血小板抗体检测及交叉配血

血小板抗体测定操作规程【检测原理】反应板中已包被抗血小板单克隆抗体，血小板悬液经离心洗涤后可在反应孔底部形成血小板单层。

加入血清或血浆，在孔中经过孵育后，若该血清或血浆中含有血小板抗体，则该抗体与反应孔中的血小板单层结合，未结合的成分通过洗涤被去除。

加入抗人及人致敏红细胞（指示红细胞），经离心后指示红细胞通过抗人的桥连与血小板单层上的血小板抗体结合，因此阳性反应为指示红细胞平铺在反应孔底部表面。

而阴性反应为指示红细胞在离心力的作用下聚集于反应孔底部中央。

【试剂组成】1、反映板2、低离子强度溶液3、抗人IgG4、25×浓缩洗涤液5、阴阳性对照6、指示红细胞7、冻干血小板8、生理盐水【样本要求】新鲜血清或血浆样本，4℃可保存7天，若需长期保存应-20℃冻存。

样本检测前经离心5分钟后，取上清液进行检测。

【实验前准备】1将试剂盒平衡至室温(18-25°C)2、25×浓缩洗涤液用纯化水按1:24体积比稀释成洗涤工作液。

【适用仪器】平板式离心机。

离心力和离心转数的换算公式为Rcf(g)=1.119×10-5×r×(rpm)2（r为离心半径，单位cm）。

【检测步骤】(一)抗体检测1、制备血小板悬液：可将商品化的冻干血小板稀释后直接使用；也可自己制备三人份等比例混合型血小板悬液（将有效期内机采血小板用生理盐水进行5-10倍稀释后混合；或采血当天8小时内或枸橼酸钠抗凝全血经离心10分钟，取上层2/3富血小板血浆混合）。

血小板悬液应贮于塑料容器中，保存并在8小时内进行检测。

2、根据检测量出反应板条，标记患者、阳性对照及阴性对照孔，未使用的板条应储存于自封袋中，加入干燥剂密封后，2-8℃储存。

3向反应孔中加入1滴（50ul）上述血小板悬液，轻摇反应板约10秒钟。

4、用平板离心机将反应板以50g离心5分钟，使血小板固定在反映孔底部。

5、倒出反应孔中的液体，并用滴管滴加洗涤工作液清洗3次，洗涤过程中轻摇微孔板，然后轻轻甩掉洗涤液。

【口的】Capture-?®是设计用来检测血小板IgG抗体的固相系统。

可为血小板输注无效患者进行血小板配血。

【适用范圉】血小板输注无效患者血小板输注前配血【检测原理】Capture-P是一个固相抗体检测系统，是曲Rachel等人4、Juji等人5和Sh让毗&等人6发表的检测过程改良而来。

患者或供体血小板首先结合于聚苯乙烯微孔表面。

然后用它们来捕获患者或供体血浆中的血小板抗体。

血清在结合有血小板的微孔中进行简短孵育，使抗体与血小板结合（如果抗体存在）。

把微孔中游离的IgG 冲洗掉，并加入结合抗IgG指示红细胞。

进行离心，这样会使指示红细胞与结合于固定的血小板上的抗体接触。

阳性检测中，在指示红细胞和结合血小板抗体间形成了抗免疫球蛋口G桥联，从而阻止了指示红细胞向微孔底部的移动。

作为这种桥联的结果，指示红细胞会形成一个汇合单层从而覆盖固定的血小板。

相反，如果是阴性检测，当不存在血小板抗原-抗体反应时，指示红细胞的移动就不会被阻止，就会被离心到微孔底部，进而形成紧密圧缩、清晰的细胞扣。

可以使用事先经过冲洗和保存的血小板，这个步骤是可以选择的。

使用血小板冲洗和储存洛液洗涤血小板，使之不含污染性血浆蛋口和非血小板细胞成分，这样的血小板可以用来制备Capture-P检测微孔的单分子层。

【主要组成成份】Capture-P检测微孔板：1X8微带板，坚硕U型底部，表面覆盖特异性血小板粘合剂。

每个微带板可以进行8个单独的检测。

这些微带板保存于一个可重复性密封的铝箔袋中，铝箔袋中含有干燥剂和湿度计。

微带板可以单使用，也可以多个使用。

未使用的微带板.干燥剂和湿度计要立即谨慎重新密封于铝箔袋中，以免暴露于湿气中使粘合剂失效。

Capture检测微孔的辅助试剂：（另行购买）Capture LISS：低离子强度溶液，含有甘氨酸、漠甲酚紫染料和防腐剂叠氮化钠（0. 1%）* OCapture-P指示红细胞：结合有兔抗人IgG抗体的红细胞悬液。

血小板抗体检测及交叉配型在血小板临床输注中的应用分析杜玮璐
【期刊名称】《中国社区医师》
【年(卷),期】2014(000)028
【摘要】目的：观察血小板抗体检测及交叉配型对血小板输注临床疗效的影响。

方法：2013年6月-2014年3月收治需输注血小板患者120例，其中50例无输血史患者为对照组，70例有多次输血史患者为观察组，两组均采用固相凝集法检
测血小板抗体，并对抗体阳性患者进行交叉配型，比较血小板输注后的疗效。

结果：观察组和对照组血小板抗体阳性率分别为41.43%和14.00%，观察组显著高于对
照组(P＜0.05)；多次输血史患者随输注次数的增加，血小板抗体阳性率越高；血
小板配型输注1 h、24 h时CCI及有效率均显著高于随机输血患者(P＜0.05)。

结论：多次输血可导致患者产生同种抗体，血小板输注前抗体检测和交叉配型可提高患者临床血小板输注的疗效。

【总页数】2页(P117-118)
【作者】杜玮璐
【作者单位】467000河南省平顶山市中心血站
【正文语种】中文
【相关文献】
1.血小板输注患者行血小板抗体检测及交叉配型的临床意义 [J], 张咏芳
2.血小板抗体检测及交叉配型在血小板输注无效患者中的应用 [J], 陈晓军;孙景春;段生宝;聂荣国
3.血小板抗体检测与血小板配型输注的临床应用分析 [J], 袁志军
4.血小板输注患者行血小板抗体检测及交叉配型的临床意义 [J], 张咏芳;
5.血小板抗体检测及交叉配型在血小板输注患者中的应用 [J], 杜容;施蔚
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交叉配型和血小板抗体检测对保障临床输血有效性的应用价值研究摘要：目的：分析研究在临床单采血小板输注中交叉配型和血小板抗体检测的临床意义。

方法：以血小板纠正指数（CCI）、血小板恢复百分率（PPR）对比交叉配型前后单采血小板输注效果。

结果：40例血小板输注无效患者，血小板抗体检测阳性17例，17例患者交叉配型后血小板输注1h和24hCCI、PPR数值明显高于交叉配型前，输血有效性有明显差异（P<0.05）。

结论：在进行临床输血的过程中，进行血小板交叉配型和血小板抗体检测，可以使得血小板输注有效性得到明显提高，值得临床的广泛推广应用。

关键词：交叉配型；血小板抗体检测；临床输血；有效性白血病是造血干细胞恶性克隆性疾病，患者骨髓白血病细胞异常增殖、凋亡受阻，抑制正常造血细胞，从而导致红细胞和血小板减少或功能异常，引起患者贫血、出血、肝脾淋巴结肿大、不规则发热等症状。

对于血小板减少或功能异常导致的患者出血，临床常采用血小板输注。

有关研究表明，患者多次输血后易产生针对血小板的同种抗体，导致血小板输注无效（RPT）。

RPT是指患者输注血小板后，输入的血小板在体内存活期短，血小板纠正指数（PPI）或血小板恢复百分率（PPR）低。

本文对本院17例血小板输注无效患者血小板交叉配型前后输注效果对比，报道如下。

1资料与方法1.1一般资料对2022年3月-2023年3月本院收治的40例血小板输注的无效白血病患者进行血小板抗体检测，男女患者的比例为22：18，年龄在22-80岁之间，平均年龄在45岁左右。

对血小板抗体检测阳性的患者进行交叉配型后输血配型的单采血小板，对比交叉配型前后单采血小板输注效果。

1.2方法血小板抗体检测采用长春博德生产的血小板抗体检测试剂盒（固相凝集法）检测，血小板交叉配血后的特配血小板由上海市血液中心提供。

血小板计数采用血细胞分析仪（SysmexXS-800i）进行测定。

对照组按病人的血型选用同型单采血小板进行输注。