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第二章 气相色谱分析gas chromatographic analysis,GC第二节 色谱理论基础fundamental of chromatograph theory色谱理论需要解决的问题：色谱分离过程的热力学和动力学问题。
影响分离及柱效的因素与提高柱效的途径，柱效与分离度的评价指标及其关系。
组分保留时间为何不同色谱峰为何变宽组分保留时间：色谱过程的热力学因素控制；（组分和固定液的结构和性质）色谱峰变宽：色谱过程的动力学因素控制；（两相中的运动阻力，扩散）两种色谱理论：塔板理论和速率理论；一、塔板理论-柱分离效能指标1.塔板理论（plate theory ）半经验理论；将色谱分离过程比拟作蒸馏过程，将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复 （类似于蒸馏塔塔板上的平衡过程）；塔板理论的假设：(1) 在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到；(2) 将载气看作成脉动（间歇）过程；(3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略；(4) 每次分配的分配系数相同。
色谱柱长：L ，虚拟的塔板间距离：H ，色谱柱的理论塔板数：n ，则三者的关系为：n = L / H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为： 保留时间包含死时间，在死时间内不参与分配!2.有效塔板数和有效塔板高度•单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。
•用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。
222116545)()(./bR R W t Y t n ==•组分在t M 时间内不参与柱内分配。
需引入有效塔板数和有效塔板高度：3.塔板理论的特点和不足（1）当色谱柱长度一定时，塔板数 n 越大(塔板高度 H 越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，所得色谱峰越窄。
（2）不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同，用有效塔板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。
（3）柱效不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的分配系数K 相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。
二、塔板理论1．塔板理论的基本假设塔板理论是Martin和Synger首先提出的色谱热力学平衡理论。
它把色谱柱看作分馏塔，把组分在色谱柱内的分离过程看成在分馏塔中的分馏过程，即组分在塔板间隔内的分配平衡过程。
塔板理论的基本假设为：1）色谱柱内存在许多塔板，组分在塔板间隔（即塔板高度）内完全服从分配定律，并很快达到分配平衡。
2）样品加在第0号塔板上，样品沿色谱柱轴方向的扩散可以忽略。
3）流动相在色谱柱内间歇式流动，每次进入一个塔板体积。
4）在所有塔板上分配系数相等，与组分的量无关。
虽然以上假设与实际色谱过程不符，如色谱过程是一个动态过程，很难达到分配平衡；组分沿色谱柱轴方向的扩散是不可避免的。
但是塔板理论导出了色谱流出曲线方程，成功地解释了流出曲线的形状、浓度极大点的位置，能够评价色谱柱柱效。
2．色谱流出曲线方程及定量参数（峰高h和峰面积A）由色谱流出曲线方程可知：当t＝tR时，浓度C有极大值。
Cmax就是色谱峰的峰高。
因此：①当实验条件一定时（即σ一定），峰高h与组分的量C0（进样量）成正比，所以正常峰的峰高可用于定量分析。
②当进样量一定时，σ越小（柱效越高），峰高越高，因此提高柱效能提高HPLC分析的灵敏度。
由流出曲线方程对V(0~∞)求积分，即得出色谱峰面积A。
可见A相当于组分进样量C0，因此是常用的定量参数。
把Cmax＝h和Wh/2＝2.355σ代入上式，即得A＝1.064×Wh/2×h，此为正常峰的峰面积计算公式。
三、速率理论（又称随机模型理论）1．液相色谱速率方程1956年荷兰学者Van Deemter等人吸收了塔板理论的概念，并把影响塔板高度的动力学因素结合起来，提出了色谱过程的动力学理论--速率理论。
它把色谱过程看作一个动态非平衡过程，研究过程中的动力学因素对峰展宽（即柱效）的影响。
后来Giddings和Snyder等人在Van Deemter方程（后称气相色谱速率方程）的基础上，根据液体与气体的性质差异，提出了液相色谱速率方程（即Giddings方程）.2．影响柱效的因素1）涡流扩散（eddy diffusion）。
第二章 气相色谱分析gas chromatographic analysis,GC
第二节 色谱理论基础fundamental of chromatograph theory
色谱理论需要解决的问题:色谱分离过程的热力学与动力学问题。
影响分离及柱效的因素与提高柱效的途径,柱效与分离度的评价指标及其关系。
组分保留时间为何不同？色谱峰为何变宽？
组分保留时间:色谱过程的热力学因素控制;(组分与固定液的结构与性质)
色谱峰变宽:色谱过程的动力学因素控制;(两相中的运动阻力,扩散)
两种色谱理论:塔板理论与速率理论;一、塔板理论-柱分离效能指标
1、塔板理论(plate theory)
半经验理论;
将色谱分离过程比拟作蒸馏过程,将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复 (类似于蒸馏塔塔板上的平衡过程);塔板理论的假设:
(1) 在每一个平衡过程间隔内,平衡可以迅速达到;
(2) 将载气瞧作成脉动(间歇)过程;
(3) 试样沿色谱柱方向的扩散可忽略;
(4) 每次分配的分配系数相同。
色谱柱长:L ,虚拟的塔板间距离:H ,色谱柱的理论塔板数:n ,
则三者的关系为:
n = L / H 理论塔板数与色谱参数之间的关系为:
保留时间包含死时间,在死时间内不参与分配!2、有效塔板数与有效塔板高度
•单位柱长的塔板数越多,表明柱效越高。
•用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。
•组分在t M 时间内不参与柱内分配。
需引入有效塔板数与有效塔板高度: 3、塔板理论的特点与不足
(1)当色谱柱长度一定时,塔板数 n 越大(塔板高度 H 越小),被测组分在柱内被分配的次数越多,柱效能则越高,所得色谱峰越窄。
(2)不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同,用有效塔板数与有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时,应指明测定物质。
(3)柱效不能表示被分离组分的实际分离效果,当两组分的分配系数K 相同时,无论该色谱柱的塔板数多大,都无法分离。
(4) 塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果,也无法指出影响柱效的因素及提高柱效的途径。
二、 速率理论-影响柱效的因素
1、 速率方程(也称范弟姆特方程式)
H = A + B /u + C ·u
H :理论塔板高度,
u :载气的线速度(cm/s)
减小A 、B 、C 三项可提高柱效;
存在着最佳流速;
A 、
B 、
C 三项各与哪些因素有关？
A —涡流扩散项
2
22116545)()(
./b
R R W t Y t n ==222/1)(16)(54.5b R R W t Y t n ==理有效
有效有效n L H W t Y t n b
R R ===2'22/1')(16)(54.5
A = 2λdp
dp :固定相的平均颗粒直径λ:固定相的填充不均匀因子
固定相颗粒越小dp ↓,填充的越均匀,A ↓,H ↓,柱效n ↑。
表现在涡流扩散所引起的色谱峰变宽现象减轻,色谱峰较窄。
B /u —分子扩散项
B = 2 νD g
ν :弯曲因子,填充柱色谱,
ν<1。
D g :试样组分分子在气相中的扩散系数(cm 2·s -1)
(1) 存在着浓度差,产生纵向扩散;(2) 扩散导致色谱峰变宽,H ↑(n ↓),分离变差;(3) 分子扩散项与流速有关,流速↓,滞留时间↑,扩散↑;(4) 扩散系数:D g ∝(M 载气)-1/2 ;M 载气↑,B 值↓。
C ·u —传质阻力项
传质阻力包括气相传质阻力C g 与液相传质阻力C L 即:
C =(C g + C L )
k 为容量因子; D g 、D L 为扩散系数。
减小担体粒度,选择小分子量的气体作载气,可降低传质阻力。
2、载气流速与柱效——最佳流速
载气流速高时:传质阻力项就是影响柱效的主要因素,流速Ý,柱效ß。
载气流速低时:分子扩散项成为影响柱效的主要因素,流速Ý,柱效Ý 。
H - u 曲线与最佳流速: 由于流速对这两项完全相反的作用,流速对柱效的总影响使得存在着一个最佳流速值,即速率方程式中塔板高度对流速的一阶导数有一极小值。
以塔板高度H 对应载气流速u 作图,曲线最低点的流速即为最佳流速。
3、 速率理论的要点
(1)组分分子在柱内运行的多路径与涡流扩散、浓度梯度所造成的分子扩散及传质阻力使气液两相间的分配平衡不能瞬间达到等因素就是造成色谱峰扩展柱效下降的主要原因。
(2)通过选择适当的固定相粒度、载气种类、液膜厚度及载气流速可提高柱效。
(3)速率理论为色谱分离与操作条件选择提供了理论指导。
阐明了流速与柱温对柱效及分离的影响。
(4) 各种因素相互制约,如载气流速增大,分子扩散项的影响减小,使柱效提高,但同时传质阻力项的影响增大,又使柱效下降;柱温升高,有利于传质,但又加剧了分子扩散的影响,选择最佳条件,才能使柱效达到最高。
三、分离度
塔板理论与速率理论都难以描述难分离物质对的实际分离程度。
即柱效为多大时,相邻两组份能够被完全分离。
难分离物质对的分离度大小受色谱过程中两种因素的综合影响:保留值之差──色谱过程的热力学因素;区域宽度──色谱过程的动力学因素。
色谱分离中的四种情况如图所示:
讨论:色谱分离中的四种情况的讨论:
① 柱效较高,△K (分配系数)较大,完全分离;
g f g D d k k C 22)1(01.0⋅+=L
f L D d k k C 22)1(32⋅+⋅=
② △K 不就是很大,柱效较高,峰较窄,基本上完全分离;
③柱效较低,△K 较大,但分离的不好;
④ △K 小,柱效低,分离效果更差。
分离度的表达式:
R =0、8:两峰的分离程度可达89%;
R =1:分离程度98%;
R =1、5:达99、7%(相邻两峰完全分离的标准)。
令W b(2)=W b(1)=W b (相邻两峰的峰底宽近似相等),引入相对保留值与塔板数,可导出下式:
讨论:
(1)分离度与柱效 分离度与柱效的平方根成正比,r 21一定时,增加柱效,可提高分离度,但组分保留时间增加且峰扩展,分析时间长。
(2)分离度与r 21 增大r 21就是提高分离度的最有效方法,计算可知,在相同分离度下,当r 21增加一倍,需要的n 有效 减小10000倍。
增大r 21的最有效方法就是选择合适的固定液。
例题1:
在一定条件下,两个组分的调整保留时间分别为85秒与100秒,要达到完全分离,即R =1、5 。
计算需要多少块有效塔板。
若填充柱的塔板高度为0、1 cm,柱长就是多少？
解: r 21= 100 / 85 = 1、18
n 有效 = 16R 2 [r 21 / (r 21 —1) ]2 = 16×1、52 ×(1、18 / 0、18 ) 2
= 1547(块)
L 有效 = n 有效·H 有效 = 1547×0、1 = 155 cm
即柱长为1、55米时,两组分可以得到完全分离。
例题2:
在一定条件下,两个组分的保留时间分别为12、2s 与12、8s,计算分离度。
要达到完全分离,即R =1、5,所需要的柱长。
解:
)
(.)
()()(/)(/)()()()()()(121221121212699122Y Y t t W W t t R R R b b R R +-=+-=
161112212121121221211212有效n r r W t t t r W t t t W t t W W t t R b b b b b R R R R R R R R R R )()
()()(''
'
''''')()()()()()()()()()()()(-=
⋅-=⋅-=-=+-=
有效有效H r r R L r r R n ⋅-=-=2212122
212121
16116)()(
分离度:
塔板数增加一倍,分离度增加多少？8533.036008.12448133.03600
2.1244
2
211=⨯===⨯==n t W n t W R b R b 72.08133.08533.0)2.128.12(2=+-⨯=R m L R R L 34.4172.05.1212122=⨯⎪⎭⎫ ⎝⎛=⨯⎪⎪⎭
⎫ ⎝⎛=。
