1 772-775 转849 基础研究 4+18 食源性单核细胞增生李斯特菌四环素、红霉素耐药基因研究
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食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测分析作者:***来源:《食品安全导刊》2022年第03期摘要:目的:分析食品中單核细胞增生李斯特氏菌的检测结果,以及时发现食品安全隐患,为食品安全监管提供参考依据。
方法:严格按照《全国食源性致病菌监测工作手册》中的单核细胞增生李斯特氏菌检验标准,对某市2021年1—12月定期采样的10类常用食品进行单核细胞增生李斯特氏菌检测,分析其阳性检出率。
结果:897份10类常用食品中,检出单核细胞增生李斯特氏菌36份,阳性检出率为4.01%,结论:食品中存在单核细胞增生李斯特氏菌污染的风险,其中以凉拌菜及冷藏食品的污染风险最高,应加强该方面的防控,确保食品安全。
关键词:单核细胞增生李斯特氏菌;食品安全;检测Detection and Analysis of Listeria Monocytogenes in FoodSHI Hongxia(Ulanqab Center for Disease Control and Prevention Inner Mongolia, Ulanqab 012000,China)Abstract: Objective: To analyze the detection results of Listeria monocytogenes in food,find the hidden dangers of food safety in time, and provide reference basis for food safety supervision. Methods: The detection of Listeria monocytogenes in the national manual for the monitoring of foodborne pathogens shall be strictly followed. According to the test standard, 10 kinds of common foods regularly sampled in a city from January to December 2021 were tested for Listeria monocytogenes, and the positive detection rate was analyzed. Conclusion: There is a risk of Listeria monocytogenes contamination in foods, among which cold dishes and refrigerated foods have the highest risk of contamination. Prevention and control in this regard should be strengthened to ensure food safety.Keywords: listeria monocytogenes; food safety; testing单核细胞增生李斯特氏菌广泛存在于土壤、蔬菜、粪便及多数食品中,该病菌对低温环境具有较好的耐受性,在5 ℃时可大量繁殖,当该病菌进入生物表层后会形成生物膜,并能提高对理化因素的抵抗力,是食源性疾病的主要致病菌之一,可通过粪便或食物进行传播。
食品中单核细胞增生李斯特氏菌的检测方法研究进展刘书花;魏云波;林小静;李景超【摘要】单核细胞增生李斯特氏菌是一种重要的食源性致病菌,广泛分布于自然界.针对目前单核细胞增生李斯特氏菌的检测现状,总结了4种现行有效的常用检测方法,并对各种检测方法的优缺点进行了分析比较.实时荧光定量PCR检测技术,可精确定量、反应迅速、信号重复性好、灵敏度和特异性高,不需要凝胶电泳过程,避免了扩增产物对环境造成的污染问题,将是未来分析检测发展的一个主要趋势.【期刊名称】《现代农业科技》【年(卷),期】2010(000)019【总页数】2页(P327-328)【关键词】单核细胞增生李斯特氏菌;传统检测方法;酶联免疫技术;分子生物学技术【作者】刘书花;魏云波;林小静;李景超【作者单位】山东省分析测试中心,山东省大型精密仪器应用技术重点实验室,山东济南,250014;山东省分析测试中心,山东省大型精密仪器应用技术重点实验室,山东济南,250014;山东省分析测试中心,山东省大型精密仪器应用技术重点实验室,山东济南,250014;山东省分析测试中心,山东省大型精密仪器应用技术重点实验室,山东济南,250014【正文语种】中文【中图分类】R155.5单核细胞增生李斯特氏菌(Listeie monocytogenes简称L.M;单增李氏菌)是一种人畜共患病病原菌[1],使人和动物患脑膜炎、脑炎、败血症及造成怀孕妇女流产、死胎等疾病。
近年来国外报道该菌所致的食物中毒越来越多,病死率高达30%~70%[2-3]。
国内也不断有散发病例,引起了国内医学界的普遍关注。
WHO在20世纪90年代已将其列为食品四大致病菌之一[4-5]。
该菌在自然界分布广泛,以家畜、家禽兽为主要宿主,很容易污染食品而引起食物中毒和李斯特病暴发[6-7]。
食品是导致人类受单核细胞增生李斯特氏菌感染的主要传播途径,该菌在4℃冰箱保存的食物中仍可生长繁殖,是冷藏食品威胁人类健康的主要病原菌。
龙源期刊网 单核细胞增生李斯特菌检测技术是什么作者:周林来源:《学习与科普》2019年第31期单核细胞增生李斯特菌包含在食源性致病菌范围当中。
就目前来看,免疫学检测方法和分子学检测方法是很多单增李斯特菌检测方法中使用最频繁的两种方法。
免疫学检测方法具有操作简便、时间短的特点,然而其非常依赖高特异性的抗体,结果容易出现失误,需要对检测结果进行详细判定。
和免疫学检测法相比,分子学检测方法具有灵敏度高、省时省力等特点,然而分子学检测方法在使用过程中需要较多的操作经验,同时不能在大批量检测中应用。
一、单核细胞增生李斯特菌概述(一)生物学特征单核细胞增生李斯特菌是一种革兰阳性短杆菌,其对营养的需求量较少,生长温度通常最低不能低于2摄氏度,最高不能超过42摄氏度,同时可以在弱酸、弱碱和6.5%NaCl肉汤中得到快速成长,并且能够形成β-溶血。
在其生长过程中还可以发酵出很多种糖类物质,按照O抗原以及H抗原能够分解成十三中血清型,其中1/2a与4b这两种类型在致病菌株中的占比最大。
(二)污染源及流行病学单核细胞增生李斯特菌是自然界中常见的一种致病菌,抗冻能力非常强,其主要传播路径是通过粪-口这种方式进行。
健康人粪便中的单核细胞增生李斯特菌携带率通常为0.6%至16.0%,然而奶制品、水产品以及家禽中均携带相应的单核细胞增生李斯特菌。
另外,单核细胞增生李斯特菌通过胎盘、黏膜、性以及产道鞥部位都可以进入到体内,从而导致感染。
单核细胞增生李斯特菌的致病性与其具有的毒作用、宿主的免疫状况以及年龄具有密不可分的关系,宿主的细胞免疫可以有效的解除单核细胞增生李斯特菌中存在的病菌。
各种免疫力弱的人群都属于易感人群,比如新生儿、四十岁以上的成人等。
健康成人感染后会出现和感冒相似的情况,然而其他免疫力功能较低的人可能会出现更加严重的症状,乃至会直接死亡。
二、相关检测技术(一)聚合酶链反应技术就目前来看,聚合酶链反应技术得到了广泛的普及与运用。
食源性单核细胞增生李斯特菌四环素、红霉素耐药基因研究闫鹤1,陈妙瑞2,石磊1(1.华南理工大学轻工与食品学院,广东广州510640)(2.厦门银祥集团有限公司,福建厦门 361100)摘要:研究了食源性单核细胞增生李斯特菌四环素、红霉素耐药基因的分布状况及和耐药表型的关系。
采用微量肉汤稀释法对2005~2007年河北省疾病预防控制中心分离到的食源性单核细胞增生李斯特菌株进行四环素、红霉素药敏实验;应用PC R方法对实验菌株进行四环素耐药基因tet(M)、tet(S)、tet(L)、tet(K)、tet(B)、及与tet(M)基因关系密切的转座子Tn916、红霉素核糖体甲基化酶基因ermB、ermC、及与ermB基因关系密切的转座子Tn917检测,对阳性样本序列进行鉴定分析;应用血清学分型、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、及脂肪酸聚类分析方法分析四环素耐药菌株之间的相关性,确定基因型和多态性。
结果表明,91株单核细胞增生李斯特菌四环素敏感77株、耐药14株;红霉素敏感89株、耐药2株,其中包含1株菌同时交叉耐药四环素和红霉素;14株四环素耐药株中含tet(M)基因的13株,在13株tet(M)基因阳性菌中,tet(M)位于Tn916转座子上的9株;1株同时交叉耐药四环素、红霉素菌同时携带tet(S)、ermB基因;ermC基因、转座子Tn917均为阴性;四环素、红霉素敏感株中未检测到上述任何耐药基因。
14株四环素耐药菌株血清型分布以1/2a型为主(n=12),部分菌株PFGE、脂肪酸分型完全一致。
食源性单核细胞增生李斯特菌获得tet(M)基因是耐四环素的主要机制之一,具有水平传播耐药基因能力的接合型转座子Tn916与该菌四环素耐药播散有直接关系;ermB基因介导的核糖体靶位点改变存在食源性单核细胞增生李斯特菌红霉素耐药株中;PFGE基因型结合脂肪酸聚类分析能够用来分析菌株之间的相关性。
关键词:单核细胞增生李斯特菌;tet基因;erm基因;接合型转座子Tn916、Tn917文章篇号:1673-9078(2010)8-772-775Tetracycline and Erythromycin Resistant Genes in Foodborne ListeriamonocytogeiesYAN He1, CHEN Miao-Rui2, SHI Lei1(1.College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou510640, China)(2.Xiamen Yinxiang Group CO., Ltd, Xiamen 361100, China)Abstract: To know the different patterns of tetracycline resistant genes and transposable elements Tn916, erythromycin resistant genes and transposable elements Tn917 and the relationship of drug resistance gene and resistance phenotype in foodborne Listeria monoeytogenes isolates, all isolates were tested for their resistance to tetracycline, erythromycin by the broth microdilution method. The presences of tet(M), tet(S), tet(L), tet(K), tet(B) genes, conjugative transposon Tn916, ermB, ermC, transposon Tn917 were determined by polymerase chain reaction amplification. Revived tetracycline resistant isolates were subjected to serotyping, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) and fatty acid methyl ester (FAME) analysis to investigate the genetic relativity and epidemiological signification. Results showed that among 14 tetracycline-resistant isolates, 13 carried tet(M) gene including nine possessing Tn916, and one harbored tet(S) and ermB gene; However, when the tetracycline-susceptible and erythromycin-susceptible isolates were also screened for tet and erm determinants no positive result was obtained. The 14 tetracycline-resistant L. monocytogenes isolates could be grouped into two different serotypes (1/2a, 1/2c), the majority (12 isolates) were of serotype 1/2a. The identification of some strains by fatty acid methyl ester (FAME) analysis was in accordance with PFGE. The conjugative transposon Tn916 is the important determinants of the resistance spreading of the L. monocytogenes. Ribosomal modification by a methylase encoded by ermB gene may play role in the mechanisms of macrolide resistance of L. monocytogenes isolates in China. The combination of fatty acid methyl ester772收稿日期:2010-04-18基金项目:国家自然科学基金项目(20877028);第二批中国博士后科学基金特别资助(200902327);华南理工大学中央高校基本科研业务费(2009ZM0224)作者简介:闫鹤(1972-)女,讲师,博士,主要从事细菌耐药机制及食品安全研究通讯作者:石磊教授(FAME) analysis along with PFGE and serotype analyses enabled us to identify differences among some isolates.Key words:Listeria monoeytogenes; serotype; antibiotic-resistant genes; Tn916 conjugative transposon 773单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes),是细胞内寄生的革兰氏阳性短杆菌,也是一种重要的食源性人兽共患病原菌,能引起人和动物李斯特菌病,如人类的脑膜炎、败血症、肺炎、热性胃肠炎、流产等疾病[1,2],且致病性强、致死率高达30%[2]。
单核细胞增生性李斯特菌快速检测技术研究引言:单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种潜伏在食品中常见的致病菌,能引起严重的食物中毒,威胁着人类的健康与生命安全。
因此,研究和发展一种快速、高效的检测技术对于食品安全至关重要。
本文旨在探讨目前关于单核细胞增生性李斯特菌快速检测技术的研究进展,并为进一步的研究和应用提供参考。
一、单核细胞增生性李斯特菌简介单核细胞增生性李斯特菌是一种革兰氏阳性菌,能在广泛的温度(0-45℃)和pH(4.4-9.6)范围内生长,且具有金属抗药性。
在食品中,该菌可以通过肉类、蔬菜和奶制品等途径传播,使其成为食品安全的重要隐患之一。
由于该菌对常规的煮沸和加热处理具有一定的抵抗能力,因此需借助有效的检测技术对其进行快速、准确的检测。
二、传统检测方法的局限性目前常用的单核细胞增生性李斯特菌检测方法主要包括传统培养方法、蛋白酶结合效应(ELISA)和分子生物学方法等。
然而,这些方法存在着以下局限性:1. 传统培养方法耗时长,需要较长的培养时间才能获得结果,无法快速检测;2. ELISA方法虽然具有较高的灵敏度和特异性,但其需要复杂的样品处理和实验步骤,使得检测过程繁琐;3. 分子生物学方法虽然能够提供较快的检测结果,但其仪器成本高,技术要求较高,限制了其在实际应用中的推广。
三、快速检测技术的研究进展随着科学技术的发展,研究人员不断探索和开发更为快速、准确的单核细胞增生性李斯特菌检测技术。
以下是几种常见的快速检测技术:1. 荧光定量聚合酶链反应(qPCR)技术:该技术以其高效、精确和快速的特点,被广泛应用于单核细胞增生性李斯特菌的检测。
qPCR技术可以快速扩增和定量样品中的特定基因片段,结合荧光定量技术实现李斯特菌的快速检测和定量。
2. 微生物芯片技术:微生物芯片是基于生物芯片技术的一种新型检测平台,可实现对多种菌种的快速识别和检测。
研究人员通过设计特定的探针,可以在芯片上同时检测多种致病菌,包括单核细胞增生性李斯特菌,提高了检测效率和准确性。
高效噬菌体防控食品源单增李斯特菌的研究进展
梁馨文;刘振杰;张菊梅;陈谋通;吴清平
【期刊名称】《现代食品科技》
【年(卷),期】2024(40)1
【摘要】单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,简称单增李斯特菌)是一种重要的食源性致病菌,因其具有耐高盐度、宽pH值和宽温度等特点,对食品安
全构成了重大威胁。
近年来,由于细菌的耐药进化速度惊人,检测与控制食品中的单
增李斯特菌是食品行业和公共卫生部门面临的一项重要挑战。
而噬菌体(Bacteriophage,Phage)因其特异性强、安全性好、繁殖速度快等特点,在食品有
害微生物防控应用中显示出巨大的潜力。
大量的研究报道表明噬菌体作为一种天然、绿色的杀菌剂,在不同种类食品致病微生物防控中具有很好的前景。
尽管噬菌体生
物防治仍存在宿主谱窄及宿主易产生抗性菌等挑战,但其作为一种安全有效的方法,
将在防控食品中的单增李斯特菌发挥重要作用。
本文综述了食品中单增李斯特菌噬菌体分离、快速检测与高效防控方面的研究现状,为开发基于噬菌体的高效防控新
技术提供参考。
【总页数】8页(P304-311)
【作者】梁馨文;刘振杰;张菊梅;陈谋通;吴清平
【作者单位】华南农业大学食品学院;广东省科学院微生物研究所
【正文语种】中文
【中图分类】J62
【相关文献】
1.单增李斯特菌溶源性噬菌体的诱导及鉴定
2.出入境动物源性食品中单增李斯特菌的多位点序列分型分析
3.食品源单增李斯特菌喹诺酮类抗生素耐药机制研究
4.单增李斯特菌动物源性食品分离株对苯扎氯铵的抗性及分子特征分析
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引用格式:林琦钰, 王丹庆, 马沁沁. 食源性单核细胞增生李斯特菌快速检测研究进展[J]. 中国测试,2023, 49(11): 68-75. LIN Qiyu, WANG Danqing, MA Qinqin. Research progress in rapid detection of food-borne Listeria monocytogenes [J]. China Measurement & Test, 2023, 49(11): 68-75. DOI: 10.11857/j.issn.1674-5124.2023080111食源性单核细胞增生李斯特菌快速检测研究进展林琦钰, 王丹庆, 马沁沁(四川师范大学生命科学学院,四川 成都 610101)摘 要: 食品安全是人类健康非常关注的问题,其中微生物污染是其主要的风险因素之一。
单核细胞增生李斯特菌是一种人畜共患病的病原体,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多。
该菌广泛存在于自然环境中,低温条件下仍可生长繁殖,是威胁人类健康的主要病原菌之一。
传统细菌检测方法耗时长,不能满足现场检测的需求。
因此开发快速、准确、高效、可靠的单核细胞增生李斯特菌检测方法是目前研究的热点。
基于免疫学、分子生物学、生物传感器和噬菌体等技术的检测方法成为单核细胞增生李斯特菌检测的重要手段。
该文综述各类检测技术的研究进展,阐述各个方法在致病菌检测中的原理、特点、应用现状和发展,并讨论各方法的优缺点,以期为单核细胞增生李斯特菌检测新技术的研发提供参考。
关键词: 食品安全; 单核细胞增生李斯特菌; 快速检测中图分类号: TB9文献标志码: A文章编号: 1674–5124(2023)11–0068–08Research progress in rapid detection of food-borne Listeria monocytogenesLIN Qiyu, WANG Danqing, MA Qinqin(College of Life Sciences, Sichuan Normal University, Chengdu 610101, China)Abstract : Bacterial contamination is one of the major problems that is considered a serious health risk factor for food safety and human health. Listeria monocytogenes (LM) is a zoonotic pathogen that can cause a variety of clinical syndromes such as reason sepsis, meningitis, and monocytosis and is widely distributed in nature.Specifically, it can grow and reproduce at low temperatures, threatening the human health of raw foods.Conventional methods of LM detection are time-consuming and cannot meet the requirements for on-site detection. Therefore, there has been an increase in demand for the development of fast, accurate, efficient, and reliable detection methods for LM in recent years. Recent rapid detection methods have been developed based on immunology, molecular biology, biosensors, and bacteriophages. Herein, we summarize the principles,characteristics, and application of various rapid detection technologies for LM, and the advantages and disadvantages of these technologies were fully discussed. Hopefully, the review can provide a reference and offer a blueprint for the research and development of new technologies for detecting LM.Keywords : food safety; Listeria monocytogenes ; rapid detection收稿日期: 2023-08-24;收到修改稿日期: 2023-10-19基金项目: 国家自然科学基金(31800158)作者简介: 林琦钰(1998-),男,四川凉山彝族自治州人,硕士研究生,专业方向为资源与应用微生物学。
食源性单核细胞增生李斯特菌四环素、红霉素耐药基因研究闫鹤1,陈妙瑞2,石磊1(1.华南理工大学轻工与食品学院,广东广州510640)(2.厦门银祥集团有限公司,福建厦门 361100)摘要:研究了食源性单核细胞增生李斯特菌四环素、红霉素耐药基因的分布状况及和耐药表型的关系。
采用微量肉汤稀释法对2005~2007年河北省疾病预防控制中心分离到的食源性单核细胞增生李斯特菌株进行四环素、红霉素药敏实验;应用PC R方法对实验菌株进行四环素耐药基因tet(M)、tet(S)、tet(L)、tet(K)、tet(B)、及与tet(M)基因关系密切的转座子Tn916、红霉素核糖体甲基化酶基因ermB、ermC、及与ermB基因关系密切的转座子Tn917检测,对阳性样本序列进行鉴定分析;应用血清学分型、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、及脂肪酸聚类分析方法分析四环素耐药菌株之间的相关性,确定基因型和多态性。
结果表明,91株单核细胞增生李斯特菌四环素敏感77株、耐药14株;红霉素敏感89株、耐药2株,其中包含1株菌同时交叉耐药四环素和红霉素;14株四环素耐药株中含tet(M)基因的13株,在13株tet(M)基因阳性菌中,tet(M)位于Tn916转座子上的9株;1株同时交叉耐药四环素、红霉素菌同时携带tet(S)、ermB基因;ermC基因、转座子Tn917均为阴性;四环素、红霉素敏感株中未检测到上述任何耐药基因。
14株四环素耐药菌株血清型分布以1/2a型为主(n=12),部分菌株PFGE、脂肪酸分型完全一致。
食源性单核细胞增生李斯特菌获得tet(M)基因是耐四环素的主要机制之一,具有水平传播耐药基因能力的接合型转座子Tn916与该菌四环素耐药播散有直接关系;ermB基因介导的核糖体靶位点改变存在食源性单核细胞增生李斯特菌红霉素耐药株中;PFGE基因型结合脂肪酸聚类分析能够用来分析菌株之间的相关性。
关键词:单核细胞增生李斯特菌;tet基因;erm基因;接合型转座子Tn916、Tn917文章篇号:1673-9078(2010)8-772-775Tetracycline and Erythromycin Resistant Genes in Foodborne ListeriamonocytogeiesYAN He1, CHEN Miao-Rui2, SHI Lei1(1.College of Light Industry and Food Sciences, South China University of Technology, Guangzhou510640, China)(2.Xiamen Yinxiang Group CO., Ltd, Xiamen 361100, China)Abstract: To know the different patterns of tetracycline resistant genes and transposable elements Tn916, erythromycin resistant genes and transposable elements Tn917 and the relationship of drug resistance gene and resistance phenotype in foodborne Listeria monoeytogenes isolates, all isolates were tested for their resistance to tetracycline, erythromycin by the broth microdilution method. The presences of tet(M), tet(S), tet(L), tet(K), tet(B) genes, conjugative transposon Tn916, ermB, ermC, transposon Tn917 were determined by polymerase chain reaction amplification. Revived tetracycline resistant isolates were subjected to serotyping, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) and fatty acid methyl ester (FAME) analysis to investigate the genetic relativity and epidemiological signification. Results showed that among 14 tetracycline-resistant isolates, 13 carried tet(M) gene including nine possessing Tn916, and one harbored tet(S) and ermB gene; However, when the tetracycline-susceptible and erythromycin-susceptible isolates were also screened for tet and erm determinants no positive result was obtained. The 14 tetracycline-resistant L. monocytogenes isolates could be grouped into two different serotypes (1/2a, 1/2c), the majority (12 isolates) were of serotype 1/2a. The identification of some strains by fatty acid methyl ester (FAME) analysis was in accordance with PFGE. The conjugative transposon Tn916 is the important determinants of the resistance spreading of the L. monocytogenes. Ribosomal modification by a methylase encoded by ermB gene may play role in the mechanisms of macrolide resistance of L. monocytogenes isolates in China. The combination of fatty acid methyl ester772收稿日期:2010-04-18基金项目:国家自然科学基金项目(20877028);第二批中国博士后科学基金特别资助(200902327);华南理工大学中央高校基本科研业务费(2009ZM0224)作者简介:闫鹤(1972-)女,讲师,博士,主要从事细菌耐药机制及食品安全研究通讯作者:石磊教授(FAME) analysis along with PFGE and serotype analyses enabled us to identify differences among some isolates.Key words:Listeria monoeytogenes; serotype; antibiotic-resistant genes; Tn916 conjugative transposon 773单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes),是细胞内寄生的革兰氏阳性短杆菌,也是一种重要的食源性人兽共患病原菌,能引起人和动物李斯特菌病,如人类的脑膜炎、败血症、肺炎、热性胃肠炎、流产等疾病[1,2],且致病性强、致死率高达30%[2]。
该菌在自然界分布极为广泛,如土壤、污水、饲料、动物、健康人群等,因此大多数食品如生肉类、牛奶、海产品、加工制品(熟肉制品、奶酪、蔬菜沙拉及即食食品等)很容易受到不同程度的污染[3],且该菌对各种应激(低温、高盐、低pH 、氧化应激等)条件有很强的耐受性,进一步增大了对人类健康的危害性[4]。
自1988年首次报道李斯特菌四环素耐受株以来[5],不断从食品、环境及临床李斯特菌病病例中分离到四环素、红霉素耐药菌株[5~9]。
细菌对四环素类药物耐药的分子机理主要是编码外输泵蛋白、核糖体保护蛋白、灭活或钝化四环素的酶,已知的四环素耐药相关基因有20余种,目前报道已有39个革兰氏阴性菌和22个革兰氏阳性菌有四环素类耐药基因[10]。
在革兰氏阴性菌主要泵出机制tet(A) to tet(E) and tet(G) totet(J)[10],在革兰氏阳性菌中发现6类四环素耐药基因,包括:tet(K)、tet(L)、tet(M)、tet(O)、tet( P)、tet(S)[10]。
接合转座子Tn916是散播tet(M)介导的四环素耐药的重要载体,能在不同的革兰阳性菌间、革兰阳性菌和革兰阴性菌间转移[10]。
细菌对大环内酯类抗生素如红霉素耐药,主要是存在erm基因编码红霉素甲基化酶,使红霉素作用靶位发生改变,目前已发现erm基因家族有20余种基因亚型,其中ermB基因比较常见,有研究报道erm基因通常位于复合型转座子Tn917内[11]。
本研究检测食源性单核细胞增生李斯特菌四环素耐药基因tet(M)、tet(S)、tet(L)、tet(K)、tet(B)及转座子Tn916、红霉素耐药基因ermB 、ermC及转座子Tn917的分布状况,同时对四环素耐药株进行血清型、基因型、脂肪酸聚类分析研究,为进一步研究食源性单核细胞增生李斯特菌耐药机制以及耐药株之间相关性,为食品安全性奠定基础、为有效控制细菌耐药提供科学依据。
1 材料和方法1.1 菌株来源91株单核细胞增生李斯特菌均由河北省疾病预防控制中心在2005~2007年全省9个监测点采样六大类(生肉、熟肉、速冻米面制品、非发酵豆类制品、水产品和蔬菜)食品中检出,全部按照GB/T 4789.30-2003鉴定证实为单核细胞增生李斯特菌。
药敏质控菌株为Staphylococcus aureusATCC29213, Escherichia coli ATCC25922, and Enterococcus faecalis 29212。
1.2 主要仪器梯度Icycler Themal Cycler PCR仪(Bio-RAD);SmartSpec TM plus紫外分光光度计(Bio-RAD);凝胶成像分析系统UNIVERSAL HOOD Ⅱ,(Bio-RAD);VICTOR3多功能酶标仪(PerkinElmer),Midi微生物鉴定系统Sherlock MIS系统 (MIDI)。