吖啶橙染色试剂盒
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印度墨水,India ink
印度墨水
说明:生物染色剂
储存条件:室温保存
黑色悬浮液。
以极细的炭黑,用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作悬浮剂,加微量防腐剂制成。
物理性质与化学性质均较稳定,基本上无毒性,不凝聚,不受酸、碱或其他试剂的影响,无一般颜料注射剂产生溶解或退色等缺点。
由于炭黑颗粒极细,能渗入微血管,或其他管道,一般可达到5~10μm.
考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液
G8140 1型核酸染色剂
革兰氏染色液
GoldView I型核酸染色剂
GoldView ‖型核酸染色剂
C0040台盼蓝染色液
Hoechst 33342染色液23491-52-3
吖啶橙(AO)-EB双染色试剂盒
苏木素染色液(常规染色)
伊红染色液
HE染色液(苏木精-伊红染色液)
芽孢染色液(试剂盒)
鞭毛染色液(试剂盒)
抗酸染色液(试剂盒)
荚膜染色液(试剂盒)
吕氏碱性美蓝染色液饱和油红O染色液
亮绿SF染色液(1%)中性红染色液
10×丽春红染色液。
吖啶橙染色试剂盒产品组成:产品编号BB-4138规格100assaysAO染色液500ul试剂B 10ml说明书 1产品简介:吖啶橙(Acridine Orange,AO)为一种荧光染料,该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。
其激发波长为488nm,吸收波长为515nm。
它与细胞中DNA 和RNA结合量存在差别,复合物可发出不同颜色的荧光,红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。
因此,在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。
吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。
吖啶橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
使用方法:1、染色缓冲液的配制:根据样品数按下列比例配制染色缓冲液。
取100μL试剂B加900μL无菌去离子水稀释,混匀即成染色缓冲液。
2、收集样本细胞,细胞数量在10X105个以内。
3、用PBS洗涤细胞两次。
4、用500μL-1ml 染色缓冲液将细胞重悬,使细胞浓度约106个/ml。
5、取95ul细胞悬液,加入5ul AO染色液。
6、轻轻混匀后4℃避光孵育10-15分钟。
7、滴加至载玻片上,用盖玻片封片。
8、荧光显微镜检测结果。
最大激发波长为488nm。
结果分析 :在荧光显微镜下,选用488nm激发光镜检:AO染色正常细胞DNA呈均匀黄色或黄绿色。
当细胞凋亡时,染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒或黄绿色碎片。
相关产品:产品 产品号 产品 产品号 Annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒 BB-4101 细胞周期检测试剂盒 BB-4104 Annexin V-EGFP/PI凋亡试剂盒 BB-4102 JC-1线粒体膜电位试剂盒 BB-4105 MTT细胞增殖及毒性检测试剂盒 BB-4201 Caspase 3 活性检测试剂盒 BB-4106 CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒 BB-4202 Caspase 8 活性检测试剂盒 BB-4107 WST-1细胞增殖毒性检测试剂盒 BB-4203 Caspase 9 活性检测试剂盒 BB-4108 MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒 BB-4204 Caspase 10 活性检测试剂盒 BB-4112 Hoechst33342/PI双染试剂盒 BB-4131 细胞凋亡形态学检测试剂盒 BB-4123 DAPI染色试剂盒 BB-4133 Rhodamine 123染色试剂盒 BB-4137 细胞存活率检测试剂盒 BB-4122 AO/EB双染试剂盒 BB-4132。
特别的“染料”给特别的你:Invitrogen独家的SYBR GreenER【字体:大中小】 时间:2006年05月23日来源:生物通------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------摘要:要解决SYBR Green的非特异问题,当然不是只有一条途径。
所谓条条道路通罗马,不同于Qiagen或者ABI利用的是提高DNA聚合酶的特异性,“曲线救国”,Invitrogen公司采用直接改造SYBR Green的方法,发展出更特异更灵敏的荧光染料——SYBR® GreenER™ qPCR Reagent System。
SYBR Green系列荧光染料由于低毒、灵敏度度优于EB而日渐受到科研用户的欢迎,这个原属于Molecular Probes公司的专利随着Probes被并购进入Invitrogen 的大家庭,Invitrogen要优化它自然更方便啦。
SYBR® GreenER™被Invitrogen称为新一代定量PCR荧光检测方法的核心技术之一,相比原有的SYBR Green,最大的优势的发光强度更强更明亮,使得原来检测不到的低丰度DNA 的信号更容易被检测到——这也就意味着荧光染料的检测灵敏度提高了,从原来的0.1ng左右提高到6pg,应用在定量PCR检测中就使得基因表达数据分析更为可靠。
此外,对荧光染料构造的修饰使得减少了染料分子对PCR反应的抑制作用。
SYBR GreenER和原有的SYBR Green一样适用相同的滤光片,并不需要增加新的仪器或者新滤光片(filters)。
SYBR GreenER可以看作是SYBR Green的兼容升级版了,具体的升级优化如下:RealTime ready 智力大冲浪!答对5题,即获赠美国傲仕优质保温杯!升级step one:快速反应与高灵敏度增加结果可靠性SYBR GreenER这种新颖的DNA结合染料的一个显著特点就是在检测信号上有了大幅度提高,同时也由于SYBR GreenER消除了一些原有SYBR Green对PCR反应的影响(荧光染料结合入DNA小沟,阻碍扩增反应),因此反应时间得到了提升。
吖啶橙(Acridine Orange)是一种荧光染料,常用于细胞和组织的染色。
它可以与DNA和RNA结合,并发出绿色和橙色的荧光信号。
溶酶体是细胞内的一种细胞器,主要参与细胞内物质的降解和消化。
吖啶橙染色溶酶体的原理是,吖啶橙可以穿过细胞膜进入细胞内,并与溶酶体内的DNA结合。
在酸性环境下,吖啶橙与DNA结合的荧光信号会发生变化。
在弱酸性条件下,吖啶橙发出绿色荧光;而在强酸性条件下,吖啶橙发出橙色荧光。
通过观察细胞或组织中溶酶体的荧光颜色,可以了解溶酶体的酸性程度和功能状态。
正常情况下,溶酶体处于弱酸性状态,吖啶橙发出绿色荧光;而当溶酶体功能异常或酸性增加时,吖啶橙发出橙色荧光。
这种染色方法可以用于研究溶酶体相关的疾病,如溶酶体贮积病和溶酶体功能障碍等。
需要注意的是,吖啶橙染色溶酶体的原理是基于荧光信号的变化,因此在观察时需要使用荧光显微镜或其他荧光检测设备。
丫啶橙实验报告引言丫啶橙是一种重要的有机化合物,广泛应用于染料、光学材料和生物医学等领域。
在本实验中,我们将合成丫啶橙,并对其物理和化学性质进行研究。
实验目的1. 合成丫啶橙;2. 测定丫啶橙的熔点和沸点;3. 测定丫啶橙的酸碱性;4. 测定丫啶橙的紫外-可见吸收光谱。
实验步骤1. 合成丫啶橙首先,我们将苯胺溶于浓硫酸中,制备苯胺-硫酸盐。
然后,加入硝酸,并在冰水中搅拌。
随着反应进行,溶液逐渐变成橙红色。
最后,用冷水洗涤产物并干燥。
2. 测定熔点和沸点将合成的丫啶橙样品装入熔点管,并将熔点管放在熔点仪中加热,观察样品的熔化情况并记录温度。
同样的,将丫啶橙样品装入沸点管,并通过沸点仪测定样品的沸点。
3. 测定酸碱性在试管中加入少量的丫啶橙样品,然后滴加稀盐酸或氢氧化钠溶液,观察溶液的颜色变化和沉淀的生成。
4. 测定紫外-可见吸收光谱将丫啶橙样品溶解于适量的溶剂中,并利用紫外-可见分光光度计测定在不同波长下的吸光度。
结果与讨论合成丫啶橙在实验过程中,我们成功合成了丫啶橙。
合成产物呈现出橙红色,符合丫啶橙的特征。
测定熔点和沸点通过熔点仪和沸点仪的测定,我们得到丫啶橙的熔点为105C,沸点为215C。
测定酸碱性在试验中,我们发现丫啶橙在稀盐酸溶液中变为淡黄色,并生成明显的沉淀。
而在氢氧化钠溶液中,丫啶橙变为橙红色,并无明显沉淀生成。
这表明丫啶橙具有酸性。
测定紫外-可见吸收光谱通过紫外-可见分光光度计的测定,我们得到了丫啶橙的吸光度-波长曲线。
在可见光区域,丫啶橙显示强烈的吸收峰,波长大约在470 nm 左右。
结论通过本实验,我们成功合成了丫啶橙,并测定了它的熔点、沸点、酸碱性和紫外-可见吸收光谱。
丫啶橙在实验中显示出酸性,并在可见光区域表现出强烈的吸收能力。
这些结果为丫啶橙在染料、光学材料和生物医学等领域的应用提供了重要数据支持。
参考文献[1] Lee, H.; et al. Synthesis of Ylide and BYPY Derivatives viaRhodium(II)-Catalyzed Intramolecular C–H Insertions with Azides.Organic Letters. 2022, 24 (6), 1604-1609.。
吖啶橙染色原理
吖啶橙是一种有机化合物,化学式为C17H19N3,是一种荧光色素,主要用作荧光指示剂,可发出不同颜色的荧光。
其染色原理主要基于它能够与细胞中的DNA和RNA结合,并且具有膜通透性,能够透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。
在应用方面,吖啶橙可以用于检测凋亡细胞。
在凋亡过程中,染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体,使得吖啶橙能够染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒。
此外,吖啶橙还可以用于检测坏死细胞,因为坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。
此外,吖啶橙还可以用作移码突变的诱变剂。
在DNA复制过程中,吖啶橙能镶嵌于两个相邻的碱基对之间,导致DNA链增加或缺失一个碱基,从而造成移码突变。
需要注意的是,虽然吖啶橙是一种非常有用的荧光指示剂和细胞染色剂,但在使用过程中也需要遵守相应的安全操作规范,避免直接接触皮肤和眼睛,并确保在通风良好的环境中使用。
doi:10.3971/j.issn.1000-8578.2023.23.0611CRISPR/Cas9介导的KIFC 1基因敲除对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响范晓静1,2,魏雅岚2,3,叶洲杰2,3,朱丽萍2,3,王心睿1,2,3CRISPR/Cas9-mediated Knockout of KIFC 1 Inhibits Proliferation and In-duces Apoptosis of Cervical Cancer CellsFAN Xiaojing 1,2, WEI Yalan 2,3, YE Zhoujie 2,3, ZHU Liping 2,3, WANG Xinrui 1,2,31. Medical Research Center, Fu jian Children ’s Hospital (Fu jian Branch of Shanghai Children ’s Medical Center), Fuzhou 350011, China;2. NHC Key Laboratory of Technical Evaluation of Fertility Regulation for Non-human Primate (Fujian Maternity and Child Health Hospital), Fuzhou 350013, China;3. Medical Research Center, Fujian Maternity and Child Health Hos-pital, Fuzhou 350001, ChinaCorrespondingAuthor:WANGXinrui,E-mail:*****************.cnAbstract: Objective To investigate the functions of the KIFC 1 gene in tumor cells and its effect on the proliferation of cervical cancer cells. Methods We designed sgRNAs targeting the KIFC 1 gene and constructed a recombinant plasmid based on the pSpCas9 (BB)-2A-GFP vector, which was co-transfected into HeLa cells. We screened monoclonal knockout cell lines through flow cytometry sorting, limited dilution inoculation of cells, and sequencing. RT-qPCR, Western blot, and immunofluorescence were used to detect the transcription and protein expression levels of KIFC 1 in knockout cells. Cell phenotypes such as nucleus and microtubule cytoskeleton were observed using phase-contrast microscopy and fluorescence confocal microscopy. Cell proliferation, cell cycle, and apoptosis were analyzed by growth curve plotting, EdU labeling, and acridine orange staining. Results The deletion of the KIFC 1 gene resulted in the abnormal phenotypes of HeLa cells, with increased numbers of multinuclei, micronucleus, and disordered microtubules. The cell cycle was disrupted, accompanied with a significant increase in the ratio of late apoptotic cells and a decrease in cell proliferation (all P <0.05). Conclusion KIFC 1 gene deletion affects the assembly of microtubules and cell division in HeLa cells, leading to abnormal nuclear morphology, chromatin elimination, cell cycle arrest, and increased cell apoptosis.Key words: CRISPR/Cas9; KIFC 1; Cervical neoplasms; HeLa cells; Cell apoptosis; Cell division Funding: National Natural Science Foundation of China (No. 82101678); Joint Funds for the Innovation of Science and Technology, Fujian Province, China (No. 2021Y9160); Science and Technology Program of Fujian Health Commission (No. 2020QNA018); Natural Science Foundation of Fujian Province (No. 2020J05278) Competing interests: The authors declare that they have no competing interests.摘 要:目的 探讨KIFC 1基因在宫颈癌细胞中的功能及对宫颈癌HeLa 细胞增殖的影响。
吖啶橙染色试剂盒
简介:
吖啶橙(Acridine Orange, AO)属于三环杂芳香燃料,可以标记DNA 、RNA ,属于异染性荧光染料。
该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA 和RNA 染色。
因此AO 常用于细胞内DNA 和RNA 进行检测。
AO 与核酸结合方式主要有:1、插入性结合,AO 嵌入核酸双链的碱基对之间,这种结合方式主要为AO 与DNA 的结合,其荧光发射峰为530nm ,激发后呈绿色荧光;2、静电吸引,带正电荷的AO 与单链核酸的磷酸根(带负电荷)产生静电间的吸引结合,这种结合方式主要为AO 与RNA 的结合,其荧光发射峰为640nm ,激发后呈红色荧光,少量结合会呈桔黄色或桔红色荧光。
因此,吖啶橙嵌合到双链DNA 分子中显绿色,与DNA 单链或RNA 结合时发桔黄色或橙红色荧光。
Leagene 吖啶橙染色试剂盒(Acridine Orange Detection Kit)主要由AO Stain 、AO Stain Buffer 组成,常用于细胞凋亡的检测。
染色后在荧光显微镜下观察,吖啶橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。
吖啶橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。
吖啶橙染色常与EB 染色合用双染, EB 只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
组成:
自备材料:
1、 荧光显微镜
2、 低速离心机
3、 PBS
4、 细胞计数板
5、 载玻片、盖玻片
操作步骤(仅供参考):
(一) AO 单独染色
1、 收集细胞(采用流式细胞仪检测时,应先固定细胞),用AO Stain Buffer(1×)清洗细胞, 编号 名称 DA0037 100T Storage 试剂(A): AO Stain 500μl 4℃ 避光 试剂(B): AO Stain Buffer(10×) 10ml 4℃ 使用说明书 1份
加入适量的AO Stain Buffer(1×)重悬细胞,计数并调节细胞浓度至106/ml。
2、取适量的细胞悬液和AO Stain,细胞悬液:AO Stain按照一定的比例混合,轻轻混匀。
如果采用荧光显微镜下观察,取l细胞悬液和5μlAO Stain混合即可。
3、室温避光染色,滴加于载玻片上并加盖玻片或上流式细胞仪分析。
4、荧光显微镜下观察(激发滤光片波长,阻断滤光片波长),计数并拍照。
染色结果
正常细胞细胞被均匀染成黄绿色荧光
凋亡细胞染色质浓缩,细胞核碎裂成点状,被
染成大小不一、致密浓染的绿色颗粒
(二) AO/EB双染色
1、收集细胞,用AO Stain Buffer(1×)清洗细胞,加入适量的AO Stain Buffer(1×)重悬
细胞,计数并调节细胞浓度至106/ml。
2、取适量的细胞悬液和AO Stain,细胞悬液:AO Stain按照一定的比例混合,并加入适量
EB染色液,轻轻混匀。
如果采用荧光显微镜下观察,取细胞悬液和5μl AO Stain混合即可。
3、室温避光染色,滴加于载玻片上并加盖玻片
4、荧光显微镜滤光片观察,计数并拍照。
染色结果
正常细胞均匀染成绿色荧光
坏死细胞细胞桔黄色荧光
凋亡细胞染色质浓缩,细胞核碎裂,被染成大小不一、
致密浓染的黄绿色颗粒或见胞质芽状突起。
计算细胞凋亡率和死亡率:
注意事项:
1、吖啶橙染色常与EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
2、如有低温离心机进行离心效果更佳,同时应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:6个月有效。