分光光度法的具体步骤
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/view/168b8186bceb19e8b8f6ba5b.html/view/923046.htm一、开机开机前将样品室内的干燥剂取出，确认电源是否连接。
打开仪器电源开关，等待仪器自检通过，自检过程中禁止打开样品室。
二、使用仪器自检结束后（7个自检项目均出现OK字样），按[MAIN MENU]键（主菜单），屏幕显示如下5个功能项：1. Phtometry（定量运算）；2.Wavelength Scan（波长扫描模式）；3.Time Scan（时间曲线扫描）；4.System（系统校正）；5.Data display（光度直接测量模式）。
按相应选项前的数字键，即可进入该选项的下一级子菜单。
1.目的规范Cary100紫外可见分光光度计的使用和维护。
2.适用范围本规程适用于Cary100紫外可见分光光度计的使用和维护。
3.职责研发实验室负责人负责本文件的起草，实验室仪器管理员负责Cary100紫外可见分光光度计的日常使用和维护。
4.系统组成本系统由Cary100紫外可见分光光度计主机、Cary Winuv软件、Dell计算机等组成。
5.程序5.1接通电源，打开机算计、主机电源开关，仪器进行自检。
5.2自检结束后，双击“Cary winUV”图标。
主机同时会发出吱吱的声响（表示脉冲电源正常工作）。
5.3单波长扫描5.3.1在Cary winUV 文件夹下双击“Simple Reads”快捷键，进入“Simple Reads－Online”状态。
在该程序下点击“Setup”，对所需的波长、信号平均时间（Ave time（s））、狭缝宽度（SBW(nm)）、Y－轴参数设置等参数进行设置，设好后，按“OK”返回。
5.3.2在参比池、样品池中放空白液，关上盖板，单击“Zero”图标，完成较零。
5.3.3取出样品池，用待测溶液冲洗数次后，倒入待测溶液，单击“READ”读数；继续放入样品按“READ”读数，直到全部样品读完。
5.3.4用编辑菜单完成数据整理。
5.3.5按Print…打印报告，完成测试。
5.4全波长扫描5.4.1在Cary winUV 文件夹下双击“Scan”快捷键，进入“Scan－Online”状态。
在该程序下点击“Setup”，进入参数设置页面。
分别对“Cary”、“Options”、“Baseline”、“Reports”、“Auto Store”项下参数进行设置。
设好后，按“OK”返回。
5.4.2在参比池、样品池中放空白液，关上盖板，单击“Baseline”图标，仪器开始对设定的波长范围进行扫描。
5.4.3扫描结束后，将样品池中空白溶液更换为待测样品溶液，单击“START”,输入所要保存的文件名，按“OK”后开始扫描；继续放入样品按“START”扫描，直到全部样品扫描结束。
5.4.4如果需要可以用编辑菜单对数据进行整理。
5.4.5按Print…打印报告，完成测试。
5.5标准曲线5.5.1在Cary winUV 文件夹下双击“Concentration”快捷键，进入“Concentration－Online”状态。
在该程序下点击“Setup”，进入参数设置页面。
分别对“Cary”、“Standards”、“Samples”、“Reports”、“Auto Store”项下参数进行设置。
设好后，按“OK”返回。
5.5.2在参比池、样品池中放空白液，关上盖板，单击“Zero”图标，完成较零。
5.5.3按所设定的标准样品顺序，单击“READ”依次对标准样品进行测定。
5.5.4标样测试完毕后，更换待测样品，单击“READ”进行待测样品测试。
5.5.5读数完毕后，如果需要可以用编辑菜单对数据进行整理。
5.5.6按Print…打印报告，完成测试。
5.6编辑、调用方法5.6.1新编一个方法步骤，以Concentration为例。
5.6.1.1单击Setup功能键，进入参数设置页面。
5.6.1.2按Cary Control→Standards→Options→Samples→Reports→Auto store顺序,设置好每页的参数。
然后按OK回到浓度主菜单。
5.6.1.3单击View莱单，选择好需要显示的内容。
基本选顷Toolber；buttons；Graphics；Report。
5.6.1.4单击Zero放空白到样品室内，按OK。
提示：Load blank press ok to read（放空白按ok读）。
5.6.1.5单击Start．出现标准／样品选择页。
Solutions Available（溶液有效）。
此左框中的标准或样品为不需要重新测量的内容。
Selected for Analysis（选择分析的标准和样品）。
此右框的内容为准备分析的标准和样品。
5.6.1.6按ok进入分析测试。
Present std1（1.0 g/l）提示：放标准1然后按OK键进行读数。
Press OK to read.放标准2按OK进行读数。
直到全部标准读完。
5.6.1.7 Present Sample1 press OK to read．放样品1按OK开始读样品，直到样品测完。
5.6.1.8为了存标准曲线在方法中，可在测完标准后，不选择样品而由File文件菜单中存此编好的方法。
以后调用此方法，标准曲线一起调出。
5.6.2运行一个已存的方法（方法中包含标准曲线）。
5.6.2.1单击File→单击Open Method→选调用方法名→单击Open．5.6.2.2单击Start开始运行调用的方法。
如用己存的标准曲线，在右框中将全部标准移到左框。
按OK→进入样品测试。
5.6.2.3按提示完成全部样品的测试。
5.6.2.4按Print键打印报告和标准曲线。
5.6.2.5如要存数据和结果，单击File文件。
选Save Data As…．在下面File name中输入数据文件名，单击Save即可保存。
其它软件包如Scan软件操作步骤相同，具体内容有些差别，请按屏幕提示操作。
5.7试验结束后，取出比色皿，洗净。
关上主机盖板。
关闭电脑，总电源。
盖好仪器防尘罩。
5.8清理仪器、实验台面，填写使用记录。
/view/e405520316fc700abb68fc45.html722型分光光度计的使用方法操作方法（1）将灵敏度旋钮调整"1"档（放大倍率最小）。
（2）开启电源，指示灯亮，仪器预热20分钟，选择开关置于"T"（3）打开试样室盖（光门自动关闭），调节"0%T"旋钮，使数字显示为"00.0"。
（4）将装有溶液的比色皿放置比色架中。
（5）旋动仪器波长手轮，把测试所需的波长调节至刻度线处。
(6) 盖上样品室盖，将参比溶液比色皿置于光路，调节透过率"100%T"旋钮，使数字显示为"100.0T"（如果显示不到100%T，则可适当增加灵敏度的档数，同时应重复"3"，调整仪器的"00.0"）(7）将被测溶液置于光路中，数字表上直接读出被测溶液的透过率（T）值。
（8）吸光度A的测量，参照"3""6"调整仪器的"00.0"和"100.0"，将选择开关置于A旋动吸光度调零旋钮，使得数字显示为.000，然后移入被测溶液，显示值即为试样的吸光度A值。
（9）浓度C的测量，选择开关由A旋至C，将已标定浓度的溶液移入光路，调节浓度按钮，使得数字显示为标定值，将被测溶液移入光路，即可读出相应的浓度值。
（10）仪器在使用时，应常参照本操作方法中"3""6"进行调"00.0"和"100.0"的工作。
（11）每台仪器所配套的比色皿不能与其它仪器上的比色皿单个调换。
（12）本仪器数字显示后背部，带有外接插座，可输出模拟信号，插座1脚为正，2脚为负接地线。
（13）如果大幅度改变测试波长时，需等数分钟后才能正常工作。
（因波长由长波向短波或短波向长波移动时，光能量变化急剧，光电管受光后响应较慢，需一段光响应平衡时间。
用来测量和记录待测物质对可见光的吸光度并进行定量分析的仪器，称为可见分光光度计。
一、原理当一束单色光照射待测物质的溶液时，当某一定频率（或波长）的可见光所具有的能量（hf）恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应（即ΔE=E2-E1=hf）时，待测物将对该频率（波长）的可见光产生选择性的吸收。
用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度（吸光度）。
由于在一定条件下，吸光度A与待测物质的浓度C及吸收地长度l的乘积成正比，即A＝KCL所以，在测得吸光度A后，可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。
二、结构722型光栅分光光度计的结构722 型光栅分光光度计，采用自准式色散系统和单光束结构，色散元件为衍射光栅，使用波长为330 一800 nm 数字显示读数还可以直接测定溶液的浓度。
其外形如图2－39。
1 数字显示器2 吸光度调零旋钮3 选择开关4 吸光度调斜滤按钮5浓度旋钮6 光源室7 电源开关8 波长手轮9 波长刻度板10 试样架拉手11 100%T旋钮12 干燥器图2－39 722 型分光光度计三、使用方法722 型光栅分光光度计的使用方法（1）操作步骤①在接通电源前，应对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固，接地线通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源。
②将灵敏度派或调至“1”档（放六倍率最小）。
调彼长调节器至所需波长。
③开启电源开关，指示灯亮，选择开关置于“T”，调节透光度“100％”旋钮，使数字显示“100.0”左右，预热20分钟。
④打开吸收地暗室盖（光门自动关闭），调节“0”旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上吸收地盖，将参比溶液置于光路，使光电管受光，调节透光度“100％”旋钮，使数字显示为“100.0”。
⑤如果显示不到“100”，则可适当增加电流放大器灵敏度档数，但应尽可能使用低档数，这样仪器将有更高的稳定性。
当改变灵敏度后必须按④重新校正“0”和“100”。
⑥按④连续几次调整“00.0”和“100”后，将选择开关置于A，调节吸光度调零旋钮，使数字显示“.000”。
然后将待测溶液推入光路，显示值即为待测样品的吸光度值A。
⑦浓度C 的测量。
选择开关由“A”旋至“C”，将标准溶液推入光路，调节浓度旋钮。
使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值。
将待测样品溶液推入光路，即可读出待测样品的浓度值。
⑧如果大幅度改变测试波长时，在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“00.0”和“100”即可工作。
