植物总酚检测试剂盒(比色法)

http : ! www? insect? ory? cndoi ： 10.16380/j. kcb.2021.02.0102 月 Februay2021, 64(2) : 230 -239昆虫学报ACTAENTOMOLOGICASINICA草地贪夜蛾在 小麦品种上的取食选择性和适应性及其与叶片生化物质含量的关系刘欢，张勇"，陈巨莲"(中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室，北京100193)摘要：【目的】测定草地贪夜蛾Spodoptera frugoerda 在不同小麦晶种上的取食选择性及适应性，探 索害e 为害与小 种间的关系，区主栽小麦晶种对草地贪夜蛾的抗性水平，为抗e 晶种布局和害e 综合防治提供理论依据。

【方法】比较了草地贪夜蛾1和3龄幼e 对15个小 麦晶种的取食选择性，初步筛选出1和3龄幼e 取食选择性均较高的4个晶种和较低的2个晶种， 测定了此6个晶种小麦叶片的生化物质(总蛋白、可溶性糖、总酚、单宁)含量，并通过Pearson 相关 性分析阐明了幼e 取食选择与叶片生化成分含量间的关系，并观察了草地贪夜蛾在6个小麦晶种上的适应性。

【结果】草地贪夜蛾1和3龄幼e 对淮麦46、 33&KOK1679和铜麦6号的取食选择性较高，而对鲁原502和烟农21的取食选择性较低$ Pearson 相关性分析表明，1和3龄幼虫对不同小 种叶片的取食选择率与小麦叶片的总蛋白和可溶性糖含量呈正相关，与叶片总酚和单宁含量呈负相关。

在不同小麦晶种上草地贪夜蛾的生长发育进程存在明显差2,在铜麦6号上的寄主适合度指数最高、幼e 历期最短，而在烟农21上的幼e 历期最长。

【结论】草地贪夜蛾对小麦 晶种适应性不同，其中烟农21对其具有较高的抗性。

草地贪夜蛾幼e 偏好在和可溶性糖含量高的小麦叶片上取食，而叶片总酚和单宁含量高则会抑制其取食，说明小麦利用营养物质和次生物质的代谢协调其不选择性和抗生性，导致晶种间对草地贪夜蛾抗e 性的差2 $关键词：草地贪夜蛾；小麦晶种；取食选择性；生化成分；适应性；生长发育；繁殖力中图分类号：Q966 文献标识码：A 文章编号：0454-6296(2021 )02-0230-10Feening preference and adaptability of Spodoptera fragigerda (Lepinoptera : Nocthidae ) on differept wheah cultivars in relation to leaf biockemical contentsLIU Huan , ZHANG Yong ** , CHEN Ju-Lian * ( State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection , Chinese Academy of Agacu/ural Sciences , Beijing 100193 , China )基金项目：国家重点研发计划“草地贪夜蛾键技术研究与 示范"(2019YFD0300101 )；国农业科学院重大科研 “草地贪夜蛾0( CAAS-LDRW202007)；中国农业科学院科技创新工程重大科研任务“跨 作物重大病虫害监测与控制”(CAAS-ZDRW202108)作者简介：刘欢！ =, 1991年9月！甘肃张掖人！博士！研究方向为昆虫生理生化,E-mail ： ******************** 通讯作者 Corresponding authom , E-mail : zhangyong02@ caas. cn ； chenju/an@ caas. cn收稿日期 Received: 2020-11-16；接受日期 Accepted ： 2021-01-I7Abstract : & Aim ' This study aims to determine the feeding preference and adaptability of the fallarmyworm ( FAW) , Spodoptera frugiperda , on didernt wheat cultivars collected from tUe Huang-Huai -Hai wheat growing areas in North China, to explore the relationship between insect pest damage andwheat cu/ivars , and tv 0x 0/ the resistance Ovals of dROrent wheat cu/ivars tv FAW, so as tv provide a tUeoretical basis for the arrangement of insect resistant cultivars and integrated pest management in wheatOelds? & Methods] The feeding preference of the 1st and 3rd instar Rrae of FAW to 15 wheatcultivars2期刘欢等：草地贪夜蛾在不同小麦品种上的取食选择性和适应性及其与叶片生化物质含量的关系231was compared.Four wheat cultivars with high feeding preference and two wheat cultivars with Ww feeding preference far the1st and3rd instar laoaa of FAW were screened out,the contents of biochemic/i components(total protein,soluble sugar,total phenol and tannin)in Wxves of these six wheat cultivars were dgemined,the relationship between the feeding preference of the laoae and the contents of biochemic/i components in Waves of these six wheat cultivars was claofied by Pexrson coweWhon analysis,and the adaptability of FAW on the six wheat cultivars was observed.&Results]The results revealed that the1st and3rd instar laoaa of FAW prefeved to feeding on Huaimai46,Huaimai33, KOK1679and Tongma@6,butnoton Luyuan502o eYannong21.The eeed@ng p ee ee eence o ethe1stand 3rd instar laoae to levves of dRerent wheat cultivars was positively correlated with the total protein content and the soluble sugar content in wheat Wxves,but neyahvely correlated with the total phenol contentand thetannin content.ThedeeeopmentoeFAW wassignieicantydi e eenton eaeesoedi e eent wheat cultivars,with the highest host suitabRity indev and the shoOesi laoal duration on Tonymai6,and with the longest Woal duration on Yannony21.&Conclusion]The FAW showed dRerent adaptability to dRferent wheat cultivars,and Yannony21showed higher resistance to this insect pest.The FAW laoaa peeeeewheataeaeeswith higheecontentsoetotaapeotein and soaubaesugae,whiaetheeeedingcan be inhibited byhigh contentsoetotaaphenoaand tannin in wheataeaees.Itisspecuaated thatthedi e eence oeeesistanceaeeeasoedi e eentwheatcuatieaestoFAW iseesuated eeom thecooedination oenon-peeeeeence and antibiosisin wheatbythemetaboaism oenuteientsand secondaeysubstances.Key words:Spodoptera frugperda%wheat cultivars%feeding preference%biochemic/i component% adaptability;growth and development%fecundity草地贪夜蛾Spodoptera frugperda，俗称秋粘虫（fall armyworm）,属鳞翅目（Lepidoptera）夜蛾科（Noctuikae）灰翅夜蛾属Spodoptera,是一种原产于美洲热带和亚热带地区的害虫（Sparks,1979）,具有寄主范围广（Montezana et aU,2018%梁沛等, 2020）、繁殖能力强（Johnson,1987%梁沛等，2020）（生态型多样"Acevedo et oU,2018）、适生范围广（谢殿杰等，2021）、迁飞扩散快"Sun et oU, 2019%梁沛等，2020）和为害严重"Day et oU,2017%梁沛等，2020）等特点。

福林-酚比色法测定桑椹中总多酚李巨秀，王柏玉【摘要】摘要：以桑椹为原料，没食子酸为标准物质研究了用福林-酚比色法测定桑椹提取液中多酚类物质含量的最适反应条件。

结果表明，当福林-酚试剂与质量分数为12%的Na2CO3溶液体积比为1:2、反应温度20℃、反应时间2h时，总多酚的含量与吸光度呈良好的线性关系，测定方法的平均回收率为97.63%，相对标准偏差(RSD)为4.5%。

该方法具有所用试剂量少、操作方便、灵敏度高、精密度高、稳定性高等优点，适宜桑椹样品总多酚含量的测定。

【期刊名称】食品科学【年(卷),期】2009(030)018【总页数】4【关键词】桑椹；Folin-Ciocaileu；比色；总多酚含量桑椹(Fructus mori L.)为桑科植物桑的果实，富含多酚类化合物，是桑椹中一类重要的生物活性物质，其主要成分是花色苷[1-2]。

据大量研究报道，多酚化合物具有清除自由基、抗动脉硬化、降血脂、防止衰老和肿瘤等功能[3-6]，已经成为当前功能性食品研究的热点。

近年来对于苹果、葡萄、茶叶等的多酚物质的研究较多和深入[7-9]，而对桑椹多酚研究的报道较少。

陕西有大面积的桑椹种植区，研究桑椹中的多酚化合物，对提高桑椹经济价值，增加桑蚕业的附加值具有一定的推动作用。

多酚含量的测定方法有高锰酸钾法、酒石酸分光光度法、原子吸收法、紫外分光光度法等。

各种方法都有局限性，有的操作繁杂、费时，有的测定结果的重复性差，有的测定的误差大、灵敏度差，只能在很小的范围内加以采用[10-12]。

本工作通过乙醇提取桑椹果实中的多酚化合物，以没食子酸为标准物采用福林-酚法测定桑椹中多酚类物质的含量，分别研究最佳吸收波长、显色剂、显色时间和温度，并对分析方法的精密度实验、稳定性实验和加标回收率等进行评价，以期寻找操作简单、分析准确度高、速度快的桑椹多酚的分析方法，为桑椹果的开发利用提供得科学依据。

1 材料与方法1.1 材料与试剂桑椹于2008年采摘于西北农林科技大学桑蚕研究所，分装于保鲜袋中，放置于-30℃冰箱中保藏。

用途本试剂盒适用于检测血清（浆）、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。

检测范围及灵敏度检测范围：0.047-1.50 mmol/L灵敏度：0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统，一类是酶抗氧化系统，包括超氧化物歧化酶(SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px）；另一类是非酶抗氧化系统，包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。

抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。

检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+，在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制，在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。

Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。

例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。

本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。

提供试剂和物品注：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同批次试剂盒中的试剂不能混用。

Focus on your research Service for life science 耗材：枪头（1000 μL ，200 μL ，10 μL ）。

仪器：酶标仪（405-425 nm ）、微量移液器（1000 μL ，200 μL ，100 μL ，10 μL ）。

所需自备物品配制试剂之前，请穿戴好防护装备。

试剂盒中部分试剂含有危险性物质。

禁止食入，吸入，直接接触眼睛、皮肤和衣物。

使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。

安全提示试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl ）、PBS （0.01 M，pH 7.4）、80%乙醇。

实验关键点ABTS工作液配制完成后，室温避光保存，在30 min内使用完毕。

植物总酚检测试剂盒(比色法)简介：植物组织或果实中存在花青素、叶绿素、类胡萝卜素、类黄酮、酚类等物质，这些物质与果实等样品衰老过程密切相关，对其加工性能、存储、营养价值等都有重要影响。

植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。

Leagene 植物总酚检测试剂盒(比色法)检测原理是总酚(Total Phenol)溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提总酚，根据提取液的吸收光谱特性，可利用分光光度计在特定波长处测定其吸光度，通过与标准曲线比较，计算出总酚含量。

该试剂盒主要用于植物组织或果实中总酚的提取以及定量检测总酚含量。

该试盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、 实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织2、 研钵或匀浆器3、 离心管4、 滤纸或纱布5、 比色杯6、 分光光度计操作步骤(仅供参考)：1、 总酚提取：①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品，置于预冷的研钵或匀浆器。

②加入预冷的TP Assay buffer ，充分研磨或匀浆后转入离心管中。

用TP Assay buffer 冲洗研钵或匀浆器并转移至离心管中，补加TP Assay buffer 。

③避光静置，期间摇动次，然后过滤至离心管中，滤液即为总酚粗提液。

2、 稀释总酚标准溶液：取适量的总酚标准(1mg/ml)，按下表进行稀释：编号 名称TP1123 50T Storage试剂(A): 总酚标准(1mg/ml) 5ml 4℃ 避光 试剂(B): TP Assay buffer 500mlRT 避光 使用说明书1份加入物(ml) 1 2 3 4 5 6总酚标准(1mg/ml) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 1蒸馏水0.9 0.8 0.6 0.6 0.50总酚浓度(mg/ml) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 13、加样：按照下表设置空白管、对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡，小心混匀。

王华. 葡萄与葡萄酒实验技术操作规范.陕西：西安地图出版社，1999单宁的测定也是参考王华，1999以没食子酸为对照品（FC酚法）总酚的含量测定方法Folin-Ciocalteu 比色法( FC酚法）一、仪器UV- 2401 PC 型紫外分光光度计;超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司KQ- 2508型)恒温水浴锅二、试剂没食子酸标准品; 钨酸钠,磷钼酸, 85%磷酸, Na2 CO3, 以上试剂均为分析纯; 水为蒸馏水。

1.3 福林试剂的配制在250mL的圆底烧瓶内加入20g 钨酸钠、5g 钼酸钠、140mL 蒸馏水，85%的浓磷酸10mL 及浓盐酸20mL，充分混匀，以小火回流10h，再加入3g 硫酸锂及15mL 双氧水，开口继续煮沸15min，待双氧水完全挥发，呈亮黄色。

冷却后移入250mL 容量瓶中，定容置于棕色试剂瓶中，放入冰箱中备用。

1.4 Na2CO3溶液的配制称取40g Na2CO3，溶于200mL 蒸馏水中, 即为20%（g/L）的Na2CO3溶液。

二、方法与结果1.对照品溶液的制备并绘标准曲线精密称取没食子酸标准品0.0110g，用蒸馏水溶解并定容至100mL，得浓度为0.11mg /mL 的标准液。

准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL 置于25mL 的棕色容量瓶中，加蒸馏水至6.0mL，然后分别加入FC 试剂0.5mL，混匀，在0.5～8min内加入1.5mL 20% 的Na2CO3溶液，充分混合后定容，30℃避光放置0.5h，以不加标准液的6.0mL 蒸馏水为空白对照，760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定三次。

2、供试品溶液的制备样品溶液总酚含量的测定: 准确量取制备好的乙醇粗提液0.5mL 于50mL 容量瓶中，加入9.5mL 蒸馏水，摇匀，再加入0.5mL 福林试剂，混匀，在0.5 ～8min 内加入1.5mL 20%的Na2CO3溶液，充分混合后定容，30℃避光放置0.5h，以没食子酸标准液为空白对照，760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定6 次(A为6次平行测得的吸光度）。

版本：A4 修改日期：2024.01.05植物可溶性糖检测试剂盒(苯酚比色法)产品简介：植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖，植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质、性状，常以糖含量作为重要指标，植物为了适应逆境条件如干旱、低温等条件会主动积累一些可溶性糖，降低渗透势和冰点，以适应外界环境条件的变化，测定植物体内可溶性糖的方法有：蒽酮比色法、3,5-二硝基水杨酸比色法、苯酚比色法、斐林试剂比色法等化学方法。

Leagene 植物可溶性糖检测试剂盒(苯酚比色法)检测原理是还原糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛或羟甲基糠醛，生成物可与苯酚反应生成橙红色化合物，在一定范围内颜色的深浅与还原糖的含量成正比，在485nm 处有最大吸收峰。

本法可以测定甲基化糖、戊糖(木糖、核糖、阿拉伯糖)、和多聚糖的测定，方法简单、试剂便宜、灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色可稳定160min 以上。

该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成：自备材料：1、 蒸馏水、浓硫酸2、 电子天平、剪刀、研钵或匀浆器、水浴锅或电磁炉、分光光度计、比色杯3、 50ml 烧杯或三角瓶、容量瓶、20ml 刻度试管或10ml 螺旋盖离心管操作步骤(仅供参考)：1、 可溶性糖的提取：①称取新鲜的植物样品(干样品亦可)0.5~1g ，剪碎，加入蒸馏水约3ml 匀浆，转移至刻度试管中，用12ml 蒸馏水冲洗研磨器2~3次，洗出液也转移至该容器。

②塑料薄膜封口，于沸水浴中提取，待冷却后过滤，将滤液转入50ml 容量瓶。

③收集残渣再次匀浆、加水提取、合并滤液，定容。

2、 配制苯酚工作液：取1份苯酚溶液(10×)，再加入9份蒸馏水，混匀即可，现用现配。

3、 稀释蔗糖标准：取1ml 蔗糖标准溶液(10mg/ml)加入100ml 容量瓶中，用蒸馏水定容编号名称TC0673 50T Storage试剂(A): 蔗糖标准溶液(10mg/ml) 1ml 4℃ 试剂(B): 苯酚溶液(10×) 6mlRT 避光 使用说明书1份至刻度，即为蔗糖标准(100ug/ml)；取干净离心管或试管，按下表操作，依次获得系列质量的蔗糖标准。

检测试剂盒(愈创木酚比色法)说明书
4ml预冷的PODLysisBuffer研磨或匀浆，4 POD粗提液，-20℃冻存，用于过氧化物酶的
A测定0=加入PODAssaybuffer工作液后立即测定的测定孔吸光度值t=反应时间(min)=3
注意事项：
1、待测样品中不能含有酶抑制剂，同时需避免反复冻融。

2、POD酶液提取时注意低温操作，防止酶活性。

3、以煮沸的酶液为对照时，酶要充分失活。

4、POD氧化剂和POD终止液具有一定腐蚀性，请小心操作。

5、POD氧化剂易挥发，请密闭保存，否则检测效率下降。

6、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，每次检测指标不宜过多，否则操作时间不一，有可能导致样本间的差异。

7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Folin-Ciocalteu比色法测定核桃仁多酚含量李淑芳;范志远;杨建华;藩莉;赵廷松;刘娇;石桌功【摘要】用70％甲醇超声提取核桃仁中的总多酚,Folin-Ciocalteu比色法研究该提取物中总多酚含量测定的适宜条件.结果表明:核桃仁提取物加Folin-Ciocalteu 试剂0.5mL、10％ Na2CO3溶液8mL,反应温度25℃、反应时间2.5h,在770nm 处测定吸光度,总多酚的含量与吸光度呈良好的线性关系.测定方法的平均回收率为98.4％,相对标准偏差(RSD)为4.28％.该方法具有操作方便,稳定性、重现性、精密度好等优点,适宜于核桃仁提取物总多酚含量的测定.【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2013(026)004【总页数】4页(P1670-1673)【关键词】核桃仁;Folin-Ciocalteu法;多酚;超声提取【作者】李淑芳;范志远;杨建华;藩莉;赵廷松;刘娇;石桌功【作者单位】云南省林业科学院,云南昆明650204;西南林业大学,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204;云南省林业科学院,云南昆明650204【正文语种】中文【中图分类】S664.1核桃有丰富的营养和广泛的医疗保健作用，核桃仁中除了含有丰富的不饱和脂肪酸、蛋白质和少量的碳水化合物外，还含有丰富的具有生理活性的多酚类物质，不仅对人体起到了积极的抗氧化作用，而且对核桃仁本身防止氧化也起到很好的保护作用［1～3］，并直接影响核桃仁的外观和口感品质［4～5］。

有研究表明食用一定量的植物多酚对疾病有预防及抑制作用，因此，近年来酚类物质由于其特有的抗氧化活性和保健价值正成为广大学者研究的热点［6～7］。

国外采用 Folin-Ciocalteu法测定核桃仁总酚的报道很多［8～9］，但国内对核桃仁总酚的定量测定采用 Folin-Denis［10］、高压液相色谱(HPLC)法［2］、普鲁土蓝法［11］等研究方法，未见Folin-Ciocalteu法对核桃酚类物质含量测定的报道。

一、测定方法概述1.依据酚类物质可以被高锰酸钾氧化的性质，高锰酸钾滴定法2.酚类化合物在碱性条件下可以与4-氨基安替比林反应生成红色染料，比色3.酚羟基可与酒石酸铁中的铁离子反应生成蓝色络合物比色4.酚类物质还原福林试剂生成蓝紫色物质，比色二、高锰酸钾滴定法测多酚此方法多应用在茶叶上原理：酚类物质可以被高锰酸钾氧化，烟叶中还有一些酚类衍生物和非酚类物质也可以被高锰酸钾氧化，会使测定结果偏高。

因此滴定须分两步进行：第一步滴定待测液中总还原性物质，第二步用明胶盐溶液将酚类物质沉淀后，测定待测液中其它还原性物质含量，二者之差就是样品中多酚含量。

但是绿原酸不能被沉淀，因此，此法不易用来测定烟草多酚。

0.1%靛红作指示剂。

酚类提取：采用沸水浴方法提取。

三、氨基安替比林比色法此方法用来测样品中挥发性酚类化合物，常常应用在食品，水等挥发酚的测定。

灵敏度最高高。

原理：酚类化合物在碱性溶液中，当有氧化剂铁氰化钾存在时，可以与4-氨基安替比林生成一种红色染料，用分液漏斗将红色染料萃取到氯仿层，在460nm处比色。

用苯酚作标准曲线，计算出样品中挥发性酚类物质含量。

1此方法酚的提取步骤比较麻烦：先在2.5mol/L硫酸溶液中加热回流1小时，将样品中中挥发酚提取出来。

通入水蒸气把酚蒸馏出来，收集并定容。

2苯酚腐蚀性强，为结晶体，不好秤取。

3蒸馏装置不能漏气，且所用的橡皮类物质需要事前用碱水浸泡，并水煮10min。

四、酒石酸比色法原理：酚类物质的羟基与酒石酸铁中的铁离子生成蓝色络合物，根据络合物溶液颜色深浅，在540nm处比色，可测出烟叶中酚类物质含量。

以儿茶酚或没食子酸乙酯作标准溶液。

可以用来测定烟草中的多酚。

此方法酚的提取与福林法测多酚提取步骤一样。

五、福林法测烟叶多酚/总酚1.原理; 在碱性条件下利用多酚的还原性，多酚可以将磷钨钼酸还原成蓝色，蓝色深浅与多酚含量城正相关，可以用分光广度计进行测定。

2.试剂和仪器：试剂：儿茶酚或没食子酸乙酯，钼酸钠，磷钨酸，Na2CO3仪器：水浴锅，721分光光度计，试管，三角瓶，漏斗，滤纸，移液管。