人类免疫缺陷病毒抗体诊断指导书(胶体金)

人类免疫缺陷病毒（HIV 1/2）抗体检测试剂（乳胶法）1 范围本标准规定人类免疫缺陷病毒（HIV 1/2）抗体检测试剂（乳胶法）的技术要求、试验方法、标志、包装、运输和贮存。

本标准适用于本公司生产的人类免疫缺陷病毒（HIV 1/2）抗体检测试剂（乳胶法）。

2 规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

GB/T1.1-2009 《标准化工作导则：第一部分：标准的结构和编写规则》GB/T 191-2008 包装储运图示标志3 术语和定义3.1 乳胶技术以乳胶颗粒作为示踪物或显色物质进行抗原抗体反应或其他分子检测的一种标记技术。

3.2 最低检出量样品中以一定概率可被声明与零有差异的被测量的最低值。

3.3 分析特异性测量程序只测量被测量物的能力。

3.4 国家参考品中国食品药品检定研究院制定的国家参考品。

3.5 均一性在相同测量条件下，对同一被测量物进行连续多次测量所得结果之间的一致性。

4 产品型号/规格条型：50人份/盒（单人份）；100人份/盒（25人份/筒×4筒）。

板型：25人份/盒（单人份）；40人份/盒（单人份）。

5 性能指标5.1 外观和物理检查5.1.1 外观：整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；5.1.2 缓冲液：澄清，无明显沉淀或絮状物；5.1.3 膜条宽度：≥2.5mm；5.1.4 质控线（C线）在滴加足量全血/血清/血浆样本后出现时间：≤3分钟；5.1.5 液体流动速度：≥10mm/min。

5.2 阴性参考品符合率用20份HIV抗体阴性国家参考品进行检测，阳性反应不得多于2份（≥18/20）；或用HIV阴性企业参考品进行检测，阴性符合率应为100%；或用经国家参考品标化的企业阴性参考品进行测定，阴性符合率为100%。

人类免疫缺陷病毒抗体定量测定作业指导书一、目的：规范人类免疫缺陷病毒抗体测定的标准操作程序，确保人类免疫缺陷病毒抗体测定的结果准确有效。

二、适用范围：在AutoLumo A2000化学发光检测仪上定量测定人血清中的人类免疫缺陷病毒抗体。

三、临床意义人类免疫缺陷病毒（俗称艾滋病病毒，英文名称是Human Immunodeficiency Virus，缩写为HIV）是一种能生存于人的血液中并攻击人体免疫系统的病毒。

HIV侵入人体后主要攻击的是一种带有CD4表面抗原的淋巴细胞（T4淋巴细胞），这种细胞是免疫系统的基本组成部分，HIV通过大量、不断地复制与释放，导致T4淋巴细胞大量死亡，使人体内T4淋巴细胞明显减少，感染者免疫功能遭到严重破坏，造成免疫缺陷，降低或失去对各种致病因素的抵抗能力，临床表现为各种机会性感染与肿瘤[1]。

有的发生神经系统病变或症状，可能与神经系统的机会性感染（弓形虫病、新隐球菌感染等）有关，同时可能是亲神经型HIV毒株的直接作用造成的。

最终，病人通常死于严重的感染和肿瘤[2]。

四、方法原理本试剂盒采用双抗原夹心法原理进行检测。

以HIV 抗原包被磁微粒，辣根过氧化物酶标记HIV抗原制备酶结合物，通过免疫反应形成抗原－抗体－酶标记抗原复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与HIV抗体的含量成正比。

五、标本的采集与处理5.1.采用正确医用技术收集血清样本（详见标准血液标本前处理流程）。

5. 2.样本中勿添加叠氮钠作为防腐剂。

5.3.样本中的沉淀物和悬浮物可能会影响试验结果，应离心除去，并确定样本未变质方可使用。

5.4.样本处理、收集后在室温放置不可超过8小时；如果不在8小时内检测需将样本放置在2～8℃的冰箱中；若需48小时以上保存或运输，则应冻存于-20℃以下，避免反复冻融。

使用前恢复到室温，轻轻摇动混匀。

六、标本拒收标准1）严重溶血、脂血 2）标本标识不明七、仪器与材料7.1.仪器：适用于Lucy2、Lumo、AutoLumoA2000化学发光检测仪。

胶体金免疫法
胶体金免疫法是一种基于胶体金颗粒的免疫诊断方法。

该方法利用胶体金的表面等离子共振效应，将免疫学的特异性与胶体金的光学性质相结合，能够快速、灵敏地检测目标分子或病原体。

该方法的基本原理是将目标分子或病原体与特异性抗体结合，形成免疫复合物。

胶体金颗粒表面经过修饰可以与抗体结合，并形成可见的胶体金免疫复合物。

当目标分子存在时，抗体将与目标分子结合，从而使胶体金免疫复合物发生聚集或变色现象，可以通过肉眼观察或仪器读取结果来判断目标分子的存在与否。

胶体金免疫法具有快速、灵敏、简便易行的特点。

它在临床诊断、药物检测、食品安全等领域广泛应用。

常见的应用有乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）检测、人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体检测等。

然而，胶体金免疫法也存在一些局限性，如实验结果受到环境因素和操作技术的影响较大，灵敏度不如一些其他方法，比如酶联免疫吸附试验（ELISA）。

此外，胶体金颗粒的制备、稳
定性和存储也是该方法需要考虑的问题。

因此，在实际应用中需要根据具体情况综合考虑选择合适的免疫检测方法。

1、检验目的用于快速定性检测人全血、血清或血浆样品中的HIV 1/2型抗体。

2、原理采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定全血、血清或血浆样本中的HIV 1/2型抗体。

检测陽性样本时，样本中的HIV抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组抗原结合形成夹心物而凝聚显色，游离的胶体金标记重组抗原则在对照线处与抗HIV单克隆抗体结合而富集显色。

阴性标本则仅在对照线处显色，30分钟内观察结果即可。

3、性能参数●用国家参考品测定，阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、精密性、最低检出量、稳定性能均符合要求，测定类风湿因子阳性血清、乙型肝炎、甲型肝炎、梅毒及非肝炎传染病患者等各种类型的血清不得引起干扰。

●本测试条/卡仅用于体外诊断试验，仅用于人全血、血清或血浆，其他体液和样本可能得不到准确的结果。

●对于下列物质在所给出的浓度下对测试结果不造成影响：4、标本要求●标本类型：血清或血浆，血浆样本对临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠）无要求。

●标本采集：见标本采集手册。

●标本储存和运输：如果血清或血浆样品收集后7天内检测，样品须放在2～8℃保存，如果大于7天则须冷冻保存；全血标本建议在3天内检测，样品放在2～8℃保存，不得冻存。

●标本拒收状态：细菌污染，严重溶血或严重脂血标本不能作测定。

5、容器和添加剂类型使用一般干燥管（不添加任何东西），或EDTA、柠檬酸钠、肝素抗凝管盛放血液。

6、贮存条件及有效期储存条件：4--30℃密封干燥处保存，有效期为16个月。

7、操作步骤【血清、血浆样本】（1）将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。

（2）将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。

（3）用微量加样器取60ul血清或血浆样本，加到试剂卡的加样处。

（4）加样后阳性标本可在1—30分钟内检出。

经过试验确证，反应时间超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。

人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（胶体金法）【药品名称】通用名：人类免疫缺陷病毒抗体诊断剂盒（胶体金法） 商品名：无英文名：Human Immunodeficiency Virus antibodies Diagnostic Kit 汉语拼音：REN LEI MIAN YI QUE XIAN BING DU KANG TI ZHEN DUAN SHI JI HE【使用目的】用于检测人血清或者血浆中的HIV(1+2)抗体 【试验原理】本试剂盒应用双抗原夹心胶体金免疫层析法检测血清/血浆中的HIV(1+2)抗体。

将通过基因工程技术制备的针对不同结合位点的两组HIV 重组抗原gp41、gp36分别用于标记和包被。

用纯化的兔抗gp41、gp36抗体作为质控线。

当样本通过层析作用在试纸条上迁移时，样本中如果含有HIV-1或HIV-2抗体，则在检测线区域将生成Ag-Ab-Ag-AU 复合物从而形成一条明显的红色线条。

无论样本中是否含有HIV 抗体，在质控线区域都将生成Ab-Ag-AU 复合物，从而形成另一条明显的红色线条。

【主要组成成分】 1）50人份/盒 1. 检测试纸条50个2. 说明书 1份 2）1人份/盒试剂条，稀释液，采血针，采血管，消毒棉球，说明书各一份。

【适用仪器】不需要任何仪器。

【标本要求】血清/血浆 【试验方法】1、试剂盒如从冰箱中取出后应平衡到室温后再从铝塑袋中取出检测卡，水平放置；2、向圆形加样孔中滴加待检样本；3、样本用量为50微升；4、在30分钟内读取椭圆形观察窗内结果 【对试验结果的解释】【该试验方法的局限性】本品仅适用于HIV （1+2）抗体的体外检测。

【产品性能指标】质控线区域的红色条带必须出现否则实验不成立。

【注意事项】 1、 全部检测工作必须符合生物安全守则规定，严格防止交叉感染。

2、 操作时须戴手套，穿工作衣，严格执行消毒隔离制度。

3、 使用前请检查本产品是否在有效期内，以及铝塑袋的密封状况； 4、 样本使用量多于200微升有可能导致溢出、流速缓慢、高背景、假阳性等结果；5、 如果样本过于粘稠有可能导致质控线暗淡甚至缺失；6、试纸条如从寒冷环境（冰箱）中取出后应平衡到室温后再使用；7、请使用新鲜的检测样本； 8、无论检测结果如何必须按照HIV 阳性污染物处理检测卡。

人类免疫缺陷病毒抗体检测试剂盒（胶体金法）操作规程英科新创（厦门）操作步骤1.将待测标本从存储条件下取出，平衡至室温并编号2.将所需数量的测试试剂从包装盒取出平衡至室温3.用微量加样器取60μl待检血清/血浆标本滴加到试剂加样处4.加样后，阳性标本可在1-30分钟内检出，超过30分钟将对实验结果造成影响。

因此建议30分钟内最终观察并记录实验结果结果判读1.阳性结果：测试条在测试区和对照区位置各出现一条紫红色条带。

如果检测区的紫红色条带隐约可见，建议对实验重复检测，并使用其他方法确认2.阴性结果：测试条只在对照区位置出现一条紫红色条带3.无效结果：对照区未出现紫红色条带，表明不正确的操作或试剂已变质损坏或是试剂中抗体含量过高。

在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂条重新测试。

如果问题依然存在，应立即停止使用此批号产品，并与当地供应商联系注意事项1.本试剂用于体外诊断，仅用于人全血、血清或血浆样品，其它体液样本可能得不到准确结果2.本试剂用于定性检测人全血、血清或血浆样品中HIV1/2型抗体，对于所有使用本试剂条检测的结果必须进一步验证3.样品的加样建议用微量加样器准确加入4.实验环境应保持一定湿度、避风，避免在过高温度下进行试验5.测试条从包装取出后，应尽快实验，避免放置于空气中过长时间，导致受潮6.对于那些含有感染源和怀疑含有感染源的物质应有合适的生物安全保证程序下列有关注意事项：（1）带手套处理样品和试剂（2）不要用嘴吸样（3）在处理样本时不能吸烟、吃食物、喝饮料、美容和处理隐形眼镜（4）用消毒剂对溅出的样品进行消毒（5）使用后的试剂和样本等废弃物应按国家相关规定妥善处理（6）超出有效期的试剂不能使用7.检测线颜色深浅的程度与样品中抗体滴度没有一定的必然联系8.任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度抗体存在，任何时候都不能排除暴露和感染的可能9.对于下列物质在所给出的浓度下对测试结果不造成影响：胆固醇200mg/ml；血红蛋白≤178g/L；甘油三酯≤200mg/ml；胆红素≤1.6mg/100ml。

人类免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗体诊断试剂（胶体金法）Diagnostic kit for Antibody to Human lmmunode ficiency Virus （Colloidal Gold）[产品名称]通用名称：人类免疫缺陷病毒（HIV1+2）抗体诊断试剂(胶体金法)英文名字：Diagnostic kit for Antibody to Human lmmunode ficiency Virus （Colloidal Gold）[包装规格]单支/袋，25/盒；10支/袋，5袋/盒；25支/袋，8袋/盒。

[临床意义]检测人血清或血浆中的HIV-1、HIV-2特异性抗体。

用于无偿献血的现场筛查，及临床术前的筛查。

[检验原理]应用免疫层析式双抗原夹心法原理。

[主要组成成分]由纯化的基因重组HIV-1和HIV-2区段抗原，免抗HIV抗体，固相硝酸纤维膜，胶体金标记的基因重组HIV-1和HIV-2区段抗原及其他试剂组成。

[储存条件及有效期] 4℃-30℃避光干燥处密封储存，切勿冰冻。

有效期24个月。

[样本要求]采取静脉血1-2ml于干净容器中分离得到血清或血浆样本。

如不及时测试可置4℃冰箱贮存，超过3天应加入0.1%硫柳汞防腐，测试前注意恢复至室温。

不可使用冻干样本。

[使用方法]1、被检样本和测试卡等在室温平衡。

2、沿缺口撕开铝箔袋，取出测试卡。

3、将80微升血清或血浆样本（用吸管滴加2-3滴）加入测试卡加样孔，平置于温室，20分钟内观察显示结果。

[检验结果的解释]阳性：在检测区上、下两端先后出现反应线，即对照线（C）和检测线（T）。

阴性：仅测试区上端有一条反应线，下端无反应线出现。

无效：测试区上、下两端均无红色反应线出现或仅在检测去（T）出现一条红色反应线，表明实验失败或试剂失效。

请用新测试卡重试。

如果问题仍然存在，请停止使用本批产品，并于当地经销商联系。

[检验方法局限性]1、本品仅用于人血清或血浆样本中的HIV抗体检查，其检测结果必须结合其他对于医师有用的临床信息。

1范人类免疫缺陷病毒(HIV 1/2)抗体检测试剂(胶体金法)围木标准规定了人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体检测试剂(胶体金法)的产品组成、技术要求、试验方法、检测规则、标志、包装、运输、贮存。

本标准适用于人类免疫缺陷病毒(HIV1/2)抗体检测试剂(胶体金法)。

本产品用于体外定性检测全血/血清/血浆中的人类免疫缺陶病毒(HIV1/2)抗体。

2规范性引用文件下列文件的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。

凡是注明口期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准。

然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于木标准。

GB/T1.1-2009标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写规则YY/T0466.1-2009/IS015223-1:2007医疗器械用于医疗器械标签、标记和提供信息的符号GB/T191-2008包装储运图示标志《中国生物制品规程》 (2000年版) 2002年增补本3产品组成3.1产品分类和型号依据《体外诊断试剂注册管理办法(试行)》“第二章产品分类及命名原则”第三类产品中“1.与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等检测相关的试剂”,本试剂判定为第三类医疗器械诊断试剂。

木标准的附录A为主要原材料、生产工艺及半成品检定的要求。

人类免疫映陷病毒(HIV1/2)抗体检测试剂(胶体金法)包装规格包括卡型单人份包装：10人份/盒，20人份/盒，25人份/盒，50人份/盒。

条型单人份包装：20人份/盒，25人份/盒，50人份/盒，100人份/盒。

条型筒装：50人份/筒，100人份/盒(25人份/筒×4筒),100人份/筒。

3.2产品组成本产品主要由HIV 1/2病毒抗体检测试剂、一次性塑料吸管、缓冲液组成。

检测试剂子主要由样品垫、聚酯纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸及聚氯乙烯树脂(PVC)板组成。

1、检验目的用于快速定性检测人全血、血清或血浆样品中的HIV 1/2型抗体。

2、原理采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定全血、血清或血浆样本中的HIV 1/2型抗体。

检测陽性样本时，样本中的HIV抗体与胶体金标记抗原结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的重组抗原结合形成夹心物而凝聚显色，游离的胶体金标记重组抗原则在对照线处与抗HIV单克隆抗体结合而富集显色。

阴性标本则仅在对照线处显色，30分钟内观察结果即可。

3、性能参数●用国家参考品测定，阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、精密性、最低检出量、稳定性能均符合要求，测定类风湿因子阳性血清、乙型肝炎、甲型肝炎、梅毒及非肝炎传染病患者等各种类型的血清不得引起干扰。

●本测试条/卡仅用于体外诊断试验，仅用于人全血、血清或血浆，其他体液和样本可能得不到准确的结果。

●对于下列物质在所给出的浓度下对测试结果不造成影响：4、标本要求●标本类型：血清或血浆，血浆样本对临床常用抗凝剂（EDTA、肝素、枸橼酸钠）无要求。

●标本采集：见标本采集手册。

●标本储存和运输：如果血清或血浆样品收集后7天内检测，样品须放在2～8℃保存，如果大于7天则须冷冻保存；全血标本建议在3天内检测，样品放在2～8℃保存，不得冻存。

●标本拒收状态：细菌污染，严重溶血或严重脂血标本不能作测定。

5、容器和添加剂类型使用一般干燥管（不添加任何东西），或EDTA、柠檬酸钠、肝素抗凝管盛放血液。

6、贮存条件及有效期储存条件：4--30℃密封干燥处保存，有效期为16个月。

7、操作步骤【血清、血浆样本】（1）将待测标本从储存条件下取出，平衡至室温并编号。

（2）将所需数量的测试试剂从包装盒中取出并平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上。

（3）用微量加样器取60ul血清或血浆样本，加到试剂卡的加样处。

（4）加样后阳性标本可在1—30分钟内检出。

经过试验确证，反应时间超过30分钟将对实验结果的观察造成影响，因此，建议30分钟内最终观察并记录实验结果。