精子核成熟度在诊断男性不育中的意义

精子功能检测在辅助生殖中的应用曹泽磊，朱亮（中国人民解放军第306医院生殖医学中心，北京，100101）摘要：精子功能检测在男性不育的诊断和治疗中的作用越来越引起人们的重视。

目前精液检测的技术和方法很多，如对精子运动特征检测、形态学分析、体外存活试验、精子膜完整性试验、顶体状态测定、精子－宫颈黏液相互作用试验等。

这些试验均为男性不育症的诊断提供帮助，但各个检测项目的结果对体内外生育能力的预测有所差异，因此有必要结合临床实际对检测项目进行必要地筛选，既能为临床诊断提供依据，又可提高效率节约患者的医疗成本。

关键词：精子功能；辅助生殖；筛选中图分类号：R446.144文献标识码：B文章编号：1006－9534（2011）01－0136－03Sperm function tests in assisted reproduction．CAO Ze－lei，ZHU Liang．（Department of Reproductive Medicine，the306th Hospital of P．L．A．Beijing100101）Abstract：Human sperm function test has such an essential role on the etiologic diagnosis of male infertility that it attracts more and more attention．Many tests have offered indispensable approaches to diagnose the male infertility such as sperm movement charac-ter，morphological analysis，survival test in vitro，integrity of sperm membrane，acrosomic status，interaction between sperm and cervical mucus and so on．We should select them to apply the clinical and to reduce the costs．Key words：Sperm Function；Assisted Reproduction；selection在男性不育的诊治过程中，精液的常规化验分析一直作为一个很重要的参考指标，来指导临床的治疗方案，随着男科学研究的深入，传统的精液分析已不足以对男性生育能力进行准确评价。

健康域公卫引言男性不育是高发于男性群体的生殖系统疾病，是指夫妻生活正常，且无避孕措施，因男性因素造成不育症状。

其致病因素与性病史、吸烟饮酒和环境污染有关,多需要通过精液质量检测诊断该病，而后开展针对性治疗[1]。

DFI （DNA 碎片指数）是精液质量的常用诊断指标，可以评估疾病程度。

顶体酶活性可以判断精子活性，其指数降低则精子具有较差的穿越力，进而降低精子质量。

现阶段，以上两项指标是男性不育的常规诊断指标，便于疾病的早期治疗。

为此，本研究选取1727例男性筛查者，分析以上两项指标的诊断效果。

1资料与方法1.1一般资料选择2016年6月~2021年12月入院诊断的1727例男性筛查者，其中男性不育患者481例。

根据DFI 分组，一组306例，不育时长为9个月~3年，平均（1.24±0.48）年。

二组113例，不育时长为10个月~3年，平均（1.30±0.44）年。

三组35例，不育时长为11个月~4年，平均（1.30±0.34）年。

四组27例，不育时长为8个月~4年，平均（1.51±0.33）年。

根据顶体酶活性分组，≤48.2U/106为27例，不育时长为8个月~3年，平均（1.17±0.66）年；＞48.2U/106为416例，不育时长为10个月~4年，平均（1.21±0.69）年。

经假设检验并无差异，＞0.05。

1.2方法根据精液检查与处理实验室手册对精液进行常规检测，用改良的牛鲍氏计数板测量精液密度，采取手工法计数。

用快速染色法（Diff-Quik ）测定精子形态学特点，正常形态4%为参考值的具体下限。

所有操作人员经过系统化培训以后上岗，具备熟练的操作能力。

顶体酶活性检测采取顶体酶试剂盒，根据改良后的Kennedy 法实施检测，将精液标本混匀以后进行计数操作，使每个反应管内部的精子个数大概是7.5×106个，对各个标本设置对照以及反应管，然后添加反应液以及抑制剂。

精子DNA完整性检测在男性不育症临床上的意义曾庆琪;谭广兴;蔡宝昌【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2009(27)3【摘要】目的探讨精子DNA完整性检测在男性不育症临床上的意义.方法选择男性不育症患者302例,用吖啶橙试验(AOT)与计算机辅助精液分析(CASA)检测DFI 和精液常规参数.结果 302例患者中,精液常规参数异常率86.09%(260/302),DFI 异常率为23.84%(72/302).精液常规参数异常组DFI异常率为19.23%(50/260),精液常规参数正常组DFI异常率为52.38%(22/42).活率低下组DFI异常率为38.65%(63/163),密度低下组DFI异常率为36.67%(22/60),畸形率增高组DFI异常率为51.06%(24/47).精子活率和密度与DFI均呈显著负相关,r分别为-0.297,-0.217,P均<0.01.精子畸形率与DFI呈显著正相关,r=0.352,P<0.01.结论在分析精液常规的同时,检测精子DNA完整性能够更好的评估患者的生育力.【总页数】2页(P223-224)【作者】曾庆琪;谭广兴;蔡宝昌【作者单位】江苏职工医科大学,南京210029;无锡市中医医院男科,江苏无锡214001;南京中医药大学,南京,210029【正文语种】中文【中图分类】R466.6【相关文献】1.改良的精子染色质扩散试验在人精子核DNA完整性检测中的应用 [J], 刘浩;耿春惠2.人精子穿去透明带金黄地鼠卵实验和精子DNA完整性检测在体外受精-胚胎移植中的应用 [J], 王丽;张学红;刘金荣3.精子DNA完整性对男性不育症患者精液常规参数和精子形态的影响 [J], 关小川;孙刚;姜力4.男性不育症患者抗精子相关抗体及精子细胞形态异常的意义 [J], 吴金霞;刘志浪;苏宇雄5.精子DNA完整性检测及其对人类辅助生殖的意义 [J], 李春苑;许常龙;杨华;邹彦;黄柳静;谭庆英;丘映因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

男性不育诊断和治疗指南男性不育是指育龄夫妇有规律性生活且未采取避孕措施，由男方因素导致女方在一年内未能自然受孕。

男性不育分为原发性不育和继发性不育，前者是指男性从未使女方受孕，后者是指男性曾经使女性伴侣怀孕或生育。

一、临床流行病学目前还没有男性不育确切患病率数据。

据世界卫生组织（WHo）估计,全球有15%育龄夫妇存在生育问题，其中男方因素约占50%。

精子质量仍是评估男性生育力的重要指标，而近年来我国男性精子浓度和精子总数呈下降趋势。

影响男性生育力的危险因素主要表现在：年龄因素、不良嗜好（吸烟、饮酒）、肥胖、不良生活习惯（熬夜、缺乏运动）、病原体感染、精索静脉曲张及不良精神心理因素等。

除已知致病因素外，仍有30%~50%的精液参数异常者无法查找到明确病因。

二、病因按照解剖部位划分，将病因区分为睾丸前、睾丸及睾丸后因素。

2.1睾丸前因素下丘脑、垂体区域的解剖或功能异常，或疾病、外伤、手术、药物等因素导致的内、外源性激素异常，使得促性腺激素分泌不足，导致继发性睾丸功能障碍。

主要包括先天性低促性腺激素性性腺功能减退症(CHH)和垂体瘤，甲状腺功能异常、严重营养障碍相关燃等可引起垂体促性腺激素水平低下的全身系统性疾病，均可导致生精功能障碍。

2.2睾丸因素染色体核型异常、Y染色体微缺失以及单基因变异等染色体或基因异常，以及无睾症、睾丸发育不全、隐睾、睾丸异位等发育异常。

腮腺炎、结核、梅毒、麻风诱发的睾丸炎及非特异性睾丸炎易导致睾丸内精子发生障碍。

睾丸损伤、扭转除导致睾丸发生缺血和萎缩外，还可诱发异常免疫反应，两者均可导致不育。

精索静脉曲张引起不育是由于局部血液返流与淤滞、组织缺氧、氧化应激损伤等多种因素综合作用的结果。

睾丸肿瘤及其治疗方法(放化疗)均可以造成精子发生障碍。

肝硬化、肾功能衰竭及其他系统性疾病也可导致睾丸功能损伤。

此外，环境中的各种化学物质、内分泌干扰物、电离辐射、重金属、有毒有害气体、长期高温环境等都可能损伤睾丸生精功能而导致不育。

男子精子报告数据1. 简介男子精子报告数据是对男性精子质量和数量的评估，是评估男性生育能力的重要指标。

通过精子报告数据，可以了解到精子的浓度、活力、形态以及其他相关指标，从而判断男性的生育能力和可能存在的问题。

本文将介绍男子精子报告数据的相关指标和其意义，以及其对男性生育能力的影响。

2. 精子报告数据指标2.1 精子浓度精子浓度是指精液中每毫升含有的精子数量。

正常精子浓度应该在15~160百万/毫升之间。

如果精子浓度太低，可能会导致男性生育能力下降。

2.2 精子活力精子活力是指精子的运动能力和活动力。

正常精子活力应该在50%以上，即有至少一半的精子具有较好的运动能力。

若精子活力过低，可能会影响精子的受精能力。

2.3 精子形态精子形态是指精子的形状和结构。

正常精子形态应该占总精子数量的4%以上。

形态异常的精子可能会影响精子的受精能力和胚胎发育。

2.4 精液容量精液容量是指一次射精中的精液总量。

正常精液容量应该在2~6毫升之间。

太低的精液容量可能会影响精子的自然传输。

2.5 精液pH值精液pH值是指精液的酸碱性。

正常精液pH值应该在7.2~8.0之间。

pH值偏高或偏低都可能会对精子的活力和受精能力产生影响。

3. 精子报告数据分析通过对男子精子报告数据的分析，可以对男性生育能力进行评估，发现潜在的问题并采取相应的措施。

如果精子浓度过低，可能会降低受孕的成功率，可以通过改善生活习惯、减少精子受损的环境因素以及寻求医生的建议来提高精子浓度。

若精子活力不足，可以考虑改变生活方式如合理饮食、适量运动以及避免过度使用高温设备等，以提高精子的运动能力。

对于形态异常的精子，可以通过一些辅助生殖技术如体外受精等来提高受孕的机会。

此外，精液容量、精液pH值等也会影响精子的存活和受精能力。

如果出现异常，可以结合医生的指导和建议，针对性地进行调整和治疗。

4. 结论男子精子报告数据是对男性生育能力进行评估的重要指标。

通过对精子的浓度、活力、形态等指标的分析，可以评估男性的生育能力，并发现潜在的问题。

精液检查的目的和意义是什么？“精子问题”作为我国男性常见个人难言问题，对个人、家庭影响颇大。

“精子检查”的重要性就在于对精子问题的发现与处理。

但大部分人对“精子检查”的目的及意义并不了解。

所以，从精子检查目的与意义入手出发，对精子问题与男性问题进行分析，并提出具体预防措施，使男性生殖问题大幅度降低。

一、精液检查概述精液检查主要是指通过相关仪器与手段对男子体内精液进行检测、化验。

精液检查不是片面的简单流程，而是更为科学、合理的可科学布局。

精液检查项目与标准较为完善，主要项目包括：精液体积、精液气味与颜色、精液的液化、精液酸碱度、精子密度、精子正常情况下的活力等。

这些检查项目都对男性自身健康及生殖系统影响颇大。

现阶段，我国精液检查相对较为完善，从技术、设备、评估等方面都较为精准，越来越多的男性都积极参与到精液检查过程当中。

二、精液检查的具体目的（一）生殖功能正常判定男性生殖问题一直是我国临床医学重点问题之一，虽然人们物质生活水平不断提升，男性生殖问题也随着增多。

据相关数据统计分析，45%的不孕不育都与男性生殖问题有关。

因此，基于其问题现状，通过精液检查可以对男性是否存在生殖问题进行判定，且目的性也正在于此。

精液检查过程中重点为“精子”成活率、活力值，通过对精子的检测分析，可以明确精子是否可以与卵子进行结合。

另外，也可以检测出精囊是否存在病变，包括炎症对精子感染、精子畸形变异等，这些都可以通过精子检查而得出。

（二）精子数量的精准明确通过对精子进行检查可以对其数量进行明确，精子数量的多少也对其男性生殖影响较大。

现阶段经常出现无精、死精等现象。

这些都与精子数量至关重要。

精子检查可以更为系统、精准对其进行检测，为男性实际需求与诊治提供依旧参考。

（三）精子质量的依据提出精子质量不仅对男性自身健康造成影响，也对其生殖后代起到决定性作用。

通过对相关数据、资料分析发现。

精子质量逐渐成为衡量孩子体质、智慧的重要标准。

男性不育实验诊断检测项目基本内容及意义暨南大学医学院附属深圳市人民医院（518020，深圳）刘瑜何林随着基础研究的深入，与男性不育相关实验检测项目愈来愈多，内容涉及形态学、免疫学、生物化学及分子生物学等多学科领域。

在这些繁冗的检测项目中究竟哪些最具诊断价值以及如何正确运用这些检测项目来进行不育症的病因学诊断，是长期困扰男性不育实验诊断临床应用的技术难题。

现将当今较为成熟、有良好应用价值并获得国际专家学者广泛认可的实验检测指标介绍如下：一、静止性生殖道感染检测指标精液中的泌尿生殖道上皮细胞、前列腺细胞、生精细胞和白细胞形态在湿片状态下是无法区分开的，它们统称为圆细胞（Round cells）。

只有通过特殊检查才能将白细胞与其他类型圆细胞区别开，从而达到判断感染是否存在的目的。

精液白细胞过氧化物酶(Leukocyte Peroxidase)染色、精液白细胞群(Leukocyte subpopulations)定量和精浆弹性蛋白酶(Elastase)定量是目前用于精液感染性检测的常用指标。

其中前二者是WHO推荐指标，后者是近几年被国内外学者广泛研究认可的检测指标。

精液白细胞过氧化物酶染色、精液白细胞群定量主要用于判断白细胞精子症，精液白细胞数大于1×106/ml即可确诊。

但二者在诊断准确性上是有差别的。

过氧化物酶染色只能检测到精液中分泌过氧化物酶的中性粒细胞，不能检出精液中所有白细胞，故假阴性率高。

而白细胞群定量是迄今为止最准确可靠的白细胞精子症检测方法，可检测出精液中所有类型白细胞。

精浆弹性蛋白酶定量检测的是白细胞抗炎效应复合物。

精液中弹性蛋白酶浓度与白细胞量不一定总是成正比。

有研究表明，精液弹性蛋白酶浓度与精液中白细胞（过氧化物酶法检测）呈良好相关性。

精液白细胞浓度>1×106/ml时，精浆弹性蛋白酶浓度均>1000ng/ml。

但当精液白细胞浓度<1×106/ml时，亦有一些标本精浆弹性蛋白酶浓度>1000ng/ml[1]。

精子评估标准精子评估是生殖医学领域中非常重要的一项检查，主要用于评估男性生育能力和诊断男性不育原因。

精子评估标准是指根据一定的指标和标准对精液中的精子进行细致的观察和分析，从而判断精子的质量和数量是否正常。

精子评估的主要指标包括以下几个方面：1.精子密度：也称为浓度，指的是每毫升精液中含有的精子数量。

正常的精子密度应在15-200百万/ml之间。

2.精子活动力：指的是精子的运动能力，也称为活动率。

通常根据精子的运动方式将其分为四个等级：A级（快速直线运动），B级（缓慢但直线运动），C级（非直线或活动缓慢），D级（无法活动）。

正常精液中A级和B级精子的比例应在总精子数的50%以上。

3.精子形态：指的是精子的形状和结构。

正常形态的精子应具有头部，颈部和尾部的明显结构。

一般来说，形态正常的精子应占总精子数的4%以上。

4.精子存活率：指的是精子在一定时间内存活的能力。

正常精液中的存活率应在50%以上。

5.精液量和液化时间：正常的精液量应在2-6毫升之间，液化时间应在20-30分钟之间。

通过对以上指标的评估，可以全面了解精子的质量和数量，从而判断男性生育能力是否正常。

若发现精子评估指标异常，可以进一步进行精子功能检查，如精子DNA断裂检测、精子抗体检测等，以帮助确定病因和制定治疗方案。

需要注意的是，精子评估只是男性生育能力评估的一个重要指标，不是唯一的评估标准。

对于不育患者来说，还需要综合考虑男性和女性生育能力的各项指标，以及其他可能的不育因素，才能确定最佳治疗方案。

总之，精子评估标准是对精液中的精子进行细致观察和分析，通过对精子密度、活动力、形态、存活率等指标的评估，可以初步判断男性生育能力是否正常，帮助确定不育的病因和治疗方案。

精子核蛋白成熟度与精液常规参数的相关性分析杨雪梅;李俊;谭宇哲;王新雪;宋亚曼【期刊名称】《中国现代医学杂志》【年(卷),期】2018(028)015【摘要】目的探讨精子核蛋白成熟度与常规精液参数之间的相关性.方法随机选择371例精液标本,利用伟力彩色精子质量检测系统进行精液常规分析,采用Diff-Quick快速染色法和苯胺蓝染色法分别检测精子形态及精子核蛋白成熟度.依据核蛋白成熟度分组,比较精液常规参数的差异并分析核蛋白成熟度与精液常规参数间是否存在相关性.结果核蛋白成熟度<70％时,精子浓度、精子总数、前向运动精子比例及正常形态精子比例均低于核蛋白成熟度≥70％组,差异有统计学意义(P<0.05);核蛋白成熟度与精子浓度、精子总数、前向运动精子比例及正常形态比例精子呈正相关(P<0.05);受试者工作特征曲线(ROC)分析表明,精子浓度、精子总数、前向运动精子比例及正常精子形态可预测核蛋白成熟度,且精子总数预测的准确性最高.结论精子核蛋白成熟度与精子浓度、精子总数、前向运动精子比例及正常形态精子比例等常规精液参数具有相关性,常规精液参数可预测核蛋白成熟度.%Objective To investigate whether sperm nucleoprotein maturity was correlated with routine semen parameters. Methods A total of 371 semen samples were randomly selected and routine semen parameters were performed by computer assisted sperm analysis. Sperm was stained with Diff-Quick method and normal morphology was evaluated. The sperm nucleoprotein maturity value was detected by aniline blue assay. Independent T-test was used to determine the effect of nucleoproteinmaturity on conventional semen parameters, and correlation analysis of nucleoprotein maturity with each semen parameter was performed. Results After classification of the quality of spermatogenesis based on nucleoprotein maturity ( ≥ 70％ vs < 70％), sperm concentration, count, progressive motility and normal morphology were decreased in the group with nucleoprotein maturity < 70％ when compared with the normal group with nucleoprotein maturity ≥ 70％ (P < 0.05). There was significant positive relation between nucleoprotein maturity with sperm concentration, count, progressive motility, as well as normal morphology. Sperm concentration, count, progressive motility as well as normal morphology could be used as prognostic predictor for nucleoprotein maturity and among them, sperm count exhibited the highest accuracy. Conclusion There is positive correlation between nucleoprotein maturity and conventional semen parameters, such as sperm concentration, count, progressive motility and normal morphology, which in turn can be served as prognostic predictor for nucleoprotein maturity.【总页数】5页(P75-79)【作者】杨雪梅;李俊;谭宇哲;王新雪;宋亚曼【作者单位】河北医科大学第一医院生殖医学科,河北石家庄 050031;河北医科大学第一医院生殖医学科,河北石家庄 050031;河北医科大学第一医院生殖医学科,河北石家庄 050031;河北医科大学第一医院生殖医学科,河北石家庄 050031;河北医科大学第一医院生殖医学科,河北石家庄 050031【正文语种】中文【中图分类】R321.1【相关文献】1.334例男性不育症患者精子DNA完整性与精液常规参数间的相关性分析 [J], 季兴哲;杨杰;宋娟;周寒鹰;张洲;师娟子2.精子DNA碎片与年龄、精液常规参数和疾病因素的相关性分析 [J], 袁人培;姜辉;陆影;杜娇;岳倩;魏楠;杨思伟3.精液不液化患者精液常规参数与精子DNA碎片相关性分析 [J], 周明连;潘林清;张帅4.孕前保健男性年龄与精子DNA碎片、精液常规参数的相关性分析 [J], 庾伟坚;路瑞静;江凡;陈献;梁淑馨;胡蝶;周喜友5.不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性分析 [J], 周欢群;蒋满波;周文;谢妍;吴爱华;王爱爱;倪运萍;陆杉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

中医治疗男性不育症良方男性不育症是指育龄夫妇同居2年以上，有生育愿望，未采取避孕措施，女方有受孕能力，由于男方生殖机能障碍而致女方不能怀孕的一类疾病。

或曾有孕育而后2年以上再未有孕育者，称为不育症。

前者为原发性不育症，后者为继发性不育症。

男性不育属于中医“无子”、“无嗣”、“精滑”、“精清”、“精冷”的范畴。

一、病因病机(1)生殖器官先天性发育异常：先天性生殖器官发育畸形和／或功能障碍，常妨碍性功能，影响生育力；虽发生率不高，但也是男性不育的重要原因之一。

(2)生殖系统感染：生殖系特异性和非特异性感染均可影响精子的发生、活力及运输，抑制附属性腺分泌，导致感染性男性不育。

现今性传播疾病成为感染性男性不育的主要原因，国内以腮腺炎、结核病变系为常见原因。

(3)输精管道梗阻：各种原因如先天性畸形、炎症病变、肿瘤和外伤等使睾丸曲细精管、附睾、输精管直至射精管及尿道发生梗阻，阻止精子的运行和排出，均可引起输精管道梗阻性不育，占男性不育病因的5%～15%，成为男性不育的一种常见病因。

输精管道梗阻常由生殖系感染如附睾、前列腺、精囊炎症及附睾、输精管结核等引起。

附睾炎是引起输精管道梗阻的常见炎症，常由淋病菌和结核菌感染所致，亦可由大肠杆菌、葡萄球菌等感染引起。

炎症破坏附睾丸黏膜下层，以后纤维结缔组织增生，使管腔狭窄或闭合。

附睾炎多为逆行感染，常伴有输精管、精囊、前列腺等炎症而同时发生梗阻。

据统计先天性输精管道畸形引起的不育，占生育能力低下者的1.3%。

少见的有附睾、前列腺原发性或转移性肿瘤，以及外伤或手术损伤输精管道而梗阻、断裂等。

(4)精索静脉曲张：精索静脉血流瘀积而造成精索蔓状静脉丛迂曲扩张，可影响睾丸生精功能，导致精液异常，精子数减少和精子活力减低，严重者可伴有睾丸萎缩和生精障碍而致使不育。

多见于青壮年，经过手术治疗后，部分病人可恢复生殖能力。

(5)内分泌疾病：内分泌疾病常导致性功能障碍和睾丸生精障碍，也是造成男性不育的重要原因。

精子形态分析报告精子形态分析是男性不育症常规检查之一，对于评估男性生育能力至关重要。

而精子形态分析报告则是通过对精子形态的观察和测量，得出一个反映男性生育能力的结果。

一、检测目的和原理精子形态分析的主要目的是评估精子形态的正常程度以及异常率，从而判断男性是否存在形态异常问题，进一步分析其生育能力。

在精子形态分析过程中，通过显微镜等设备观察精子的头部、颈部和尾部等部位的形态结构，细致地计算和记录出各类形态异常精子的数量和比率。

二、报告项目和指标在精子形态分析报告中，通常会包含以下几个主要指标：1. 精子正常形态比例：这是衡量男性生育能力的主要指标之一。

正常形态率越高，男性生育能力越强。

2. 异常形态精子比例：这是另一个重要的指标。

异常形态精子比例高可能意味着男性存在某种精子结构异常的问题。

3. 头部异常精子比例：头部异常精子包括头部过大、头部过小、头部变形等。

此类异常可能影响精子的活力和受精能力。

4. 颈部异常精子比例：颈部异常精子会影响精子的运动能力和进入卵细胞的能力。

5. 尾部异常精子比例：尾部异常精子包括尾部畸形、尾部缺失等。

此类异常会阻碍精子的游动能力，降低受精能力。

三、分析结果和建议精子形态分析报告根据上述指标给出具体的分析结果和评估建议。

对于正常范围内的指标，会给予鼓励和建议，并提供一些生活上的调整建议。

对于异常指标，会进一步分析其原因，如是否为遗传问题、环境因素或其他生理疾病引起。

根据异常比例的程度和具体情况，可以采取一些治疗措施来改善精子形态问题。

例如，通过药物治疗来调节内分泌，改善精子发育环境；通过手术矫正某些结构异常等。

对于一些不可逆的异常形态，也可以考虑采取辅助生殖技术，如体外受精等。

四、生活调整建议根据精子形态分析报告的结果，医生通常会给出一些生活调整建议，以改善精子的形态和质量，提高生育能力。

常见的建议包括：1. 饮食调整：饮食中应富含蛋白质、维生素、矿物质等营养物质，可以适当增加海产品、豆类、坚果等富含优质蛋白质的食物。

㊃短篇论著㊃精子D F I㊁H D S与精子形态和患者年龄的相关性分析*王甩艳1,张秀明1,林喜荣1,罗燕萍1,贺玉莹2,莫红梅1ә1.深圳市罗湖区人民医院医学检验科,广东深圳518001;2.深圳市罗湖医院集团医学检验中心,广东深圳518001摘要:目的对男性不育患者进行精子D N A检测,探讨精子D N A碎片指数(D F I)㊁精子高D N A着色性(H D S)与受检者的精子形态及年龄的关系㊂方法选取深圳市罗湖区人民医院生殖中心601例精液样本,显微镜法计算正常形态精子百分比,流式细胞仪检测精子D F I和H D S,并分析其与受检者的正常形态精子及年龄之间的关系㊂结果正常形态精子百分比<4.00%组与ȡ4.00%组之间的D F I和H D S比较,差异有统计学意义(P<0.05)㊂各年龄组间D F I比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而各年龄组间H D S比较差异无统计学意义(P>0.05)㊂正常形态精子百分比与精子D F I㊁H D S呈负相关(r=-0.162,P<0.05;r=-0.281,P<0.05),年龄与精子D F I呈正相关(r=0.132,P<0.05),而年龄与精子H D S无相关性㊂结论精子D F I和H D S可作为反映男性生育能力的指标㊂关键词:精子D N A碎片指数;精子高D N A着色性;不育D O I:10.3969/j.i s s n.1673-4130.2021.05.024中图法分类号:R698.2文章编号:1673-4130(2021)05-0621-03文献标志码:A精液常规检测是对男性生育能力进行评估的基础检查项目,但对精子功能的亚细胞结构不能做出评估[1-2]㊂精子D N A检测包括精子D N A碎片指数(D F I)和精子高D N A着色性(H D S)㊂精子D F I是一个被认为较各种常规精液参数更为有效的男性不育指标,可以预测自然受孕和体外受精的结果[3-5]㊂精子H D S指高可染性的精子即核未完全缩合的不成熟精子占总精子的百分数,反映的是精子的成熟度[6]㊂精子D N A损伤有关的因素包括年龄㊁环境污染物等[7]㊂本文对男性不育患者的精子D F I㊁H D S与其形态和患者年龄进行相关性分析,旨在探讨其在男性生殖能力评估上的应用价值㊂1资料与方法1.1一般资料选取2018年5月至2020年1月深圳市罗湖区人民医院生殖中心的601例患者精液样本㊂601例患者婚后均正常性生活1年以上不育,无外伤及遗传性疾病家族史,体检未发现明显睾丸㊁附睾及输精管异常等,且基本排除女方不孕因素㊂正常形态精子百分比为0.00%~9.00%,平均(3.45ʃ1.91)%;年龄21~72岁,平均(35.76ʃ7.43)岁㊂1.2精子形态学分析采用改良巴氏染色,按照世界卫生组织(WHO)‘人类精液检查与处理实验室手册第5版“标准[8],进行精子形态评价,正常形态精子百分比参考范围ȡ4.00%㊂1.3精子D F I和H D S检测方法使用的仪器是流式细胞仪(m i n d r a y,B r i C y t e E6),采用F C S A S软件分析精子的D F I和H D S㊂检验原理是正常精子D N A 紧密结合而具有抗酸性,维持双链的稳定性,而受损的或不成熟的精子形成松散的染色质结构,其D N A 在酸作用下变成单链,吖啶橙(A O)与双链D N A结合发出绿色荧光,与单链D N A结合发出红色荧光,然后通过配有专用软件的流式细胞仪得出相关参数㊂D F Iɤ15%:精子D N A完整性好;15%<D F I<30%:精子D N A完整性一般;D F Iȡ30%:精子D N A完整性差㊂H D Sɤ15%:精子成熟染色质含量正常;H D S>15%:精子成熟染色质含量异常㊂1.4统计学处理采用S P S S17.0统计软件进行数据分析,计数资料以[n(%)]表示,组间差异采用非参数检验分析,受检者的正常形态精子及患者年龄与精子D F I和H D S的相关性均采用P e a r s o n相关分析㊂2结果2.1精液样本检测结果受检的601例精液样本中,精子D N A完整性好的有243例(40.43%);精子D N A完整性一般的有241例(40.10%);精子D N A 完整性差的有117例(19.47%)㊂精子成熟染色质含量正常的有494例(82.20%),精子成熟染色质含量异常有107例(17.80%)㊂2.2正常形态精子百分比与精子D F I和H D S的相关性依据正常形态精子百分比将患者分为< 4.00%组和ȡ4.00%组,分析两组精子不同程度㊃126㊃国际检验医学杂志2021年3月第42卷第5期I n t J L a b M e d,M a r c h2021,V o l.42,N o.5*基金项目:广东省深圳市医疗卫生三名工程项目(S Z S M201601062)㊂ә通信作者,E-m a i l:437897734@q q.c o m㊂本文引用格式:王甩艳,张秀明,林喜荣,等.精子D F I㊁H D S与精子形态和患者年龄的相关性分析[J].国际检验医学杂志,2021,42(5): 621-623.D N A完整性和成熟染色质含量的分布情况,见表1㊁2㊂随着正常形态精子百分比的增大,精子D F Iɤ15%的个体所占的比率逐渐上升,而精子D F Iȡ30%和15%<D F I<30%的个体所占的比率逐渐下降,且精子H D S的比率趋势与D F I一致㊂非参数检验显示正常形态精子百分比<4.00%组与ȡ4.00%组之间的D F I和H D S比较,差异有统计学意义(P<0.05)㊂P e a r s o n相关分析表明正常形态精子百分比与精子D F I呈负相关(r=-0.162,P<0.05),正常形态精子百分比与精子H D S呈负相关(r=-0.281,P< 0.05)㊂表1两组D F I比较组别n D F Iɤ15%15%<D F I<30%D F Iȡ30%P <4.00%组345114(33.04)145(42.03)86(24.93)<0.05ȡ4.00%组256129(50.39)96(37.50)31(12.11)表2两组H D S比较组别n H D Sɤ15%H D S>15%P<4.00%组345257(74.49)88(25.51)<0.05ȡ4.00%组256237(92.58)19(7.42)2.3年龄与精子D F I和H D S的相关性依据年龄将患者分为<35岁㊁35~<40岁和ȡ40岁3组,分析3组之间的精子不同程度D N A完整性和成熟染色质含量的分布情况,见表3㊁4㊂随着年龄的增大,精子D F Iɤ15%的个体所占的比率逐渐下降,而精子D F Iȡ30%和15%<D F I<30%的个体所占的比率不断上升㊂各年龄组间D F I比较,差异均有统计学意义(P<0.05),而各年龄组间H D S比较差异无统计学意义(P>0.05)㊂P e a r s o n相关分析表明患者年龄与精子D F I呈正相关(r=0.132,P<0.05),患者年龄与精子H D S无相关(r=0.020,P>0.05)㊂表3各组D F I比较组别n D F Iɤ15%15%<D F I<30%D F Iȡ30% <35岁组305149(48.85)119(39.02)37(12.13) 35~<40岁组15964(40.25)63(39.62)32(20.13)ȡ40岁组13730(21.90)59(43.07)48(35.03)表4各组H D S比较组别n H D Sɤ15%H D S>15%<35岁组305249(81.64)56(18.36)35~<40岁组159128(80.50)31(19.50)ȡ40岁组137117(85.40)20(14.60)3讨论精子D N A损伤是男性不育的主要分子原因,这对生育有负面影响㊂依据WHO指南,精液分析检测常规参数是评估男性生育能力的主要方法㊂然而,常规的精液分析对男性生育能力的预测是很有限的,很多时候并不能够解释男性不育的原因㊂在全球范围内进行精子D N A片段分析,可作为男性不育症的预后和诊断及其管理的工具[9]㊂近年来的研究发现,精子在受孕和胚胎发育过程中也扮演了重要角色,包括遗传物质表达异常㊁表观遗传规律紊乱㊁D N A完整性降低等㊂因此在评估男性生育力时,精子D N A完整性受到越来越多的关注㊂精子D N A是父源遗传物质,其完整性对子代健康的重要性不言而喻㊂精子D N A损伤影响D N A碱基对的复制与转录,直接导致了遗传信息的缺失并影响生物转化功能,从而阻碍胚胎形成[10]㊂李清琴等[11]研究表明精子D F I与精子活力呈负相关,且升高水平与精子活力的下降程度有关,提示精子D N A 损伤可能存在与精子活力下降相同的影响机制㊂前者研究的是D F I与精液常规参数相关分析,而本文在其基础上,旨在研究的是D F I和H D S与受检者的正常形态精子百分比及年龄的关系,D F I反映的是精子D N A完整性好或差,是作为检测精子D N A损伤的一个重要指标,而H D S反映精子成熟染色质含量正常与否,是对精子D N A损伤的重要补充依据㊂本研究结果显示,正常形态精子百分比ȡ4.00%与<4.00%这两组间的D F I和H D S差异有统计学意义(P< 0.05)㊂精子D F I和H D S与正常形态精子百分比呈负相关,表明精子碎片率高且其成熟染色质含量异常可能会导致精子形态的异常,或者精子形态缺陷可伴有D N A碎片的增加和成熟染色质含量异常㊂而精子畸形会导致受精能力降低㊂本研究各年龄组之间的D F I比较,差异有统计学意义(P<0.05),并且年龄与精子D F I呈正相关,即年龄越大,D F I越高,精子D N A的完整性越差㊂但是患者年龄与精子H D S无相关,说明年龄可能对于精子染色质的成熟影响不大㊂C R O S N O E L等[12]研究表明随着父方年龄的增大,单基因突变会每年增加两个,这对精子与受精卵的成功结合及胚胎的正常发育有着重要的作用㊂同时也有相关研究表明年龄增长,男性生育力下降,精液参数变差包括精子活动力㊁精子活率等降低[13]㊂因此,年龄增长导致精子D N A损伤概率增大和精子形态异常率升高㊂精子D N A的损伤水平能显著性的预测宫颈内授精㊁宫腔内授精和体外授精等助孕手段的成功率,而且精子D N A损伤与卵细胞胞质内单精子注射及体外授精助孕治疗后的妊娠风险增加显著相关[14-15]㊂精子D F I㊁H D S与精子形态均呈负相关,精子D F I与患者年龄呈正相关,故年龄是影响精子D N A 完整性的因素之一,并且精子D N A损伤会导致精子形态的异常,因此精子D F I和H D S应与常规精液参数等综合分析,这在男性的不育原因诊断㊁精子生殖能力评估和人工辅助生殖结局的预测上有着非常重要的作用,同时需清楚精子D N A损伤的内在机制,有㊃226㊃国际检验医学杂志2021年3月第42卷第5期I n t J L a b M e d,M a r c h2021,V o l.42,N o.5待后续进一步研究㊂参考文献[1]B A R R A T T C L.S e m e n a n a l y s i s i s t h e c o r n e r s t o n e o f i n-v e s t i g a t i o n f o r m a l e i n f e r t i l i t y[J].P r a c t i t i o n e r,2007,251 (1690):8-10.[2]E V G E N I E,C HA R A L A B O 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人类精子功能状况检查第一节精子-宫颈粘液相互作用检查一、体内试验（性交后试验postcoital testing PCT）1.时间的选择：性交后试验应尽可能紧靠排卵期进行。

排卵期可根据通常得临床指标，即通常得周期长度，基础体温、宫颈粘液变化和阴道细胞学检查，如有可能，也应测定血浆或尿中得雌孕激素水平及进行卵巢超声检查来确定。

嘱每对夫妇于试验前避免性生活。

重要的是要使性交后试验评价宫颈粘液得时间标准化，这一时间应是9-24小时内。

2.试验技术：选择不加润滑剂得窥阴器放入阴道，再用结核菌素注射器（不带针头），吸管或聚乙烯管在阴道后穹窿部吸取混合标本。

然后再用另一注射器或导管吸取宫颈腔中的粘液标本，并迅速地将这些标本置于载玻片上，盖上盖玻片，在相差显微镜下检查。

压制标本的标准厚度可用硅胶浸渍过直径为100μm 的玻璃微球支撑控制，这样做可以使测定粘液中的精子浓度标准化。

3.阴道混合标本：通常精子在阴道内2小时即死亡，检查阴道混合标本得目的在于证实精液确系曾存在于阴道内。

4.宫颈粘液标本：宫颈管下部的精子数目随性交后时间的推移而改变。

在性交后2-3小时内，在宫颈管下部积聚大量精子。

宫颈粘液中的精子活力分级问题，仍要依据世界卫生组织规定的标准，即：a级，快速直线前向的前向运动；b级，缓慢或呆滞得前向运动；c级，非前向性运动；d级，不活动精子。

5.结果的评价：正常妇女在周期中期与精液指标正常得男子性交后9-24小时内，宫颈内粘液在每高倍视野（HPF，400×）通常有50个以上得活动精子，其活力属于a,b两级，即相当于2500条以上精子/mm3。

每高倍视野中有20条或更多的“a”级前向运动的精子即可认为结果良好。

如每高倍视野中精子不足10条（＜500mm3），特别是只有缓慢或转圈得“b”级精子，则表现精子穿透能力减轻或宫颈粘液异常。

性交后试验的目的不仅是为了测定宫颈粘液中得活精子的数量，而更重要得是确定性交后一定时间内精子存活和运动情况。

何为精液微生物学检查？成都市青白江区妇幼保健院检验科 610300精液微生物学检查指的是对男性生殖道中任何部位引起的感染情况进行检查，都能够从精液中检查出微生物。

常见的微生物有大肠埃希菌、支原体、淋球菌以及金黄色的葡萄球菌等。

精液微生物学检查主要是通过涂片染色镜以及培养等方法来检查出男性精液中存在的微生物，该项检查能够及时发现男性体内影响身体的病菌体，能够为相关疾病的诊断和治疗奠定良好的基础。

一、精液微生物学检查的意义生殖道出现炎症是导致男性不育的重要原因，而精液的生成以及输送至相关部位并引发感染时，能够在男性的精液中检查出病原体。

精液微生物学检查能够判定男性生殖道引起炎症的病菌体，并为其合理服用抗生素要去提供有效的依据。

精液微生物学检查的结果能够明确诊断出患者的临床表现以及影像学的检查，明确患者引起疾病的病原体，为后期医生的诊断和治疗提供有效的指导意见。

另外，微生物培养后还能够展开药敏试验，有助于治疗临床的治疗情况，从而提高治疗的效果。

二、精液微生物学检查的方法精液微生物学检查的主要目的有评价男性的生育功能；为诊断和治疗男性的不育症状提供有效的参考；对诊断男性生殖系统潜在的疾病起辅助作用；输精管结扎术后的效果观察；为人工授精以及精子库筛选出优质的精子等。

精液检查前采集精液的方法类似于常规的方法，采集好精液后，将采集的精液送检，但是当温度低于20℃或者高于40℃时就会影响精子的活动，所以在冬季运送精液时，应该做好保暖措施，以免精液的活力发生变化，影响精液检查的准确性。

检查精液的方法有很多种，通过精液微生物学检查能够发现男性体内的病菌体，为男性不育症以及隐藏疾病的诊断和治疗提供指导性意见。

接下来我们就一起来看看精液微生物学检查的各种方法。

1、一般检查首先，测排出量。

精液完全被液化后要测定排出量，具有生育功能的男性每次射出的精液平均为3.5ml，精液的量与射精的频度呈现负相关。

精浆属于精子进行活动的介质，也会中和阴道内分泌出的酸性物质，避免精子的活力受到影响。