药理实验设计
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药理学设计性实验实验一、石菖蒲的镇静作用【目的】1应用小动物自主活动学习镇静药物的实验方法。
2、应用小动物自主活动仪,研究地西泮、石菖蒲对小鼠自发活动的影响。
【原理】小动物自主活动仪的原理:在活动箱内,将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上,动物在箱内每活动一次,感应电流发生改变,经过放大装置,使电脉冲驱使继电器启动, 通过记录器记录动物活动次数。
地西泮是镇静催眠的代表药。
石菖蒲具有宁心安神作用,其挥发油对中枢有广泛的抑制作用。
本实验以小鼠自发活动次数为指标,观察药物的镇静作用。
【动物】小鼠6只,实验前禁食12h o【药品】0.05%地西泮溶液,石菖蒲水煎液,生理盐水【主要器材】动物自主活动仪1台,电子称1台,1ml注射器2支,烧杯2杯。
【方法】将6只动物随机分为甲乙丙组,甲组灌胃生理盐水,乙组灌胃石菖蒲水煎液(连续两天),丙组灌胃地西泮1次,0.2ml/10。
给药后1小时各组动物放入小动物自主仪,先适应2分钟,再记录5分钟内小鼠自主活动次数。
【结果】地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响。
(结果见表1)表1地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响参考文献:[1] 胡锦官,顾健,王志旺•石菖蒲及其有效成分对神经系统作用的药理研究[J].中药药药理与临床.1999.15 (30: 19[2] 刘新民.石菖蒲的研究现状J].中医药研究.1992. (4): 57[3] 吴启端,吴清和,石菖蒲的药理学研究进展[J].2006,17 (6) :477-480实验二、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用【目的】1、学习小鼠跳台原理和操作,正确运用跳台实验仪器对小鼠进行学习记忆能力行为学测试。
2、观察石菖蒲对小鼠记忆获得障碍的疗效作用。
【原理】鼠跳台实验装置由DT-200小鼠跳台测试箱和DT-200小鼠跳台测试仪组成。
测试箱由6个小房间构成,一次可同时试验6只动物,每个小房间有一橡皮台,箱底是可通电的铜栅,在训练期通电小鼠跳下平台在箱底不断被电击,这个过程中小鼠获得记忆,24 h后测试时观察小鼠第一次跳下平台的时间和 5 min内跳下平台的次数,比较各组老鼠记忆保持的能力。
药理学实验设计实验名称: 黄连素治疗老年性冠心病的治疗作用研究实验目的: 黄连素又名小檗碱,是从黄连黄柏、三颗针、唐松草等植物中提取的生物碱,也可人工合成,为广谱抗生素,抗菌作用较强,床多用于清热解毒及抗肠道细菌感染。
目前,黄连素的临床应用范围逐渐扩展,如其能增加心肌收缩力,改善心肌供血,改善心功能,抗心律失常,调脂,降压等。
黄连素药理机制尚未完全清楚,临床应用研究有单用也有联合应用,且给药剂量、给药时间、疗程、疗效依据等缺乏统一的标准,从而限制了黄连素的临床应用。
另外,黄连素的应用仅限于口服给药,也限制了其广泛应用。
因此,研究黄连素对老年冠心病的治疗作用,在剂型改变等方面作进一步研究,会使黄连素更好的发挥药用价值。
实验原理:冠心病的临床表现为心绞痛、心肌梗死、心肌纤维化和冠状动脉猝死等。
冠心病基本上由冠状动脉粥样硬化引起。
而冠状动脉粥样硬化与高血脂,高血压等密切相关。
黄连素在心血管疾病方面的作:1.抗心律失常:心律失常的症状主要表现心脏搏动的节律或频率不正常。
临床研究发现,黄连素具有抑制血管平滑肌的作用,这种作用可以减缓冠状动脉的收缩,改善心肌缺血的状况,使心跳恢复正常。
绝大多数抗心律失常药物都有减弱心肌收缩力的缺点,而黄连素则能加强心肌的收缩力。
因此,用黄连素治疗心律失常可收到很好的疗效 2.抗心力衰竭,炎症因子hs-CRP、IL-6、TNF-α及LN( NT-ProBNP)与心力衰竭严重程度密切相关。
黄连素改善心功能与炎症介质降低有关。
3.抑制心肌纤维化,改善心室重构,黄连素可抑制血管紧张素Ⅱ( AngⅡ) 诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成的作用,其作用机制与促进心肌成纤维细胞分泌一氧化氮、减少转化生长因子β1( TGF2-β1) 含量有关。
4.降血压,该药物还能改善血液动力状态,减少对心脏及肾脏的损伤,即使长期服用,也无明显不良反应。
5.降血脂黄连素可以通过磷酸腺苷活化蛋白激酶( AMPK) 途径抑制肝细胞内脂质的合成,显著减少肝脏的脂质储存。
药理学设计性实验药理学实验设计1( 实验项目名称:奥美拉唑对抗利血平引起的胃溃疡作用2.国外研究现状:胃溃疡是临床常见病,为研究其发病和治疗机制,国内外业已建立起多种胃溃疡小鼠动物模型,有的模型在中医药研究中亦被广泛引用。
但研究中存在的突出。
奥美拉唑对小鼠水浸应激性溃疡的形成具有很强的抑制作用,表现为溃疡数和溃疡发生率下降,且呈量效关系。
国外临床研究表明,奥美拉唑钠对胃溃疡的疗效明显优于H+受体拮抗剂,表现为起效快,症状消失迅速,用H+受体拮抗剂无效的患者改用本药可得到满意的疗效。
3.实验原理 :利血平是肾上腺素能神经元阻断性抗高血压药。
用药后交感神经系统的功能受到遏制,副交感神经系统的功能相对占优势,结果出现利血平的副作用,引发溃疡,因此在本实验中引用利血平制作小白鼠的胃溃疡模型。
奥美拉唑选择性性地作用于胃粘膜壁细胞,抑制处于胃壁细胞顶端膜构成的分泌性微管和胞浆内的管状泡上的H+-K+-ATP酶的活性,从而有效地抑制胃酸的分泌,起效迅速,适用于胃及十二指肠溃疡,返流性食管炎和胃泌素瘤。
由于H+、K+-ATP酶是壁细胞泌酸的最后一个过程,故本品抑酸能力强大,有强而持久的抑制基础胃酸及食物、五肽胃酸泌素所致的胃酸分泌的作用。
它不仅能非竞争性抑制促胃液素、组胺、胆碱及食物、刺激迷走神经等引起的胃酸分泌,而且能抑制不受胆碱或H2受体阻断剂影响的部分基础胃酸分泌,对H2受体拮抗剂不能抑制的由二丁基环腺苷酸(DcAMP)刺激引起的胃酸分泌也有强而持久的抑制作用。
显效快,可逆,且无H2受体拮抗剂诱发精神方面的副作用。
本品对胃蛋白酶分泌也有抑制作用,对胃黏膜血流量改变不明显,也不影响体温、胃腔温度、动脉血压、静脉血红蛋白、动脉氧分压、二氧化碳分压及动脉血pH。
有强而持久的抑制基础胃酸及食物、五肽胃酸泌素所致的胃酸分泌的作用。
显效快,可逆,且无H2受体拮抗剂诱发精神方面的副作用。
用于胃及十二指肠溃疡、反流性或糜烂性食管炎、佐-埃二氏综合征等,对用H2受体拮抗剂无效的胃和十二指肠溃疡也有效。
药理学实验设计方案药理学实验设计方案一、背景介绍药理学是研究药物对生命体的作用机理及其药理效应、毒性、药物代谢等药物性质的一门学科。
药理学实验是药理学研究的重要手段,通过药理学实验可以观察药物的作用效果,以了解药物的药理效应、副作用等。
二、实验目的本实验旨在了解不同药物对小鼠血压和心率的影响,以及探究血压和心率的变化与药物剂量之间的关系,为临床应用药物提供依据。
三、实验设计1. 动物模型:选用C57BL/6小鼠为实验对象,雄性小鼠,体重20-30g,数量30只。
2. 分组设计:将小鼠随机分为5组,每组6只。
分别为:正常对照组(给予生理盐水)、低剂量组(给予药物X低剂量)、中剂量组(给予药物X中剂量)、高剂量组(给予药物X 高剂量)、对照组(给予药物Y)。
3. 实验操作:(1)采用尾动脉插管法测量小鼠血压和心率,记录基础值(即给药前)。
(2)给予不同剂量的药物X和药物Y,以相同的体积溶液为对照组。
(3)测量给药后不同时间间隔的血压和心率,记录数据。
(4)对数据进行方差分析(ANOVA)和t检验,分析不同剂量组血压和心率变化差异的显著性。
4. 统计分析:(1)数据以平均数±标准误(mean±SEM)表示。
(2)使用一元方差分析(one-way ANOVA)和t检验分析数据,P<0.05即为显著差异。
四、实验步骤1. 将小鼠随机分为5组,注射不同剂量的药物X和药物Y。
2. 将小鼠麻醉,采用尾动脉插管法测量血压和心率,记录基础值。
3. 给予药物X和药物Y,以生理盐水作为对照组。
4. 给药后分别在30min、60min、90min和120min测量小鼠的血压和心率,并记录数据。
5. 对数据进行方差分析(ANOVA)和t检验,分析不同剂量组血压和心率变化差异的显著性。
6. 统计分析数据,以平均数±标准误(mean±SEM)表示。
五、实验注意事项1. 实验中应注意保持小鼠的清洁和舒适,避免受到惊吓和过度刺激。
实验题目:某药物对小鼠肝细胞损伤的保护作用研究一、实验目的1. 探讨某药物对小鼠肝细胞损伤的保护作用。
2. 评价该药物在肝细胞损伤模型中的治疗效果。
二、实验材料1. 实验动物:昆明种小鼠,体重18-22g,雌雄各半。
2. 药物:某药物,纯度≥98%。
3. 试剂:DMSO(二甲基亚砜)、二甲基苯、血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒等。
4. 仪器:酶标仪、离心机、显微镜、恒温水浴箱等。
三、实验方法1. 实验分组:将小鼠随机分为5组,每组10只,分别为正常组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。
2. 模型制备:除正常组外,其余各组小鼠按10mg/kg剂量给予二甲基苯,连续7天,制备肝细胞损伤模型。
3. 给药:正常组和模型组给予生理盐水,低剂量组、中剂量组和高剂量组分别给予低、中、高剂量的某药物。
4. 检测指标:a. 生化指标:ALT、AST水平;b. 丙二醛(MDA)含量;c. 超氧化物歧化酶(SOD)活性;d. 肝组织形态学观察。
四、实验结果1. 生化指标:与正常组相比,模型组ALT、AST水平显著升高(P<0.01)。
与模型组相比,低、中、高剂量组ALT、AST水平均显著降低(P<0.05)。
2. 丙二醛(MDA)含量:与正常组相比,模型组MDA含量显著升高(P<0.01)。
与模型组相比,低、中、高剂量组MDA含量均显著降低(P<0.05)。
3. 超氧化物歧化酶(SOD)活性:与正常组相比,模型组SOD活性显著降低(P<0.01)。
与模型组相比,低、中、高剂量组SOD活性均显著升高(P<0.05)。
4. 肝组织形态学观察:正常组肝细胞结构完整,无明显损伤。
模型组肝细胞出现水肿、变性、坏死等损伤现象。
低、中、高剂量组肝细胞损伤程度逐渐减轻,细胞结构逐渐恢复。
五、讨论本研究通过建立小鼠肝细胞损伤模型,探讨了某药物对肝细胞损伤的保护作用。
药理实验指导教案一、实验目的通过药理实验,了解药物的作用机制、药力学参数以及药物相互作用等相关知识,培养学生科学实验的能力。
二、实验材料与设备1. 实验药物:如阿司匹林、盐酸吗啡等。
2. 药理实验动物:如小鼠、大鼠等。
3. 实验器材:如注射器、实验仪器等。
4. 实验材料:如生理盐水、缓冲液等。
三、实验内容及步骤1. 实验前准备(1)准备好实验动物,确保健康状况良好。
(2)配制药物溶液,根据药物剂量和实验要求进行稀释。
(3)准备实验器材和材料。
2. 药效学实验(1)组织实验动物,随机分组。
(2)给予实验动物不同剂量的实验药物,如阿司匹林。
(3)观察实验动物的反应,如频率、强度等。
(4)根据实验结果,绘制药物剂量-反应曲线图。
(5)计算药物的EC50值。
3. 药物代谢实验(1)给予实验动物一定剂量的药物,如盐酸吗啡。
(2)在一定时间间隔内,采集实验动物的生物样本,如血液、尿液等。
(3)采用适当的实验方法,分离和检测药物及其代谢产物。
(4)绘制药物的浓度-时间曲线图,并计算药物的半衰期。
4. 药物相互作用实验(1)选择两种具有不同作用机制的药物,如阿司匹林和盐酸吗啡。
(2)给予实验动物单独使用这两种药物,并记录其反应。
(3)给予实验动物同时使用这两种药物,并记录其反应。
(4)比较两种情况下实验动物的药效差异,评估药物之间的相互作用。
5. 实验结果分析根据实验数据和观察结果,进行统计学分析,并进行合理的解释和讨论。
四、实验安全注意事项1. 遵循实验室安全操作规范,佩戴实验服和防护手套。
2. 确保实验动物的福利,遵循动物实验伦理的相关规定。
3. 注意药物的剂量和给药途径,避免超出安全范围。
4. 注意药物的保存和处理,避免污染和损坏。
五、实验总结与思考对实验结果进行总结,并提出对实验方法和结果的改进意见。
思考药物在临床应用中的重要性和意义。
六、实验拓展学生可以根据自身兴趣和实验条件,开展其他相关的药理实验,如药物对器官的作用、药物对行为的影响等。
药理学实验的设计与分析作为现代医学科学的一个核心分支,药理学的实验设计与分析成为药理学基础研究不可或缺的重要环节。
基于不同的研究目的和药物的特点,设计科学和合理的实验方案,对于保证实验结果的可靠性和有效性,进一步深入了解药物的性质和作用机制,具有至关重要的意义。
本文将就药理学实验设计与分析作探讨,旨在探索以科学精神为基础的实验方法和技巧,加强我们对于药物作用和治疗疾病的认识和理解。
一、实验设计1.实验设计前的准备工作实验设计的成功与否往往取决于准备工作的充分,尤其是实验前的研究和信息汇总。
在实验设计前,我们应该对于我们研究的药物有充分的了解,包括其化学结构、药理学性质、研究历史和现有的研究成果等;对观察指标和检测方法进行概括,明确实验的目的、内容和方向;并根据实验的实际安排,明确实验的时间、地点和实验条件。
此外,还应该能对实验可能的变量和潜在的干扰因素进行考虑和处理,确保实验结果的真实可靠性。
2.确定实验内容、方法和阶段药理学实验的设计关键在于要明确研究的目的和内容,以及实验的方法和流程。
具体实验可以涉及如药物的毒理学特点、药物代谢动力学和药物的作用机制等。
在选择实验方法和检测指标时,应基于所研究药物的特点,对不同的生物模型和实验方式进行鉴别和优先选择。
在实验设计的过程中,我们可以通过多个阶段的实验设计,逐渐将结果逐渐推进和发展,以达到完善的目标研究。
3.确定实验中药物剂量和给药方式药物剂量和给药方式是药理学实验中重要的内容之一。
根据实验的研究目的和实验对象的特点,确定所需药物剂量,并选择不同的给药方式,如使用静脉注射、口服、皮肤贴片、肌肉注射等。
二、实验统计分析1.数据收集和处理实验数据的收集和处理是实验统计分析过程中的重要环节,必须同实验设计缜密相关。
采用适当的方法收集数据并记录下来,如时间表、数据表和实验报告。
数据处理时应尽可能地排除掉不稳定的数据,如孤立数据、误差偏差和数据偏向等。
数据处理要尽量优化数据,保证数据的质量,以确保数据的准确度和可靠性。
药理学实验设计与实施第一章:引言药理学实验是药理学研究中极为重要的一环,其意义在于检测和评价药物对生物体的影响,为临床应用提供理论依据。
药理学实验的设计和实施则需要依据药物属性和生物体反应的特点,合理设置实验方案和操作流程,从而获得可靠和科学的实验结果。
本文旨在介绍药理学实验设计和实施的相关知识和要点,以期对药理学相关研究工作的开展提供帮助和指导。
第二章:药理学实验设计的基本要素药理学实验设计应当包括以下基本要素:1. 研究目的和问题:明确实验的研究目的和需要解决的问题,确定实验的意义和价值。
2. 实验对象和样品:选取符合实验要求的动物模型或人体样本,对其进行实验操作和观察。
3. 药物选择和用量:选用合适的药物种类和剂量,考虑其药效、毒性、代谢途径等因素。
4. 实验方法和手段:确定实验操作方法和手段,包括药物给药途径、检测指标和仪器设备等。
5. 实验设计和方案:合理安排实验组和对照组、重复实验次数和时间间隔等,保证实验的可比性和信度。
第三章:药理学实验实施的基本流程药理学实验实施应当包括以下基本流程:1. 实验前准备:准备实验所需的药品和设备,检查实验的执行条件和安全措施,确认实验对象和样本的来源和数量,制定实验操作规程和记录表格。
2. 实验操作过程:按照实验方案和操作规程进行药物给药、生理指标检测、数据记录等操作,注意实验结果的可重复性和准确性。
3. 实验数据处理和分析:对实验结果进行数据处理和分析,包括数据清洗、统计分析和结果呈现等,寻找实验结果之间的相关性和趋势。
4. 实验结果的解读和应用:根据实验结果,解读药物在生物体内的作用机理和效应,分析其在临床应用中的潜在价值和应用前景。
第四章:药理学实验的注意事项和质量控制在药理学实验的设计和实施中,需要注意以下事项和质量控制方面:1. 实验操作规范和标准化:实验操作应当按照统一的规程和标准进行,保证实验结果的可比性和可重复性。
2. 实验条件的控制和优化:控制实验条件的稳定性和一致性,避免实验误差,优化实验条件和环境,提高实验效率和成果。
急性毒性试验
急性毒性试验是临床前新药安全性评价的第一步,与其它毒性试验相比具有简单、经济、易行等特点。
因此新药研究开发时往往通过该项试验,尽可能多的了解一些新药的毒理学特点,为早期判断侯选新药是否具有研究开发价值提供毒性强度资料。
急性毒性试验(单次给药毒性试验)主要观察对实验动物一次给药后所产生的毒性症状及其程度,出现和消失的时间,死亡的发生率并计算出其最大给药量,最小致死量、半数致死量(LD50)等。
急性毒性试验方法的有关问题如下:
一、动物
(一)动物种——动物种(或系)的差异是动物急性毒性差异的主要原因,药酶则是毒性种差的重要原因之一。
为推测新药对人的急性毒性,某些发达国家动物急性毒性试验要求包含非啮齿类动物(除家兔外)在内的两种动物,我国对此未作出明确规定。
由于中药已在临床长期使用,一般认为,如尤特殊情况,使用一种动物已基本上达到急性毒性试验的目的。
目前虽常用的实验动物是小鼠或大鼠。
但在某些特殊情况下,例如受试物中已知含有强烈胃肠刺激物,就还应再采用非啮齿类大动物进行实验,否则,即使毒性较大(如巴豆)也并不能引起大、小鼠呕吐反应。
(二)动物的年龄、性别、体重——急性毒性受动物的健康状态、年龄、性别、遗传因素、体重、药物的吸收、分布、代谢、排泄和内分泌激素等的影响。
未成年的动物药酶活性一般较低,对于经代谢后减毒的药物表现毒性较强。
而且,年幼动物药物代谢功能和敏感度较易发生变化,性别间的特性也尚未确立,因此,口服毒性通常使用年轻的性成熟的动物,—般小鼠6—8周龄,两种性别,体重18-22g(同次试验体重相差不超过2g),大鼠6—8周龄,两种性别,体重120~150g(同次试验体重相差不超过10g)。
(三)动物数量——视不同试验而异。
最小致死量或半数致死量,小动物(大鼠、小鼠)试验组在三组以上,每组—般至少10只动物(雌雄各半)。
一些国家对动物数和组数不作规定,因此,有只用3只一组经多组试验测得近似致死量或LD50者。
大动物(犬、猴)并不—定要求得到LD50,可用少量动物采用剂量递增的方法观察中毒症状,求近似致死量即可。
最大给约量试验—般要求用小鼠或大鼠20只即可。
二、给药方法
(一)动物禁食——动物购入后应在实验室观察1星期,口服给药前,为减少吸收差异和大容量给药造成胃急性扩张,小鼠和大鼠至少应停食4 -6h,要求一夜停食(不停水),投药后再停食3-4h。
(二)给药途径——中药新药除临床给药途径外,—、二类新药还希望其他给药途径,水溶性药物应同时采用静脉给药途径,其他如油剂,混悬剂之类可采用皮下给药途径。
腹腔汁射在人体极少用,中药粗制剂成分复杂,动物毒性试验中也尽可能少用,以避免腹腔刺激性的干扰。
各给药途径的容量一般为小鼠0.4—0.5ml/20g(体重),大鼠lml/l00g(体重)。
小鼠口服最大容量不超过0.8ml/20g(体重),其他途径不超过0.5ml/20g(体重)。
大鼠口服最大容量不超过2ml/l00g(体重),其他途径不超过lml/l00g(体重)。
三、急毒试验观察指标和致死量的计算
(一)观察指标——不能把求得致死剂量看作是急性毒性实验的唯一要求。
发现毒性症状及毒性反应的靶器官同样是急毒实验非常重要的目的。
死后及时解削进行肉眼观察和病理组织学观察。
(二}致死剂量计算——可用Bliss点斜法、简化机率法、改进寇氏序贯法等计算最小致死量或半数致死量。
Bliss法严谨精确,缺点是计算非常繁复。
但近代有计算机软件,汁算方法可推荐Bliss法。
各种方法原则基本相同,如:①剂量对数值应为等差,即剂量应按等比级数排列;②各组动物数应相等;③死亡率应在50%上下基本对称分布等。
如受试物毒性低,测不出LD50,可求得最大给药量。
急性毒性试验方法
一、LD50的测定
最小致死量是使动物刚好致死的药物剂量,但由于药物的性质,给药方法和个体差异,每只动物的最小致死量确很大的差异,实验和统训学原理表明一群动物最小致死量的平均值相当于半数致死量。
半数致死量测定方法很多,但实验没计大同小异,所不同者为算方法的不同,其试验方法如下:
预试验——目的是找出0%及100%估计致死量。
更确田地说是找到—个0死亡的最大剂量和100%死亡的最小剂量的估值以决定实验中采用的最大剂量(Dm)和最小剂量(Dn),,这在测定中非常重要,是实验成败的关键。
可用雌或雄性动物,设四组以上,每组3-4只,先用1;10的剂量比给药(如5mg/kg、50mg/kg、500mg/kg、5000mg/kg固定剂量)。
记录死亡动物数。
然后在死亡数4/4和0/4两组之间按1;2(如50mg/kg、100mg/kg、200mg /kg、400mg/kg)以下的剂量比进行重复试验,以此测得近似的0和100%死亡率。
正式试验——在预试验Dn和Dm剂量范围内按等比设三个以上剂量组,其组间剂量的比值,一般在1;0.6至1:0.9范围内。
动物随机分组,每组10只或10只以上,雌雄各半,分别编号,给药前应禁食(不禁水)过夜。
各给药组和溶剂对照组按体重给药后,详细记录毒性反应症状,症状出现和消失的时间,死亡时间。
LD50和最小致死量及其可信限的汁算可采用Bliss法,改进寇氏法、点斜法、简化概率单位法或其他的计算方法。
汁算结
果对比表明,不同的汁算方法,结果间一般无明显差异,而不同实验室对同一样品试验结果却常见有显著差异。
冈此,采用较简单的计算方法完全可以满足LD50计算的准确性。
初步毒性分析——
二、最大给药量试验
如同受试药物的浓度或体积限制,无法测出半数致死量(LD50)时,作最大给药量试验。
试验选用拟推荐临床试验的给药途径,以动物能耐受的最大浓度(溶液仍有较好的流动性),最大体积的给药量1次或1日内2~3次给予动物。
以小鼠口服为例:动物数不得少于20只,雌雄各半,容量—次不超过0.4ml/10g(体重),多次给药间隔时间不低于4h,观察7日,汜录毒性反应和体重变化。
如仍未见毒性反应或体重正常增加,则可认为该药物小鼠最大给药量未见毒性反应,或LD50大于最大给药量。
三、近似致死量试验。