血小板 抗原抗体检测

【口的】Capture-?®是设计用来检测血小板IgG抗体的固相系统。

可为血小板输注无效患者进行血小板配血。

【适用范圉】血小板输注无效患者血小板输注前配血【检测原理】Capture-P是一个固相抗体检测系统，是曲Rachel等人4、Juji等人5和Sh让毗&等人6发表的检测过程改良而来。

患者或供体血小板首先结合于聚苯乙烯微孔表面。

然后用它们来捕获患者或供体血浆中的血小板抗体。

血清在结合有血小板的微孔中进行简短孵育，使抗体与血小板结合（如果抗体存在）。

把微孔中游离的IgG 冲洗掉，并加入结合抗IgG指示红细胞。

进行离心，这样会使指示红细胞与结合于固定的血小板上的抗体接触。

阳性检测中，在指示红细胞和结合血小板抗体间形成了抗免疫球蛋口G桥联，从而阻止了指示红细胞向微孔底部的移动。

作为这种桥联的结果，指示红细胞会形成一个汇合单层从而覆盖固定的血小板。

相反，如果是阴性检测，当不存在血小板抗原-抗体反应时，指示红细胞的移动就不会被阻止，就会被离心到微孔底部，进而形成紧密圧缩、清晰的细胞扣。

可以使用事先经过冲洗和保存的血小板，这个步骤是可以选择的。

使用血小板冲洗和储存洛液洗涤血小板，使之不含污染性血浆蛋口和非血小板细胞成分，这样的血小板可以用来制备Capture-P检测微孔的单分子层。

【主要组成成份】Capture-P检测微孔板：1X8微带板，坚硕U型底部，表面覆盖特异性血小板粘合剂。

每个微带板可以进行8个单独的检测。

这些微带板保存于一个可重复性密封的铝箔袋中，铝箔袋中含有干燥剂和湿度计。

微带板可以单使用，也可以多个使用。

未使用的微带板.干燥剂和湿度计要立即谨慎重新密封于铝箔袋中，以免暴露于湿气中使粘合剂失效。

Capture检测微孔的辅助试剂：（另行购买）Capture LISS：低离子强度溶液，含有甘氨酸、漠甲酚紫染料和防腐剂叠氮化钠（0. 1%）* OCapture-P指示红细胞：结合有兔抗人IgG抗体的红细胞悬液。

血小板抗体检测项目（固相凝集法）一、基本原理：血小板抗体检测是检测患者血清中是否存在针对血小板的免疫性抗体，包括三类：1.ABO血型系统和HLA系统产生的血小板相关抗体，2.血小板特异性抗原（HPA）产生的特异性抗体，3.药物所致的血小板抗体二、血小板抗体检测的临床应用(一)在临床辅助诊断中的作用1、特发性血小板减少性紫癜（ITP）：ITP的临床症状很重要，但仍为排除性诊断。

如结合血小板抗体检测，则对ITP的确诊有重要价值。

2、血液系统疾病辅助诊断：对白血病、再生障碍性贫血、骨髓异常增生综合症、溶血性贫血、新生儿血小板减少症有辅助诊断意义。

3、孕期流产风险评估：血小板抗体筛查可对孕期流产风险做出评估，尤其适用于有多次妊娠史、习惯性流产史以及不孕不育情况查因。

（二）在临床输血治疗中的应用1、预防红细胞输注中非溶血性发热反应：血小板抗体阳性患者输注红细胞悬液后发生非溶血性发热反应明显高于阴性者，对于血小板抗体阳性采取干预措施后非溶血性发热反应明显降低，极大提高了输血的安全性。

2、预防血小板输注无效：血小板抗体是引起免疫性血小板输注无效最重要的原因，特别是多次输血后出现的血小板输注无效。

检测血小板抗体对提高血小板治疗效率和保证输血安全有重要意义。

三、血小板抗体检查的筛查对象1、血液肿瘤科病人：评价患者体内血小板抗体水平，辅助诊断血液系统疾病：如白血病、再障、溶血性贫血、血小板减少性疾病、骨髓异常增生综合症。

2、需治疗性输注血小板患者：特别是需多次输注血小板患者，建议提前筛查血小板抗体，防止血小板输注无效。

3、妇产科孕检：评价孕期流产风险，尤其适用于有多次流产史患者查因。

四、血小板抗体在临床病例中的验证。

医院检验中心血小板抗体测定（PAIgG，PAIgM，PAIgA）操作规程
（1）试剂
1）鼠抗人IgG多抗 cat NO 0279 蒸馏水复溶后分装，每支50ul，置-30℃贮存
2）鼠抗人IgM多抗 cat NO 0285 同上3）鼠抗人IgA多抗 cat NO 0278 同上4）FITC羊抗鼠荧光单抗 cat NO 0279 按说明书复溶，置-30℃贮存
（2）方法
血小板固定：取富含血小板的血浆0.4ml加1mlTEN缓冲液中。

再取上述稀释血浆0.4ml加等量2%的多聚
甲醛，室温固定15分钟。

洗涤：在已固定的血小板试管中加2mlTEN缓冲液，3000转/分，离心5分钟，洗涤2次。

弃上清液，加TEN
缓冲液0.4ml。

测定：测定管中分别加入IgG、IgM、IgA单抗50ul，将固定血小板50ul分别加入测定管和对照管。

室温
20分钟，用2mlTEN 3000转/分离心5分钟洗涤一
次后，再加0.6mlTEN。

上机：用各自的阴性对照。

阴性对照值在1.0左右，计数1万个血小板。

( 3 ) 参考范围
PAIgG 6.3-20.3%
PAIgM 2.6-14.5%。

血小板抗体常用的检测方法
嘿，咱今儿就来唠唠血小板抗体常用的检测方法。

你说这血小板抗体啊，就像是身体里的小调皮鬼，得把它们给找出来才行呢！
先来说说这酶联免疫吸附试验吧，这就好比是个超级侦探，能把那些隐藏的血小板抗体给揪出来。

它通过一些巧妙的反应和检测，让抗体无处可逃。

你想想，就像是在一个大迷宫里，这个试验就是那个能找到正确路径的指南。

还有这固相红细胞吸附试验呢，它就像是个精准的捕捉器。

血小板抗体一旦出现，它就能紧紧抓住，绝不放手。

就好像是个厉害的猎人，等着猎物上钩呢。

淋巴细胞毒试验也不能小瞧呀！它能像个敏锐的检察官一样，仔细检查每一个可能有问题的地方，不放过任何一个可疑的血小板抗体。

这可真是厉害得很呢！
流式细胞术呢，就像是个高科技的扫描仪，快速又准确地扫描着，把那些血小板抗体都给识别出来。

它可真是个厉害的角色呀！
咱再想想，要是没有这些检测方法，那得有多麻烦呀！医生们就像是在黑暗中摸索，不知道该往哪里走。

但有了这些方法，就像是点亮了一盏盏明灯，指引着前进的方向。

你说这些检测方法是不是很重要？它们就像是身体的卫士，守护着我们的健康。

我们得感谢那些发明和完善这些方法的科学家们，是他们让我们能更好地了解自己的身体。

所以呀，可别小看了这些血小板抗体常用的检测方法，它们可是在背后默默为我们的健康努力着呢！这就是关于血小板抗体常用检测方法的事儿，咱可得记住啦！。

血小板抗体检测的意义及检测技术的研究进展作者：付谦来源：《中国社区医师》2018年第25期摘要长期多次输血维持治疗的患者极易产生血小板相关抗体，从而导致许多严重并发症的发生。

文章对血小板抗体检测在输血中的重要意义、血小板杭体检测技术两个方面作一综述。

关键词血小板抗体;检测;输血随着输血医学研究的不断深入，成分输血越来越广泛地应用于临床，输注血小板成为一种重要的临床输血治疗手段，尤其是对治疗血小板缺乏引起的出血倾向、血小板功能性障碍具有重要价值。

但临床上常面临的问题是血小板输注无效或效果欠佳，其主要原因可能为患者体内产生了大量血小板抗体，对外来血小板造成破坏m，特别是长期多次输血维持治疗的患者极易产生血小板相关抗体，从而导致许多严重并发症的发生，如血小板输血性紫癜、血小板输注无效、重度出血等，给临床治疗带来了难度，并且对血液资源造成了严重浪费。

因此，输血前进行血小板抗体检测对于有效改善输血效果，特别是提高血小板输注效果显得尤为重要。

本文对血小板抗体检测在临床输血中的重要意义及国内几种常用检测技术的研究进展作一综述。

血小板抗体检测在输血中的重要意义血小板抗原、抗体：人类血小板表面的抗原系统较复杂，可以分为两类：①血小板自身特有的抗原，如GP、HPA等;②与其他机体组织或细胞共有的抗原，如HLA-Ⅰ、ABH等。

无论是共有抗原或自身抗原，都能够刺激机体产生异常免疫反应，产生大量血小板抗体，这是血小板输注无效的首要原因。

致使外来血小板破坏增多、功能减低、寿命缩短，特别是在多次输血患者中，55%的患者会出现PTR或（和）PTP[2]。

血小板抗体的产生是由血小板表面不同的相关抗原决定簇引起的一组复杂的免疫性疾病。

血小板抗体包括针对GP抗原的血小板特异性抗体（PB IgG）和针对HLA-Ⅰ类抗原的血小板表面相关抗体（PA IgG）两类。

随着患者输注血小板次数或输注量的不断增加，体内血小板抗原被不断刺激，导致体内血小板抗体水平上升，引起输注无效及非溶血性输血的可能性也相应增高。

血小板抗体检测在反复输血中的应用价值张玉朝【摘要】目的：探讨血小板抗体检测在反复输血中的应用价值。

方法选取南阳市中心血站2013年2月至2015年3月进行血小板抗体检测的200例反复输血患者，设为观察组；另外选取100例无输血史者，设为对照组，对两组患者进行血小板抗体检测并对结果进行对比分析。

结果观察组患者血小板抗体阳性率（37．5％）高于对照组（13．0％），差异有统计学意义（P ＜0．05）。

观察组输注无效率（85．0％）高于对照组（12．0％），差异有统计学意义（P ＜0．05）。

结论通过对反复输血患者进行血小板抗体检测能够有效评价血小板输注效果，为临床输血提供指导。

在对患者进行输血前建议先滤除白细胞以降低血小板抗体阳性率，预防和控制免疫性血小板输注无效的发生，保证输血的安全性。

【期刊名称】《河南医学研究》【年(卷),期】2016(025)003【总页数】2页(P448-449)【关键词】血小板;抗体;输血【作者】张玉朝【作者单位】南阳市中心血站河南南阳 473000【正文语种】中文目前，临床失血患者不断增加，血小板相关制品在医学范围内应用更加广泛，尤其是各种血液系统疾病和肿瘤患者的治疗。

但是从目前临床输血工作中发现，患者多次输血后可能产生血小板相关抗体，直接破坏了输入血小板的结构和功能，导致血小板输注无效。

因此，探究血小板抗体检测的应用价值对反复输血患者具有十分重要的意义[1]。

本文选取200例反复输血患者，进行血小板抗体检测，确保患者输血的安全，现具体分析如下。

1.1 一般资料选取南阳市中心血站2013年2月至2015年3月进行血小板抗体检测的200例反复输血患者(观察组)，患者均经5次以上输血，排除发热、感染和弥散性血管凝血等导致血小板输注无效的情况。

其中男120例，女80例；年龄为16～74岁，平均(42.1±3.2)岁；白血病43例，恶性肿瘤25例，全血小板减少40例，淋巴瘤37例，再生障碍性贫血55例。

磊铆戈学同等学力申请硕士学位论文（２００５届）五种血小扳抗体检测方法的比较及其优化Ｃｏｍｐａｌａｔｉｖｃｓｔｕｄｉｅｓｂｙｆｉｖｅｍｅｔｈｏｄｓａｎｄｍｏｄｉｆｉｃａｄｖｅａｐｐｌｉｃａｌｉｏｎ０１１ｄｃｔｃｃｔｉｏｎｏｆｐｌａｔｅｌｅｔａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ周晓华研究生姓名指导教师捌名申请学位级别专业名称——鱼——垂——堂—一研究方向血液免症论文提交日期２００５年１０月五种血小板抗体检测方法的比较及其优化第一部分２．１标本制备实验中所需血小板悬液采用本单位多人份Ｏ型献血员机采血小板，经ＴＥＮ洗涤两次后备用；患者标本及对照标本分离取血浆。

２．２ＭＡＳＰＡＴ法检测ＭＡＳＰＡＴ法也即单克隆抗体固相血小板抗体实验，其操作如下：调整血小板悬液为不低于Ｏ．１４×１０８／Ｌ。

向微孔中加入５０ｕｌ血小板悬液，１０００ｒｐｍ离心５ｍｉｎ。

用ＰＢＳ洗涤６次，每次洗涤时旋转并轻摇微孔板。

加入２滴ＬＩＳＳ试剂，再加入５０川被检血浆，轻摇１０ｓｅｃ，３７。

Ｃ孵育３０ｍｉｎ。

用ＰＢＳ洗涤６次，立即加５０ｌａｌＭＡＳＰＡＴ抗人ＩｇＧ，并加入１滴指示细胞，轻轻震荡，１０００ｒｐｍ离心５ｍｉｎ看结果。

如果指示红细胞聚集在微孔中部，表示阴性结果，如果指示红细胞结合到血小板层上，表示阳性结果。

见图１．２所示图１．２ＭＡＳＰＡＴ法检测血小板抗体结果（指示红细胞聚集在微孔中部，表示阴性结果，指示红细胞结合到血小板层上平铺散开，表示阳性结果。

）２３４５６图２．２两种微柱凝胶法改良方法检Ｎｎｍｄ，板抗体效果比较图（１、２为阴性对照，３、４为改良方法Ｉ所得结果，５、６为改良方法ＩＩ所得结果）结果微柱凝胶法的结果判读：如红细胞凝集在胶表面或凝胶中，则结果为阳性，如红细胞沉降于凝胶管底部，则结果为阴性；ＭＡＳＰＡＴ法结果判读：如果指示红细胞聚集在微孔中部，表示阴性结果，如果指示红细胞结合到血小板层上，表示阳性结果。

微柱凝胶原检测法及两种改良方法与ＭＡＳＰＡＴ法的结果比较见表２．１、表２．２。