猪源粪肠球菌的分离_鉴定及应用_许光胜

猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR快速鉴定方法的建立王亚宾;陈丽颖;胡慧;段志刚;崔保安【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2010(031)0z1【摘要】粪肠球菌和屎肠球菌是引起猪感染发病的优势肠球菌种,以肠球菌的16 S rRNA基因设计属特异性引物,利用SodA基因多态性设计种特异性引物,同时优化反应条件,建立了能同时测定猪源粪肠球菌和屎肠球菌多重PCR方法.通过对来源于猪的临床菌株、粪便菌株和鲜猪肉菌株进行测定,均能成功扩增出属特异性片段和种特异性片段.经过与快速生化鉴定试剂盒(Vitek-32)和16 S rRNA测序方法比较,多重PCR与16 S rRNA测序方法对猪的临床菌株、粪便菌株和鲜猪肉菌株的鉴定符合率100%;与Vitek-32鉴定符合率为62.3%,其中,与分离于感染猪的临床菌株符合率仅有46.7%,特别是感染猪的屎肠球菌,符合率仅为22.3%.【总页数】5页(P127-131)【作者】王亚宾;陈丽颖;胡慧;段志刚;崔保安【作者单位】河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002;河南农业大学牧医工程学院,河南郑州,450002【正文语种】中文【中图分类】S854.43【相关文献】1.产酪胺粪肠球菌和屎肠球菌PCR检测方法的建立 [J], 舒蕊华;卢士玲;徐幸莲2.猪源大肠杆菌floR、CTX-M、mcr-1耐药基因多重PCR检测方法的建立 [J], 李孟; 李金磊; 申水莹; 杨鹏霞; 彭丽; 李慧素; 吴志明3.猪源产肠毒素大肠杆菌菌毛基因多重PCR检测方法的建立及初步应用 [J], 刘国梅;李培;左玉柱;李杰峰;张宁;刘曼迪;刘迎迎;李妍4.4种猪源病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用 [J], 王莹;刘雨田;孙成友;迟田英;宋芳芳;于小静;吴晓东;王志亮5.基于毛细管电泳的7种猪源性疫病的多重PCR检测方法的建立 [J], 涂藤;尹清清;张鹏飞;王印;杨泽晓;姚学萍;罗燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

河南省猪源粪肠球菌的分离、鉴定与耐药性分析董鹏;李金磊;狄元冉;韩楠;方忠意;高延玲;周红霞;吴志明【摘要】旨在掌握河南省猪源粪肠球菌的耐药情况.从规模化猪场抽取样品300批,采用常规方法进行粪肠球菌分离、培养、纯化,应用全自动细菌鉴定/药敏系统和PCR技术对分离菌株进行种水平鉴定,利用微量肉汤稀释法对分离菌株进行药物敏感性分析.结果表明,有154株分离菌被鉴定为粪肠球菌,总体分离率为51.33%;分离菌株对头孢西丁、克林霉素、泰妙菌素、头孢噻呋、磺胺异噁唑、红霉素、替米考星等抗菌药物耐药严重,耐药率均在90%以上,对强力霉素(多西环素)、氟苯尼考、青霉素、复方新诺明耐药性相对较强,耐药率在60%~90%.综上提示,河南省猪源粪肠球菌耐药情况严重.【期刊名称】《畜牧与饲料科学》【年(卷),期】2017(038)007【总页数】3页(P13-15)【关键词】粪肠球菌;猪;分离;鉴定;耐药性【作者】董鹏;李金磊;狄元冉;韩楠;方忠意;高延玲;周红霞;吴志明【作者单位】河南省兽药饲料监察所,河南郑州 450008;河南省兽药饲料监察所,河南郑州 450008;河南省兽药饲料监察所,河南郑州 450008;鹤壁市畜产品质量监测检验中心,河南鹤壁 458030;河南省兽药饲料监察所,河南郑州 450008;河南省兽药饲料监察所,河南郑州 450008;河南省兽药饲料监察所,河南郑州 450008;河南省兽药饲料监察所,河南郑州 450008【正文语种】中文【中图分类】S858.285.11;S854.43肠球菌原属于链球菌属，1994年正式被独立划分为肠球菌属［1］。

粪肠球菌是一种革兰阳性菌，是重要的条件致病菌［2］，广泛分布于自然界中，常栖居于人和动物的肠道中。

近年来，肠球菌感染人和动物的报道不断增加，随着耐药菌株的增多，感染后的治疗也越来越困难［3］。

先前认为粪肠球菌是人和动物的共生菌，但近年来研究发现，粪肠球菌已逐渐成为人和动物革兰阳性菌感染中仅次于葡萄球菌的第二大病原菌［4］。

一株猪源屎肠球菌的分离、鉴定及益生功能初步研究王凡;王建设;刘婷;李晓清;王安如【摘要】In this article,strain ZW002 belonged to Lactobacillus was isolated from healthy pig feces. According to the results ofmorphological,physiological,biochemical tests,and sequence analysis of16S rRNA gene,strain ZW002 was identified as Enterococcus faecium ,the accession number of 16S rRNA gene is JN542513. Moreover,the preliminary study of its beneficial effects, like acid resistance, bile salt tolerance and antibacterial activity was carried out. The results showed that strain ZW002 exhibited good stress tolerance and antibacterial activity, which lead strain ZW002 to be a promising candidate for probiotic research.%从健康仔猪粪便中分离到一株乳酸菌ZW002,并从形态、生理生化指标,16S rRNA基因序列分析,鉴定该菌株为屎肠球菌(Enterococcus faecium),将其16S rRNA基因提交GenBank,登录号为JN542513.从耐酸、耐胆盐及抑菌性能等方面对菌株进行益生功能初步研究,结果表明,菌株ZW002表现出良好的耐受性及益菌性能,为猪用微生态制剂的研究开发奠定了基础.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2012(039)007【总页数】4页(P231-234)【关键词】益生菌;屎肠球菌;鉴定;益生性能【作者】王凡;王建设;刘婷;李晓清;王安如【作者单位】北京大北农科技集团股份有限公司,饲用微生物工程国家重点实验室,北京100193;北京大北农科技集团股份有限公司,饲用微生物工程国家重点实验室,北京100193;北京大北农科技集团股份有限公司,饲用微生物工程国家重点实验室,北京100193;北京大北农科技集团股份有限公司,饲用微生物工程国家重点实验室,北京100193;北京大北农科技集团股份有限公司,饲用微生物工程国家重点实验室,北京100193【正文语种】中文【中图分类】Q78益生素（probiotics）是一类能通过调控生物体微生态平衡进而有效促进宿主健康和生长的活微生物制剂，又被称为活菌制剂、微生态制剂等（Golden，1998，Fiora monti等，2003）。

猪源粪肠球菌分离鉴定及其对PEDV复制的影响
吴浩杨;孙海波;宋军;孙东波
【期刊名称】《黑龙江八一农垦大学学报》
【年(卷),期】2024(36)2
【摘要】为研究粪肠球菌对PEDV复制的影响,试验从9日龄健康仔猪粪便中分离粪肠球菌,通过形态学观察、生化试验和16S rDNA测序完成分离株初步鉴定,并利用qRT-PCR试验方法探究分离菌株对PEDV复制的影响。

结果表明:从仔猪粪便中分离得到一株革兰氏阳性链状排列的球菌,其生化鉴定结果均符合粪肠球菌特征,16S rDNA测序结果表明分离菌株与登录号为MT604811、MT544905的粪肠球菌同源性高达100%,确定此分离菌株为粪肠球菌,命名为E1。

qRT-PCR结果显示,菌株E1的培养液、全菌体及过滤上清液对PEDV的复制均有抑制作用,且E1培养液与IPEC-J2细胞预孵育时对PEDV复制的抑制作用最为显著。

研究成功分离一株猪源粪肠球菌,此分离株E1可在体外抑制PEDV的复制,其结果为病毒性肠道疾病的防治提供新的理论基础。

【总页数】8页(P37-43)
【作者】吴浩杨;孙海波;宋军;孙东波
【作者单位】黑龙江八一农垦大学动物科技学院
【正文语种】中文
【中图分类】S852.65
【相关文献】
1.河南省部分地区猪和鸡源粪肠球菌的分离鉴定与耐药性分析
2.猪源粪肠球菌的分离鉴定
3.河南省猪、鸡源粪肠球菌的分离鉴定
4.河南省猪源粪肠球菌的分离、鉴定与耐药性分析
5.猪源粪肠球菌的分离与鉴定
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增刊2袁芳艳，刘泽文，马天凤，等.一株猪源屎肠球菌的分离、鉴定及益生功能初步研究［J ］.湖北农业科学，2019，58（S2）：369-373.收稿日期：2019－10－24基金项目：国家重点研发计划项目（2017YFD0500600）；湖北省农业科技创新中心资助项目（2016－620－000－001－026）作者简介：袁芳艳（1981－），女，湖南永州人，副研究员，博士，主要从事家畜传染病快速诊断及新型疫苗研究，（电话）139****4992（电子信箱）fangyanyuan12＠163．com ；通信作者，田永祥（1965－），研究员，（电子信箱）tyxanbit＠163．com 。

抗生素曾因具有防治疾病、刺激生长、提高饲料利用率等功效而为集约化畜牧业的发展做出过贡献。

但是，长期滥用抗生素导致耐药菌株的产生、动物正常菌群失调、畜产品药物残留等严重问题，因此寻找抗生素替代品成为畜牧业绿色健康发展道路中亟需解决的问题。

微生态制剂具有无毒、无残留、无抗药性等优点，得到了业内的关注，成为最有前途的抗生素替代品之一［1］。

饲用抗生素替代品的种类较多，常见的有微生态制剂、酶制剂、寡糖、植物提取物、糖萜素、酸化剂等［2］。

其中，微生态制剂在促进肠内益生菌的代谢与繁殖、维持肠道微生态平衡、提高宿主免疫力、改善饲料利用率和繁殖能力以及改善一株猪源屎肠球菌的分离、鉴定及益生功能初步研究袁芳艳1，2，刘泽文1，2，马天凤3，李晓月2，刘威1，2，高婷1，2，郭锐1，2，周丹娜1，2，杨克礼1，2，段正赢1，2，梁婉1，2，陈文杰2，孟丽2，田永祥1，2（1．农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室，武汉430064；2．湖北省农业科学院畜牧兽医研究所，武汉430064；3．华中农业大学动物医学院，武汉430070）摘要：从健康断奶仔猪粪便内分离3株乳酸菌，通过细菌培养、革兰氏染色镜检、16S rDNA 序列分析、种特异性PCR 鉴定等方法，鉴定所分离的为屎肠球菌。

专利名称：猪源粪肠球菌及其在防治母畜各种繁殖障碍疾病方面的应用
专利类型：发明专利
发明人：黄引贤
申请号：CN201310268522.5
申请日：20130628
公开号：CN103343094A
公开日：
20131009
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种猪源粪肠球菌及其在防治母畜各种繁殖障碍疾病方面的应用，所述猪源粪肠球菌的16SrDNA序列如SEQ ID NO:1所示，所述猪源粪肠球菌的保藏编号为CGMCC
No.6977。

本发明所述的猪源粪肠球菌耐热、耐酸、耐碱、耐干燥、抵抗力甚强、遗传性较稳定，无任何毒性，又能抑制常见的猪牛8种致病菌，又能提高猪精子活力并延长其寿命，改善并维持了微生态平衡。

所述粪肠球菌配制成的微生态制剂能在子宫内很好生长繁殖，因而净化了母畜生殖道环境，保证了母畜正常的生理功能，从而按期发情排卵，提高受精率和产仔数，对防治母畜各种繁殖障碍疾病的应用具有重大的科学意义和很好的经济效益。

申请人：中山市微科生物技术有限公司
地址：528400 广东省中山市南头镇升辉北路86号
国籍：CN
代理机构：广州科粤专利商标代理有限公司
代理人：黄培智
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湖南省猪源肠球菌的分离鉴定朱娜;方超;周成捷;柴强强;王送林;黎满香【摘要】为了从猪粪便中分离出肠球菌,采用6.5％NaCl pH 9.6 TSB和麦康凯血平板两种方法分别对80个健康猪源样品和53个流行性腹泻猪源样品进行检测.结果显示,共分离出115株肠球菌,其中健康猪源肠球菌72株,包括粪肠球菌2株,屎肠球菌30株,其他肠球菌40株,检测率为90％;从流行性腹泻中共分离到43株肠球菌,其中粪肠球菌9株,屎肠球菌29株,其他肠球菌5株,检出率为81.1％,前者方法中其他肠球菌的检出率比较高,后者方法屎肠球菌的检出率比较高.两种方法各有侧重,为分离不同菌种的肠球菌提供依据.【期刊名称】《湖南畜牧兽医》【年(卷),期】2016(000)002【总页数】4页(P41-44)【关键词】肠球菌;粪肠球菌;屎肠球菌;分离鉴定【作者】朱娜;方超;周成捷;柴强强;王送林;黎满香【作者单位】湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;湖南农业大学动物医学院,湖南长沙410128;湖南畜禽安全生产协同创新中心,湖南长沙410128【正文语种】中文【中图分类】S852.61肠球菌在自然界中分布很广，在动物、植物、水、土壤、食物中均有分布，在人和动物体内肠球菌主要定居在阴道、口腔及消化道内，属正常的菌群之一。

肠球菌一般不会引起机体发病，是一种非常重要的条件致病菌[1]。

目前，肠球菌是细菌性感染疾病中的第二大病原菌，可以引起尿道感染、腹腔感染、心内膜炎、败血症和伤口感染等[2]，严重时可以引起死亡。

在兽医临床中，发现的由肠球菌引起的动物疾病也日益增多[3-5]。

肠球菌属兼性厌氧、无芽孢的革兰氏阳性、过氧化氢酶阴性成对或链状排列的球菌。

肠球菌对环境的耐受性较强，耐酸、碱、热及高盐，一般可以在自然状况下存活数周，可在羊血琼脂平板上检测肠球菌的溶血性。

仔猪大肠杆菌的分离鉴定及市售药物比较一、引言大肠杆菌是人畜共患病原体中的一种，可以引起疾病甚至死亡。

而仔猪大肠杆菌，也称为肠源性大肠杆菌，是仔猪的主要致病菌之一。

它能够引起毒血症、腹泻、肺炎等疾病，并且可通过分泌毒素和侵入性的作用影响机体免疫系统。

因此，对仔猪大肠杆菌的分离鉴定及药物选择十分关键。

本文通过对仔猪粪样进行分离鉴定，并比较不同药物的疗效，为仔猪大肠杆菌病的治疗提供一定的参考。

二、材料与方法2.1 采集样品从某仔猪养殖场购买5只1周龄健康仔猪，采用无菌手套和无菌器具采集粪样。

将5只仔猪的粪便混合后制作成10%的粪浆，进行进一步的分离和鉴定。

2.2 细菌分离鉴定采集的粪样经过数次稀释后，用无菌挂钩在含有大肠杆菌生长基的平板上进行分离。

将培养出的菌株进行生化鉴别，并在毒力试验中评估不同菌株的致病性，从中筛选出致病性较强的菌株进行后续实验。

2.3 药物选择及药敏试验根据分离鉴定的结果，选取常用的青霉素、头孢菌素、氯霉素、甲氧苄啶、唑诺环酮、诺氟沙星等抗生素进行药物敏感试验。

将选取的药物分别制成不同浓度的药物溶液，将分离鉴定得到的菌株涂布在含有不同药物浓度的平板上培养，观察各菌株在不同药物下的生长情况，判断其敏感性和耐药性。

2.4 药物效果评估将选取的不同浓度的药物以及对照组的生理盐水分别注射至感染小鼠体内，观察体温变化，记录小鼠存活情况和症状。

三、结果与分析3.1 分离鉴定结果从5只健康仔猪的粪样中分离出6株大肠杆菌。

通过生化鉴别和毒力实验，筛选出2株致病性较强的菌株，分别命名为ES-H1和ES-H2。

它们在小鼠体内分别引起了毒血症和腹泻等症状，证明其具有较强的致病性。

药物敏感试验结果如图1所示。

图中显示，在低浓度的青霉素和头孢菌素作用下，两株菌株的生长情况较好，表明这两种药物的敏感性较低；而在高浓度氯霉素和甲氧苄啶的作用下，两株菌株的生长明显受到抑制，表明这两种药物的敏感性较高。

图1 药物敏感试验结果将不同药物注射至感染小鼠体内，观察小鼠体温变化和存活情况。

一株猪源屎肠球菌的分离鉴定及系统进化分析
韩明渠;李富伟;吴培均
【期刊名称】《饲料博览》
【年(卷),期】2018(000)004
【摘要】为获得性能优良的动物肠源乳酸菌菌种,试验利用MRS琼脂培养基从健康猪肠道及其内容物中分离得到一株乳酸菌CE001.综合形态特征、生理生化特征以及16S rRNA基因序列和pheS基因系统进化分析结果,初步鉴定为屎肠球菌,该菌种保藏于中国普通微生物菌种保藏中心,保藏号为CGMCC9666.
【总页数】5页(P32-35,43)
【作者】韩明渠;李富伟;吴培均
【作者单位】北京科为博生物技术研究院,北京100086;北京科为博生物技术研究院,北京100086;北京科为博生物技术研究院,北京100086
【正文语种】中文
【中图分类】S852.6;S828
【相关文献】
1.一株猪源屎肠球菌的分离及其种属鉴定 [J], 张利勃;张瑞;王小杰;谢双语;高慎阳
2.一株羊源致病性屎肠球菌的分离鉴定及耐药性分析 [J], 刘永安;李学瑞;周建华;马丽娜;刘永生
3.一株猪源屎肠球菌的分离、鉴定及益生功能初步研究 [J], 王凡;王建设;刘婷;李晓清;王安如
4.一株金鲳鱼源屎肠球菌的分离鉴定 [J], 宋华文;王金才;赵丽梅
5.一株猪关节源链球菌的分离鉴定及体外抑菌试验 [J], 区海蕴;周亚南;吴晨晓;梁润利;肖芬;万乐;万振鹏;张羿洋;朱芝秀
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仔猪感染粪肠球菌的病原鉴定及病原特性初报王亚宾;陈丽颖;张红英;金钺;钱伟锋;邵仁东;崔保安【期刊名称】《中国农学通报》【年(卷),期】2008(24)5【摘要】旨在对引起河南省三门峡某猪场肥育仔猪发病死亡的病原菌进行鉴定,并对其病原特性进行初步分析。

用常规手段分离纯化可疑病原菌,观察其形态染色特性和培养特性,然后利用Vitek-32全自动细菌鉴定系统进行生化特性鉴定,并进一步检测分离菌株的明胶酶和溶血素等毒力因子表型及其药物敏感性。

结果表明:①经细菌分离纯化,得到2个呈链状排列的G+球菌分离株,分别命名为HE1和HE2株。

②经Vitek-32全自动细菌鉴定系统鉴定,2株分离菌均为粪肠球菌(E. faecalis)。

③毒力因子表型试验表明,HE1和HE2均具有溶解明胶的能力,且能裂解兔红细胞,其中HE1呈现β型溶血,HE2呈现α型溶血。

④动物试验表明,分离菌株对小鼠具有致死作用,其中HE1毒力更强。

家兔对上述分离株具有一定耐受性,仅表现出临床症状但不死亡。

⑤药敏结果显示分离菌对万古霉素、替考拉宁、利富平和氨苄西林敏感,对诺氟沙星、红霉素、卡那霉素和四环素耐药。

粪肠球菌感染可以导致仔猪发病死亡,但不同的粪肠球菌分离株对动物的致死能力有差异。

【总页数】5页(P39-43)【关键词】仔猪;粪肠球菌;鉴定;病原特性【作者】王亚宾;陈丽颖;张红英;金钺;钱伟锋;邵仁东;崔保安【作者单位】河南农业大学牧医工程学院【正文语种】中文【中图分类】S855【相关文献】1.碱蓬红斑病病原菌鉴定及生物学特性研究初报 [J], 姜华;张琳;修玉萍;李艳;杨策;邵璐2.对粪肠球菌泌尿系统感染者进行病原菌培养以及对其药物敏感试验性分析 [J], 任振平3.一株致仔猪关节炎粪肠球菌的鉴定 [J], 王亚宾;胡清林;陈丽颖;程金平;陈小丽;崔保安4.哺乳幼獐大肠杆菌和松鼠葡萄球菌混合感染的病原鉴定及诊治初报 [J], 徐海军;左瑞华;张圣尧;杨先保;王广林5.粪菌移植法治疗非特异病原性羔羊腹泻的效果初报 [J], 王燕;杨会国;赵红琼;姚刚;滕晓晓;杨柠芝;李婷;陈卓;斯坎达尔·伊斯拉木;王治;祁来芳;刘佳佳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。