人类免疫缺陷病毒抗体检测(乳胶法)

人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体检测(乳胶法)【样本要求】静脉采血后离心获得血清、血浆样本，不同的抗凝剂如柠檬酸钠，肝素钠，EDTA，草酸钠，枸橼酸钠的血浆标本均可，在2-8℃条件下可保存一周，长期保存需-20C冷冻，应避免反复冻融，发臭、溶血等异常样本请勿使用。

【检验方法】在进行检测前必须先完整阅读使用说明书，并将试剂、样本和缓冲液恢复至室温(20℃-30℃)1.从原包装铝箔袋中取出试剂。

2.将试剂放在干净的平台上，用一次性塑料吸管吸取1滴血清、血(25 Ul)于加样孔(S)中，随后加入1滴缓冲液(的40ul)，开始计时。

3.等待红色条管的出现，检测结果应在15-20分钟判读，20分钟后判读结果无效【检验结果的解释】阳性(+)：两条红色条出现。

一条带位于检测区内(T)，另一条带位于质控区内(C)。

阴性(-)：仅质控区(C)出现一条红色条，在检测区内(T)无红色条带出现。

无效:质控区(C)未出现红色条带，表明不正确的操作过程或试剂已变质损坏。

在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂新检测。

如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系【检验方法的局限性】1.本试剂仅用于体外诊断2.本试仅用于检测人血清、直浆样本，用其它样本或溶液检测的结果可能有误。

3.本试剂为定性检测。

无法确定样本中HIV抗体的水平。

4.本试剂仅用于HIV抗体初筛检测，HIV抗体确认应遵循相关法规和标准在有资质的HIV确认实验室进行。

5.阳性结果须经相关确证方法的确认或经过国家法定的其他方式处理。

6.受分析灵敏度所限，阴性结果不能完全排除艾滋病毒感染的可能性，可能系样本中抗体浓度低于本产品的灵敏度所致，对于有怀疑的结果建议采用灵数度更高的其他类方法进行复核。

抗原试剂乳胶法使用方法乳胶法是一种常见的直接原创性检测方法，主要是使用特殊抗原可以直接与抗体发生免疫反应，产生乳胶凝块并可视化，也是抗原检测中最常用的技术之一。

该技术的原理是将待检血清、血清处理或血浆与抗原反应來藉由产生立即凝块而迅速做出抗原与抗体的确认。

例如，癌症患者中血清中偶见特定抗原时可以用乳胶法检出它们。

乳胶法检测步骤：一、准备：1.准备含有抗原和抗体的微胶囊：抗原是乳胶室的上层，而抗体是位于下面的乳胶室。

2.分别取出所需的抗原试剂，稀释为适当浓度，到水准管中；3.将血清中的特异抗体和同一种抗体的称量分别加入20mL的模板杯；4.再加入稀释的抗原试剂，将同一种抗原（抗体）的模板杯和另一种抗体的模板杯分别放入液体进行反应。

二、检测：1.液上乳化：用反座管把上层抗原移到底部，用手转动管中液体，使其混合，直到乳胶反应完全混合；2.定抗原：将乳胶反应的混合物放到乳胶形成的流动盒，水平运动不息，观察情况：正常为乳胶猪油状振荡，表明它已经凝固；3.记录结果：将反应结果20min内，把结果记录到检验报告上，包括阳性反应绝对值（PVAB,positivevalidated absorbance value）、阴性反应绝对值（NIVAB,negativevalidating absolute value）等。

三、清洗：清洗乳胶检测器内，利用10%碳酸氢钠液、乙醛、醋酸钠液清除乳胶，尤其是它们可能溅到的任何部位，将反应放置在塑料瓶中存放，以便供参考。

四、存放：完成实验后，尽快将乳胶法使用的试剂安全收回保存，一般可存放在-20℃冰箱内，保存的有效期根据生产厂家的规定不同而不同，一般为2到3年，没有病原菌培养基可以无视有效期存放于室温。

如果试剂在实验中受到高温或其他改变，则会缩短其保存时间。

乳胶法是一种简单、快速、准确的检测抗原的方法，正确使用此技术，有助于更为准确地检测抗原，从而更有效地控制和监测可能会导致疾病的血液中抗原的含量。

人类免疫缺陷病毒（HIV 1/2）抗体检测试剂（乳胶法）1 范围本标准规定人类免疫缺陷病毒（HIV 1/2）抗体检测试剂（乳胶法）的技术要求、试验方法、标志、包装、运输和贮存。

本标准适用于本公司生产的人类免疫缺陷病毒（HIV 1/2）抗体检测试剂（乳胶法）。

2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T1.1-2009 《标准化工作导则：第一部分：标准的结构和编写规则》GB/T 191-2008 包装储运图示标志3 术语和定义3.1 乳胶技术以乳胶颗粒作为示踪物或显色物质进行抗原抗体反应或其他分子检测的一种标记技术。

3.2 最低检出量样品中以一定概率可被声明与零有差异的被测量的最低值。

3.3 分析特异性测量程序只测量被测量物的能力。

3.4 国家参考品中国食品药品检定研究院制定的国家参考品。

3.5 均一性在相同测量条件下，对同一被测量物进行连续多次测量所得结果之间的一致性。

4 产品型号/规格条型：50人份/盒（单人份）；100人份/盒（25人份/筒×4筒）。

板型：25人份/盒（单人份）；40人份/盒（单人份）。

5 性能指标5.1 外观和物理检查5.1.1 外观：整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；5.1.2 缓冲液：澄清，无明显沉淀或絮状物；5.1.3 膜条宽度：≥2.5mm；5.1.4 质控线（C线）在滴加足量全血/血清/血浆样本后出现时间：≤3分钟；5.1.5 液体流动速度：≥10mm/min。

5.2 阴性参考品符合率用20份HIV抗体阴性国家参考品进行检测，阳性反应不得多于2份（≥18/20）；或用HIV阴性企业参考品进行检测，阴性符合率应为100%；或用经国家参考品标化的企业阴性参考品进行测定，阴性符合率为100%。

人类免疫缺陷病毒（HIV1/2）抗体检测试剂盒技术参数
1.*检测原理：免疫层析乳胶法（提供产品注册证明）；
2.*检测标本：全血、血清、血浆（提供产品注册证明）
3.判读时间：20分钟内出成果，成果易读；
4.产品性能：-参与全国艾滋病病毒抗体诊断试剂临床评估，持续四年敏感性到达100%，特异性不低于99.3%，功能率不低于99.56%（提供有关证明文献）；
5.保留方式：常温保留，（4～30℃）（提供产品注册证明）；
6.*有效期：试剂有效期24个月，交货时实际有效期不少于20个月（提供产品注册证明）；
7.体系认证：生产厂家须通过ISO13485体系认证。

抗原乳胶法
乳胶法是用乳胶实现抑制剂抗原之间反应的常见技术，它可以用来检测抗体，鉴定抗
体或抗原，查找抗原，抗原抗体识别绑定等。

乳胶法是把抗原（如蛋白质，抗原粒子）和被检物（如抗体）混合溶解后，再将混合
物涂布在乳胶（Agar）片上，在特定温度和pH条件下，把抗体以及抗原粒子结合在一起，当抗原与抗体结合程度越高，结合相会形成白色的沉淀。

乳胶法的具体步骤是：
（1）首先准备实验所需的物品，包括：抗原、抗体、乳胶、eluate（可以是PBS或TBS等）、微波炉、反应板等。

（2）将一小块乳胶栅放在反应板上，用微波炉加热至70℃，直至乳胶完全融化，冷
却到室温，将栅格封闭，使乳胶凝固成片。

（3）将抗原和抗体混合；将混合液涂布在乳胶片上，盖好，并用铁夹夹住以防液漏。

（4）将反应板放入37℃水浴中，微波炉加热20min，然后放凉，将抗原和抗体的反
应结果清洗2次，用eluate洗净反应板，把反应物剩余的液体洗掉，反应完毕，以黑色
沉淀来判断抗原与抗体结合的程度。

（5）将测定结果反映在图表中，观察反应结果，可以判断具体的反应状况。

乳胶法是一种非常有效的用来检测抗原抗体相互作用的技术，简单、准确、便捷，并
且有很多额外的好处，例如可以用来比较不同抗原的结合度，也可以用来比较不同抗体浓
度的结合程度等等。

人类免疫缺陷病毒抗体检测规程一、操作步骤：1、将试剂盒从冰箱中取出，至室温中平衡30分钟后使用。

2、将标本对应微孔按顺序编号。

3、配液：将50ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释至1000ml备用。

4、编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照一型、二型各一孔，空白对照一孔。

5、加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100ul。

6、温育：覆盖黏胶纸，置37度孵育30分钟。

7、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。

8、每孔加酶结合物100微升，取新粘胶纸覆盖放映板，置37度孵育30分钟。

9、取出已孵育完毕的反应板，弃去粘胶纸，吸干板内液体，将洗涤液注满各孔（约300微升/孔），吸干，反复5次，在干净纱布上将板拍干。

10、每孔加入底物缓冲液50微升，TMB50微升，混匀，置37度显色10分钟。

11、加终止液50微升震荡反应板5秒钟，使之充分混匀。

12、在酶标度数仪上，取波长450nm（建议使用双波长酶标仪比色，参考波长630nm），仪空白对照孔校零，读取每孔吸收值（加终止液后，务必在15分钟内读数完毕）二、结果判断：抗HIV阳性对照OD值大于0.8，抗HIV阴性对照OD值小于0.08。

Cutoff Value=阳性对照值乘以10%（若阳性对照OD值大于2.5按2.5计算）标本OD值小于等于Cutoff Value为阴性。

标本OD值大于Cutoff Value为阳性。

三、注意事项：1、在试剂的使用单位必须使当地卫生行政部门标准的HIV初筛试验室。

2、整个检测工作必须符合HIV试验室管理范围和生物安全守则规定，严格防止交叉感染。

操作时必须带手套，穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。

3、HIV检测结果的判定不许以酶标仪的读数为准。

4、标本和酶结合物均应用加样器加注，并经常校对其准确性。

人类免疫缺陷病毒抗体检测（乳胶法）【预期用途】人类免疫缺陷病病毒（HIV）1型和2型抗体石人感染了人类免疫缺陷病病毒（HIV）1型和2型后出现的特异性抗体，人类免疫缺陷病病毒（HIV1/2）抗体检测用于定性检测血清/血浆样本中的人类免疫缺陷病病毒（HIV）1型和2型抗体，可用于人类免疫缺陷病病毒（HIV1/2）感染的辅助诊断。

【试验原理】人类免疫缺陷病病毒（HIV1/2）抗体检测试剂盒（乳胶法）采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析乳胶标记技术原理。

试剂上含有事先固定在检测区（T）的重组HIV-1和HIV-2型抗原。

检测时，将样本滴入试剂的加样孔中，样本中HIV-1，2型抗体与预包被在膜上的重组抗原-乳胶颗粒标记结合物反应，然后，混合物在毛细效应下向上层析，在检测区（T）与固定在膜上的重组HIV-1和HIV-2型抗原反应。

如果样本中含有HIV抗体，在检测区（T）会出现红色条带，检测区内出现红色线条表明是阳性结果。

如果在检测区内（T）没有出现红色条带，则样本中不含HIV抗体，表明是阴性结果。

无论抗HIV抗体是否存在于样本中，混合物都会继续向上层析至质控区（C），出现一条红色条带。

质控区（C）内所显现的红色条带是判定层析过程中是否正确的标准，同时也作为检测试剂的内控标准。

【试剂组成】本试剂主要原材料包括：包被重组HIV1型、包被重组HIV2型抗原、标记重组HIV1型、标记重组HIV2型抗原、链霉亲和素结合物、生物素、乳胶颗粒、硝酸纤维素膜、聚酯纤维素膜。

注意：不同批号试剂中各组份不可互换使用，以免产生错误结果。

检测时另需准备样本收集容器和计时器。

【存储条件和有效期】原包装应储存于4-30℃，阴凉干燥避光处，有效期24个月。

切忌冷冻或在已过有效期后使用。

试剂应在铝箔袋撕口后1小时内使用：如在温度高于30℃或在高湿度环境中，应即开即用。

【样本要求】静脉采血后离心获得血清/血浆样本，不同的抗凝剂如柠檬酸钠，肝素钠，EDTA，草酸钠，据盐酸纳的血浆标本均可。

乳胶法是一种检测方法乳胶法是一种广泛应用于生物医学领域的检测方法，其原理是利用抗原与抗体的特异性结合来检测目标分子，常用于诊断、疫苗研发和药物筛选等方面。

以下我将详细介绍乳胶法的工作原理、应用以及优缺点。

乳胶法的工作原理是基于抗原与抗体的特异性结合反应。

抗原是指能够引起免疫反应并与相应的抗体结合的分子。

而抗体则是由机体免疫系统产生的一种针对特定抗原的蛋白质，具有高度的特异性。

乳胶法利用这种特异性的结合反应来检测目标分子的存在与浓度。

乳胶法的实验步骤如下：1. 准备乳胶颗粒：将抗原与乳胶颗粒反应，使抗原附着到乳胶表面，形成抗原-乳胶复合物。

这种复合物具有触边性，可以形成可见的聚集现象。

2. 添加待测样品：将待测样品中的目标分子加入到抗原-乳胶复合物中，如果目标分子存在，它将与抗原结合，从而影响复合物的触边性，导致复合物的聚集程度发生变化。

3. 观察聚集现象：通过肉眼或显微镜观察复合物的聚集情况，如果复合物发生聚集，则表示目标分子存在。

乳胶法在生物医学领域有广泛的应用。

首先，在临床诊断方面，乳胶法可以用于检测病原体、药物残留、毒素和抗体等，如乳胶凝集试验（LA）、乳胶凝集皿试验（LAT）和乳胶凝集滴度试验（LTT）常被用于肝炎、风湿病、结核病等疾病的诊断。

其次，在疫苗研发方面，乳胶法可以用于评估疫苗的活性和效力，并确定疫苗批次的质量。

此外，乳胶法还被广泛应用于药物筛选、免疫学研究和基因工程等领域。

乳胶法具有一些优点。

首先，它具有高度的灵敏度和特异性，可以检测非常低浓度的目标分子。

其次，乳胶法操作简单，不需要复杂的设备和操作步骤，适合大规模、快速、经济的检测应用。

此外，乳胶法还相对环境友好，不需要使用放射性标记物质，减少了对环境和人体的污染。

然而，乳胶法也存在一些缺点。

首先，乳胶颗粒的稳定性较差，容易发生聚集和沉淀现象，影响检测结果的准确性。

其次，乳胶法的检测结果通常是定性的，不能准确测量目标分子的浓度。

性病的实验室检测与规范解读人类免疫缺陷病毒（HIV）的实验室检测方法1、HIV核酸检测的最低检测限是（）c/ml HIV-1 D2、以下对HIV病毒的抵抗力的认识，错误的是（）C3、以下哪项不是HIV抗体快速检测试剂的特点（）A4、以下哪项属于HIV抗体检测的外源性干扰因素（）A5、HIV-1核酸试验时，如果检测结果≤（）CPs/ml，建议重新采样检测，检测结果报告检测值E2015版艾滋病检测技术规范解读1、HIV抗体快速检测采用乳胶层析法时，加样后，（）分钟内观察并记录结果C2、HIV抗体确证检测阴性，但疑似窗口期感染，建议进一步做HIV核酸检测或（）后随访，尽早明确诊断C3、在《2015版艾滋病检测技术规范》北京版修订内容中，规定筛查阳性样本去向，即筛查阳性样本送艾滋病确证实验室进行确证实验，所有样本检测完毕后长期保存于（）超低温冰箱A4、HIV抗体快速检测采用胶体金法时，加样后，（）分钟内观察并记录结果D5、以下对《2015版艾滋病检测技术规范》北京版修订内容的认识，错误的是（）A梅毒螺旋体感染的实验室诊断与临床应用1、以下哪项是二期梅毒的血清学试验结果（）B2、梅毒螺旋体RPR（快速梅毒血清反应素）检测的优点是（）B3、如血清反应滴度升高（）倍属于血清复发，或有症状复发，均应加倍量复治C4、以下对梅毒螺旋体生物学特性的特点，错误的是（）C5、以下哪项是一期梅毒的主要临床表现（）A梅毒非特异性抗体检测操作指南解读（WST-491-2016）1、梅毒半定量试验--滴度试验强阳性的表现是（）A2、当VDRL/RPR/TRUST发现，新生儿的血清、CSF中梅毒非特异性抗体水平（）时，可作为判断先天梅毒的参考依据C3、梅毒非特异性抗体检测所使用的水平旋转仪，水平状态转速要求符合（）±2r/min C4、以下对VDRL、RPR、TRUST三种梅毒非特异性抗体检测方法的认识，错误的是（）A5、TRUST梅毒非特异性抗体检测方法使用的示踪剂是（）BHIV病毒感染实验室检测策略1、对于免疫印迹、条带免疫试验结果不确定者，应（）C2、以下关于HIV使用抗体检测试剂的筛查检测流程，认识错误的是（）D3、以下对于不能区分抗原抗体的试剂筛查检测流程的认识，错误的是（）A4、以下对HIV检测策略总原则的认识，错误的是（）B5、以下对HIV匿名无关联检测流程，认识错误的是（）C。

人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒（胶体金法）
生产厂家：美艾利尔（上海）医疗器械销售有限公司
储存条件：1℃-30℃保存
操作步骤
1.从原包装铝箔袋中取出检测板，放于水平、干燥的平面上
2.滴加10μl待检血清/血浆标本或20μl全血标本于样品孔（S）内
3.随后滴加4滴（约120μl）试验用稀释液垂直加到样品孔（S）内
4.当检测开始时，检测板中央可看到紫色液体流过结果窗口，
5.在10—20分钟内判读结果，在加入稀释液后，10分钟后读取结果不要超过
20分钟
结果判读
1.阳性结果：（1）出现质控线C和测试线1，表示HIV—1阳性结果
（2）出现质控线C和测试线2，表示HIV—2阳性结果
（3）出现质控线C、测试线1和测试线2，表示HIV—1和HIV —2阳性结果
2.阴性结果：仅质控线（C）出现一条紫色条带
3.无效结果：结果窗口没有质控线C
注意事项
1.本试剂仅用于体外诊断
2.在处理样本时不能吸烟、吃食物
3.在处理样本时应戴防护手套，事后充分清洗双手
4.避免标本出现喷洒或形成气溶胶
5.使用合适的消毒剂彻底清洁溢出物
6.使用后的试剂和样本等废弃物应按国家相关规定妥善处理
7.请不要混合和交换不同的待检样本
8.抗凝剂如：肝素、EDTA、柠檬酸钠不会影响实验结果
9.使用溶血标本、含类风湿因子的样本和高血脂、黄疸样本可能导致减弱实验
结果的显示。