OXA-23酶基因在多药耐药鲍氏不动杆菌的流行

碳青霉烯酶的研究进展碳青霉烯类具有非常广泛的抗菌活性，因能抵抗大多数内酰胺酶的水解，故常用于产超广谱 -内酰胺酶（ESBL）和/或去阻遏 AmpC -内酰胺酶（AmpC）菌株引起严重感染的治疗但碳青霉烯耐药肠杆菌的出现，给临床治疗带来了极大困难。

通常，革兰阴性菌对碳青霉烯类的耐药机制，一是 AmpC 酶过度表达联合OMP 丢失；二是 PBP 对碳青霉烯类亲和力的改变；三是碳青霉烯酶（Carbapenemases）的产生在这些机制中，最突出的是碳青霉烯酶。

一、碳青霉烯酶的分类及有关细菌碳青霉烯酶是指能够明显水解亚胺培南或美罗培南的一类β-2内酰胺酶 ,包括 Ambler分子分类的 A、 B、 D 3类酶。

A类为丝氨酸酶 ,其活性部位具有丝氨酸结构 ,属于 Bush分群中的第 2f亚组。

A 类碳青霉烯酶少见 ,包括阴沟肠杆菌( I M I2 1和 NMC2 A)、黏质沙雷菌中由染色体介导的 NMC2 A、 Sme2 1、 Sme2 2、 Sme2 3、I M I2 1酶 ,以及肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌中质粒介导的 KPC1、GES2 2酶。

这类酶都是青霉素酶 ,他们对亚胺培南的水解活性强于美罗培南 ,可以引起青霉素类、氨曲南、碳青霉烯类耐药 ,而对第 3代头孢菌素通常敏感。

三唑巴坦、克拉维酸可以抑制此类酶 ,但不被乙二胺四乙酸 ( EDT A)所抑制。

Amble分类 D类为丝氨酸酶 ,属于 Bush分群中的第 2d亚组，其活性部位具有丝氨酸结构,由blaOXA等位基因编码 ,仅见于不动杆菌。

Amble分类 B类是金属酶,属于 Bush分类 3组 ,是一种需金属离子发挥活性的β-内酰胺酶 ,由 bla I MP、 blaV I M、 blaSPM和 blaGI M编码,可被EDT A所抑制 ,染色体介导或质粒介导,存在于多种不同革兰阳性和革兰阴性细菌中。

金属酶均可明显水解亚胺培南,能水解除单环类抗菌药物以外的绝大多数β-内酰胺类抗菌药物,但对于其他β-内酰胺类抗菌药物的水解能力有较大差异。

鲍曼不动杆菌耐药机制研究及感染治疗控制方面的新进展作者：邝咏云来源：《中国卫生产业》 2013年第30期邝咏云云南楚雄州人民医院，云南楚雄?675000[摘要]?鲍曼不动杆菌是临床常见的条件致病菌，分布在自然和医院环境中，它有极强环境适应能力和获得外源性耐药基因的能力，易在医院内引起暴发流行。

近年来，多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌引起的医院感染增多，可引起呼吸道相关性肺炎、尿路感染、菌血症等，由于临床治疗困难，引起了广泛关注。

泛耐药菌株几乎无药可治，病死率极高，因此它们被称为21世纪革兰阴性杆菌中的“耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）”[1]引起广泛关注。

本文主要就多重耐药鲍曼不动杆菌流行情况、耐药机制研究及临床感染治疗控制方面的新进展作一综述。

[关键词]?鲍曼不动杆菌；耐药机制；临床治疗；医院感染[中图分类号]?R516 [文献标识码]?A [文章编号]?1672-5654(2013)10(c)-0193-02鲍曼不动杆菌是医院感染的重要病原菌。

近年来的感染在增多，且其耐药性日益严重，已引起临床和微生物学者的严重关注。

鲍曼不动杆菌主要引起呼吸道感染，也可引发败血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎等。

鲍曼不动杆菌在医院的环境中分布很广且可长期存活，对危重患者和CCU及ICU中的患者威胁很大，也将此类感染称做ICU获得性感染。

国内耐碳青霉稀类的鲍曼不动杆菌发展很快，在最近发现的“多重耐药”与“耐碳青霉烯类”的鲍曼不动杆菌（MDRAB）和（CRAB），在我国内地很多地方均已出现，所以要引起高度警惕，并要及时采取重要措施。

1 多重耐药鲍曼不动杆菌的流行现状多重耐药鲍曼不动杆菌（MDRAB），通常指的是对抗绿脓的头孢菌素、碳青霉烯类、β-内酰胺抗生素复合制剂、氟喹诺酮类、氨基糖苷类五类抗菌药物中三类以上耐药的菌株，泛耐药菌株鲍曼不动杆菌（PDRAB）通常指对以上抗菌药物均耐药的菌株[2]。

目前，我国临床分离的MDRAB和PDRAB有逐年上升趋势，根据2010年中国耐药监测网数据[3]显示，鲍曼不动杆菌位于临床分离阴性菌的第三位，5523株不动杆菌属（鲍曼不动杆菌占89.6％）对亚胺培南和美罗培南耐药率为57.1％和58.3％，其中泛耐药鲍曼不动杆菌从2009年17.0%升到21.4%。

我院鲍曼不动杆菌携带方23基因及其耐药机制研究张梓岗1,于海娟2,戴晓坍3,夏雯3,丁龙坤3,席月3,张敏3,吴亮3,** (1江苏省江阴市青阳医院，江阴214400；2江苏省江阴市第三人民医院，江阴214400；3江苏大学医学院镇江212013)摘要：目的研究我院分离鲍曼不动杆菌携带Ha。

斑23基因的携带情况及其诱导细菌耐药机制。

方法收集江阴市青阳医院2019年1月至2019年12月间临床分离鲍曼不动杆菌，经VITEK-2全自动微生物鉴定及药敏分析系统鉴定耐亚胺培南菌株100株，敏感菌株100株。

通过多重PCR法检测上述菌株中弘也_23、bla0XAU.bla0XA5^abla0XA^基因携带情况。

通过PCR法扩增亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌Ha。

尬23的0抽序列，构建过表达载体MaO坯23巾丫毗匕3并电转化鲍曼不动杆菌(ATCC17978),以硫酸卡那霉素和美罗培南共同筛选过表达〃加如公基因的菌株。

釆用稀释法检测转化Wa°〃23/pYMAb3载体和pYMAb3空载体的菌株对亚胺培南的MIC。

结果我院耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌均携带Na。

坯23,敏感株未检出携带该基因。

RT-PCR法可检出转化i/a0X1.23/pYMAb3载体菌株表达6%^基因，而转化pYMAb3空载体菌株未检出bla。

沁基因表达。

转化仏。

林2s/pYMAb3载体菌株对亚胺培南MIC为32ng/mL,转化空载体菌株MIC仅为0.5ug/mL。

结论我院耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌均携带基因，可以作为耐药菌株筛选的分子标记。

由质粒携带的弘:如一力基因是诱发我院鲍曼不动杆菌耐药的重要原因，在院感工作中需高度重视。

关键词：鲍曼不动杆菌；耐药；bla。

沁;转化中图分类号：R978.1文献标志码：A文章编号：1001-8751(2021)01-0024-05The bla OXA23Gene of A cinetobacter baumannii in our Hospital and theMechanism of the Drug ResistanceZhang Zi-gang1,Yu Hai-juan2,Dai Xiao-yue3,Xia Wen3,Ding Long-kun3,Xi Yue3,Zhang Min3,Wu Liang3(1Jiangsu Province Hospital of Qingyang,Jiangyin214400;2 The third people's hospital of Jiangyin,Jiangyin214400;3School of medicine,Jiangsu university,Zhenjiang212013)Abstract:Objective To study the distribution of Acinetobacter baumannii canying bla OXA23gene in our hospital and the mechanism of inducing bacterial resistance.Methods A total of200strains including100strains of imipenem resistant and100strains of sensitive A.baumannii were collected from Qingyang Hospital from January 2019to December2019.The bacterial identification and drug susceptibility analysis were carried out by VITEK-2 system.The genes of bla0XA2V bla OXA24,bla OXA5i and bla0XA5Z gene were detected by multiplex PCR.The bla OXA23 gene ORF sequence from imipenem-resistant strain was amplified by PCR and ligated with pYMAb3by T4ligase. The bla OXA23/pYMAb3vector was transfected into A.baumannii(ATCC17978)by electroporation.The mutant strain overexpressing bla OXA23gene was selected by sulfuric acid kanamycin and meropenem.The bla0XA13gene expression was determined in both fe/a^^/pYMAbS vector transfected strain and pYMAb3vector transfected strain by RT-PCR. The MICs of these two strains to imipenem was determined by dilution method.Results The imipenem-resistant A. baumannii in our hospital carried the bla OXA23gene,while the sensitive strains did not cany bla OXA23gene.The RT-PCR assay could detect the bla OXA23gene expression in bla OXA23/pYMAb3vector transfected strain,while the bla OXA23 gene expression did not be detected in pYMAb3vector transfected strain.When transfected with bla OXA23/pYMAb3 vector,the imipenem MIC reached to32|ig/mL,and the imipenem MIC of strain transfected with pYMAb3vector 收稿日期：2020-05-28作者简介：张梓岗，副主任医师，主要从事感染免疫保护与致病机制研究。

ICU病区多重耐药鲍曼不动杆菌的分子流行病学调查及耐药基因研究万楠;王璐;孟冬娅【摘要】Objective To study the epidemic trend, homology and the mechanism of drug resistance of Acinetobacter baumamii (MDR-Aba) in Intensive Care Units (ICU) of the hospital in which the authors served, so as to offer a reference for clinical treatment and efficient preveation of iatrogenic infection. Methods Fourteen consecutive MDR-Aba isolates were collected from ICU of General Hospital of Shenyang Command from June to Dec 2008. Drug sensitivity of these isolates to 14 antibiotic drugs, including p-lactam, aminoglycoside and fluoroquinolone, etc, was examined by K-B test. Pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) was employed to detect the homology of Acinetobacter baumanmi, and cluster analysis was carried out with GelCompar 6.3 software to group the isolated MDR-Aba. PCR was performed to amplify the genes related to drug resistance from these isolates, and the results were identified by sequencing. Results All the 14 isolates were highly resistant to cephalosporins, carbapenems, aminoglycoside and fluoroquinolone, while some of them retained susceptibility to cefoperazone/sulbactam, and most of the strains showed susceptibility to minocycline in vitro. All isolates belonged to a same PFGE pulsotype, which may be divided into 2 subtypes as Type Al (n=10) and Type A2 (n=4). OXA-23-like, OXA-51-like and Int I genes were detected by PCR in all isolates. Conclusion All MDR-Abaisolates collected basically belong to the same lineom. The mechanism of antibiotic resistance may be closely related to these genes such as OXA-23-like, OXA-51-like and Int I.%目的了解重症监护室(ICU)病区多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-Aba)的流行趋势、同源性以及耐药机制,为临床用药提供参考并有效控制院内感染的发生.方法收集2008年6-12月沈阳军区总医院ICU病区住院患者临床分离出的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌14株.采用K-B法检测其对β-内酰胺类、氨基糖苷类、氟喹喏酮类等14种抗菌药物的敏感性;行脉冲场凝胶电泳(PF-GE),使用GelCompar 6.3软件进行聚类分析对MDR-Aba进行分型;采用PCR方法扩增部分耐药基因并进行测序比对.结果 14株菌株在体外对头孢菌素类、碳青霉烯类、氨基糖苷类、氟喹喏酮类12种抗生素均呈高水平耐药,大部分菌株对米诺环素敏感,部分菌株对头孢哌酮/舒巴坦敏感.PFGE聚类分析结果显示,14株MDR-Aba菌株均为同一基因型,来源相同,分为A1(10株)和A2(4株)两种亚型.PCR扩增结果显示,14株MDR-Aba菌株均携带blaOXA-23-like、blaOXA-51-like和Intl 基因.结论所收集的14株MDR-Aba菌株均属同一基因型,其耐药性可能与blaOXA-51-like、blaOXA-23-1ike和IntI等耐药基因关系密切.【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2011(036)007【总页数】3页(P751-753)【关键词】鲍氏不动杆菌;抗药性，细菌;电泳，凝胶，脉冲场【作者】万楠;王璐;孟冬娅【作者单位】110840沈阳,沈阳军区总医院检验科;110840沈阳,沈阳军区总医院检验科;110840沈阳,沈阳军区总医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R446.5不动杆菌是一类条件致病菌,广泛分布于自然界、医院和人体皮肤表面,为院内感染的重要病原菌之一[1]。

多重耐药鲍曼不动杆菌的挑战和治疗策略近年来随着广谱抗生素的广泛使用，多重耐药鲍曼不动杆菌（Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii，MDRAB）日渐增加。

它不仅对目前常用的抗菌药物产生耐药，而且还在院内流行造成广泛的交叉感染，是临床医师普遍惧怕的细菌［1］，给临床抗感染治疗带来挑战，是美国IDSA呼吁重点防治的六大菌之一。

本文就如何防治MDRAB的感染作如下综述：1 病原学概述不动杆菌属(Acinetobacter)为一群不发酵糖类、无动力、氧化酶阴性的革兰阴性球杆菌，自从1911年首次被发现以来，不动杆菌属的分类经过多次变迁, 现在根据DNA杂交技术将不动杆菌分为32个基因种，鲍曼不动杆菌是不动杆菌属感染最主要的菌种，约占72.9％［2］。

鲍曼不动杆菌在高危人群中可引发严重的感染，国外资料显示其危险因素包括广谱抗生素的使用、机械通气、气管插管、侵入性操作、ICU环境等［3］。

主要引起医院获得性肺炎，占院内获得性肺炎总数的3-5%，而在ICU病房更高达15%～24%。

鲍曼不动杆菌引起的感染一般死亡率为7.8％～23％，而在ICU病房更高达10％～43％［4］。

2 多重耐药株和泛耐药株定义目前对于鲍曼不动杆菌的多重耐药或泛耐药定义，仍有一些争议，国外文献至少有50个不同的定义［5］。

尽管如此，一般认为对下列5 类抗菌药中(具有抗铜绿假单胞菌活性者) 3类以上药物耐药者为多重耐药株，包括头孢菌素类、碳青霉烯类、β内酰胺酶抑制剂、氟喹诺酮类和氨基糖苷类。

泛耐药株（Pandrug-resistant Acinettobacter baumanii，PDRAB）是指对目前推荐用于上述经验性治疗的药物全部耐药者，但不包括多黏菌素及替加环素。

3 流行病学根据美国院内感染监测数据(NNIS)以及中国医院感染资料显示，鲍曼不动杆菌在院内感染中占第4位，仅次于铜绿假单胞菌的又一个重要的非发酵菌［6］。