非发酵菌
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一、实验目的1. 掌握非发酵菌的基本概念及分类;2. 熟悉非发酵菌的鉴定方法;3. 提高实验室操作技能,培养科学思维和严谨的工作态度。
二、实验原理非发酵菌是一类不发酵或不分解糖类的革兰氏阴性杆菌,主要包括假单胞菌属、不动杆菌属、产碱杆菌属、莫拉菌属、黄杆菌属等。
非发酵菌的鉴定主要通过观察菌落特征、进行生化试验、动力与鞭毛观察等手段。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:(1)非发酵菌菌种:假单胞菌、不动杆菌、产碱杆菌、莫拉菌、黄杆菌等;(2)培养基:普通琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、动力半固体培养基、氧化酶试验培养基等;(3)试剂:葡萄糖、乳糖、酵母提取物、酚红指示剂、氧化酶试剂等;(4)实验仪器:恒温培养箱、显微镜、酒精灯、无菌操作台等。
2. 实验仪器:(1)显微镜:用于观察菌落特征;(2)恒温培养箱:用于培养菌种;(3)酒精灯:用于无菌操作;(4)无菌操作台:用于无菌操作。
四、实验方法与步骤1. 菌落观察(1)将菌种接种于普通琼脂平板、血琼脂平板、麦康凯琼脂平板,分别于30℃、37℃培养24小时;(2)观察菌落特征,如菌落大小、形状、颜色、边缘、表面、透明度等;(3)记录观察结果。
2. 动力与鞭毛观察(1)将菌种接种于动力半固体培养基,30℃培养24小时;(2)观察菌种在半固体培养基中的生长情况,如是否有鞭毛、菌落是否呈指状、螺旋状等;(3)记录观察结果。
3. 氧化酶试验(1)将菌种接种于氧化酶试验培养基,30℃培养24小时;(2)观察菌种是否产生氧化酶,即菌落周围是否出现绿色;(3)记录观察结果。
4. 氧化-发酵(O/F)试验(1)将菌种接种于氧化-发酵试验培养基,30℃培养24小时;(2)观察菌种是否产生酸,即菌落周围是否出现红色;(3)记录观察结果。
5. 麦康凯琼脂平板生长情况(1)将菌种接种于麦康凯琼脂平板,30℃培养24小时;(2)观察菌种在麦康凯琼脂平板上的生长情况,如是否生长、生长速度等;(3)记录观察结果。