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2015年宁波市某二级医院细菌耐药性监测俞碧霞;赵韧;江梦娇;吴臻琦【摘要】目的了解宁波市镇海龙赛医院2015年临床分离细菌分布和耐药特征,为临床合理选择抗菌药物提供依据.方法收集临床分离的1083株非重复细菌,采用纸片扩散法(K-B)进行药敏试验,按CLSI 2014年版标准判读药敏试验结果,采用WHONET5.6软件进行数据分析.结果分离菌中革兰阴性菌726株占67.0％,革兰阳性菌357株占33.0％.居前3位的细菌依次为:大肠埃希菌25.5％、肺炎克雷伯菌11.5％、铜绿假单胞菌9.2％,而鲍曼不动杆菌仅为3.8％.大肠埃希菌、克雷伯菌属细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)株的检出率分别为49.6％和53.6％.耐亚胺培南的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的比例分别为0.4％和0.8％.铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对所监测药物的耐药率都低于20％,其中碳青霉烯类耐药的鲍曼不动杆菌(CRAB)比例仅为9.8％,未分离到泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNA)的检出率分别占金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的53.2％和70.1％,未发现对万古霉素和替考拉宁耐药的葡萄球菌.未分离出耐万古霉素的链球菌属、肠球菌属细菌.万古霉素仍是对革兰阳性球菌抗菌活性最强的药物,碳青霉烯类药物对肠杆菌科等革兰阴性杆菌抗菌活性最强.结论与三甲医院细菌耐药性监测相比,本二级医院分离耐药菌的构成比及药物敏感性存在差异,鲍曼不动杆菌检出率低,耐药水平较低.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2017(042)001【总页数】6页(P73-78)【关键词】抗菌药物;细菌耐药性监测;碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌【作者】俞碧霞;赵韧;江梦娇;吴臻琦【作者单位】宁波市镇海龙赛医院,宁波315200;宁波市镇海龙赛医院,宁波315200;宁波市镇海龙赛医院,宁波315200;宁波市镇海龙赛医院,宁波315200【正文语种】中文【中图分类】R978.1随着抗菌药物在临床上的广泛使用，细菌对抗菌药物的耐药性日趋严重，细菌耐药性监测工作可及时发现耐药细菌流行状况，掌握细菌耐药性变迁。
一、实验目的1. 掌握非发酵菌的基本概念及分类；2. 熟悉非发酵菌的鉴定方法；3. 提高实验室操作技能，培养科学思维和严谨的工作态度。
二、实验原理非发酵菌是一类不发酵或不分解糖类的革兰氏阴性杆菌，主要包括假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、黄杆菌属等。
非发酵菌的鉴定主要通过观察菌落特征、进行生化试验、动力与鞭毛观察等手段。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）非发酵菌菌种：假单胞菌、不动杆菌、产碱杆菌、莫拉菌、黄杆菌等；（2）培养基：普通琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、动力半固体培养基、氧化酶试验培养基等；（3）试剂：葡萄糖、乳糖、酵母提取物、酚红指示剂、氧化酶试剂等；（4）实验仪器：恒温培养箱、显微镜、酒精灯、无菌操作台等。
2. 实验仪器：（1）显微镜：用于观察菌落特征；（2）恒温培养箱：用于培养菌种；（3）酒精灯：用于无菌操作；（4）无菌操作台：用于无菌操作。
四、实验方法与步骤1. 菌落观察（1）将菌种接种于普通琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板，分别于30℃、37℃培养24小时；（2）观察菌落特征，如菌落大小、形状、颜色、边缘、表面、透明度等；（3）记录观察结果。
2. 动力与鞭毛观察（1）将菌种接种于动力半固体培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种在半固体培养基中的生长情况，如是否有鞭毛、菌落是否呈指状、螺旋状等；（3）记录观察结果。
3. 氧化酶试验（1）将菌种接种于氧化酶试验培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种是否产生氧化酶，即菌落周围是否出现绿色；（3）记录观察结果。
4. 氧化-发酵（O/F）试验（1）将菌种接种于氧化-发酵试验培养基，30℃培养24小时；（2）观察菌种是否产生酸，即菌落周围是否出现红色；（3）记录观察结果。
5. 麦康凯琼脂平板生长情况（1）将菌种接种于麦康凯琼脂平板，30℃培养24小时；（2）观察菌种在麦康凯琼脂平板上的生长情况，如是否生长、生长速度等；（3）记录观察结果。
非发酵菌的耐药及治疗对策什么是非发酵菌？非发酵菌是一类不靠发酵代谢获取能量的微生物。
它们生长缓慢，对环境的适应能力相对较弱，更容易在人体内引发感染。
一些非发酵菌种类通常生长于惰性和污秽环境，例如水、土壤或食物中，而其他非发酵菌可以从人和动物的皮肤、口腔和肠道中分离出来。
非发酵菌的耐药性非发酵菌的耐药性往往比其他微生物更高，这意味着它们难以被常见的抗生素杀死。
与其他细菌不同，非发酵菌不使用发酵作为它们的主要代谢方式，而是使用其他化学物质来产生能量。
这使得它们在天然界中生长得更为广泛和适应各种条件，然而却也使得常见的抗生素对其产生的影响较小。
非发酵菌的高度耐药性意味着，它们所引起的感染更加难以治疗，并且药物疗效的预测性很差。
抗生素过度使用的问题也加剧了这个情况。
当前，治疗非发酵菌感染的首选药物是四环素类、氨基糖苷类、多黏菌素E、大环内酯类和喹诺酮类，但是已经发现存在多种产生了抗药性的非发酵菌，这些细菌对抗生素产生的耐药性，随着药品的不断使用而变得更加普遍。
治疗耐药性非发酵菌感染的策略做好预防措施由于非发酵菌的耐药性较强，更应注重预防。
保持好个人卫生、遵循医疗机构的感染预防措施，以及注意食品的选择和烹饪等措施都有利于预防非发酵菌感染。
准确诊断非发酵菌感染准确诊断非发酵菌感染有助于针对性治疗。
但是还需要考虑抗生素选择和使用的范围。
正确的药物治疗是准确诊断非发酵菌感染的前提。
没有明确的敏感性测试可能会导致不必要的药物使用，这不仅对病人没有益处，还可能带来消耗性医疗的问题。
合理使用抗生素一般来说，应该尽可能避免不必要的抗生素使用，以防止抗生素负荷增加和高耐药的情况恶化。
如果一些老年病人或者有免疫缺陷的病人一直使用抗生素，容易导致耐药菌的滋生。
坚持病原学领域的最佳实践，不是简单的使用抗生素，还需要注意抗生素使用的时间和剂量的合理性。
拓展非抗生素治疗选择随着医学技术的不断进步，新的非抗生素药物和新的治疗方法正在不断被开发出来，例如喂养益生菌、使用细胞保护剂和抗氧化剂进行治疗等。
非发酵菌是一大类不能以发酵形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、无芽胞革兰阴性杆菌的统称，主要存在于外界环境中，有的是人体皮肤黏膜表面的正常菌群组成部分。
非发酵菌的基本特点主要包括：
不能利用或仅能以氧化形式利用葡萄糖。
多数为机会致病菌，即在人体免疫功能低下时容易引发感染。
对多种抗生素具有耐药性，且耐药性较强，容易形成多重耐药性。
非发酵菌的种类繁多，主要包括假单胞菌属、不动杆菌属、黄杆菌属、产碱菌属等。
其中，铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌等在非发酵菌中占有重要地位，并且由非发酵菌引起感染的报告逐渐增多，特别是在医院感染中。
以上内容仅供参考，如需更多信息，建议查阅非发酵菌的相关资料或咨询相关研究学者。
非发酵菌是一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厌氧、条件致病菌。
【氧化酶试验】铜绿、粪产碱为阳性，醋酸钙不动杆菌为阴性【非发酵菌生化编码管鉴定】原理：该系列鉴定共有9种生化培养基，共10项试验，参照下述方法，将试验结果换算成4位数字, 加以数值化后查表。
例：某一分离菌株，具有下列鉴定结果，数值化后为1734，查表得知：可能为施氏假单胞菌和洋葱单胞菌，再按表中要求做硝酸盐产气补充实验区分。
无芽胞的革兰阴性杆菌；多为- 4组0-F厌顿2分需氧1分结果：需氧得分匸12组氧化輕分枸携酸2分麦芽犍1分+ + +73纠精氨就4分甘露醇2分木糖1分-+ +4组硝还4分DNA酶2分乙酰胺4分观察结果时按表中说明进行。
—、O-F试验接种2支编码管，1支加无菌石蜡油，另1支不加。
原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型；能进行无氧降解的为发酵型；不分解葡萄糖的细菌为产碱型。
发酵型细菌无论在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖，而氧化型细菌在无氧环境中则不能分解葡萄糖。
本试验又称氧化发酵（0/F或Hugh —Leifson , HL）试验，可用于区别细菌的代谢类型。
培养基均不产酸（颜色不变）为阴性；培养基表面和底部都产酸（变黄）为发酵型；培养基表面变为深蓝色为产碱型；培养基表面变黄、底部不色变为氧化型。
二、硝酸盐还原试验原理：某些细菌能还原培养基中的硝酸盐，生成亚硝酸盐和氮气等。
硝还试验是测定还原过程中生成的亚硝酸盐。
如培养基中有亚硝酸盐存在，则亚硝酸盐与醋酸生成亚硝酸，亚硝酸与对氨基苯磺酸生成重氮苯磺酸，后者与a -萘胺结合成N- a -萘胺偶氮苯磺酸。
假单胞菌等能使硝酸或亚硝酸盐还原为氮气，此为脱硝化或脱氮化作用。
结果解释：/变红一®性沿试验管加AB液各少许变一加锌粉-不变r阳性，产气\变红阴性注意事项：若加入硝酸盐试剂不出现红色，需检查硝酸盐是否已被还原，可于原试管内再加入少许锌粉，如出现红色，表示硝酸盐仍然存在；若不出现红色，表示硝酸盐已衩还原为氨和氮。
