药理实验讲稿
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实验二：小鼠镇痛实验（热板法）
一、实验目的：
1、掌握热板法镇痛实验方法；
2、观察盐酸曲马朵的镇痛效应。
二、实验原理：各种伤害如热刺激引起的疼痛性刺激通过感觉纤维传入脊髓，最后到达大脑皮层感觉区引起疼痛。
镇痛药通过痛感觉中枢整合作用以及抑制或者减少痛觉的传入而达到镇痛作用。
将小鼠置于一定温度的热板上，热刺激小鼠足部产生痛反应，即舔足反应。
以小鼠出现舔足的时间作用为痛反应指标，判断药物是否具有镇痛作用。
三、实验动物：雌性小鼠10只；18~22g。
四、实验器材及药品：热板仪，电子秤，秒表，1ml注射器（3只以上）；盐酸曲马朵溶液，生理盐水，苦味酸。
五、实验步骤：
（1）动物筛选：将热板仪调至55±0.5℃，将小鼠置于热板上，密切观察小鼠反应，以舔后足为痛觉敏感指标。
秒表记录从将小鼠置于热板上到出现舔后足的时间，共两次，每次间隔5分钟，取其均值为该小鼠的痛阈值。
痛反应过敏（跳跃、逃窜或痛阈值小于10秒）或痛反应迟钝（痛阈值大于30秒）的小鼠弃去不用。
筛选合格小鼠10只，称重编号。
（2）分组和给药：将10只小鼠随机分成甲、乙两组，每组5只。
甲组皮下注射生理盐水0.1ml/10g，乙组皮下注射盐酸曲马朵溶液0.1ml/10g。
（3）观察和记录：给药后15min、30min、45min依次测定各鼠痛阈1次，如小鼠在60秒内仍无产生疼痛反应，应立即取出不再刺激，痛阈值按60秒计算。
六、预期实验结果及分析：
（1）甲组小鼠给药后平均痛阈值跟给药前平均痛阈值无明显变化；
（2）乙组小鼠给药后平均痛阈值跟给药前平均痛阈值相比明显提高。
实验三大鼠抗炎实验
一、实验目的：本实验用鸡蛋清致炎，观察地塞米松对抗渗出性炎症的作用，同时了解抗炎实验方法。
二、实验原理：
糖皮质激素具有抗炎、抗毒、抗免疫、抗休克作用，增加红细胞、血小板，减少淋巴细胞。
糖皮质激素对各种因素（如感染性、物理性、化学性、免疫性及无菌性）所致的炎症及炎症的各不同阶段均有强大的抑制作用。
对急性炎症，糖皮质激素可抑制毛细血管扩张，抑制充血、渗出、水肿、白细胞浸润和吞噬反应，从而缓解红、肿、热、痛。
对慢性炎症可抑制毛细血管和纤维母细胞增生，避免、延缓或减轻肉芽组织生成，防止粘连及瘢痕形成，减轻炎症后遗症。
糖皮质激素类药物的抗炎机制是复杂的。
近年研究表明，糖皮质激素与其在细胞浆内的受体结合，而干扰一些致炎因子的基因转录过程，进而使一些炎症有关因子如细胞因子（包括白介素类、肿瘤坏死因子、巨噬细胞集落刺激因子等）、炎症介质（如白三烯、前列腺素、血小板活化因子等）产生较少，最终产生抗炎作用。
在糖皮质激素中，地塞米松抗炎作用较强，且作用持续时间长，为长效类糖皮质激素。
大鼠足趾肿胀法是经典最常用的实验性炎症模型，致炎剂引起大鼠足趾肿胀，容积增大。
本法利用毛细管放大原理，将动物足趾容积的变化，通过排水量增加，在毛细管的高度刻度上反映出来。
为减小误差，保证结果的准确性，所使用的容器必须同一规格。
本方法简便易行，结果较精确可靠，可进行定量研究。
常用的致炎剂有角叉菜、鸡蛋清、酵母琼脂、甲醛、鹿角菜等。
三、实验材料
(一). 动物：SD大鼠
(二). 器材：大鼠足趾容积测量仪，鼠笼，天平，1ml、5ml注射器，1ml或2ml刻度吸管，16号针头
(三). 药品与试剂：0.5%地塞米松磷酸钠溶液，0.9%氯化钠注射液，新鲜鸡蛋清
四、观察指标
以排水法测量两只大鼠致炎前左踝关节正常容积，测量2次，取其平均值作为致炎前自身对照。
两组大鼠给致炎剂和盐水后，每隔30min测量两鼠左后脚之容积，共测三次，以左后脚给致炎剂前后容积之差，作为踝关节肿胀程度。
五、方法与步骤
取体重相近最好为同性别大鼠2只，称重，以排水法测量两鼠左后脚之正常容积值（以毫升表示），测量2次，取其平均值作为致炎前自身对照。
然后甲乙两鼠分别腹腔注射0.5%地塞米松磷酸钠溶液0.5ml/kg和等容量的0.9%氯化钠注射液。
30min后，由两鼠左后脚掌腱膜下向踝关节周围注射新鲜鸡蛋清0.1ml。
以后每隔30min测量两鼠左后脚之容积，共测三次。
以左后脚给致炎剂前后容积之差，作为踝关节肿胀程度。
六、实验结果
将本班或更多班级更多实验小组的实验结果算出平均值，绘制成坐标图形。
纵坐标表示关节肿胀容积（ml），横坐标表示时间（min）。
五、注意事项
六、思考题
糖皮质激素有哪些？其抗炎机制如何？临床有哪些用途？
实验四药物对小鼠凝血时间影响实验。
