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HPA基因分型与配型在临床的应用王清;旷开其;徐朝霞;杨妞;罗佳;曹丽群;钟待鸣【期刊名称】《吉林医学》【年(卷),期】2016(037)003【摘要】目的:建立血小板捐献者基因库,开展血小板基因同型的交叉配型输注,预防并解决血小板输注无效.方法:①采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)对长沙地区435名无血缘关系的18~45岁机采献血者和12名患者进行HPA1-17等位基因分型.②选取与患者ABO血型及HPA基因型相同的机采血小板,再用固相凝集法配型相合后输注,选取ABO同型原则进行随机机采血小板固相凝集法配合输注,并比较两种方法.结果:长沙地区人群HPA基因有地区特点,杂合度较高的基因依次为HPA-15、HPA-3、HPA-2.采用ABO血型和HPA基因同型加固相凝集法配合的血小板输注有效率为95.2%,采用ABO同型加随机血小板固相凝集法配合的有效率为78.2%.结论:长沙地区HPA基因具有多态性,采用ABO血型和HPA基因型均相同及固相凝集配合的机采血小板能有效提高血小板输注的有效性,防止血小板免疫性抗体产生及发生输注无效,此法值得在临床推广.【总页数】3页(P524-526)【作者】王清;旷开其;徐朝霞;杨妞;罗佳;曹丽群;钟待鸣【作者单位】湖南省长沙市血液中心,湖南长沙 410001;湖南省长沙市血液中心,湖南长沙 410001;湖南省长沙市血液中心,湖南长沙 410001;湖南省长沙市血液中心,湖南长沙 410001;湖南省长沙市血液中心,湖南长沙 410001;湖南省长沙市血液中心,湖南长沙 410001;湖南省长沙市血液中心,湖南长沙 410001【正文语种】中文【相关文献】1.人类血小板同种抗原HPA-1、HPA-2、HPA-3和HPA-5的实时PCR基因分型优于标准的PCR-SSP方法 [J],2.探讨血小板输注中血小板抗原基因分型与配型的应用效果 [J], 旷洁平3.血小板抗原基因分型及临床配型应用研究 [J], 李双;桂嵘;王赤林;谢毓滨;徐朝霞;周鼎;卢艳4.HLA与HPA配型不合导致血小板输注无效1例 [J], 王皓; 郭兴莹; 张志波; 张新萍; 冀春红; 黄象艳5.HPA基因分型与配型在临床的应用 [J], 王清;旷开其;徐朝霞;杨妞;罗佳;曹丽群;钟待鸣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血小板抗体产生的原因分析输注血小板作为临床治疗和预防血小板减少或血小板功能缺陷所致的出血的重要支持手段，有不可替代的临床作用。
目前血小板输注的策略主要采取ABO同型随机输注，并未像红细胞一样，在输注前进行了抗体筛查和交叉配型。
其实血小板上的抗原系统也很复杂，产生的血小板抗体对临床的作用不亚于红细胞血型抗体，对输注的效果产生不良影响，进而影响治疗的效果。
一、血小板抗体1、同种抗体：多次输注血小板或妊娠可产生同种抗体（如：ABO 抗体、HLA抗体、HPA抗体等）；2、自身抗体：血小板自身抗体；3、药物依赖抗体：抗肝素、青霉素、磺胺类抗体等。
二、血小板相关抗原系统一、血小板相关抗原1、红细胞血型抗原：存在ABO、Lewis、I、i和P等红细胞抗原；但不存在Rh、Duffy、Kell、Kidd和Lutheran等血型系统抗原；2、人类白细胞抗原：只有HLA-I类抗原（HLA-A/B/C），无HLA-II 类抗原；3、其他非特异性抗原：CD36、GPVI等。
二、血小板特异性抗原（HPA）HPA是构成血小板膜结构的一部分，是位于血小板膜糖蛋白上的抗原表位。
至少有5种糖蛋白（GPIa，Ib，IIb，IIIa以及CD109）具有多态性；至今已发现命名的共有35个血小板特异性抗原：HPA-1\2\3\4\5\15及其他HPA血型系统。
三、血小板抗体产生原因有研究显示：输血次数越多，产生血小板抗体的机会就越高，如图输血≥5次的组别与输血小于5次的组别比较抗体阳性率差异有统计学意；产妇、经常需要反复输血治疗的病种比如血液病、肿瘤患者的血小板抗体阳性率明显高于其他病种，差异有统计学意义；而有输血史的病例中不同性别、不同年龄之间差异无统计学意义，说明多次反复输血和妊娠是产生血小板抗体的主要因素。
在临床上，有些疾病必须要反复输注红细胞或和血小板作为支持治疗的重要手段，而输血是一种血液成分的移植，如果供受者血型抗原不合，容易刺激机体的免疫系统引起反应，输血后患者同种异型白细胞与血小板抗原将会对机体产生刺激，使其产生抗体，血小板抗体阳性率也就增大。
血小板HPA-3,HPA-15基因分型微滴式数字PCR检测体系的构建孔小娇;王红梅;段生宝;刘铁梅【期刊名称】《中国输血杂志》【年(卷),期】2024(37)1【摘要】目的建立血小板HPA-3,HPA-15基因分型的微滴式数字PCR(ddPCR)高灵敏检测方法,并初步探索应用于孕妇外周血胎儿游离DNA HPA抗原相容性检测的可行性。
方法针对HPA-3,HPA-15的SNP突变位点,设计特异性引物及MGB 探针,优化ddPCR退火温度及引物浓度等扩增条件,建立最佳反应体系,明确检验程序。
对该检测方法进行方法学性能评估包括特异性、灵敏度、重复性和稳定性。
利用ddPCR技术对2022年6月至2023年6月67例临床血液标本进行检测,将等位基因分型结果与基因测序结果比较,并对52例母体外周血胎儿游离DNA HPA 抗原进行检测。
结果检测血小板HPA-3,HPA-15的ddPCR方法,引物及探针特异性良好,HPA-3,HPA-15的最佳退火温度分别为:61.6℃,60.2℃;体系最佳引物浓度分别为:900 nM,700 nM;探针终浓度均为250 nM。
拷贝数定量检测范围为:2~20000 copies,检测下限为0.1 copies/μL且线性良好。
在低拷贝数标本中,HPA-3及HPA-15实际检测值的批内及批间变异系数(CV)均<5%。
对67份人血液标本DNA的HPA-3,HPA-15基因型检测,结果与基因测序结果完全一致。
应用于胎母血小板HPA-3,HPA-15基因型检测结果符合预期。
结论本研究构建的HPA-3,HPA-15 ddPCR检测体系准确性高,重复性及稳定性较好,灵敏度高,可应用于临床血小板HPA-3,HPA-15基因型供者库的建立、基因配型及胎母血小板相容性检测等。
【总页数】8页(P1-8)【作者】孔小娇;王红梅;段生宝;刘铁梅【作者单位】吉林大学中日联谊医院;中国科学院苏州生物医学工程技术研究所【正文语种】中文【中图分类】R446.6;R331.143【相关文献】1.微滴式数字PCR和实时荧光PCR在豆奶饮料转基因成分检测中的应用2.微滴式数字PCR和实时荧光定量PCR检测大豆中的转基因成分3.Drop-off微滴式数字PCR检测急性髓系白血病NRAS基因突变及其临床应用4.微滴式数字PCR与荧光定量PCR对真皮间充质干细胞增殖及凋亡相关基因检测的比较研究5.基于微滴式数字PCR定量检测转基因玉米'CC-2'外源基因和内参基因在土壤中的存留因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
献血人群人类血小板抗原1～5系统基因多态性分布特点徐向华【摘要】目的：探讨献血人群人类血小板抗原1~5系统基因多态性分布特点。
方法采用聚合酶链-序列特异性引物技术（PCR-SSP）对200例无血缘关系的健康献血者进行HPA-1-5系统基因分型,分别计算献血人群的基因型及基因频率,分析其基因的多态性分布特点。
结果该研究中献血人群HPA-1a、2a、3a、4a、5a基因频率分别为：0.942、0.741、0.926、0.945、0.773，HPA-1b、2b、3b、4b、5b基因频率分别为：0.058、0.286、0.084、0.045、0.227，各系统均呈多态性分布， ab杂合子依次为64和30例,-2bb4例；HPA-3和-15高度杂合,aa基因型依次为112和80例,很多献血人群属于bb基因型。
结论该地区献血人群HPA-1-5系统基因均呈多态性分布,以HPA-3、-2和-5的a与b基因杂合率较高。
%Objective To investigate the blood donation population human platelet antigen of 1 ~ 5 system gene polymorphism distribution characteristics.Methods Polymerase chain - sequence specific primers (PCR SSP) technology to the health of 200 cases of unrelated donors to HPA genotyping-1-5 system, gene frequency and genotype of the blood donation population are calculated respectively, analyze its gene polymorphism distribution characteristics.Results The study of blood donation population HPA - 1 a、2 a、3 a、4 a、5 a gene frequency are: 0.942、0.741、0.926、 0.741、0.926,HPA - 1 b、2 b、3 b、4 b、5 b gene frequencies are: 0.058、 0.286、0.084、0.286、0.084, are distributed in each system are polymorphism, ab heterozygous for 64 and 30 cases, in turn - 2 bb4 cases; HPA - 3 and 15 highly heterozygous, aa genotype wasfollowed by 242 and 210, many line but people belong to the bb genotype. Conclusion This area crowd HPA - 1-5 blood donation system in gene polymorphism distribution of HPA - 3, 2 and 5 a and b gene hybrid rate is higher.【期刊名称】《中国卫生产业》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】3页(P192-193,198)【关键词】献血人群;血小板抗原;1~5系统;基因多态性分布【作者】徐向华【作者单位】江苏省泰州市中心血站检验科，江苏泰州 225300【正文语种】中文【中图分类】R45人类血小板抗原（HPA)位于血小板膜糖蛋白上，这些膜糖蛋白是由遗传基因决定的，在临床和输血实践中具有重要的研究意义。
机采献血者血小板抗原基因分型检测及意义邢培清;张伯伟;徐亚琴;别立莉;郭如华;李秀珍;杨瑞云;赵磊【期刊名称】《河南职工医学院学报》【年(卷),期】2003(015)003【摘要】目的探讨本地区机采血小板献血者HAP基因多态性分布及意义.方法用PCR-SSP(序列特异性引物)方法对100名固定机采献血者进行HPA-1～5基因分型检测,分析多态性.结果HPA-1 a、4 a、5 a有较高的基因频率,分别为0.99、0.98、0.96,2 a、3 a基因频率相对较低,为0.88、0.64.结论本地区HPA-1～5基因分型结果与韩国、台湾以及国内其他地区一致,与欧洲自人存在种族差异.PCR-SSP是一种方便快捷的基因分型方法,可进行血小板配型、相关疾病的诊断、遗传多态性调查.【总页数】3页(P40-42)【作者】邢培清;张伯伟;徐亚琴;别立莉;郭如华;李秀珍;杨瑞云;赵磊【作者单位】河南省红十字血液中心,河南,郑州,450053;河南省红十字血液中心,河南,郑州,450053;河南省红十字血液中心,河南,郑州,450053;河南省红十字血液中心,河南,郑州,450053;河南省红十字血液中心,河南,郑州,450053;河南省红十字血液中心,河南,郑州,450053;河南省红十字血液中心,河南,郑州,450053;河南省红十字血液中心,河南,郑州,450053【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.青岛市2014-2015年机采血小板献血者初筛检测不合格原因分析及对策 [J], 吴玉清;于琦2.机采血小板献血者血液检测低报废率原因分析 [J], 田庆华;李延伟;张晓飞;杜利树3.南宁市全血献血者与机采血小板献血者传染性指标检测结果差异性分析 [J], 谢家日4.河源地区机采血小板固定献血者血小板抗原系统基因多态性分析 [J], 欧小懂;叶登凰;黄璐;黄仕云;陈勇芳;邱美丽5.长期机采血小板献血者甲状旁腺素测定的意义 [J], 孙启俊;傅强;李翠萍;欧阳建;陈津;周丽娟;张晓萍;王瑛瑛;姜士荣;朱世钧;张葵因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
关于血小板配型的一些问题——为何会血小板输注无效1、长沙血液中心副主任李忠表示，为确保输血安全，提高输注疗效，从2013年8月5日起，在供血辖区内，针对临床血小板输注无效的患者，长沙血液中心提供特殊血小板基因配型业务。
血小板是人体血液中的一种成分，当患者因各种原因造成血液中血小板减少或血小板功能异常，引起严重出血时，必须输注血小板进行治疗。
血小板输注无效是由于献血者和患者的血小板抗原不匹配，患者输注血小板后，体内产生血小板抗体，因此，输注不能提升患者体内的血小板计数，不能有效解决出血症状而危及生命。
长期、多次输注血小板的患者大约有27%左右可发生血小板输注无效，多为血液病患者和肿瘤患者。
2、人们都知道输血之前需要配型。
红细胞输注前配型主要有ABO 和Rh系统血型配型。
血小板表面有多个具有临床意义的血型抗原系统，因此在血小板配型中，除了ABO血型配型外，要根据患者的同种免疫状况，还可能需要进行HLA-I抗原和血小板特异性抗原（HPA 抗体）的配型。
国内外的研究表明，血小板同种免疫的发生率高于红细胞同种免疫的发生率。
在血小板同种免疫中，80%以上涉及HLA-I 类抗原，约5%涉及HPA抗原。
如果多次输注未配型的血小板，就可能导致血小板输注无效。
通常，输注血小板只考虑选择ABO血型相同的血小板，却很少想到做血小板配型。
如果不做血小板配型，只选择ABO血型相同就输注血小板，尤其是随机输注以手工方法分离制备的血小板制剂时，输注一两次效果可能还不错，但是输注次数多了效果就难说了。
有同种免疫史的受血者，包括多次输注他人提供的随机血小板、红细胞、干细胞或器官移植以及妊娠，甚至有早孕流产史者，可能发生HLA-I 抗原或血小板抗原的同种免疫反应，在血清中产生血小板的同种抗体。
产生抗体的频率和特异性主要取决于输注的量和次数。
一般输注的次数和量越多，产生抗体的频率就越高。
当体内血清中产生了抗体的人再次输注未配型的血小板后，就可能发生血小板抗原和抗体的免疫反应，反应的结果是血小板遭到迅速破坏，从而出现血小板输注后计数不仅不升高，反而会降低的现象。
血小板输注无效的因素与对策作者：李戬来源：《中外医疗》 2011年第23期李戬(武警上海总队医院检验科上海 200000)【摘要】随着输血技术的发展,血小板在临床的应用越来越广泛,临床上发现不少病人输注血小板后不能达到预期值即血小板输注无效(RPT)。
本文将对其影响因素及对策进行探讨。
【关键词】输血血小板无效【中图分类号】 R826 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674-0742(2011)08(b)-0177-01随着输血技术的发展,血小板在临床的应用越来越广泛,临床上发现不少病人输注血小板后不能达到预期值即血小板输注无效(RPT)。
本文将对其影响因素及对策进行探讨。
血小板输注无效分为非免疫因素和免疫因素。
1 血小板输注无效的非免疫因素1.1 血小板的质量血小板的制备、保存、运输以及白细胞的污染程度均可影响血小板的质量。
如血小板数量不足、离心损伤、不合适的温度、保存时间的长短。
1.2 发热感染发热可使血小板被破坏,存活期缩短。
感染期血小板暴露的隐抗原吸附IgG抗体导致血小板生存期缩短消耗增加。
尤其是革兰阴性杆菌败血症可严重破坏血小板。
1.3 脾肿大脾亢可使血小板破坏增多。
脾切除可使血小板回收率增至90%以上。
1.4 弥漫性血管内凝血(DIC)引发DIC的重要因素是感染、败血症和恶性肿瘤,可大量消耗凝血因子和血小板,使血小板的存活期缩短。
1.5 药物常见的有消炎痛、苯巴比妥、头孢菌素、肝素等药物可致骨髓毒性非免疫或抗体介导的血小板破坏。
当患者出现不明原因的PTR时应考虑药物抗体存在的可能性。
1.6 骨髓移植在骨髓移植后的造血细胞恢复期,可发生类似免疫个体所出现的自身-非自身免疫识别的暂时紊乱导致自身抗体水平上升。
急、慢性移植物抗宿主病(GVHD)和巨细胞病毒感染可以提高血小板相关免疫球蛋白的水平,从而增加从循环中清除血小板的速度[1]。
1.7 自身抗体继发的自身免疫性血小板减少已在骨髓移植、血癌及一些其他多次输血患者中发现。
