人环磷酸腺苷cAMPELISA试剂盒使用方法

elisa检测camp原理
Elisa（酶联免疫吸附测定法）是一种常用的实验技术，用于检
测特定蛋白质或其他分子的存在。

在检测 cAMP（环磷酸腺苷）时，Elisa 的原理如下：
1. 固相酶联免疫吸附测定法的基本原理是将待检测物质（如cAMP）与固相上的特异性抗体结合，形成抗原-抗体复合物。

2. 接着，将样品中的 cAMP 加入到已经涂覆有抗体的微孔板中，待检测的 cAMP 与抗体结合形成复合物。

3. 随后，通过洗涤步骤去除未结合的物质。

4. 接下来，加入与 cAMP 结合的第二抗体（标记有酶的抗体），形成“抗原-一抗-二抗”复合物。

5. 再次进行洗涤步骤去除未结合的第二抗体。

6. 最后，加入染色底物，使与 cAMP 结合的酶作用产生可检测
的信号。

通过测量产生的颜色变化或发光强度，可以定量测定样品中cAMP 的含量。

这就是 Elisa 技术在检测 cAMP 方面的基本原理。

大鼠环磷酸腺苷(cAMP)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：96T20pg/ml-600pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中环磷酸腺苷(cAMP)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠环磷酸腺苷(cAMP)水平。

用纯化的大鼠环磷酸腺苷(cAMP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入环磷酸腺苷(cAMP)，再与HRP标记的环磷酸腺苷(cAMP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的环磷酸腺苷(cAMP)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠环磷酸腺苷(cAMP)浓度。

试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

大鼠环磷酸腺苷(cAMP)ELISA酶联免疫试剂盒Rings of rats adenosine monophosphate (cAMP) ELISA ELISA kit大鼠环磷酸腺苷(cAMP)ELISA酶联免疫试剂盒试剂盒组成: 组分规格大鼠环磷酸腺苷cAMP预包被板12条或6条样本分析缓冲液1瓶5ml/3ml标准品稀释液10ml/5ml大鼠环磷酸腺苷cAMP标准品2支/1支(冻干)大鼠环磷酸腺苷cAMP1瓶10ml/5ml亲和素连接的HRP酶1瓶10ml/5ml浓缩洗涤液20×30ml/瓶TMB底物1瓶10ml/5ml中止液1瓶5ml/3ml封板胶纸3/2张说明书 1份大鼠环磷酸腺苷(cAMP)ELISA酶联免疫试剂盒1.专一性强。

抗原与抗体的免疫反应是专一反应，而免疫酶技术以免疫反应为基础，所检测的对象是抗原（或抗体），使用的抗体除标记了酶以外，与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。

2.灵敏度高。

由于抗体联结上了酶，因此，借助于酶与底物的显色反应，显示抗原与抗体的结合，大大提高了检测的灵敏性，使检测水平接近放射免疫测定法。

3.样品易保存。

经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定，因此有利于样品的保存。

4.结果易观察。

对检测结果即可用肉眼观察，又可用显微镜观察，也可以用分光光度计进行比色测定，还可用显微镜观察。

这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变，从而引起被检测物的显示。

5.可以定量测定。

溶液中的抗原物质，应用酶免吸附技术进行比色测定，依据光密度值的变化，可以定量。

预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。

6.可以大规模测定样品。

如有成千上万份样品需要进行检测，免疫酶技术都能在较短时间内完成。

7.仪器和试剂简单。

对免疫没技术来说，不需要荧光显微镜，也不需要测定放射性的特殊仪器，所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂，普通实验室及生产应用单位均易购置.ELISA的样本实验准备在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。

人受磷蛋白(PLN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号：E1884h3. 蒸馏水或去离子水，全新滤纸标本的采集及保存1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存，-20℃不应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

操作步骤实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。

实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。

空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。

为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。

每孔加检测溶液A工作液100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3. 温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4. 每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液）100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

人腺苷脱氨酶(ADA)elisa试剂盒使用说明书Elisa kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3 ml×1瓶（48）/6 ml×1瓶（96）【人腺苷脱氨酶(ADA)elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人腺苷脱氨酶(ADA)水平。

用纯化的人腺苷脱氨酶(ADA)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入腺苷脱氨酶(ADA)，再与HRP标记的腺苷脱氨酶(ADA)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的腺苷脱氨酶(ADA)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人腺苷脱氨酶(ADA)浓度。

迪信泰检测平台
环磷酸腺苷（cAMP）检测
环磷酸腺苷(Cyclic adenosine monophosphate, cAMP)，又称为环化腺核苷一磷酸、环腺一磷，是细胞内参与调节物质代谢和生物学功能的重要物质，是生命信息传递的“第二信使”。

在体内可以促进心肌细胞的存活，增强心肌细胞抗损伤、抗缺血和缺氧能力；促进钙离子向心肌细胞内流动，增强磷酸化作用，促进兴奋-收缩偶联，提高心肌细胞收缩力，增加心输出量；同时还扩张外周血管，降低心脏射血阻抗，减轻心脏前后负荷，增加心排出量，改善心功能。

迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和液相质谱联用(LC-MS)，可高效、精准
的检测cAMP的含量变化。

此外，迪信泰检测平台还提供其他信号分子系列检测服务，以满足您的不同需求。

对于常见核苷酸，可配合标样进行检测，对于稀有的核苷酸，如提供标准样品，可提供定制检测。

HPLC和LC-MS测定cAMP样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。

周期：2~3周。

项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。

2. 相关质谱参数（中英文）。

3. 质谱图片。

4. 原始数据。

5. cAMP含量信息。

迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。

ELISA试剂盒的操作规范
今天大家就一起来看看我公司ELISA试剂盒操作规范细节。

1.严格按照说明书进行操作。

操作前将试剂在室温下平衡30～60min。

2.加样后及时放入孵箱。

标本较多时，要分批操作。

按说明严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗。

3.合理安排检测量，以免反应板过多导致洗板等待时间长。

4.加样时保持显色剂不外流；加终止液时应避免产生气泡。

5.应桌面清洁，整个操作过程中酶标板不被污染。

在加样的步骤中，您要注意加样器枪头的洁净与否和吸量的准确性，直接影响检测结果。

由于枪头构造特殊，导致清洗困难，加大了交叉污染的机会。

建议用一次性吸嘴。

加样器也要经常清洗，定期校准。

加样时应将所加物加在酶标板板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出。

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断大鼠（Rat）环磷酸腺苷（cAMP）ELISA检测试剂盒使用说明书试剂盒货号：DG20165D-96T 检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被环磷酸腺苷（cAMP）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的环磷酸腺苷（cAMP）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、0.75、1.5、3、6、12nmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒使用说明书产品编号：D711286包装规格：48 TESTS / 96 TESTS声明：使用前仔细阅读本说明书。

只能用于研究用途，不得用于医学诊断。

用途用于人血清、血浆或其他相关生物液体中甘油醛-3-磷酸脱氢酶的测定。

工作原理本试剂盒采用的是双抗夹心酶联免疫吸附检测技术（ELISA）。

测定样品中人甘油醛-3-磷酸脱氢酶水平。

向预先包被了抗人甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体的酶标孔中，加入标准品和样本，温育后，加入生物素标记的抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体。

再与HRP标记的链霉亲和素结合，形成免疫复合物，再经过温育和洗涤，去除未结合的酶，然后加入显色底物TMB，产生蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

最后，在450 nm处测定反应孔样品吸光度（OD）值，样本中的人甘油醛-3-磷酸脱氢酶浓度与OD值成正比，通过绘制标准曲线计算出样本中人甘油醛-3-磷酸脱氢酶的浓度。

1 / 262 / 26原理图：试剂盒组成说明书1份1份封板膜5片5片预包被酶标板8孔X 6条8孔X 12条-20°C 标准品1瓶2瓶-20°C 标准品/样本稀释液SD120 mL X 1瓶20 mL X 1瓶2-8°C 浓缩生物素标记甘油醛-3-磷酸脱氢酶抗体（100X ）60 μl120 μl-20°C生物素标记抗体稀释液SD214 mL X 1瓶14 mL X 1瓶2-8°C浓缩HRP 标记链霉亲和素（100X ）60 μl120 μl-20°C （避光）HRP标记链霉亲和素稀释液SD314 mL X 1瓶14 mL X 1瓶2-8°C显色剂10 mL X 1瓶10 mL X 1瓶2-8°C （避光）终止液10 mL X 1瓶10 mL X 1瓶2-8°C浓缩洗涤液（25×）30 mL X 1瓶30 mL X 1瓶2-8°C需要而未提供的试剂和器材1.37°C恒温箱2.酶标仪（450 nm波长滤光片）3.精密移液器及一次性吸头4.去离子水或蒸馏水5.一次性试管6.洗板机或洗瓶，吸水纸注意事项1.试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。

Camp试验操作规程1. 引言本文档旨在规范Camp试验的操作流程和安全要求，以保证试验过程的顺利进行并确保试验人员的安全。

2. Camp试验概述Camp试验是一种常用的评估新产品、新药物或新治疗方法有效性的实验方法。

它广泛应用于医学、农业、环境保护等领域。

Camp试验可以通过对试验对象进行一系列的实验操作和观测，来评估其对特定条件或因素的响应。

3. Camp试验操作步骤3.1 试验前准备在进行Camp试验之前，需要进行以下准备工作：•准备试验对象：选择适合的试验对象，根据试验目的确定试验对象的数量和特征。

•设计试验方案：制定试验的目标、步骤和所需材料，确定实验组和对照组，确保试验的科学性和可比性。

•资源准备：准备所需的实验设备、试剂和耗材，并确保其齐全、干净和有效。

•安全措施：评估试验过程中可能存在的风险，并采取相应的安全措施，保护试验人员的安全。

3.2 试验操作Camp试验的操作步骤如下：1.试验组准备：根据试验方案，按照实验组和对照组的要求准备试验对象。

2.实验条件设置：根据试验方案，设置适当的实验条件，如温度、湿度、光照等。

3.实验操作：按照试验方案的要求进行实验操作，如添加试剂、测量数据等。

4.观测记录：根据试验方案，及时和准确地记录实验过程和观测结果，包括时间、数据、现象等。

5.实验结束：在试验结束后，清理实验现场，处理实验产生的废弃物和残余物。

6.数据分析：根据试验记录的数据，进行数据分析和统计，并对结果进行解释和讨论。

3.3 试验安全在进行Camp试验时，应注意以下安全要求：•确保实验室的安全：实验操作前，检查实验室的安全设施和消防设备是否完好有效。

•使用个人防护装备：试验人员应佩戴实验室规定的个人防护装备，如实验手套、实验眼镜、实验衣等。

•正确操作试剂：按照试验方案和操作要求，正确使用和处理试剂，避免接触皮肤和呼吸道。

•处理废弃物：及时将实验产生的废弃物和残余物分类、储存和处置，按照实验室的规定进行处理。