骨髓移植修复辐射损伤小鼠卵巢的实验研究

芝麻酚对小鼠骨髓c-kit阳性细胞辐射损伤的保护作用研究路璐;张俊伶;李德冠;孟爱民【摘要】目的：探讨芝麻酚对小鼠骨髓c-kit阳性细胞辐射损伤的保护作用，进一步探讨其可能的作用机制。

方法经免疫磁珠细胞分选法获得小鼠骨髓c-kit阳性细胞，设空白对照组、单加药组和照射剂量1 Gy、4 Gy的照射加药组。

后2组均加入终浓度为10-8～10-3 mol/L的芝麻酚，照射加药组在照射前30 min加药，加药后继续培养18 h。

采用生物发光法检测小鼠骨髓c-kit阳性细胞的细胞活力，甲基纤维素半固体培养法检测克隆形成能力，流式细胞术检测细胞凋亡水平。

结果与对照组比较，1 Gy和4 Gy射线照射后小鼠c-kit阳性细胞的细胞活力分别下降59.52％和79.35％（P＜0.05），集落形成数量分别下降40.38％和87.69％（P ＜0.05）；在10-8～10-6 mol/L浓度范围内，芝麻酚可显著提高小鼠c-kit阳性细胞细胞活力和集落形成数量，但对细胞凋亡无影响。

结论芝麻酚对小鼠骨髓c-kit阳性细胞辐射损伤的保护作用可能是通过提高造血祖细胞的增殖能力。

%Objective To investigate the protective effect of sesamol on radiation injury mouse bone marrow c-kit+cell,and further explore its possible mechanism.Methods Mouse bone marrow c-kit+cells were collected by immunomagnetic cell sorting method.There were 2 groups in the study:single dosing group and radiation plus drug group(doses of irradiation included 1 Gy and 4 Gy),and 10 -8 ~10 -3 mol/L sesamol were co-cultured with mouse bone marrow c-kit+cell half hour before irradiation exposure,cells were then cultured for 18 hours under the conventional culture conditions (37℃ and 5% CO2 ).The viability of mouse bone marrow c-kit+cells were measured by bioluminescence.The ability ofcolony-forming units were detected by CFU-GM and apoptotic rate of c-kit+cells were detected by Annexin V/PI antiapoptotic assay. Results Compared with control group,after 1 Gy and 4 Gy irradiated,cell viability of mouse bone marrow c-kit+cells were decreased 59.52% and79.35%,respectively(P<0.05),the number of colony-forming were decreased 40.38% and 87.69%,respectively(P<0.05 ).Cell viability of c-kit+cells and the number of colonies formed were significantly increased with sesamol concentration between 10 -8 ~10 -6 mol/L,but not improve apoptosis rate.Conclusion Sesamol has protective effect on irradiation-induced injury in mouse bone marrow c-kit+cells,the mechanism of which may be related to the ability of hematopoietic progenitor cells proliferation.【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】4页(P1-4)【关键词】芝麻酚;c-kit阳性细胞;骨髓;辐射损伤;辐射防护【作者】路璐;张俊伶;李德冠;孟爱民【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室，天津 300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室，天津 300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室，天津300192;中国医学科学院北京协和医学院放射医学研究所天津市放射医学与分子核医学重点实验室，天津 300192【正文语种】中文【中图分类】R5511.1 材料1.1.1 实验动物：C57BL／6小鼠50只，雄性，SPF级，8～10周龄，体质量18～22 g，购自北京维通利华实验动物有限公司，合格证号：SCXK（京）2009-0017，由中国医学科学院生物医学工程研究所动物实验中心提供，SPF级条件饲养。

浙江医学2018年第40卷第15期随着医疗水平的不断提高，治疗方法的不断完善及新技术的临床应用，肿瘤患者的生存期也得到了明显延长。

对于女性肿瘤患者，治疗所带来的医源性损害也逐渐得到重视。

化疗及放疗常见的一个远期并发症是卵巢毒性。

据不完全统计，美国每年大约有4000例青春期前女性因不同的恶性肿瘤接受化疗或放疗，而卵巢早衰是化疗和放疗伴随产生的最普遍的远期后果[1]。

卵巢储备功能是指卵巢皮质区卵泡生长、发育、形成可受精的卵母细胞的能力，它反映女性的生育能力[2-3]。

临床上通过年龄、卵巢形态与体积、激素水平、细胞因子来预测卵巢储备功能。

人出生时卵巢包含有大约200万个卵泡，其中仅有300~500个卵泡在生育期成熟并排出成熟卵母细胞，其余卵泡和卵母细胞逐渐闭锁、凋亡。

卵巢发育卵泡的能力和卵母细胞质量的下降，导致女性生育能力的下降称为卵巢储备功能降低，其病因至今不明确。

有研究认为其与自身免疫、遗传缺陷、放化疗史、盆腔手术史、基因突变和特发性原因等相关[4-5]。

本文就放化疗对卵巢功能的影响、卵巢功能的保护策略作一综述。

1放化疗对卵巢功能的影响1.1放疗卵巢为放疗极度敏感器官，较低剂量即可引起卵巢功能不可逆性衰竭，从而导致患者提早进入绝经期，使其生存质量严重下降[6]。

体外实验显示电离辐射可直接导致卵细胞DNA 损伤，诱导原始卵泡和成熟卵泡凋亡；1次照射2Gy 可损伤约50%卵泡细胞[7]。

Wal -lace 等[8]研究发现，单次剂量＞8.0Gy 可造成几乎所有女性卵巢功能永久性丧失，而剂量＜1.5Gy 对卵巢功能基本无影响。

1.5~8.0Gy 剂量间卵巢功能能否保存则取决于患者年龄。

其原因可能是年轻患者拥有更多的原始卵泡，因此需要更高剂量的射线才能导致卵巢功能损伤[9]。

总体来说，年纪越大，卵巢储备功能越差，对射线的耐受度越差，需要更加严格限制放疗剂量才能保留卵巢功能。

1.2化疗化疗能引起女性不孕和干扰女性内分泌，但其对卵巢影响的生物学机制至今仍然未知。

第14卷 第3期2023年5月Vol. 14 No.3May 2023器官移植Organ Transplantation ·论著·间充质干细胞来源的细胞外囊泡对放射性肝损伤的保护作用及其机制研究陈池 萧家麒 隋昕 张英才 【摘要】 目的 探讨间充质干细胞来源的细胞外囊泡（MSC-EV ）对照射诱导的小鼠放射性肝损伤和肝细胞系损伤的保护作用及相关机制。

方法 分别将C57BL/6小鼠随机分为空白组、造模组和MSC-EV 治疗组（治疗组），每组9只；将AML12细胞随机分为对照组、照射组和MSC-EV 干预组（干预组）。

分别通过一次性 15 Gy 和6 Gy X 线照射建立动物和细胞放射性损伤模型，照射后48 h 取小鼠的肝组织与血清进行相关实验，照射后15 h 对细胞进行相关检测。

检测血清丙氨酸转氨酶（ALT ）、天冬氨酸转氨酶（AST ）水平，肝组织和细胞丙二醛（MDA ）含量，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-qPCR ）检测白细胞介素（IL ）-1β、IL-6、转化生长因子（TGF ）-β、CXC 趋化因子配体（CXCL ）10 信使RNA （mRNA ）相对表达量，肝组织苏木素-伊红（HE ）染色进行肝组织病理损伤评分，脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP 缺口末端标记（TUNEL ）染色法、碘化丙啶（PI ）染色法分别检测肝组织、细胞凋亡情况，蛋白质印迹法测定谷胱甘肽过氧化酶（GPX ）4、铁死亡抑制蛋白（FSP ）1的蛋白表达情况，二氢乙啶（DHE ）染色检测活性氧簇（ROS ）产生水平，并检测线粒体通透性转换孔（mPTP ）荧光强度。

结果 与空白组比较，造模组小鼠血清AST 、ALT 水平均增高，小鼠肝组织IL-1β、TGF-β和CXCL10 mRNA 相对表达量均增加，MDA 含量增加，肝损伤评分升高，细胞凋亡率增加，细胞内ROS 水平升高，小鼠肝组织GPX4、FSP1蛋白相对表达量下降，差异均有统计学意义（均为P <0.05）；与造模组比较，治疗组小鼠血清AST 、ALT 水平均降低，小鼠肝组织IL-1β、TGF-β和CXCL10 mRNA 相对表达量均下降，MDA 含量减少，肝损伤评分降低，细胞凋亡率下降，细胞内ROS 水平降低，小鼠肝组织GPX4、FSP1蛋白相对表达量增加，差异均有统计学意义（均为P <0.05）。

闫 伟1，2 1. 河北北方学院药学系，2. 保定爱晖药业，【摘要】人类的通讯设备、产生以及传播过程中会向周围空间泄露电磁能量，统都有损伤效应，该文主要从电磁辐射的生物学应用、磁辐射的中药材等几方面进行综述，【关键词】电磁辐射；【中图分类号】射对人体各大系统都有损伤效应。

热效应，非热效应以及累积效应即是人们所公认的电磁辐射，也是对人体产生损伤效果的主要因素。

其中又以累积效应对人体的损伤较为严重。

当电磁辐射照射人体时，人体就会产生损伤效应。

若在人体的损伤尚未来得及自我修复之前，再次受到电磁波辐射，其伤害程度就会发生累积，经过几次照射就会产生累积效应，严重危害人体健康。

电磁辐射对人体的危害已有大量文献报道，其中对神经系统的危害备受关注。

本文对电磁辐射及其生物医学应用、神经细胞的种类及其功能意义、电磁辐射对神经细胞的影响以及相关机制、防治电磁辐射损伤的中药材等方面进行综述。

1 电磁波及生物医学应用1.1 电磁波及电磁辐射电磁波是由电磁和磁场及两个磁场之间共同作用相互变化产生的。

电磁波的产生以及传播过程中会向周围空间泄露电磁能量，这种现象被称为电磁辐射。

大体上电磁辐射的分类有两种类型，按电磁辐射产生的原因可将电磁辐射分为自然电磁辐射和人为电磁辐射两类。

自然电磁辐射的产生是通过自然现象引发的，如打雷、太阳风暴、极光等，自然电磁辐射对动物产生的电磁干扰比较大并且波及的范围很广。

人为电磁辐射的产生主要由人们使用的各种电子仪器与通信设备引起的，如手机、雷达等。

我们受到人为电磁辐射的可能性比较大，而且危害比较严重。

此外，电磁辐射也可以根据波长以及频率分为各种类型（Tab.1）。

1.2 电磁波的生物医学应用1.2.1 促进创伤愈合研究发现一定条件的电磁波照射可产生促进创伤愈合的作用。

黄美生等［1］使用手术将绵羊臀部进行人工创伤处理后，采用特定电磁波谱治疗器（电压220 V，功率250 W）进行照射治疗。

研究发现，特定电磁波谱疗法（special electromagnetic spectrum therapy，TDP）产生的特定电磁波谱具有消除炎症、止痛、改善人体微循环、加快新陈代谢等作用，能够有效调动人体生理功能，对促进创伤愈合具有显著效果。

当归注射液对辐射损伤后小鼠卵巢颗粒细胞凋亡影响的实验研
究
张端莲;邓成国;杨虹;杨勇;崔冶建
【期刊名称】《山东中医杂志》
【年(卷),期】2003(22)12
【摘要】目的 :探讨当归注射液对辐射损伤的卵巢颗粒细胞凋亡的影响。

方法 :应用当归注射液对 6 0 Co- γ射线辐射损伤后的小鼠卵巢组织给予治疗 ,连续给药 30 d,通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测治疗后的卵巢颗粒细胞凋亡率。

结果 :实验用药组卵巢颗粒细胞凋亡率显著低于实验对照组 (P <0 .0 0 1)。

结论
【总页数】4页(P743-746)
【关键词】当归注射液;辐射;卵巢颗粒细胞;凋亡;小鼠
【作者】张端莲;邓成国;杨虹;杨勇;崔冶建
【作者单位】武汉大学医学院;郧阳医学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285.8
【相关文献】
1.当归多糖对辐射损伤小鼠骨髓单个核细胞凋亡的影响 [J], 何晓莉;陈凤鸣;吴宏;肖倩
2.当归对辐射损伤后小鼠卵巢组织影响的实验研究 [J], 张端莲;陕声国
3.当归对60Co—射线辐射损伤后小鼠卵巢恢复过程的实验... [J], 张瑞莲;张世明
4.当归对60Co—γ 射线辐射损伤后小鼠卵巢恢复过程中超微结构... [J], 张端莲;张世明
5.当归对辐射损伤后小鼠卵泡影响的定量研究 [J], 张端莲;王松山;余墨声;张玲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

小鼠子宫内膜干细胞损伤修复调控机制的研究发表时间：2018-12-13T15:06:46.090Z 来源：《医药前沿》2018年34期作者：叶国柳靳丽杰王玲玲周玉[导读] 人类子宫内膜是一种高度再生组织，一个生育年龄妇女的子宫内膜要经历超过400个周期以上的增长，分化，和脱落。

（蚌埠医学院第一附属医院妇产科安徽蚌埠 233004）【摘要】目的：本研究组通过对经典Wnt信号通路的干涉，观察其对子宫内膜损伤后修复的影响，探讨小鼠子宫内膜干细胞损伤修复调控机制的研究，为子宫内膜损伤修复障碍及其引发疾病的干细胞治疗方法提供新的研究思路。

方法：利用Wnt/β-catenin信号通路转基因报告鼠（BAT-gal小鼠）建立子宫内膜损伤模型，了解Wnt信号分布和表达的变化；western blot和QPCR等方法检测来证实Wnt信号通路激动剂Wnt-7a和阻断剂SFRP-2后Wnt信号通路的调节变化。

通过直接荧光显微镜观察和免疫组化染色后显微镜下观察,证实产后小鼠子宫内膜边缘（SP）群干/祖细胞分离纯化并进行培养后移植到损伤的宫腔内，能在宫腔内存活和迁移并且对损伤内膜组织发挥修复作用。

结果：A.通过特殊的X-gal染色确证Wnt/β-catenin信号通路存在于子宫内膜损伤修复中并起着重要作用。

证实产后小鼠子宫内膜边缘（SP）群干/祖细胞分离纯化并进行培养后移植到损伤的宫腔内，能在宫腔内存活和迁移并且对损伤内膜组织发挥修复作用。

证实Wnt/β-catenin信号通路在（SP）群干/祖细胞修复损伤子宫内膜中的调节作用。

结论：Wnt/β-catenin信号通路在（SP）群干/祖细胞修复损伤子宫内膜中的调节作用。

【关键词】子宫内膜干细胞；调控；损伤修复【中图分类号】R324 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）34-0176-021.引言人类子宫内膜是一种高度再生组织，一个生育年龄妇女的子宫内膜要经历超过400个周期以上的增长，分化，和脱落。

科技风2021年5月心理论研究DOI：10.19392/kf1671-7341.202115072SASP与细胞衰老的研究进展杨丽华辽宁省大连大学医学院辽宁大连116622摘要：衰老相关分泌表型（SASP）是细胞衰老后分泌的一系列炎症细胞因子、趋化因子、生长因子和蛋白酶，与多种生理过程和衰老相关疾病密切相关，是细胞衰老的特征。

SASP与干细胞、成纤维细胞、上皮细胞、內皮细胞及平滑肌细胞的衰老有关。

对SASP与细胞衰老关系的探究，有助于了解细胞衰老多种生理过程和衰老相关疾病的研究。

关键词:细胞衰老；衰老相关分泌表型；干细胞;成纤维细胞细胞衰老是生物体在性成熟后出现的细胞生理功能进行性减退，是一种细胞状态，与多种生理过程和衰老相关疾病密切相关。

细胞衰老和衰老相关分泌表型（senescence-as­sociated secretoc phenotype,SASP）已经成为衰老和很多慢性疾病的主要驱动因素，包括癌症、神经退行性变、心脏病和骨关节炎。

近几年研究发现,SASP与干细胞衰老、成纤维细胞衰老、上皮细胞衰老、内皮细胞衰老及平滑肌细胞衰老有关。

本文对SASP与细胞衰老的研究进行综述，旨在为细胞衰老多种生理过程的研究及衰老相关疾病治疗策略提供一定理论基础。

1SASP的概述2008年，Coppe J P等首次提出SASP这个概念。

SASP 是细胞衰老后分泌的一系列炎症细胞因子、趋化因子、生长因子和蛋白酶。

SASP是细胞衰老的表现特征，影响细胞的微环境，与细胞衰老、个体老化和衰老相关的疾病有密切联系。

2SASP与细胞衰老2.1SASP与干细胞衰老成体干细胞/祖细胞是存在于组织中的一小群细胞，在其运作的器官的所有细胞类型中，具有分化的潜力，干细胞/祖细胞衰老与生理和病理过程密切相关。

SASP能够将衰老扩散到附近和远处的非衰老细胞。

用去卵巢（OVX）小鼠作为雌激素缺乏模型，研究发现OVX小鼠的骨髓间充质干细胞（BMSCs）在体内外都表现衰老表型，且JAK2/STAT3信号通路激活,SASP因子分泌上调。

小鼠辐照骨髓移植的步骤
1. 准备骨髓移植受体小鼠：受体小鼠在接受辐射1周前，应饲喂酸化并添加抗生素的灭菌水。

接受辐射后2周内，小鼠应继续饲喂酸化并添加抗生素的灭菌水，之后可改喂酸化但不含抗生素的饮用水。

对于C57BL6/J小鼠，辐射剂量是10 Gy的伽马射线，受体小鼠要在4小时内接受尾静脉骨髓移植手术。

2. 准备移植用供体骨髓细胞：收获供体小鼠的股骨，并将其保存在RPM11640（2% FBS，10 U/mL肝素+青霉素+链霉素）中。

用注射器冲洗股骨骨髓腔，并用灭菌的40 μm细胞滤器过滤骨髓细胞。

再用无血清的RPMI1640冲洗细胞，4℃离心5分钟，转速2000 r/mi。

用25 mL无血清RPMI重悬细胞，并进行细胞计数。

最后，用无血清RPMI1640调整细胞浓度至1x10 cells/mL。