单核细胞增生李斯特菌检验PPT课件
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单核细胞增生李斯特菌形态特征:①革兰氏阳性的类球形杆菌②大小约为0.4~0.5µm x 0.5~2.0µm③两端钝圆④在有些培养基中稍弯,单个、成V形或成对平行排列⑤在陈旧培养中的菌体可呈丝状及革兰氏阴性⑥兼性厌氧,无芽孢,一般不产生荚膜⑦在20~25℃时以4根周毛运动,在37℃时只有较少的鞭毛或1根鞭毛培养特性:①需氧和兼性厌氧②生长范围为2-42℃③最适温度为35-37℃④pH中性至弱碱性(pH9.6)⑤在6.5% NaCl 肉汤中生长良好。
⑥在20-25℃培养有动力,穿刺培养2-5天可见倒立伞状生长,肉汤培养物在显微镜下可见翻跟斗运动。
⑦在固体培养基上,菌落初始很小,透明,边缘整齐,呈露滴状,但随着菌落的增大,变得不透明。
⑧在5-7%的血平板上,菌落通常也不大,灰白色,刺种血平板培养后可产生窄小的β-溶血环。
⑨在0.6%酵母浸膏胰酪大豆琼脂(TSAYE)和改良Mc Bride(MMA)琼脂上,用45°角入射光照射菌落,通过解剖镜垂直观察,菌落呈兰色、灰色或兰灰色。
生化特性:(甘露醇、木糖为阴性,其他为阳)1.该菌触酶阳性,氧化酶阴性。
2.发酵多种糖类,产酸不产气。
发酵葡萄糖、乳糖、水杨素、麦芽糖、鼠李糖、七叶苷、蔗糖(迟发酵)、山梨醇、海藻糖、果糖。
不发酵木糖、甘露醇、肌醇、阿拉伯糖、侧金盏花醇、棉子糖、卫矛醇和纤维二糖。
3.不利用枸橼酸盐,40%胆汁不溶解。
4.吲哚、硫化氢、尿素、明胶液化、硝酸盐还原、赖氨酸、鸟氨酸均阴性。
5.MR-VP试验和精氨酸水解阳性。
生化试验:①动力试验+原理:有动力的细菌扩散生长,培养基浑浊,无动力的细菌培养基澄清。
(结果:有动力,呈伞状生长,底为弯月牙形)②过氧化氢酶试验(触酶试验)+原理:具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢生成水和新生态氧,继而形成分子氧出现气泡。
(结果:汽包产生为+)应用:葡萄球菌和微球菌均产生过氧化氢酶,而链球菌属为阴性,故此试验常用于革兰阳性球菌的初步分群。
MM_FS_CNJ_03出口食品单核细胞增生李斯特氏菌斜射光镜MM_FS_CNJ_0344 出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验方法1. 适用范围本方法适用于牛乳、乳制品、水产品、肉及肉制品食品。
其他食品可参照采用。
2. 原理概要单核细胞增生李斯特氏菌是一种能引起人畜共患疾病的致病菌。
在胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂(TS2 YE、选择性培养基(MMA等平板上用45°角斜射光照射可观察到蓝色菌落;水解七叶苷并与柠檬酸铁铵反应产生黑色菌落。
3. 主要试剂和仪器. 主要试剂(包括培养基)胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE (见B1);胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂(TSA- YE (见B2); 增菌培养液(EB (见B3 ;选择性培养基(MMA (见B4 ;牛津琼脂(见B5 ;改良缓冲蛋白胨水(MBP (见B6 ;7%羊血琼脂(见B7 ;糖发酵培养基(见B8 ;半固体琼脂;尿素琼脂;硝酸盐培养基;MR- VP培养基;三糖铁琼脂(TSI 。
胰酪蛋白胨(或胰蛋白胨;盐酸吖啶黄素;萘啶酮酸;复达新;甘氨酸酐;氯化锂;苯乙醇;放线菌酮;多粘菌素E;头孢双硫唑甲氧;磷霉素;柠檬酸铁铵;七叶苷;酚红;D—葡萄糖;D—甘露醇;哥伦比亚琼脂;酵母浸膏;牛肉浸膏。
. 仪器微生物学实验室常用设备;解剖镜;斜射灯;平面镜。
4. 过程简述. 样品如为冷冻食品,应于2〜5C解冻,且不超过18h,若不能及时检验,应置于 -15C保存。
非冷冻的易腐样品应尽可能及时检验,若不能及时检验,应置于4C 冰箱保存,在24h 之内检验。
. 前增菌和增菌前增菌:巴氏消毒乳、乳制品、冷冻水产品,冻肉及其它加工食品均应进行前增菌。
无菌操作称取25g样品,加入装有225mL改良缓冲蛋白胨水(MBP的均质杯内,高速均质1〜2min,制成1 : 10样品匀液,转入500ml T口瓶内;液体食品可用吸管吸取25mL样品,加入装有225mL改良缓冲蛋白胨水(MBP的广口内,充分振摇制成1 : 10样品匀液,于30C培养24、48h。