前白蛋白ppt课件
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血清前白蛋白检测指标对肝脏疾病的诊断--------------------------------------------------------------------------------核心提示:nbsp;nbsp;nbsp;nbsp;肝脏是合成和分解蛋白的重要器官,实验室通过检测血液中的蛋白或酶水平,即可反映肝脏合成及储备能力,根据各项指标的降低程度、观察动态变化,提示肝病患者的病情严重程度。
以往临床上多采用一些传统的肝功能项目,如ALT、TP、ALB、CEA【关键词】前白蛋白检测;肝脏疾病;诊断价值肝脏是合成和分解蛋白的重要器官,实验室通过检测血液中的蛋白或酶水平,即可反映肝脏合成及储备能力,根据各项指标的降低程度、观察动态变化,提示肝病患者的病情严重程度。
以往临床上多采用一些传统的肝功能项目,如ALT、TP、ALB、CEA、TBA等传统的生化检验指标,对有些新指标项目了解较浅,如选择前白蛋白(Prealbumin,PA)检测的较少,在此笔者对血清PA特性与其它肝功能检测指标联合应用价值,做如下综述。
1 生物特性人体血清PA是一种低分子量血浆蛋白,主要由肝脏合成,分子量为55 KD,沉淀系数3.9[1],是一个稳定的四聚体,由4个相同的亚单位组成,每一个亚基含127个氨基酸,具有重要的生物活性,在甲状腺和维生素A的转运中起重要作用,因此又称甲状腺联结PA 或维生素A转运蛋白[2],血清半衰期为1.9 d,在pH 8.2缓冲液中电泳移PA比白蛋白高25%,琼脂电泳时位于白蛋白之前,其功能类似。
正常人血清PA含量为0.28 g/L~0.35 g/L,约占全部血清蛋白的0.4%。
2 实验方法2.1 琼脂糖电泳仪器:采用全自动HYDRASY电泳仪(法国sebia);试剂主要含PH(8.6±0.1)琼脂糖凝胶,pH (8.8±0.3)Tris巴比妥缓冲液,2 g/L酸紫染液,自配试剂:脱色液0.5 g/L柠檬酸;方法取血清10 μl加样,保温7 min~10 min,电泳、染色、脱色、干燥(全部由仪器完成),扫描、报告结果。
1 测定方法免疫比浊法。
2 测定原理血清前白蛋白(Prealbumn,PA)与试剂中包被有抗PA抗体的胶乳颗粒相结合,与之发生凝集形成不溶性免疫复合物,使反应液产生混浊,PA的浓度与胶乳颗粒的凝集形成的浊度成正比。
3 标本血清及肝素-Li,Na,K/EDTA-K抗凝血浆,处理方法见标本准备。
稳定性:2 - 8℃ 3天-20℃ 6个月4 试剂4.1试剂来源:ROCHE配套试剂(详见试剂说明书)。
贮存条件及稳定性:未打开试剂盒:2-8℃储存至效期末R1:打开后机上稳定90天R2:打开后机上稳定90天准备:直接使用。
4.2 校准物来源:ROCHE配套校准物,符合WHO标准,具体如下:S1:0.9%NaClS2:C.f.a.s批特异的定标液的靶值乘以下列的转换因子,用来计算定标曲线。
S2:0.125 S5:1.000 S3:0.250 S6:2.276 S4:0.500定标频率:A 试剂批号更换后 B 由质控结果决定4.3 质控物来源:Precinorm protein (罗氏蛋白正常值质控)Precipath protein (罗氏蛋白病理值质控)其它适合的质控品贮存条件:置2-8℃冰箱至有效期。
准备:质控品应该进行1+7倍稀释后使用。
5 仪器ROCHE MODULAR P生化分析仪。
6 上机操作见仪器作业指导书。
7 参考范围20-40mg/ml8 性能指标本法线性范围为3-80mg/dl ,灵敏度为1.5mg/dl。
9临床意义前白蛋白是一种富含色氨酸的蛋白质,它在肝脏细胞中合成,分子量约为55 000道尔顿。
当PH为8.6时,虽然相对于Albumin的含量只有2.5%,,但是因为其阳极扩散率较高,在电泳后Prealbumin 的条带要先于白蛋白。
前白蛋白的功能是结合和转运低分子量的视黄醇结合蛋白(分子量低于21 000道尔顿),阻止其进行肾小球的率过。
循环中前白蛋白中的30-50%于视黄醇-结合蛋白形成复合物。
带你走近前白蛋白(PA)1.理化性质前白蛋白(Prealbumin, PA),分子量5.4万,由肝细胞合成,在电泳分离时,常显示在白蛋白的前方,其半衰期很短,仅约12小时。
因此,测定其在血浆中的浓度对于了解蛋白质的营养不良、肝功能不全、比之白蛋白和转铁蛋白具有更高的敏感性。
2.生理功能PA除了作为组织修补的材料外,还可视为一种运载蛋白,它结合T4与T3,而对T3亲和力更大,PA与视黄醇结合蛋白形成复合物,具有运载维生素A的作用。
3.参考范围:(1)醋酸纤维薄膜电泳法:0.28~0.35g/L。
(2)免疫扩散法:男:233.5~372.7mg/L。
女:217.75~337.65mg/L。
儿童:160.7~327.9mg/L。
(3)散射比浊法:213.0~441.9mg/L。
4.临床意义除了作为一种灵敏的营养蛋白质指标,PA在急性炎症、恶性肿瘤肝硬化或肾炎时其血浓度下降。
(1).肝脏疾病时前白蛋白更敏感,临床认为有30%白蛋白正常的肝病患者的前白蛋白减少,坏死后肝硬化几乎是零。
肝硬化肝细胞坏死较轻,前白蛋白变化不大,预后较好,当病情改善时,前白蛋白亦迅速升高;(2).亚急性肝坏死前白蛋白一直在低值,故前白蛋白可用作判断肝病预后指标。
肝癌以及阻塞性黄疸患者均可降低,其降低程度与病情有密切关系;(3).结合转氨酶、胆红素检测对不同类型肝脏疾病和非肝脏疾病有鉴别意义,如前白蛋白、转氨酶、胆红素均增高,多属急性肝脏疾病,如前白蛋白不增高,仅转氨酶、胆红素增高则应考虑非肝脏本身疾病;(4).肾病综合症前白蛋白不仅不减少,而且在饮食充分时还可以升高。
营养不良负氮平衡时前白蛋白减少。
5.前白蛋白偏高的原因前白蛋白偏高的主要原因是由血液浓缩造成。
另外还有一种可能是肝脏的代谢能力强也是引起前白蛋白偏高的原因。
6.前白蛋白偏低的原因前白蛋白在急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化或肾炎时其在血液中的浓度下降,测定前白蛋白在血浆中的浓度对于了解肝功能不全、比之白蛋白和转铁蛋白具有更高的敏感性,临床上导致前白蛋白偏低的原因主要有以下几种:(1).急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化或肾炎会造成前白蛋白偏低;(2).发生亚急性肝坏死时前白蛋白一直在会低于正常值;(3).肝癌以及阻塞性黄疸可引起前白蛋白偏低;(4).营养不良负氮平衡时也可导致前白蛋白偏低简而言之,肝脏疾病中的肝癌、肝硬化、慢性活动性肝炎、阻塞性黄疸等都可以表现为前白蛋白偏低。