酶放大免疫法和微粒子酶联免疫法监测地高辛浓度的对比分析

酶联免疫吸附法和微粒子酶免疫分析法检测HBsAb的临床效果对比分析作者：陈李好来源：《中外医学研究》2016年第33期【摘要】目的：对酶联免疫吸附法和微粒子酶免疫分析法检测HBsAb的临床效果进行对比。

方法：选择196份接种乙肝疫苗后血清标本作为研究对象，分别采取酶联免疫吸附法和微粒子酶免疫分析法检测HBsAb，并对两种方法的检测阳性率和HBsAb最低检出结果进行对比分析。

结果：196份标本经酶联免疫吸附法检测，检出HBsAb阳性标本139份，阳性率为70.92%；经微粒子酶免疫分析法检测，检出HBsAb阳性标本157份，阳性率为80.10%。

微粒子酶免疫分析法检测阳性率较酶联免疫吸附法高（P【关键词】酶联免疫吸附法；微粒子酶免疫分析法； HBsAb；定量检测；对比doi：10.14033/ki.cfmr.2016.33.024 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2016）33-0048-02目前在国内，大部分医院的检验科会采取酶联免疫吸附法对血清乙型肝炎表面抗原（HBsAg）以及乙型肝炎表面抗体（HBsAb）展开检测。

酶联免疫吸附法在检验工作中，具有操作简单等优势，但是值得注意的是，其灵敏度、重复性相对较差，很容易受到钩状效应、标本浓度等因素的影响，进而出现假阴性结果，造成漏诊或者是误诊[1]。

近几年，随着科学技术的提高，微粒子酶免疫分析法问世，文献[2]报道，微粒子酶免疫分析法在HBsAb检测中，存在一定的优势。

有研究表明儿童在接种乙肝疫苗后较成人更易产生乙型肝炎表面抗体[3]，本次研究中，出于对酶联免疫吸附法和微粒子酶免疫分析法检测HBsAb的临床效果进行对比的目的，对196份接种乙肝疫苗后血清标本分别采取酶联免疫吸附法和微粒子酶免疫分析法检测HBsAb，并对比分析结果，现汇报如下。

1 资料与方法1.1 一般资料研究中资料来源于笔者所在医院收集到的接种乙肝疫苗后血清标本，共选择196份作为研究对象。

2种酶免疫方法在大型生化仪上检测药物浓度的应用评估李甲勇;刘畅;王弘明;张如霖【摘要】目的评估均相酶免疫法与酶放大免疫法测定血清中苯妥英、丙戊酸、茶碱、地高辛、甲氨蝶呤、卡马西平、霉酚酸及全血环孢霉素A 8种药物浓度的一致性.方法用均相酶免疫法和酶放大免疫法检测BIO-RAD 3个水平及原厂的质控品,计算批内、批间精密度.收集用于每种药物浓度检测的临床样本120例,其中异常样本超过30%,另每种药物再收集30例同源血浆样本(除环孢霉素A外),在SIEMENS ADVIA 2400全自动生化分析仪上用2种检测方法平行测定,观察2种方法检测临床样本的一致性.结果均相酶免疫法和酶放大免疫法检测质控品批内、批间精密度,结果均在控且稳定性良好.2种检测方法测定环孢霉素A、苯妥英、丙戊酸、茶碱、地高辛、甲氨蝶呤、卡马西平及霉酚酸浓度的总体相关性较好(r值分别为0.997、0.993、0.997、0.996、0.988、0.994、0.999、0.997),各回归方程检验均具有统计学意义(P<0.001).2种检测方法测定结果差异均无统计学意义(P>0.05).2种检测方法在各药物医学决定水平处的预期偏移均小于规定允许误差范围.除环孢霉素A外,其余药物检测同源血清与血浆样本结果的一致性好,回归方程检验均有统计学意义(P<0.01),且配对t检验显示差异均无统计学意义(P>0.05).结论均相酶免疫法和酶放大免疫法在SIEMENS ADVIA 2400全自动生化分析仪上检测苯妥英、丙戊酸、茶碱、地高辛、甲氨蝶呤、卡马西平、霉酚酸及环孢霉素A 8种药物浓度具有较好的一致性.%Objective To evaluate the consistency of homogeneous enzyme immunoassay and enzyme-amplified immunoassay in the determinations of phenytoin,valproicacid,theophylline,digoxin,methotrexate, carbamazepine and mycophenolic acid in serum and cyclosporine A in whole blood with 8 drugconcentrations. Methods Homogeneous enzyme immunoassay and enzyme-amplified immunoassay were used to determine BIO-RAD with 3 concentrations and original quality control products,and the within-run and between-run precisions were calculated. A total of 120 clinical samples were collected for each drug concentration,which more than 30%of them were abnormal. Except for cyclosporine A,30 homologous plasma samples were collected for each drug concentration. Using SIEMENS ADVIA 2400 automatic biochemical analyzer,homogeneous enzyme immunoassay and enzyme-amplified immunoassay were performed parallelly,and the consistency of them was evaluated. Results The within-run and between-run precisions of homogeneous enzyme immunoassay and enzyme-amplified immunoassay were good,and there was a good stability. The overall correlation of each drug concentration was good,and r were 0.997 for cyclosporine A,0.993 for phenytoin,0.997 for valproic acid,0.996 for theophylline, 0.988 for digoxin,0.994 for methotrexate,0.999 for carbamazepine and 0.997 for mycophenolic acid. All the regression equations were significant statistically (P<0.001). There was no statistical significance for the results of the 2 methods(P>0.05). The expected bias of each drug concentration at medical decision level was in allowable error range. The consistency of homologous serum and plasma samples was good,except for cyclosporine A, and each regression equations were significant statistically(P<0.01),and the difference of paired t-test wasnot&nbsp;significant statistically (P>0.05). Conclusions The results of phenytoin,valproic acid,theophylline,digoxin,methotrexate,carbamazepine,mycophenolic acid and cyclosporine A with 8 drug concentrations have good consistency between the 2 methods by SIEMENS ADVIA 2400 automatic biochemical analyzer.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2017(032)004【总页数】5页(P311-315)【关键词】均相酶免疫法;酶放大免疫法;生化分析仪;药物浓度;一致性【作者】李甲勇;刘畅;王弘明;张如霖【作者单位】上海市第一人民医院检验科,上海 200080;上海市第一人民医院检验科,上海 200080;上海市第一人民医院检验科,上海 200080;上海市第一人民医院检验科,上海 200080【正文语种】中文【中图分类】R446.61药物浓度监测是以药代动力学原理为指导，分析药物在血液中的浓度，用以评价疗效或确定给药方案，使给药方案个体化，以提高药物治疗水平，从而达到临床安全、有效、合理用药的目的。

常见化学发光免疫分析技术比较1、化学发光免疫分析化学发光免疫分析chemiluminescence immunoassay,CLIA,英音：,kemi,lju:mi'nesəns ,imju:nəuə'sei是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术;是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术;CLIA是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术;是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术;1.1、化学发光免疫分析原理化学发光免疫分析包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统;化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子hv , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额;免疫反应系统是将发光物质在反应剂激发下生成激发态中间体直接标记在抗原化学发光免疫分析或抗体免疫化学发光分析上, 或酶作用于发光底物;1.2、化学发光免疫分析类型化学发光免疫分析法以标记方法的不同而分为两种:1化学发光标记免疫分析法;2酶标记、以化学发光底物作信号试剂的化学发光酶免疫分析法1.2.1 化学发光标记免疫分析化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析CL IA , 是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法;常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物-acridiniumester AE , 是有效的发光标记物,其通过起动发光试剂NaOH-H2O2作用而发光, 强烈的直接发光在一秒钟内完成, 为快速的闪烁发光;吖啶酯作为标记物用于免疫分析, 其化学反应简单、快速、无须催化剂; 检测小分子抗原采用竞争法, 大分子抗原则采用夹心法, 非特异性结合少, 本底低; 与大分子的结合不会减小所产生的光量, 从而增加灵敏度;1.2.2 化学发光酶免疫分析从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析chemiluminescent enzyme immunoassay,CLEIA , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂, 操作步骤与酶免分析完全相同: 以酶标记生物活性物质如酶标记的抗原或抗体进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物, 在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定;目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶HRP 和碱性磷酸酶AL P , 它们有各自的发光底物;12.2.1 HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺3-氨基邻苯二甲酰肼,luminol , 或其衍生物如异鲁米诺4-氨基邻苯二甲酰肼 , 是一类重要的发光试剂;其结构如图4 所示;鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行, 在过氧化物酶及活性氧过氧化阴离子O2- , 单线态氧1O2 , 羟自由基OH· , 过氧化氢H2O2存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm;早期用鲁米诺直接标记抗原或抗体 , 但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响;近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂N aOH-H2O2作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度;Kodak AmerliteTM 半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的;1.2.2.2增强发光酶免疫分析enhanced luminescence enzyme immunoassay, ELEIA在发光系统中加入增强发光剂, 如对2碘苯酚等, 以增强发光信号, 并在较长时间内保持稳定, 便于重复测量, 从而提高分析灵敏度和准确性;在全自动分析仪上, 还可通过计算机严密控制, 进行自动操作, 如加试剂, 混合, 温育, 洗涤, 加发光试剂, 发光计数, 数据处理, 绘制标准曲线, 直至完成病人血清样品的分析并打印出结果;Am erliteTM 发光增强酶免分析系统用荧光素、噻唑等增强剂, 其发光时间可持续长达20min, 试剂盒有甲状腺功能检测的促甲状腺素、三碘甲腺原氨酸、甲状腺素、甲状腺素结合球蛋白、游离甲状腺素, 与性激素有关的有促黄体激素、促卵泡激素、人绒毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睾酮, 以及其他方面的如癌胚抗原、铁蛋白、地高辛等;1.2.2.3 ALP标记的CLEIA所用发光底物为环1, 2-二氧乙烷衍生物,,用于化学发光酶免分析底物而设计的分子结构中包含起稳定作用的金刚烷基, 其分子中发光基团为芳香基团和酶作用的基团, 在酶及起动发光试剂作用下引起化学发光;最常使用的底物AMPPD 3-2-spiroadamatane-4-methoxy-4-3-phosphoryloxy-phenyl-1,2-dioxetane Dioxetane中文名为: 3-2-螺旋金刚烷-4-甲氧基-4-3-磷氧酰-苯基-1,2-二氧环乙烷;在碱性磷酸酶ALP 作用下, 磷酸酯基发生水解而脱去一个磷酸基, 得到一个中等稳定的中间体AMPD 半寿期为2-30min , 此中间体经分子内电子转移裂解为一分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子, 当其回到基态时产生470nm 的光, 可持续几十分钟如图5;AMPPD 为磷酸酯酶的直接化学发光底物, 可用来检测碱性磷酸酯酶或酶和抗体、核酸探针及其它配基的结合物;可检测到碱性磷酸酯酶的浓度为10-15mol/L ;美国DPC公司的Immulite全自动酶放大发光免疫分析仪, 以碱性磷酸酶为标记物, 以金刚烷作发光底物, 测定灵敏度相当于10- 21mol/mL的酶, 采用聚苯乙烯珠作载体, 其检测水平已能达到10- 12g/mL;AMPPD是一种生物化学领域中最新的超灵敏的碱性磷酸酶底物,其特点：反应速度快,在很短时间内提供正确可靠的结果;在它的分子结构中有两个重要部分,一个是联接苯环和金刚烷的二氧四节环,它可以断裂并发射光子；另一个是磷酸根基团,它维持着整个分子结构的稳定;在通常情况下,这种化合物很稳定;但是当有碱性磷酸酶存在时,DioxetanePhosphate作为酶的底物会在酶的催化一脱去磷酸根基团,形成一个不稳定的中间体;这个中间体随即自行分解二氧四节环断裂,同时发射光子;该试剂采用微粒子化学发光技术,采用最新磁性微粒,用以包被抗体;用碱性磷酸酶ALP标记抗原抗体;经过普通抗原抗体反应,碱性磷酸酶结合在微粒子上,碱性磷酸酶的结合量同病人血清中的待测物质成比例;经过洗涤反应管两边有磁场,磁性微粒包被的抗原抗体结合物被吸附在管子两边,其余游离部分被抽吸掉,最后加入发光底物DioxetanePhosphate,5分钟后,仪器通过光电倍增管检测反应的发光强度;AMPPD是碱性磷酸酶的化学发光底物,在适宜的缓冲液中,随着酶的催化水解作用,AMPPD分解成AMP-D,后者发出强度很高的光信号,其发光的速度取决于碱磷酶的浓度;当碱磷酶偶合到杂交的探针时,便可以通过此系统检测到杂交分子的存在量;2微粒体发光免疫分析微粒体发光免疫分析microparticle luminescence enzyme immunoassay,MLEIA ,该免疫分析技术有两种方法：一种是小分子抗原物质的测定采用竞争法;另一种是大分子的抗原物质测定采用双抗体夹心法;该仪器所用固相磁粉颗粒极微小,其直径仅1.0μm,这样大大增加了包被表面积,增加抗原或抗体的吸附量,使反应速度加快,也使清洗和分离更简便,从而减少污染,降低交叉污染概率;反应中使用碱性磷酸酶ALP标记抗原或抗体,作用于其底物二氧乙烷磷酸酯,由其在激发态与基态的动力学变化中发生发光反应;2.1、竞争反应其原理是：用过量包被磁颗粒的抗体,与待测的抗原和定量的标记吖啶酯抗原同时加入反应杯温育,其免疫反应的结合形式有两种,一是标记抗原与抗体结合成复合物；二是测定抗原与抗体的结合形式;如受检标本中含有待测抗原,则与标记抗原以同样的机会与磁颗粒包被的抗体结合,竞争性地占去了吖啶酯标记抗原与磁颗粒包被的抗体结合的机会,使吖啶酯标记抗原与磁颗粒包被的抗体的结合量减少;由于磁颗粒包被的抗体是过量的,足以与待测抗原结合;2.2、双抗体夹心法：其原理是：标记抗体与被测抗原同时与包被抗体结合成一种反应形式,即包被抗体-测定抗原-发光抗体的复合物;具体讲是以顺磁性微珠作为载体包被抗体,利用磁性微珠能被磁场吸引,在磁场的作用下发生力学移动的特性,迅速捕捉到被测抗原,当加入标本后,标本中的抗原与磁性抗体形成复合物,在磁力的作用下,协助该复合物快速地与其他非特异性物质分离,使抗原-抗体结合反应的时间缩短,测定时间减少,降低了交叉污染的几率,此时再加入碱性磷酸酶标记的第二抗体,形成磁珠包被抗体-抗原-酶标记抗体复合物,经洗涤去掉未结合的抗体后,加入ALP的发光底物环1,2-二氧乙烷衍生物AMPPD ;AMPPD被复合物上ALP催化,迅速地去磷酸基团,生成不稳定的中间体AMPD;AMPD的快速分解,从高能激发态回到低能量的稳定态时,持续稳定地发射出光子hv,发射光所释放的光子能量被光量子阅读系统记录,通过计算机处理系统将光能量强度在标准曲线上转换为待测抗原的浓度,并报告结果;其检测水平可达pg/ml水平,重复性好; 3、电化学发光免疫分析Electrochemiluminescence immunoassay, ECLIAECLIA是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术,是电化学发光ECL和免疫测定相结合的产物; 它的标记物的发光原理与一般的化学发光CLA不同,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括了电化学和化学发光二个过程;ECL与CLA的差异在于ECLA是电启动发光反应,而CLA是通过化合物混合启动发光反应;ECLA 不仅可以应用于所有的免疫测定,而且还可用于DNA／RNA探针检测;其检测原理以TSH检测为例：第一步：结合了活化的三联吡啶钌衍生物即Rubpy32+ +N羟基琥珀酰胺酯NHS的TSH抗体和结合了生物素的TSH抗体与待测血清同时加入一个反应杯中孵育9分钟;第二步：将被链霉亲和素包被的磁珠加入反应杯中,再次孵育9分钟,使生物素通过与亲和素的结合将磁珠、TSH抗体连接为一体,形成双抗体夹心法;下一步,蠕动泵将形成的 Rubpy32+-抗体-抗原-抗体-磁珠复合体吸入流动测量室,此时,磁珠被工作电极下面的磁铁吸附于电极表面;同时,游离的TSH抗体与生物素结合的和与Rubpy32+结合的抗体也被吸出测量室;紧接着,蠕动泵加入含三丙胺TPA的缓冲液,同时电极加电压,启动ECL反应过程;发光剂 Rubpy32+和电子供体TPA在阳极表面可同时各失去一个电子而发生氧化反应,使二价的Rubpy32+被氧化成三价,后者是一种强氧化剂；另一方面,TPA 被氧化成阳离子自由基TPA+●,后者很不稳定,可自发失去一个质子H+,形成自由基TPA●,这是一种很强的还原剂,可将一个电子给三价的Rubpy33+,使其形成激发态的Rubpy32+,而TPA自身被氧化成二丙胺和丙醛;激发态的Rubpy32+通过荧光机制衰减,发射出一个波长620nm的光子,重新生成基态的Rubpy32+;该过程在电极表面周而复始地进行,产生许多光子,光电倍增管检测光强度,光强度与Rubpy32+的浓度呈线性关系,故可测出待测抗原的含量;最后,终止电压,移开磁珠,加入清洗液冲洗流动测量室,准备下一个样品测定;4、时间分辨荧光免疫分析timeresolved fluoroimmunoassay,TRFIATRFIA以镧系元素作为标记物所建立的免疫测定技术;因镧系元素如Eu3+所发射的荧光寿命长,在测定特异性荧光时,可通过延迟检测时间而将标本或环境中的非特异荧光扣除,使其具有良好信噪比;时间分辨荧光免疫测定TRFIA是一种非同位素免疫分析技术,它用镧系元素标记抗原或抗体,根据镧系元素螯合物的发光特点,用时间分辨技术测量荧光,同时检测波长和时间两个参数进行信号分辨,可有效地排除非特异荧光的干扰,极大地提高了分析灵敏度;在生物流体和血清中的许多复合物和蛋白本身就可以发荧光,因此使用传统的发色团进而进行荧光检测的灵敏度就会严重下降;大部分背景荧光信号是短时存在的,因此将长衰减寿命的标记物与时间分辨荧光技术相结合,就可以使瞬时荧光干扰减到最小化;时间分辨荧光分析法TRFIA实际上是在荧光分析FIA的基础上发展起来的,它是一种特殊的荧光分析;荧光分析利用了荧光的波长与其激发波长的巨大差异克服了普通紫外-可见分光分析法中杂色光的影响,同时,荧光分析与普通分光不同,光电接受器与激发光不在同一直线上,激发光不能直接到达光电接受器,从而大幅度地提高了光学分析的灵敏度;但是,当进行超微量分析的时候,激发光的杂散光的影响就显得严重了;因此,解决激发光的杂散光的影响成了提高灵敏度的瓶颈;解决杂散光影响的最好方法当然是测量时没有激发光的存在;但普通的荧光标志物荧光寿命非常短,激发光消失,荧光也消失;不过有非常少的稀土金属Eu、Tb、Sm、Dy的荧光寿命较长,可达1～2ms,能够满足测量要求,因此而产生了时间分辨荧光分析法,即使用长效荧光标记物,在关闭激发光后再测定荧光强度的分析方法医学教|育网搜集整理;平时常用的稀土金属主要是Eu铕和Tb铽,Eu荧光寿命1ms,在水中不稳定,但加入增强剂后可以克服；Tb荧光寿命1.6ms,水中稳定,但其荧光波长短、散射严重、能量大易使组分分解,因此从测量方法学上看Tb很好,但不适合用于生物分析,故Eu最为常用;4.1、时间分辨信号原理普通物质荧光光谱分为激发光谱和发射光谱,在选择荧光物质作为标记物时,必须考虑激发光谱和发射光谱之间的波长差,即Stokes 位移的大小;如果Stokes位移小,激发光谱和发射光谱常有重叠,相互干扰,影响检测结果的准确性;镧系元素的荧光光谱有较大的Stokes位移,最大可达290nm,激发光谱和发射光谱间不会相互重叠,加上其发射的光谱信号峰很窄,荧光寿命长,铕的荧光寿命可达730us,检测中只要在每个激发光脉冲过后采用延缓测量时间的方式,待短寿命的背景荧光衰变消失后,再打开取样门仪器记录长寿命铕鳌合物发射的特异性荧光,可以避免本底荧光干扰,提高检测的精密度;TRFIA的测量仪器是时间分辨荧光计,由三大部分组成：光源：脉冲光源：氙灯每秒闪烁1000次；小型N2激光器；输出脉冲波长：337nm荧光信号获取系统；数据处理系统医学教|育网搜集整理;4.2、解离增强原理解离增强镧系元素荧光免疫分析DELFIA是时间分辨荧光免疫分析中的一种;它用具有双功能基团结构的螯合剂,使其一端与铕Eu连接,另一端与抗体/抗原分子上的自由氨基连接,形成EU标记的抗体/抗原,经过免疫反应之后生成免疫复合物;由于这种复合物在水中的荧光强度非常弱,因此加入一种增强剂,使Eu从复合物上解离下来,自由Eu同增强剂中的另一种螫合剂螯合形成一种胶态分子团,这种分子团在紫外光的激发下能发出很强的荧光,信号增强了百万倍;因为这种分析方法使用了解离增强步骤,因此称为解离增强镧系元素荧光免疫分析;这是目前在时间分辨荧光免疫分析中应用最多的一种分析系统;。

芪苈强心胶囊对地高辛血药浓度影响的可能机制张 璇1,2,黄 燕3,贾壮壮1,王贤良1,毛静远1摘要:芪苈强心胶囊是治疗慢性心力衰竭的中药复方制剂,临床发现有规范服用地高辛的心力衰竭病人联用芪苈强心胶囊后可出现地高辛血药浓度升高的现象,对用药安全性造成影响㊂通过检索相关文献,对出现此现象的可能机制进行综述,以期为临床安全用药提供参考㊂关键词:心力衰竭;芪苈强心胶囊;地高辛;血药浓度;综述d o i :10.12102/j.i s s n .1672-1349.2022.24.015 地高辛是由毛花洋地黄提纯制得的中效强心苷,临床用于治疗各种急慢性心力衰竭[1],但其治疗量和中毒量相差较小,极易蓄积导致洋地黄中毒,临床应用中监测血药浓度十分必要㊂芪苈强心胶囊是由益气温阳药与虫类通络药配伍而成,具有益气温阳㊁活血通络㊁利水消肿之功效[2]㊂有研究显示,在心力衰竭规范西药基础上联用芪苈强心胶囊治疗,可进一步降低病人血浆N 末端脑钠肽前体(NT -proBNP )水平,改善临床症状和生活质量[3],广泛用于心力衰竭的治疗㊂临床应用发现,存在规范服用地高辛的病人联用芪苈强心胶囊后可检出地高辛血药浓度升高的情况,对本药的加载应用造成安全困扰㊂查阅相关文献,现对联用芪苈强心胶囊后出现地高辛血药浓度升高的可能机制进行分析,以期为安全合理用药提供参考㊂1 联用芪苈强心胶囊对地高辛血药浓度的影响多项研究显示,联用芪苈强心胶囊导致地高辛血药浓度升高㊂李琳等[4]对23例联合服用地高辛和芪苈强心胶囊后出现洋地黄过量的病人进行分析,73.92%的病人服药1周内可监测出洋地黄过量,其中7例出现视觉障碍㊁消化系统症状㊁频发期前收缩等不良反应,停用或减量芪苈强心胶囊后上述症状均减轻或消失,提示可能与芪苈强心胶囊有关㊂叶小春等[5]对2016年 2017年采用酶联免疫放大法进行地高辛血药浓度监测的381例心力衰竭病人进行分析,其中联基金项目 国家重大疑难疾病(慢性心力衰竭)中西医临床协作项目;教育部 创新团队发展计划 项目(No.INR -16R54)作者单位 1.天津中医药大学第一附属医院,国家中医针灸临床医学研究中心(天津300381);2.天津中医药大学(天津301617);3.中国医学科学院阜外医院通信作者 毛静远,E -mail :*************引用信息 张璇,黄燕,贾壮壮,等.芪苈强心胶囊对地高辛血药浓度影响的可能机制[J ].中西医结合心脑血管病杂志,2022,20(24):4505-4507.用芪苈强心胶囊病人血药浓度高于单用地高辛病人(P <0.05),考虑可能与芪苈强心胶囊含有多种强心苷成分有关㊂年国侠[6]将120例心力衰竭病人随机分为地高辛组㊁芪苈强心胶囊组及地高辛联合芪苈强心胶囊组,规律服药4周后,采用化学发光免疫法测定地高辛血药浓度并进行临床观察,结果显示,联用芪苈强心胶囊可导致病人地高辛血药浓度升高,甚至达到中毒剂量,但未出现明显中毒症状,初步判断可能是芪苈强心胶囊某些成分影响了地高辛血药浓度的检测㊂2 芪苈强心胶囊中的强心苷成分强心苷来源于植物,属一级强心苷,经提取后生成二级苷,二级苷加酸解脱成苷元,如地高辛㊁洋地黄毒苷等[7]㊂芪苈强心胶囊是由黄芪㊁附子㊁人参㊁丹参㊁葶苈子㊁泽泻㊁红花㊁玉竹㊁陈皮㊁桂枝㊁香加皮11味中药组成㊂现代研究表明,高浓度黄芪皂苷与毒毛花苷K 作用相似,通过抑制心肌细胞膜Na +-K +-ATP 酶活性,发挥正性肌力作用[8];去甲乌药碱作为附子的核心有效成分,浓度稀释至10-9g/mL 时,可增强离体蟾蜍心脏的收缩力[9]㊂张碧华等[10]进一步通过分子集构建,对比分析芪苈强心胶囊与地高辛㊁洋地黄毒苷㊁西地兰3种洋地黄制剂的理化性质和结构,结果显示,芪苈强心胶囊中与地高辛结构相似度>45%的中药分子有4个,与洋地黄毒苷结构相似度>45%的中药分子有15个,其中黄芪苷Ⅴ与洋地黄毒苷的相似度达59%,而20R 人参皂苷Rg3和人参皂苷Rg3与地高辛和洋地黄毒苷的相似度>48%㊂相关药理实验显示,香加皮具有显著的强心苷样作用,有效成分杠柳苷的化学结构和药理作用均与毒花毛苷相似,具有一定的蓄积毒性,治疗剂量即可出现恶心㊁呕吐㊁腹泻等胃肠道症状,剂量过大导致多源性室性期前收缩㊁心房颤动㊁房室传导阻滞等心律失常表现[11]㊂葶苈子含毒毛旋花子配基㊁葶苈苷㊁糖芥苷㊁伊夫单苷和伊夫双苷等㊃5054㊃中西医结合心脑血管病杂志2022年12月第20卷第24期多种强心苷成分,与地高辛抗体发生交叉反应[12]㊂3中药制剂对内源性洋地黄样物质的影响Fishman[13]研究发现豚鼠脑组织中有类似洋地黄样物质㊂Gruber等[14]从犬血浆中分离出可抑制Na+-K+-ATP酶活性的低分子蛋白质,具有强心㊁利钠㊁利尿和缩血管作用,与地高辛抗体交叉结合,在免疫学上表现为类似洋地黄的抗原性,称为内源性洋地黄样物质(EDLS)㊂相关研究表明,心力衰竭病人血药浓度与心功能呈负相关,EDLS分泌的相对或绝对不足促进了心力衰竭的发生发展,也是洋地黄类药物治疗心力衰竭的理论基础[15-16]㊂目前,尚无芪苈强心胶囊对EDLS影响的报道,但毛静远教授团队关注常用中药制剂对地高辛代谢的影响,开展了中西医结合药动学研究[17]㊂通过比较发现生脉注射液可刺激心力衰竭病人血清EDLS的分泌与释放,这种作用与给药剂量和次数呈一定的量效关系和积累效应[18]㊂建立多种心力衰竭模型,开展相关研究,结果证实,参附注射液可提高心力衰竭大鼠血清EDLS浓度,给药即刻起效[19],作用维持至少8h;参麦注射液可增加心力衰竭犬血清㊁肾上腺㊁下丘脑及心肌EDLS浓度,给药7d后血清EDLS浓度-时间曲线趋于平坦,体内EDLS水平达到稳态[20]㊂中药制剂对EDLS水平的影响可能是药物直接刺激和促进EDLS 分泌和释放的结果,亦可能是多途径改善心功能的继发改变㊂4不同方法检测地高辛血药浓度的差异地高辛血药浓度检测主要包括免疫分析法与色谱法,常用的有微粒子酶联免疫法(MEIA)㊁酶联免疫放大法(EMIT)与液相串联质谱法(LC-MS/MS)等[21],由于抗体识别能力差异与分析体系不同,同一样本由不同方法测定可能得到不同的检验结果[22]㊂白万军等[23]分别采用MEIA与LC-MS/MS法对10份已知质量浓度的质控样品及50份接受地高辛治疗病人的稳态谷浓度血浆样品进行地高辛浓度测定,结果显示,两种方法检测质控样品地高辛浓度差异无统计学意义(P>0.05),经MEIA法测定的病人血浆地高辛浓度高于LC-MS/MS法(P<0.01),进一步筛选MEIA法检测> 2.0ng/mL而LC-MS/MS法检测<0.8ng/mL的血浆样品14份,结合病人临床表现,14例病人均未出现地高辛中毒反应,与LC-MS/MS法检测结果一致㊂董占军等[24]收集了75例接受地高辛治疗病人的血浆样本,分别采用EMIT法和LC-MS/MS法进行地高辛浓度测定,参照EMIT法测定结果分为低质量浓度(<0.8ng/mL) 24例㊁中质量浓度(0.8~2.0ng/mL)26例及高质量浓度(>2.0ng/mL)25例,结果显示,低质量浓度时两种方法检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05),中质量浓度㊁高质量浓度时EMIT法检测结果高于LC-MS/MS 法(P<0.001),两种方法表现出的差异在联用去乙酰毛花苷时更显著㊂魏世杰等[25]分别在独立实验室使用EMIT和LC-MS/MS法检测质控样品和临床生物样本血浆中的地高辛浓度,结果显示,LC-MS/MS法具有较强的特异性,检测结果接近病人实际情况,而EMIT 法受到地高辛样免疫活性物质的干扰㊂5讨论心力衰竭是一种复杂的临床综合征,是各种心脏疾病的严重表现和晚期阶段,随着药物治疗的不断优化,冠状动脉血运重建及器械治疗的发展,心力衰竭病人生存率及预后得到进一步改善[26],中医药在改善病人心功能㊁稳定病情㊁提高生存质量等方面有优势,可广泛用于心力衰竭的治疗[27]㊂芪苈强心胶囊作为益气温阳活血的中药复方制剂,常与西药搭配使用,但与地高辛联用后可能会出现地高辛血药浓度升高的现象,一定程度对安全用药造成困扰㊂相关研究显示,联用芪苈强心胶囊可出现地高辛血药浓度升高的现象,但出现这种现象的原因需加以鉴别分析:①芪苈强心胶囊是由11味中药制成,本身含有多种强心苷成分,口服芪苈强心胶囊后在体内转化过程中产生类地高辛样免疫活性物质,或同时调动机体EDLS以改善病人心功能,从而对地高辛血药浓度的测定造成干扰㊂②MEIA与EMIT均属免疫分析法,通过抗原抗体结合的定量检测方法,芪苈强心胶囊导致外源性和/或内源性地高辛样免疫活性物质,均可与地高辛抗体发生交叉反应,从而使检测结果出现增高的假象[28]㊂考虑到药物与血浆蛋白的结合率较恒定,而药物产生的临床作用主要与游离部分有关,故利用离心超滤法检测游离型药物可避免EDLS对免疫分析法测定地高辛血药浓度造成的干扰[29],或直接采用LC-MS/MS等色谱法进行检测,从而对地高辛血药浓度进行准确定量[30]㊂③有实验室检测地高辛血药浓度升高同时伴有洋地黄中毒临床症状的研究报道,明确芪苈强心胶囊是否影响或延迟地高辛代谢,需进一步开展相关研究加以证明㊂参考文献:[1]陈新谦.陈新谦新编药物学[M].18版.北京:人民卫生出版社,2019:1-5.[2]吴以岭.络病学基础与临床研究[M].北京:中国科学技术出版社,2005:186-189.[3]LI X L,ZHANG J,HUANG J,et al.A multicenter,randomized,double-blind,parallel-group,placebo-controlled study of the㊃6054㊃C H I N E S EJ O U R N A L O FI N T E G R A T I V E M E D I C I N E O N C A R D I O-C E R E B R O V A S C U L A R D I S E A S E D e c e m b e r2022 V o l.20 N o.24effects of Qili Qiangxin capsules in patients with chronic heartfailure[J].Journal of the American College of Cardiology,2013,62(12):1065-1072.[4]李琳,李琦,王金会,等.23例芪苈强心胶囊相关洋地黄过量病例分析[J].中国药物警戒,2015,12(6):357-359.[5]叶小春,黄鹤归,张耕.芪苈强心胶囊对地高辛血药浓度的影响[J].医药导报,2019,38(7):955-957.[6]年国侠.芪苈强心胶囊对地高辛血药浓度及中毒反应的影响[J].淮海医药,2018,36(4):477-480.[7]沈琳.中西药并用对充血性心力衰竭患者血清地高辛浓度的影响[J].中国中西医结合杂志,2004,24(8):697.[8]姚红旗,侯雅竹,王贤良,等.黄芪心血管药理作用研究进展[J].河南中医,2019,39(2):302-306.[9]KOSUGE T,YOKOTA M.Letter:studies on cardiac principle ofaconite root[J].Chemical&Pharmaceutical Bulletin,1976,24(1):176-178.[10]张碧华,金毅,杨明,等.芪苈强心胶囊中强心有效成分及其作用机理的计算机模拟[J].临床药物治疗杂志,2016,14(3):25-32. [11]刘虹,刘芳,朱晓月,等.香加皮产生毒副反应的原因及安全用药对策[J].中成药,2011,33(1):134-136.[12]王妍,贡济宇.葶苈子的化学成分及药理作用研究[J].长春中医药大学学报,2008,24(1):39-40.[13]FISHMAN M C.Endogenous digitalis-like activity in mammalianbrain[J].BMJ Case Reports,1979,76(9):4661-4663. [14]GRUBER K A,WHITAKER J M,BUCKALEW V M.Endogenousdigitalis-like substance in plasma of volume-expanded dogs[J].Nature,1980,287(5784):743-745.[15]张雪峰,陈晓明,张肃,等.内源性洋地黄样物质水平的临床意义[J].吉林医学院学报(自然科学版),1997,18(2):53-54. [16]柯永胜.内源性血管活性物质研究进展[J].临床荟萃,1990,5(7):294-297.[17]毛静远,王恒和.中西医结合药动学系列研究思路与方法[J].中医药学刊,2003,21(4):512-513.[18]毛静远,王恒和,王强,等.生脉注射液对心力衰竭患者内源性洋地黄物质血清水平的影响[J].中国中医急症,2003,12(6):527-528.[19]毛静远,魏广力,王恒和,等.参附注射液对心衰大鼠血清内源性洋地黄样物质水平的影响[J].中国实验方剂学杂志,2007,13(7):29-31.[20]王贤良,毛静远,魏广力,等.参麦注射液对心衰犬内源性洋地黄样物质组织浓度的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志,2012,10(1):68-69.[21]李优鑫,毛静远,李惠芬.地高辛血药浓度检测方法的分析[J].中国中药杂志,2007,32(4):285-288.[22]ROGERS N M,JONES T E,MORRIS R G.Frequently discordantresults from therapeutic drug monitoring for digoxin:clinicalconfusion for the prescriber[J].Internal Medicine Journal,2010,40(1):52-56.[23]白万军,宋浩静,孙晓利,等.LC-MS/MS法和MEIA法测定人血浆中地高辛浓度的差异比较[J].中国药房,2016,27(5):604-607. [24]董占军,白万军,刘洪涛,等.液相色谱-质谱法和酶扩大免疫法测定地高辛血药浓度的方法研究[J].中国临床药理学杂志,2016,32(7):640-642.[25]魏世杰,贾飞龙,尹慧,等.液质联用技术与酶放大免疫法检测血浆地高辛浓度的两种方法比较[J].宁夏医科大学学报,2020,42(8):853-858.[26]MCDONAGH T A,METRA M,ADAMO M,et al.2021ESCGuidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronicheart failure[J].European Heart Journal,2021,42(36):3599-3726.[27]FU S F,ZHANG J H,GAO X M,et al.Clinical practice of traditionalChinese medicines for chronic heart failure[J].Heart Asia,2010,2(1):24-27.[28]SUPPA M,GIANCASPRO G,COPPOLA A,et al.High digoxinserum levels in an elderly patient for the endogenous digoxin-likeimmunoreactive substances.A case report[J].La ClinicaTerapeutica,2011,162(3):245-248.[29]DASGUPTA A,SALDANA S,HEIMANN P.Monitoring free digoxininstead of total digoxin in patients with congestive heart failureand high concentrations of digoxin-like immunoreactivesubstances[J].Clinical Chemistry,1990,36(12):2121-2123. [30]GARCÍA-IR AN ZO E M,R O D RÍG U EZ-LU C EN A F J,M A TO SES-C H IR IVELLA C,et al.Pharmacokinetic monitoring of chronic treatment withdigoxin from primary health care[J].Farmacia Hospitalaria,2017,41(4):527-532.(收稿日期:2022-05-25)(本文编辑薛妮)㊃7054㊃中西医结合心脑血管病杂志2022年12月第20卷第24期。

科学探索走进医疗器械知到章节测试答案智慧树2023年最新山东药品食品职业学院第一章测试1.医疗器械按照风险程度分几类管理（）。

参考答案:32.血管支架属于第三类医疗器械。

（）参考答案:对3.医疗器械风险程度判断，根据医疗器械的预期目的，通过（）等因素综合判定。

（）参考答案:使用状态 ;是否接触人体;使用形式 ;结构特征4.国家建立医疗器械不良事件监测制度，对医疗器械不良事件进行收集、分析、评价、控制（）参考答案:对5.境内第二类医疗器械需要向（）申请注册。

参考答案:省级市场局6.医疗器械定义规定的医疗器械不含（）。

参考答案:药品7.关于医疗器械的判断正确的是（）。

参考答案:判断效用是否主要是通过物理等方式获得。

;医疗器械可以是仪器、设备、器具、体外诊断试剂及校准物、材料以及其他类似或者相关的物品，包括所需要的计算机软件。

;判断是否符合定义所规定的6个预期目的之一。

;如效用通过药理学、免疫学或者代谢的方式获得，应判断是否是辅助作用。

;判断是否用于人体。

8.中国古代，最早的医疗器械是（）参考答案:砭石9.哪种医疗器械可以透视人体内部结构（）参考答案:X线机10.退热贴不是医疗器械（）参考答案:错第二章测试1.心电图五个波P、Q、R、S、T中，T波表示（）。

参考答案:心室复极2.在现代脑电图学中，根据（）的不同将脑电划分为四种波。

参考答案:频率和振幅3.现代脑电图学中，脑电波按照频率由高到低的排列顺序为（）。

参考答案:β、α、θ、δ4.按检测参数分类，便携式监护仪属于（）。

参考答案:多参数监护仪5.监护仪中的多路生理参数监护部分由（）和信号的显示，记录，报警等部分组成。

参考答案:信号检测，模拟信号处理，数字信号处理6.为人体运动系统疾病的诊断和治用治疗提供重要的工具（）。

参考答案:肌电图7.肌电图机诱发肌肉产生肌电的部分是（）。

参考答案:刺激器盒8.心电图机有哪些临床应用（）。

参考答案:用于监测危重病人、外科手术、麻醉、心导管检查等以及航天、登山运动员的心脏情况;特征性心电图改变以及演变是诊断心肌梗死的可靠和实用方法;对于各种心律失常、传导阻滞的诊断有肯定价值;有助于心肌受损、供血不足、心包炎、药物和电解质紊乱等诊断,可提示心脏房室肥大9.脑电图机除了脑电信号的检测、处理、输出等部分以外，还配有如下的辅助设备（）参考答案:脑电频率分析器;电子刺激器;声光刺激器;记录装置10.监护仪是一种精密监测人的生命体征的仪器。

全自动微粒子化学发光免疫分析仪监测地高辛血药浓度欧阳栋;卢玉山;黄忠英;张竞;孔令和【摘要】采用全自动微粒子化学发光免疫分析仪对服用了地高辛的120例成年患者进行血药浓度监测分析。

地高辛血药浓度＜0.5ng/ml 共22例次（7.69%）、0.5~2.0ng/ml 有效范围内242例次（84.62%）、2.0~3.0ng/ml 范围内18例次（6.29%）、≥3.0 ng/ml共4例次（1.40%）。

根据监测结果适当调整患者地高辛药物服用剂量之后，120例患者均在7d内接受多次全自动微粒子化学发光免疫分析仪监测并显示血清标本中地高辛浓度在有效范围0.5~2.0ng/ml之内，未见死亡病例。

使用全自动微粒子化学发光免疫分析仪可准确测定患者服用地高辛后的血清药物浓度，及时调整用药量，保证疗效、避免意外。

【期刊名称】《现代诊断与治疗》【年(卷),期】2013(000)016【总页数】1页(P3666-3666)【关键词】全自动微粒子化学发光免疫分析仪;地高辛;血药浓度【作者】欧阳栋;卢玉山;黄忠英;张竞;孔令和【作者单位】九江市第三人民医院，江西九江 332000;九江市第三人民医院，江西九江 332000;九江市第三人民医院，江西九江 332000;九江市第三人民医院，江西九江 332000;九江市第三人民医院，江西九江 332000【正文语种】中文【中图分类】R969.4地高辛是一类典型的强心苷类药物，用药量控制不当极易引发中毒意外，临床用药量需要严格控制，其毒性作用直接取决于用药后患者体内血清药物浓度［1，2］。

全自动微粒子化学发光免疫分析技术是最新的血药浓度监测手段［3，4］，本次研究使用全自动微粒子化学发光免疫分析仪进行120例地高辛治疗患者血药浓度监测分析，现报告如下。

1 资料与方法1.1 一般资料选取服用了地高辛的120例肝肾功能正常的成年患者，共接受地高辛血药浓度监测共286例次。

其中男 69 例，女51例；年龄 20～83（59.4±2.6）岁； 88 例患者地高辛服用剂量为 0.125～0.25mg/d，4例患者用药量＜0.125mg/d，全体患者其他辅助药物治疗模式相同，常见辅助药物为美托洛尔等β-受体阻滞剂、阿司匹林、氢氯噻嗪等利尿剂、西拉普利等血管紧张素转换酶抑制剂等等。

我国治疗药物监测的现状与展望程道海;陆华;刘滔滔;宁宗【期刊名称】《广西医科大学学报》【年(卷),期】2016(033)005【总页数】4页(P910-913)【关键词】治疗药物监测;个体化治疗;精准医学【作者】程道海;陆华;刘滔滔;宁宗【作者单位】广西医科大学第一附属医院药学部南宁 530021;广西医科大学第一附属医院药学部南宁 530021;广西医科大学第一附属医院药学部南宁 530021;广西医科大学第一附属医院急诊科南宁530021【正文语种】中文【中图分类】R96国内治疗药物监测(therapeutic drug mornitoring，TDM)是运用现代分析技术，对血液或其他体液中的药物及其代谢物浓度进行检测，并根据药动学和药效学理论，进行数据分析，制定最佳给药方案，从而提高药物疗效，避免或减少毒副作用，达到安全合理应用药物的目的[1～3]。

其核心是以血药浓度为指标，通过个体化地调整用药方案，实现临床治疗目标。

本文就国内TDM相关研究进展作一综述。

我国TDM开始于上世纪80年代，经过30多年发展已取得长远进步。

鉴于TDM 在个体化用药、提高医疗服务质量中的重要作用，近年来我国卫生部门将TDM列入有关评价或准入制度中。

2010年12月3日，卫生部印发的《二、三级综合医院药学部门基本标准(试行)》，要求二、三级综合医院药剂科(或药学部)应配备血药浓度监测设备；《三级综合医院评审标准实施细则(2011年版)》和《医疗机构药事管理规定》中均规定，医疗机构应开展个体化给药方案的研究与监测，而TDM是开展药物个体化治疗的基础；卫生部印发的《肝脏、肾脏、心脏、肺脏移植技术管理规范》中要求，移植准入单位能够开展免疫抑制剂血药浓度检测；在《儿童急性淋巴细胞白血病临床路径(2010年版)》要求开展甲氨喋呤(MTX)血药浓度监测；《抗菌药物临床应用指导原则(2015年版)》中要求能开展有关抗菌药物品种和特殊患者的血药浓度监测，调整给药方案，实现个体化给药。