为终点。

(5)空白测定:称取0.5g蔗糖代替试样,按上述操作步骤测定。

5.结果计算

(1)饲料中粗蛋白质的含量按公式计算

式中:w(CP) —饲料中粗蛋白的质量分数,%;

V—滴定试样时所消耗的标准盐酸溶液的体积,mL

V0—滴定空白时所消耗的标准盐酸溶液体积,mL

C B—标准溶液盐酸的量浓度,MryLI

0.0140 —氮的摩尔质量,kg/mol;

m—试样质量,g