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血小板生成素受体激动剂治疗难治性特发性血小板减少性紫癜的研究进展摘要：本文对于血小板生成素受体激动剂（TRA）在治疗特发性血小板减少性紫癜（ITP）上的研究现状以及进展进行了讨论，现做如下报告。
关键词：血小板生成素受体激动剂；特发性血小板减少性紫癜；研究进展血小板减少性紫癜（ITP）是临床上常见的血液病，这种疾病主要是由于机体血小板生产功能出现障碍以及血小板生存时间变短而导致患者皮肤或者内脏大量出血，对患者的生命健康造成严重威胁[1]。
研究指出ITP的诊断标准当机体血小板低于20~30×109/L或者是低于50×109/L合并具有出血现象。
随着科研工作者对ITP研究的不断深入，临床上对于ITP的诊断治疗也有了新的认识和选择。
目前临床上对于ITP的治疗主要采用药物治疗和手术治疗，药物治疗的首选药物多为糖皮质激素和丙种球蛋白，治疗效果也比较显著[2]；手术治疗则可以进行脾切除手术。
但是这些方法都是通过免疫抑制来达到降低血小板的清除率，对机体可能会造成一定的损伤.当患者出现耐受或治疗效果不佳时，临床上可以通过促进血小板增多而进行治疗。
直接进行血小板的输注来补充患者机体血小板的数量花费较高而且也容易产生副作用，因此寻找其它有效促进机体血小板生成的药物有着十分重要的意义[3]。
经过科研工作者的不断努力，血小板生成素受体激动剂（TRA）以及促血小板生成素（TPO）的出现带给临床治疗ITP新的曙光。
本文对TRA应用治疗ITP的研究现状和进展做进一步概述。
1.促血小板生成素（TPO）的结构和作用TPO是一种能够对血小板生成有调节作用的因子，这种因子的主要结构包括2个结构区域：一个是与受体结合的区域；一个是羰基区域，这个区域经过高度糖基化，能够对蛋白的稳定性有保持作用。
机体内主要是由肝脏和肾脏产生TPO，然后TPO进入血液循环后，就会与受体c-mpl进行结合，这种受体主要是位于巨核细胞和其祖细胞表面。
特发性血小板减少性紫癜的临床表现及诊断方法分析特发性血小板减少性紫癜（idiopathic thrombocytopenic purpura，ITP）是一种以血小板计数减少及皮肤和（或）黏膜紫癜为主要临床表现的自身免疫性疾病。
本文将就特发性血小板减少性紫癜的临床表现及诊断方法进行详细分析。
一、临床表现特发性血小板减少性紫癜的主要临床症状为皮肤和（或）黏膜紫癜。
紫癜是由于血小板减少导致血管壁的破裂出血所致。
紫癜多表现为皮肤、口腔黏膜、鼻腔、胃肠黏膜等处的紫点、紫斑或紫癜，可根据病情轻重而异，严重者甚至出现弥散性出血。
其他常见症状包括鼻出血、牙龈出血、月经过多等。
二、诊断方法1. 详细病史询问：包括疾病的起病、持续时间和性质、既往有无自身免疫病史等。
特发性血小板减少性紫癜的确诊需要排除其他可以引起血小板减少的疾病因素。
2. 体格检查：皮肤和（或）黏膜紫癜是特发性血小板减少性紫癜的主要临床表现，体格检查应包括全身皮肤和黏膜的观察。
注意观察出血情况，如皮肤紫癜、鼻衄、口腔出血、牙龈出血等。
3. 血常规检查：特发性血小板减少性紫癜的特点之一是血小板减少。
进行血常规检查可观察到血小板计数减少，但需排除其他血液病因素引起的继发性血小板减少。
4. 骨髓穿刺检查：骨髓穿刺检查对于特发性血小板减少性紫癜的诊断具有重要意义。
通过骨髓穿刺可观察到骨髓中巨核细胞的数量和形态，以及排除其他原发性血小板减少的病因。
5. 自身抗体检测：特发性血小板减少性紫癜的发病机制与自身免疫有关，自身抗体检测可以协助诊断。
反应皿或胶乳凝集试验可以检测血清中抗血小板抗体水平的变化。
6. 免疫学检测：包括淋巴细胞亚群、T细胞亚群的测定等，可以协助确定免疫功能的异常情况，进一步指导治疗。
7. 影像学检查：特发性血小板减少性紫癜患者可能出现脑出血等严重并发症，因此进行头颅CT或MRI检查可以评估颅内出血情况。
8. 治疗经验：以药物治疗为主，常用药物包括激素类药物和免疫抑制剂等。
【疾病名】妊娠合并特发性血小板减少性紫癜【英文名】pregnancy complicating idiopathic thrombocytopenic purpura 【缩写】【别名】妊娠合并免疫性血小板减少性紫癜；妊娠合并原发性血小板减少性紫癜【ICD号】O99.1【概述】特发性血小板减少性紫癜(ITP)是因免疫机制使血小板破坏增多的临床综合征，又称免疫性血小板减少性紫癜，是最常见的一种血小板减少性紫癜，其特点为血小板寿命缩短，骨髓巨核细胞增多，血小板更新率加速。
临床上分为急性型和慢性型。
急性型多见于儿童，慢性型好发于青年女性。
本病不影响生育，因此合并妊娠者不少见，是产科严重并发症之一。
【流行病学】妊娠期血小板减少中，特发性血小板减少约占74%。
【病因】急性型多发生于病毒感染或上呼吸道感染的恢复期，患者血清中有较高的抗病毒抗体，血小板表面相关抗体(PAIgG)明显增高。
慢性型发病前多无明显前驱感染史，目前认为发病是由于血小板结构抗原变化引起的自身抗体所致，80%～90%病例有血小板表面相关抗体(PAIgG、PAIgM、PA-C3。
慢性型发生于育龄妇女妊娠期，并且容易复发，表明雌激素增加对血小板有吞噬和破坏作用。
【发病机制】急性ITP的发病机制尚未阐明，可能是由于病毒抗原吸附于血小板表面，使血小板成分的抗原性发生改变，并与由此产生的相应抗体结合，导致血小板破坏，血小板寿命缩短。
严重者血小板寿命仅数小时。
急性ITP患者血小板表面相关的免疫球蛋白(PAIg)常增高，这种增高多呈一过性。
当血小板数开始回升时，PAIg迅速下降。
另外，病毒可直接损伤血小板，使血小板破坏增加。
ITP患者的组织相容性抗原的研究表明，ITP尤其好发于伴有DR抗原者，HLADR(LB)则与治疗反应密切相关。
这些患者对肾上腺皮质激素疗效欠佳，而对脾脏切除有较好的疗效。
有些学者认为，ITP是某些免疫功能异常的表现。
在系统性红斑狼疮(S L E)血小板减少相当普遍，7%～26%患者并发ITP。
特发性血小板减少性紫癜辨证探讨（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【关键词】血小板减少性紫癜病因病机辨证分型特发性血小板减少性紫癜(ITP)是临床上常见的出血性疾病,一般认为免疫功能异常导致抗自身血小板抗体的产生在ITP发病过程中起重要作用。
临床以外周血中血小板减少、骨髓巨核细胞增多伴成熟障碍为特征,以全身皮肤黏膜甚至内脏出血为表现的自身免疫性疾病。
本病属中医“虚劳”、“发斑”、“血证”、“肌衄”、“葡萄疫”等范畴。
笔者现就本病辨证及其与现代免疫指标的相关性加以论述。
1 热迫血行多见于急性ITP或慢性ITP急性发作期。
外感内伤,蕴毒于内,血热妄行而溢于脉外,即所谓“血无火不升”,“出血总缘于热”。
《血证论》云：“血证气盛火旺者十居八九。
”《济生方·吐衄》云：“夫血之妄行也,未有不因热之所发,盖血得热则淖溢,血气俱热,血随气上,乃吐衄也。
”《景岳全书·血证》亦云：“血本阴精,不宜动也……盖动者多由于火,火盛则逼血妄行……血动之由,惟火惟气耳。
”从火热的渊源来看,有外邪入里化火,如《外科正宗·葡萄疫》说：“感受四时不正之气,郁于皮肤而不散,结成大小青紫斑点,色若葡萄,发在遍体头面,乃为腑证,自无表里。
邪毒传胃,牙根出血,久则虚人。
”《症因脉治·衄血论》曰：“胃火上炎,肝火易动,阴血随火上升,错经妄越,则内伤衄血。
”《素问玄机原病式》指出：“五志过极皆为热盛。
”此外,又痰、食、血、水诸郁不解,气机郁结,日久亦均可化热。
故而七情伤气；劳倦色欲动火；外邪不解,热郁于经；饮食不节,火动于胃,此皆动血之因,迫血妄行,溢于肌肤则为紫斑；溢于上窍,则为吐衄；下焦热甚,灼伤阴络,则为便血,尿血。
2 阴虚火旺火有虚实之分,实火已如上述。
火盛迫血妄行,精血亏耗,阴不制阳又导致阴虚火旺的病理变化。
故而阴虚火旺既是热盛迫血的结果,又是再一次引起出血的病因。
文章编号(Article ID):1009-2137(2004)02-0204-03・论著・血小板特异性抗体对特发性血小板减少性紫癜诊断价值的研究张海燕,侯明1,张小红,关向宏,孙桂珍山东省临沂市人民医院,临沂276003;1山东大学齐鲁医院,济南250012摘要 本研究的目的是比较特发性血小板减少性紫癜(ITP)、慢性再生障碍性贫血(CAA)、恶性血液病患者及健康志愿者特异性抗体水平,以评价血小板特异性抗体在ITP诊断中的价值。
用改良单克隆抗体特异性俘获血小板抗原(MAIPA)技术同时检测血小板GPIb/Ⅸ、GPIIb/Ⅲa、GPⅣ、GPⅤ的特异性抗体。
结果表明:ITP组、CAA组、恶性血液病患者及健康志愿者血小板特异性抗体总阳性率分别为69.99%,10%,20%和0%。
ITP组与CAA组存在显著性差异(χ2=20.71,P<0.005),ITP组与恶性血液肿瘤化疗组存在显著性差异(χ2=12.22,P<0.005)。
健康志愿组无1例阳性。
结论:多种抗体同时检测可提高敏感性,血小板特异性抗体对ITP是一种特异性高、敏感性强的实验室诊断指标。
关键词 特发性血小板减少性紫癜;血小板特异性抗体;血小板中图分类号 R55812文献标识码 AThe Diagnostic V alue of Platelet G lycoprotein2Specif ic Autoantibody Detection in Idiopathic Thrombocytopenic PurpuraZHA N G Hai2Y an,HOU M i ng1,ZHA N G Xiao2Hong,GUA N Xiang2Hong,S U N Gui2ZhenDepart ment of Hematology,L i nyi People′s Hospital,L i nyi276003,Chi na;1Depart ment of Hematology,Qil u Hospital of S handongU niversity,Ji nan250012,Chi naAbstract To detecte levels of platelet glycoprotein2specific autoantibody in idiopathic thrombocytopenic purpura(ITP),chronic aplastic anemia(CAA),hematologic malignancies and healthy volunteers,and evaluate the clinical significance of platelet glycoprotein2specific autoantibody level in diagnosis for ITP,anti2GPIb/Ⅸ、anti2GPIIb/Ⅲa、anti2GPⅣand anti2GPⅤauto2antibodies were detected contem poraneously by a modified monoclonal antibody immobilization of platelet antigen assay(modified MAIPA).The results showed that the total positive rate of antibodies againast plateletGPIb/Ⅸ、GPIIb/Ⅲa、GPⅣ、GPⅤwere69.99%,10%,20%and0%in ITP,CAA,hematologic malignancy groupand healthy volunteers respectively.There was significant difference between ITP and CAA(χ2=20.71,P<0.005), between ITP and hematologic malignancy group(χ2=12.22,P<0.005).There was no positive finding in the healthy control.It is concluded that platelet glycoprotein2specific autoantibody has high value for the diagnosis of ITP,many kinds of antibodies detection at one time can enhance sensitivity,MAIPA is a s pecific assay for the diagnosis of idiopathic thrombocytopenic purpura.K ey w ords idiopathic thrombocytopenic purpura;platelet specific antibody;plateletJ Ex p Hem atol2004;12(2):204-206特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocy2 topenic purpura,ITP)是一类由体液和细胞免疫异常导致血小板破坏增多的疾病1。
血小板自身抗体对于诊断ITP及探讨ITP的发病机制具有重要的意义。
我们采用单克隆抗体特异性俘获血小板抗原(MA IPA)的技术并加以改进,检测了ITP,慢性再生障碍性贫血(CAA),恶性血液肿瘤化疗患者及健康志愿者的血小板糖蛋白(glycoprotein,GP)特异性抗体,以评价血小板特异性抗体对ITP的诊断价值。
材料与方法病例选择2002年3月至2003年3月间符合诊断标准的ITP患者,慢性再生障碍性贫血(CAA)患者,恶性血液肿瘤化疗后血小板减少患者各30例。
全部符合国内血液病诊断标准,ITP组中男12例,女18例,年龄6-62岁。
CAA组中男17例,女13例,年龄7通讯作者:张海燕,主治医师、硕士.电话:(0539)82187752003-07-21收稿;2003-12-23接受・42・中国实验血液学杂志 Journal of Ex perimental Hem atology2004;12(2):204-206 -58岁。
恶性血液肿瘤化疗组中急性白血病24例,多发性骨髓瘤3例,恶性淋巴瘤3例。
年龄22 -71岁。
另选30名健康志愿者作为对照。
所有待测者均未接受过血小板输注,取血时血小板在(5-60)×109/L。
采集患者外周血5ml,5%ED TA抗凝,离心后Eppendorf管分装,置-80℃冰箱低温保存,待测。
试剂抗血小板GPIb/Ⅸ、GPIIb/Ⅲa、GPⅣ、GPⅤ单克隆抗体购自Imunotech公司,羊抗鼠Ig G(H+L)及碱性磷酸酶标记的羊抗人Ig G由Sigma公司提供,蛋白酶抑制剂亮抑蛋白酶肽(leupeptin)为Boehringer Mannheim公司的产品,其它试剂均为分析纯。
羊抗鼠IgG包被多孔板配置抗体终浓度为3μg/ml的包被液,在多孔板上每孔加100μl,置4℃孵育过夜,然后用0.01mol/L PBS/Tween洗板2次,加入封闭液,室温下放置30分钟后,去除封闭液并甩干,即用。
包被羊抗鼠IgG多孔板俘获单克隆抗体分别制备终浓度为4μg/ml的单克隆抗体GPIb/Ⅸ,GPIIb/Ⅲa,GPⅣ和GPⅤ稀释液,取上述包被板,每孔加单克隆抗体稀释液50μl,室温下在摇床上孵育60分钟,再用PBS/Tween洗板3次,待用。
血小板抗体的检测采用ED TA抗凝的O型全血50ml,260×g离心15分钟,分离富含血小板血浆,再1000×g离心10分钟,取浓缩血小板,用PBS/ED TA洗2次,并将血小板浓度调至1×109/ml。
在每个Eppendorf管中加血小板悬液100μl,再加待测血浆,室温孵育60分钟,用PBS/Tween洗板3次,然后加裂解缓冲液亮抑蛋白酶(leupeptin),置4℃摇床上30分钟后, 4℃26000×g离心30分钟,取50μl上清加200μl 稀释缓冲液,在俘获单克隆抗体的羊抗鼠包被板上每孔加稀释上清液100μl(设复孔),室温下在摇床上孵育60分钟,再用0.01PBS/Tween洗板4次,每孔加碱性磷酸酶标记的羊抗人Ig G(1∶3000)100μl,室温下在摇床上孵育60分钟,然后用0.01PBS/ Tween洗板6次,每孔加PN PP/底物缓冲液,孵育15-60分钟至显色,用自动酶标仪在405nm及490 nm下观察结果。
每板设1份正常血浆,若患者血浆的A值大于正常A值 x+3s的则为阳性。
统计学方法率的比较采用卡方检验。
结 果各种血小板减少症患者血小板膜特异性抗体的MAIPA法检测检测结果见表1。
CAA组与ITP组血小板膜糖蛋白特异性抗体的总阳性率有显著差异(χ2=20.71, P<0.005);恶性血液肿瘤化疗组与ITP组血小板膜糖蛋白特异性抗体的总阳性率有显著差异(χ2= 12.22,P<0.005)。
健康对照组无1例阳性。
ITP 组2种抗体组合的MA IPA检测结果中GPIb/Ⅸ和GPIIb/Ⅲa抗体同时阳性2例,GPIIb/Ⅲa和GPⅣ抗体同时阳性1例,GPIb/Ⅸ和GPⅤ抗体同时阳性1例。
3种抗体组合的MA IPA检测结果中仅1例GPIb/Ⅸ、GPIIb/Ⅲa和GPⅣ同时阳性。
T able1.Platelet glycoprotein2specif ic autoantibody detection in ITP,CAA,hematolo gic malignancyes and healthy volunteer Group Positive rateanti2 GPIb/Ⅸanti2GPIIb/Ⅲaanti2GPⅣanti2GPⅤTwoantibodiesThreeantibodiesFourantibodiesTotolpositiverateITP16167%(5/30)20%(6/30)10%(3/30)3133%(1/30)13133%(4/30)3133%(1/30)3133%(1/30)69199%(21/30)CAA0%(0/30)6167%(2/30)3133%(1/30)0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)10%(3/30)Hematologic malignancy10%(3/30)0%(0/30)0%(0/30)10%(3/30)0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)20%(6/30)Healthy volunteer0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)0%(0/30)・52・血小板特异性抗体对特发性血小板减少性紫癜诊断价值的研究T parison of the signif icance of detection for anti2GPIb/Ⅸ,anti2GPIIb/Ⅲa,anti2GPⅣ,anti2GPⅤautoantibodiesType of antibodies Sensitivity(%)Specificity(%)ProbabilityratioPositive pre2dictive value(%)Negative pre2dictive value(%)Totalefficiency(%)anti2GPIb/Ⅸ40979813878 anti2GPIIb/Ⅲa459712883681 anti2GPⅣ269712884380 anti2GPⅤ20979675078抗血小板膜GPIb/Ⅸ、GPIIb/Ⅲa、GPⅣ、GPⅤ4种抗体的检测4种抗体的敏感性、特异性、可能性比值、阳性预测值、阴性预测值及总有效率的检测结果见表2。
