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鲍曼不动杆菌耐药机制研究及感染治疗控制方面的新进展作者：邝咏云来源：《中国卫生产业》 2013年第30期邝咏云云南楚雄州人民医院，云南楚雄?675000[摘要]?鲍曼不动杆菌是临床常见的条件致病菌，分布在自然和医院环境中，它有极强环境适应能力和获得外源性耐药基因的能力，易在医院内引起暴发流行。
近年来，多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌引起的医院感染增多，可引起呼吸道相关性肺炎、尿路感染、菌血症等，由于临床治疗困难，引起了广泛关注。
泛耐药菌株几乎无药可治，病死率极高，因此它们被称为21世纪革兰阴性杆菌中的“耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）”[1]引起广泛关注。
本文主要就多重耐药鲍曼不动杆菌流行情况、耐药机制研究及临床感染治疗控制方面的新进展作一综述。
[关键词]?鲍曼不动杆菌；耐药机制；临床治疗；医院感染[中图分类号]?R516 [文献标识码]?A [文章编号]?1672-5654(2013)10(c)-0193-02鲍曼不动杆菌是医院感染的重要病原菌。
近年来的感染在增多，且其耐药性日益严重，已引起临床和微生物学者的严重关注。
鲍曼不动杆菌主要引起呼吸道感染，也可引发败血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎等。
鲍曼不动杆菌在医院的环境中分布很广且可长期存活，对危重患者和CCU及ICU中的患者威胁很大，也将此类感染称做ICU获得性感染。
国内耐碳青霉稀类的鲍曼不动杆菌发展很快，在最近发现的“多重耐药”与“耐碳青霉烯类”的鲍曼不动杆菌（MDRAB）和（CRAB），在我国内地很多地方均已出现，所以要引起高度警惕，并要及时采取重要措施。
1 多重耐药鲍曼不动杆菌的流行现状多重耐药鲍曼不动杆菌（MDRAB），通常指的是对抗绿脓的头孢菌素、碳青霉烯类、β-内酰胺抗生素复合制剂、氟喹诺酮类、氨基糖苷类五类抗菌药物中三类以上耐药的菌株，泛耐药菌株鲍曼不动杆菌（PDRAB）通常指对以上抗菌药物均耐药的菌株[2]。
目前，我国临床分离的MDRAB和PDRAB有逐年上升趋势，根据2010年中国耐药监测网数据[3]显示，鲍曼不动杆菌位于临床分离阴性菌的第三位，5523株不动杆菌属（鲍曼不动杆菌占89.6％）对亚胺培南和美罗培南耐药率为57.1％和58.3％，其中泛耐药鲍曼不动杆菌从2009年17.0%升到21.4%。
我院鲍曼不动杆菌携带方23基因及其耐药机制研究张梓岗1,于海娟2,戴晓坍3,夏雯3,丁龙坤3,席月3,张敏3,吴亮3,** (1江苏省江阴市青阳医院，江阴214400；2江苏省江阴市第三人民医院，江阴214400；3江苏大学医学院镇江212013)摘要：目的研究我院分离鲍曼不动杆菌携带Ha。
斑23基因的携带情况及其诱导细菌耐药机制。
方法收集江阴市青阳医院2019年1月至2019年12月间临床分离鲍曼不动杆菌，经VITEK-2全自动微生物鉴定及药敏分析系统鉴定耐亚胺培南菌株100株，敏感菌株100株。
通过多重PCR法检测上述菌株中弘也_23、bla0XAU.bla0XA5^abla0XA^基因携带情况。
通过PCR法扩增亚胺培南耐药的鲍曼不动杆菌Ha。
尬23的0抽序列，构建过表达载体MaO坯23巾丫毗匕3并电转化鲍曼不动杆菌(ATCC17978),以硫酸卡那霉素和美罗培南共同筛选过表达〃加如公基因的菌株。
釆用稀释法检测转化Wa°〃23/pYMAb3载体和pYMAb3空载体的菌株对亚胺培南的MIC。
结果我院耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌均携带Na。
坯23,敏感株未检出携带该基因。
RT-PCR法可检出转化i/a0X1.23/pYMAb3载体菌株表达6%^基因，而转化pYMAb3空载体菌株未检出bla。
沁基因表达。
转化仏。
林2s/pYMAb3载体菌株对亚胺培南MIC为32ng/mL,转化空载体菌株MIC仅为0.5ug/mL。
结论我院耐亚胺培南的鲍曼不动杆菌均携带基因，可以作为耐药菌株筛选的分子标记。
由质粒携带的弘:如一力基因是诱发我院鲍曼不动杆菌耐药的重要原因，在院感工作中需高度重视。
关键词：鲍曼不动杆菌；耐药；bla。
沁;转化中图分类号：R978.1文献标志码：A文章编号：1001-8751(2021)01-0024-05The bla OXA23Gene of A cinetobacter baumannii in our Hospital and theMechanism of the Drug ResistanceZhang Zi-gang1,Yu Hai-juan2,Dai Xiao-yue3,Xia Wen3,Ding Long-kun3,Xi Yue3,Zhang Min3,Wu Liang3(1Jiangsu Province Hospital of Qingyang,Jiangyin214400;2 The third people's hospital of Jiangyin,Jiangyin214400;3School of medicine,Jiangsu university,Zhenjiang212013)Abstract:Objective To study the distribution of Acinetobacter baumannii canying bla OXA23gene in our hospital and the mechanism of inducing bacterial resistance.Methods A total of200strains including100strains of imipenem resistant and100strains of sensitive A.baumannii were collected from Qingyang Hospital from January 2019to December2019.The bacterial identification and drug susceptibility analysis were carried out by VITEK-2 system.The genes of bla0XA2V bla OXA24,bla OXA5i and bla0XA5Z gene were detected by multiplex PCR.The bla OXA23 gene ORF sequence from imipenem-resistant strain was amplified by PCR and ligated with pYMAb3by T4ligase. The bla OXA23/pYMAb3vector was transfected into A.baumannii(ATCC17978)by electroporation.The mutant strain overexpressing bla OXA23gene was selected by sulfuric acid kanamycin and meropenem.The bla0XA13gene expression was determined in both fe/a^^/pYMAbS vector transfected strain and pYMAb3vector transfected strain by RT-PCR. The MICs of these two strains to imipenem was determined by dilution method.Results The imipenem-resistant A. baumannii in our hospital carried the bla OXA23gene,while the sensitive strains did not cany bla OXA23gene.The RT-PCR assay could detect the bla OXA23gene expression in bla OXA23/pYMAb3vector transfected strain,while the bla OXA23 gene expression did not be detected in pYMAb3vector transfected strain.When transfected with bla OXA23/pYMAb3 vector,the imipenem MIC reached to32|ig/mL,and the imipenem MIC of strain transfected with pYMAb3vector 收稿日期：2020-05-28作者简介：张梓岗，副主任医师，主要从事感染免疫保护与致病机制研究。
鲍曼不动杆菌耐药性相关基因及其调控机制研究进展温海初;牛雨佳;陈丽华【摘要】鲍曼不动杆菌作为一种耐药机制复杂、耐药范围广泛的条件致病菌受到临床和科研人员的高度关注.目前临床用于鲍曼不动杆菌治疗的主要抗菌药物有β-内酰胺类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类药物等,然而几乎所有抗菌药物都已出现不同程度的耐药现象.基因水平研究有助于阐明复杂的耐药机制,提出治疗新方案.本文主要对近年来发现的常用抗菌药物耐药基因及其调控机制作一综述.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2016(034)002【总页数】3页(P137-139)【关键词】鲍曼不动杆菌;耐药基因;调控机制【作者】温海初;牛雨佳;陈丽华【作者单位】中南大学湘雅医学院检验系,长沙410013;中南大学湘雅医学院检验系,长沙410013;中南大学湘雅三医院检验科,长沙410013【正文语种】中文【中图分类】R446.5鲍曼不动杆菌为不动杆菌属中最常见的一种革兰阴性杆菌，广泛存在于自然界的水及土壤、医院环境、人体皮肤、呼吸道、消化道和泌尿生殖道中，引发败血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎、院内获得性肺炎等。
该菌在医院环境中可长期存活，极易造成危重患者的感染，是医院感染的重要病原菌。
因此，在已发现多种耐药机制的前提下，对鲍曼不动杆菌耐药性相关基因及其调控机制的进一步研究具有重要临床意义。
本文对此作一综述。
根据现有研究，鲍曼不动杆菌的耐药机制包括产生灭活酶和修饰酶、细胞外膜通透性的改变、抗菌药物作用靶位改变和生物被膜的形成，此外主动外排泵在鲍曼不动杆菌获得性耐药中也扮演重要角色。
1.1 药物灭活酶和修饰酶的合成在鲍曼不动杆菌耐药机制研究中受到关注较多的灭活酶为B类金属β-内酰胺酶和D类苯唑西林β-内酰胺酶，其可水解破坏菌体内的相应β-内酰胺类抗菌药物的β-内酰胺环。
另外，鲍曼不动杆菌可产生常见的3类氨基糖苷修饰酶：乙酰转移酶(AAC)使游离氨基乙酰化；磷酸转移酶(APH)使游离羟基磷酸化；核苷转移酶(AAD)使游离羟基核苷酰化。
鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性分析1. 引言1.1 研究背景鲍曼不动杆菌是一种常见的医院感染病原体，通常会引起严重的医院感染，特别是在危重患者中造成严重的并发症。
随着抗生素的滥用和不当使用，鲍曼不动杆菌的耐药性不断增加，给临床治疗带来了挑战。
对鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性进行深入分析和研究，将有助于制定更科学、更有效的治疗方案，减少医院感染的发生率，降低患者的死亡率，提高医疗质量。
本研究旨在探讨鲍曼不动杆菌在临床中的分布情况及其耐药性机制，为临床医生提供更准确的治疗建议，为临床实践提供科学依据，对于改善医疗质量和患者生存率具有重要意义。
1.2 研究目的本研究的目的是探讨鲍曼不动杆菌在临床中的分布情况以及其耐药性的分析。
通过对不同临床样本中鲍曼不动杆菌的检测和分析，了解其在不同人群和环境中的分布情况，为预防和控制鲍曼不动杆菌感染提供依据。
深入研究鲍曼不动杆菌的耐药性情况，分析其对常规抗生素的抗性机制，有助于制定更有效的治疗方案和预防策略。
通过本研究，旨在提高对鲍曼不动杆菌的认识，促进临床医生对该细菌感染的警惕，并为临床治疗提供参考依据，从而减少其对患者健康的危害。
1.3 研究意义鲍曼不动杆菌是一种常见的致病菌，具有较强的耐药性，对人类健康构成了一定的威胁。
研究鲍曼不动杆菌的临床分布及耐药性，有助于了解该菌株在不同人群中的患病情况，为医生提供更有效的治疗方案。
通过对其耐药性的分析，可以帮助医疗机构制定更科学的感染控制措施，减少因感染而导致的疾病负担和医疗费用。
深入研究鲍曼不动杆菌的耐药机制，对于发展新型抗菌药物以及提高抗生素的使用效率具有积极的意义。
本研究对于促进临床医学领域的发展和人类健康的维护具有重要的意义。
2. 正文2.1 鲍曼不动杆菌的临床分布鲍曼不动杆菌（Acinetobacter baumannii）是一种常见的多重耐药细菌，广泛存在于医院环境中，并对免疫力低下的患者造成严重的感染。
根据临床病例和研究数据，鲍曼不动杆菌的临床分布主要集中在重症监护病房、手术室、外科和呼吸科等医疗单位。
鲍曼不动杆菌耐药机制及相关中药研究进展崔煦然;赵京霞;郭玉红;丁军颖;刘清泉【摘要】Acinetobacter baumannii is an important pathogenic bacteria causing infectious diseases in hospital .It shows multi drug resistance and pan drug resistance against antibiotics .The treatment of diseases caused by this bacteria is very difficult to given as its drug resistance mechanism is complex .Traditional Chinese Medicine had significant antibacterial effect of antibacterial , proved in long term of application .Further researches on resistance of bacteria with TCM is meaningful .This article is a review on drug resistance mechanism of Acinetobacter baumannii and related researches of Traditional Chinese Medicine to be the basis of Acineto -bacter baumannii infection control .%鲍曼不动杆菌是医院内引起感染性疾病的重要病原菌,在与抗生素对峙的过程中呈现出多重耐药、泛耐药性的特点,其耐药机制复杂,治疗该类菌种所致疾病难度大.中药在长期的使用过程中,表现出显著的抗菌作用.深入研究中药的作用,对解决细菌耐药的问题具有重要的意义.作者经过查阅文献,就鲍曼不动杆菌耐药机制及相关中药的研究作一综述,以期为控制鲍曼不动杆菌的感染奠定基础.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2016(011)010【总页数】5页(P1961-1965)【关键词】鲍曼不动杆菌;耐药性;中药【作者】崔煦然;赵京霞;郭玉红;丁军颖;刘清泉【作者单位】中医感染性疾病基础研究北京市重点实验室,北京,100010;北京市中医研究所,北京,100010;首都医科大学附属北京中医医院,北京,100010;中医感染性疾病基础研究北京市重点实验室,北京,100010;北京市中医研究所,北京,100010;首都医科大学附属北京中医医院,北京,100010;中医感染性疾病基础研究北京市重点实验室,北京,100010;首都医科大学附属北京中医医院,北京,100010;北京中医医院顺义医院,北京,101300;中医感染性疾病基础研究北京市重点实验室,北京,100010;北京市中医研究所,北京,100010;首都医科大学附属北京中医医院,北京,100010;中医感染性疾病基础研究北京市重点实验室,北京,100010;北京市中医研究所,北京,100010;首都医科大学附属北京中医医院,北京,100010;北京中医医院顺义医院,北京,101300【正文语种】中文【中图分类】R969鲍曼不动杆菌(Acinetobacter Baumannii,AB)是医院内引起感染的重要条件致病菌[1]，常引起院内获得性肺炎，其检出率逐渐升高。
鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药性及基因分析目的：通过研究本院21株鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药基因和耐药情况，为临床用药提供依据。
方法：用珠海迪尔DL-96微生物鉴定系统进行细菌鉴定及K-B法进行药敏试验，并用碳青霉烯酶4种基因的特异性引物对其进行聚合酶链反应(PCR)扩增和基因型分析，通过网上GemBank进行比对，以确定编码酶基因的类型。
结果：21株鲍曼不动杆菌对左旋氧氟沙星、丁胺卡那霉素、多粘菌素B的耐药率分别为50%、25%、10%。
其他抗生素的耐药率均在80%以上。
携带D类碳青霉烯酶OXA-23基因有17株(81%)，携带OXA-51基因有15株(60%)，OXA-24、OXA-58基因引物PCR扩增为阴性，OXA-23基因阳性株进行测序后通过在网上GemBank比对与OXA-23标准株99%同源，OXA-51基因阳性株与OXA-51标准株98%同源。
结论：鲍曼不动杆菌对多粘菌素的耐药率最低，其次是丁胺卡那霉素和左旋氧氟沙星，其中以携带OXA-23型碳青霉烯酶基因为主，应严格监测其耐药情况，针对性地选用抗生素，对防止其流行和多重耐药性的产生有着重要意义。
鲍曼不动杆菌是一种分离率和耐药性最高的不动杆菌，是一种条件致病菌，也是重要的医院感染病原菌。
近年来，由于广谱抗菌药物的滥用，多重耐药不动杆菌日趋增多，甚至出现多重耐药和全耐菌株，给临床治疗带来极大的困难。
因为鲍曼不动杆菌在干燥物体表面生存时间可长达25 d以上，极易造成流行，给临床抗感染治疗带来很大的困难，也对院内感染的控制提出了新的要求[1]。
鲍曼不动杆菌的耐药机制非常复杂，如产酶、PBP改变外膜蛋白缺失等因素有关。
本文通过对21株对耐碳青霉烯类抗生素的鲍曼不动杆菌的耐药性和基因分析，进一步了解其耐药机制，为临床治疗和控制感染提供依据。
1材料与方法1.1菌株来源所有菌株均为从本院2009年1月-2011年1月住院患者痰液、血液、尿液等标本分离所得的非重复菌株，标准菌株为大肠ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853。
鲍曼不动杆菌OXA-23、OXA-24耐药基因研究
摘要】目的研究临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌的OXA-23、OXA-24耐药基
因研究。
方法用微量肉汤稀释法测定最小抑菌浓度（MIC值）；PCR检测OXA-23、OXA-24耐药基因，并对扩增出的基因测序比对。
结果90株鲍氏不动杆菌，均为多重耐药菌株，其中同时对5种抗生素耐药的占81.6%；检出6株携带OXA-23基因（全部对美罗培南和亚安培南耐药）、均未检出OXA-24基。
结论某医
院流行产OXA-23型酶的菌株，需要采取措施防止其进一步传播。
【关键词】鲍曼不动杆菌多重耐药耐药基因
鲍曼不动杆菌广泛存在于医院环境中，如呼吸机设备、消毒液、透析机、水龙
头等[1]，是最常见的条件致病菌之一，可以引起多种医院感染，如肺炎、伤口感染、败血症和脑膜炎等。
随着抗生素的广泛使用，多重耐药鲍曼不动杆菌不断发展。
因此，研究鲍曼不动杆菌多重耐药分子机制，可为合理选择抗生素，采取有
效措施防止耐药株进一步扩散提供理论依据。
本研究对2004年1月～2008年7
月临床分离的90株鲍曼不动杆菌的耐药谱进行了测定，对OXA-23、OXA-24耐药
基因进行了检测。
1 材料与方法
1.1 实验菌株
2004年1月至2008年7月分别从河北省8家医院ICU室、呼吸内科、神经外科、急诊科等收集到90株鲍氏不动杆菌，其中痰液标本82株、分泌物3株、尿
液2株、咽拭子1株、耳分泌物1株、脓液1株。
采用法国生物梅里埃(API) 公司
生产的VITEK-32型全自动微生物分析仪及配套试剂盒对细菌进行鉴定。
1.2 试剂和主要仪器
抗生素：美罗培南（MEM）、亚胺培南(IPM)、哌拉西林/他唑巴坦(TZP)、左氧
氟沙星(LEV)、头孢他啶（CAZ）、阿米卡星（AKN）、头孢哌酮/舒巴坦（CFP/SB）购自中国药品生物制品检定所；DNA分子量Maker、dNTP、Taq DNA聚合酶等分
子生物学试剂，均购自Sigma公司；PCR引物由博迈德科技发展有限责任公司合成，胶回收试剂盒购自Promega公司。
主要仪器：台式低温高速离心机（江苏省太仓医疗器械厂），WGP-300型电热
恒温培养箱（重庆万达仪器有限公司），HBPX220型PCR仪（Hybaid公司），凝
胶成像系统（上海复日科技有限公司）
1.3 MIC测定
采用WHO推荐的微量液体稀释法进行抗生素的最小抑菌浓度（MIC）测定，根
据美国临床实验室标准委员会（CLSI）[2]标准判断结果。
大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853和肺炎克雷伯ATCC70060作为质控菌。
1.4 基因PCR检测
检测目的基因引物序列见表1。
表1 目的基因引物序列及产物
基因检测： PCR反应体系均为50 μl：10 ×PCR反应缓冲液5 μl、2.5 mmol/L dNTP 4 μl、10 μmol/L 上、下游引物各2 μl、Taq DNA 聚合酶1.0 U、DNA模板100 ng。
PCR反应条件：94 ℃预变性5 min；94 ℃25 s，50 ℃ 45 s， 72 ℃ 90 s，30 个
循环；72 ℃延伸10 min。
1.5 测序和数据处理
对扩增阳性株PCR产物进行测序（上海生工）和序列比对（用软件DNAMAN
5.2.2）。
采用SPSS13.0统计分析软件进行数据分析，P<0.05即为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 标本类型
90株鲍曼不动杆菌中，来源于痰标本最多，为82株，占91.2%；其他标本依
次为分泌物3株（3.3%），尿液2株（2.2%）。
2.2 病区分布
90株鲍曼不动杆菌中，分离自ICU最多，为30株，占33.2%；其他依次为呼吸内科18株（20.0%）、神经外科病房7株（7.8%）、急诊科6株（6.7%）等。
2.3 MIC法药敏结果
美罗培南（MEM）、亚胺培南(IPM)敏感率分别为58.9%、51.1%，头孢哌酮/舒
巴坦（CFP/SB）敏感率为30.0%、左氧氟沙星(LEV)敏感率为21.1%、哌拉西林/他
唑巴坦(TZP)敏感率20.0%、阿米卡星（AKN）、头孢他啶（CAZ）敏感率分别为16.7%和15.6%。
详见表 2。
表2 鲍曼不动杆菌对抗菌药物的耐药谱（数量，%）
2.4 耐药基因扩增结果
采用特异性引物对90株鲍曼不动杆菌分离株进行耐药基因扩增，扩增产物经
1.3%琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察特异性条带。
结果有10株OXA-23基因阳性，阳性率为10%；未扩增出OXA-24耐药基因。
耐药基因型代表性菌株PCR扩增产
物电泳结果见Fig.1。
Fig.1 The PCR product of OXA-23 gene run on 1.3 % (w/v) agarose gel electrophoresis
M:Markers; 4、5、8、9、11、12: A.baumannii lsolates
3 讨论
β-内酰胺酶基因是鲍曼不动杆菌最主要的耐药基因，包括超广谱β-内酰胺酶类（属A类，包括TEM-型、SHV-型、SIM-型、PER-型等基因）、金属酶类（属B类，包括IMP和VIM基因）、OXA型酶（属D类）等[2,3]。
OXA-23型酶，水解青霉
素和头孢菌素、碳青霉烯，使菌株产生对亚胺培南类抗生素的耐药性[4]。
鲍曼不
动杆菌主要分布于重症监护病房(ICU)，占33.2%，其他依次为呼吸内科18株（20.0%）、神经外科病房7株（7.8%）、急诊科6株（6.7%）等，并且在所有
标本类型中痰标本的检出率最高，占91.2%。
鲍曼不动杆菌的耐药谱广，不易被
抗菌药物所清除，感染后治疗非常棘手，特别是对那些免疫功能低下的危重患者
将会导致非常严重的后果。
D类碳青霉烯酶对亚胺培南、头孢噻肟、头孢他啶的
水解活性较低，但常同时合并外膜通透下降和(或)主动外排系统增强等，因此耐
药性较强[4]。
故对OXA-23型β-内酰胺酶基因流行病区，应及时采取有效措施，
防止高耐药和多重耐药株的进一步传播，以免给今后的治疗带来困难。
也对医院
不合理用药提出警告，在治疗不动杆菌引起感染时, 必须合理使用抗菌药, 避免多
重耐药现象再次发生。
在医院间转移病人时必须注意鉴定和追踪耐药不动杆菌[5]。
参考文献
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