AGP手性柱应用实例

CHIRAL-AGPα－酸糖蛋白（AGP）是一种非常稳定的蛋白质,它不溶于各种有机溶剂，耐高温以及较高或较低的PH值。

AGP是CHIRAL-AGP柱的手性选择体，键合5μm的球形硅颗粒。

CHIRAL -AGP柱适用于反相色谱，用途十分广泛，不仅能用于直接分离没有衍生物的对映异构体，也能分离分子量很广的药物化合物的对映异构体。

CHIRAL-AGP 是目前使用最广泛的手性柱之一。

能分离的化合物：∙胺（伯、仲、叔、季胺）∙酸（强酸、弱酸）∙非光解质（酰胺、酯、醇、亚砜等）尤其还能分离坦索罗辛，分离度达1.5以上。

应用范围在制药公司、医院、大学和化工厂，CHIRAL-AGP用于对映体的纯度分析及生物分析。

随着应用范围的扩大，半制备柱也可分离纯的对映异构体。

流动相大多数的分离都是非常简单的流动相系，水缓冲流动相与低浓度有机溶剂，如异丙醇或乙腈。

该柱的手性选择性及保留值可以通过改变流动相的PH、缓冲液的浓度和性质以及有机改性剂的浓度来调节。

绝大多数（>95%）的分离使用上述简单的流动相。

但是，控制相为DMOA（N,N-二甲基辛胺）、辛酸和丁胺化合物时可提高对异构体的选择性。

尺寸CHIRAL-AGP提供内径为2，3，4和10mm，长度为50，100和150mm几种类型的柱子。

保护柱提供长10mm、内径2，3，4mm三种类型。

CHIRAL-AGP产品规格应用谱图用CHIRAL-AGP 100x4.0 ，低pH值条件下分离带三个芳环碱性化合物。

Alimemazine缓冲液浓度对甲氧萘丙酸对映体的保留时间的影响0.01M 磷酸钠缓冲液pH7.0 0.05M磷酸钠缓冲液pH7.0。

Nov 2005 Page 1手性柱 CHIRALPAK? AD使用手册请在使用色谱柱前仔细阅读本《使用手册》色谱柱描述:10卩硅胶表面涂布有直链淀粉—三（3,5 —二甲苯基氨基甲酸酯）出厂保存溶剂： 正己烷/异丙醇（90:10 v/v ）0 to 40 ° C最大流速也和流动相粘度（流动相成分）有关，必须小心不能超过柱压上限流动相 250 x 4.6mm ID250 x 10mm ID 250 x 20mm ID 烷烃/醇类 90:10 1.0 to 1.5 ml/min5.0 to 7.0 ml/min 18 to 25 ml/min 100%乙醇0.5 ml/min 2.0 to 3.0 ml/min5.0 to 8.0 ml/min 100% 异丙醇0.2-0.3 ml/min1.0 ml/min3.0 to 5.0 ml/min柱压指色谱柱压降，即接上柱子后系统的压力与未接柱子时系统压力的差值。

填料结构: CH250 x 4.6 mm ID250 x 10 mm ID半制备柱250 x 20 mm ID半制备柱流动相方向 参照色谱柱标签上的箭头典型流速 1.0 ml/min 不要超过1.5ml/min 柱压范围5.0 ml/min 不要超过7ml/min< 30 Bar ( 约 430 psi) 不要超过50 Bar ( 约700 psi) 18 ml/min 不要超过25ml/min温度R =OCH该色谱柱在岀厂之前都已经通过了检测，检测条件、结果和批号信息请查阅“岀厂检测报告”。

有助于柱子最长寿命的理想值，但是只要在50 Bar之内柱子就没事。

A -流动相烷烃：正己烷，异己烷或正戊烷，不同的烷烃有不同的选择性。

己烷/乙醇5/15〜40/60的流动相会损坏固定相，从而影响基线稳定性。

如果要将15%乙醇换成60%乙醇的流动相，建议使用100 %的异丙醇作为过渡溶剂，过渡流速要小一些（异丙醇的粘度较大）。

手性药物的分离在色谱法中的应用手性药物是指具有手性结构的药物，也就是说它们的分子是非对称的，存在左右手两种立体异构体。

其中一种形式可能具有治疗作用，而另一种可能无效甚至有害。

对手性药物的分离至关重要。

色谱法是一种常用的手性药物分离技术，本文将着重介绍手性药物在色谱法中的应用及其原理。

色谱法是一种利用不同成分在固定相和流动相之间相互分配系数不同来进行分离的分析方法。

色谱法可以分为气相色谱（GC）和液相色谱（LC）两种。

对于手性药物的分离，通常采用的是LC方法。

LC色谱法中，通常使用手性色谱柱和手性色谱填料进行手性药物的分离。

手性色谱柱是针对手性化合物设计的专用柱子，具有对手性分子选择性的特点。

手性色谱填料是填充在手性色谱柱中的固体填料，可以提供手性分离所需的手性识别性。

手性色谱柱和手性色谱填料的使用，使得手性药物的分离更加准确和高效。

手性药物在色谱法中的分离原理主要包括手性识别机理和手性分离机理。

手性识别机理是指手性色谱填料对手性分子产生特异性作用的机制。

手性色谱填料通常由手性选择性的分子构成，当手性分子进入填料内部时，它们会与填料发生作用，使得分子在填料中进行分离。

手性分离机理是指手性分子在手性色谱柱上进行分离的机制，它涉及到分子在固定相表面吸附、解吸和扩散的过程。

手性色谱法在手性药物分离中的应用十分广泛。

它具有分离效果好、操作简便、灵敏度高等优点，被广泛应用于制药、医药等领域。

下面我们将通过实例介绍手性药物在色谱法中的应用。

实例一：利他净（Racemic Amphetamine）的手性分离利他净是一种常用的治疗多动症和注意力缺陷障碍的药物，其分子中含有手性中心，存在左旋和右旋两种手性异构体。

对于多数病患来说，其中仅含有右旋异构体的单一药物是更有效的。

需要对其进行手性分离。

利他净的手性分离可以采用手性色谱柱进行。

利他净通常使用液相色谱法进行手性分离，选择手性色谱柱进行分离。

手性色谱柱的填料对利他净的手性分离起到关键作用。

蛋⽩质型： 蛋⽩质型⼿性⾊谱柱属于第5种类型。

分离依赖于疏⽔相互作⽤和极性相互作⽤。

已经有多种蛋⽩质⽤于此类⼿性⾊谱柱。

⽬前使⽤较多的是α-酸性糖蛋⽩（α-Acid Glycoprotein，AGP），⼈⾎清⽩蛋⽩（Human Serum Albumin，HSA），⽜⾎清⽩蛋⽩（Bovine Serum Albumin，BSA）和卵类粘蛋⽩（Ovomucoid，OV）。

α-酸性糖蛋⽩分⼦由181个氨基酸残基和40个唾液酸（sialic acid）残基构成。

α-酸性糖蛋⽩分⼦偏酸性，等电点为2.7。

含有两个⼆硫键，性质很稳定。

α-酸性糖蛋⽩分⼦可以共价键合到硅胶上，制成⼿性⾊谱柱，可以分离许多化合物。

α-酸性糖蛋⽩⼿性⾊谱柱使⽤的流动相通常为pH 4-7的磷酸盐缓冲液和很⼩⽐例的有机相。

有机相⾸选异丙醇，如达不到分离要求，可以尝试⼄腈，⼄醇，甲醇或四氢呋喃。

有机相的改变导致蛋⽩结构发⽣暂时的改变。

⾊谱柱的负载量⾄关重要，典型的负载量为0.02mg/ml的浓度样品，进样20µl。

pH 的改变对⼿性选择性起关键作⽤，尤其是胺类化合物。

pH降低导致蛋⽩质负电荷的降低，引起胺类化合物保留时间减⼩，然⽽这意味着可以减⼩有机相⽐例，使选择性增加，峰形改善。

通过调节有机相⽐例仍⽆法达到分离效果时，有时需⽤电荷调节剂。

但这可能引起蛋⽩结构的永久改变，这些电荷调节剂包括丁酸、⾟酸、癸酸和⼆甲基⾟胺。

有时也⽤到1，2 亚⼄基⼆醇，1，2丁醇和氯化钠。

温度对分离也有影响，温度增加保留时间，减⼩分离因⼦。

⼈⾎清⽩蛋⽩（HSA）分⼦量为69,000，等电点为4.8。

蛋⽩中认为存在两个药物结合位点：华法令-氮杂普鲁帕宗（warfarin-azapropazone）和苯基⼆氮杂-吲哚（benzodiazapine-indole）结合位点。

流动相中加⼊⾟酸，采⽤⼈⾎清⽩蛋⽩⼿性⾊谱柱可以有效分离benzodiazapine。

agp色谱柱说明书一、引言AGP色谱柱是一种常用的色谱柱，广泛应用于药物代谢研究和生物样品分析领域。

本说明书将详细介绍AGP色谱柱的特性、使用方法和注意事项，以帮助用户正确选择和操作该色谱柱，获得准确可靠的实验结果。

二、产品特性1. 良好的分离性能：AGP色谱柱采用独特的固定相材料，能够有效分离和富集药物代谢产物和生物样品中的目标化合物。

2. 超高效分离：该色谱柱具有较高的分离效率和分离峰对称性，能够满足对分析灵敏度和分辨率要求较高的应用。

3. 良好的稳定性：AGP色谱柱具有较好的化学稳定性和热稳定性，可适应不同的工作条件和样品溶剂。

4. 广泛适用性：该色谱柱适用于各种常见的HPLC分析设备，可广泛应用于药物代谢研究、生物样品分析等领域。

三、使用方法1. 样品制备：将待分析的样品按照常规方法制备，保证样品的纯度和浓度。

2. 色谱条件设置：根据实验需要，选择合适的流动相组成和流速，控制柱温、检测波长等参数。

3. 样品进样：使用适量的样品溶液，通过自动进样器或手动进样器将样品注入色谱柱。

4. 色谱分离：打开色谱柱系统，开始进行分离。

根据实验需要，可以进行梯度洗脱或等温洗脱等操作。

5. 数据采集与分析：使用合适的软件进行数据采集和分析，记录分离峰的保留时间和峰面积。

四、注意事项1. 色谱柱的储存：请将色谱柱存放于干燥、避光、低温的环境中，避免暴露于阳光和高温环境中。

2. 色谱柱的使用寿命：根据实验条件的不同，AGP色谱柱的使用寿命会有所差异。

一般情况下，建议每天使用后进行正常的冲洗和保养，以延长色谱柱的寿命。

3. 流动相的选择：根据分析物的特性和目的，选择适合的流动相，保证色谱柱的稳定性和分离效果。

4. 样品溶剂的选择：请使用纯度较高的溶剂，并应用过滤器滤除杂质，以防止对色谱柱造成损坏。

5. 柱温的控制：适当控制柱温，可以改善色谱柱的稳定性和分离效果，提高分析的重复性和可靠性。

6. 操作安全：在使用色谱柱时，应遵守实验室的安全操作规范，避免对自身和他人造成伤害。

chiralpak agp色谱柱使用说明书1. 简介CHIRALPAK AGP色谱柱是一种手性固定相色谱柱，广泛应用于手性化合物的分离和纯化。

本说明书将详细介绍CHIRALPAK AGP色谱柱的使用方法和技巧，帮助用户更好地操作该柱，获得高效准确的手性分离结果。

2. 色谱条件在使用CHIRALPAK AGP色谱柱前，您需要准备适当的色谱条件。

常见的色谱条件包括：- 色谱柱：CHIRALPAK AGP色谱柱（填料类型：纤维素三聚体）- 流动相：选择与目标化合物相容的溶剂组合，并进行合适的相间平衡。

常用的溶剂组合包括甲醇/水混合溶液、醋酸乙酯/异丙醇混合溶液等。

具体的比例和流速可以根据分析需要进行调整。

- 柱温：柱温是影响分离效果的重要因素之一。

通常情况下，推荐在室温下进行分离实验。

如果需要更高的分离效果，可以增加柱温，但不要超过柱的最高温度限制。

3. 样品准备与进样在进行手性分离之前，需要对样品进行准备和前处理。

确保样品的纯度和浓度符合要求，并根据需要调整样品溶液的pH值。

一般来说，样品溶液的pH值需要与流动相相容。

进样前，请确保将柱孔口封闭，并用流动相预冲柱体，以去除杂质和平衡柱体。

然后，使用自动进样器或手动进样器将样品注入柱体。

注意，不要超过柱容量的10%以防止柱体过载。

4. 色谱分离在进样后，打开柱孔口，并根据预设的色谱条件开始分离实验。

确保流量稳定并监测流出液的紫外检测器响应。

如果分离结果不理想，可以尝试优化柱温、流动相比例、流速等参数。

5. 结果解释与分析分离实验完成后，根据底流检测器或质谱等检测方法，记录目标化合物的保留时间和对映体选择性。

根据分离结果，可以进行定量和定性分析，并对结果进行解释。

6. 色谱柱保养与储存为了保证柱体的稳定性和延长使用寿命，建议按照以下步骤进行柱体保养和储存：- 在使用柱体后，用纯溶剂流动相冲洗柱体，以去除样品残留物。

- 将柱孔口封闭，并用适量的保护剂进行柱体保护。

关于手性色谱柱的使用解读
手性色谱柱是由具有光学活性的单体，固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相。

通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异，从而达到光学异构体拆分的目的。

要实现手性识别，手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。

这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。

手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。

这些相互作用通过影响包埋复合物的形成，**位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。

由于这种作用力较微弱，因此需要仔细调节、优化流动相和温度以达到好的分离效果。

手性柱的使用途径
1、手性分离重要的是选择一根好的手性柱，做手性分析的都知道，大赛璐的手性柱根据用途分为多种不同的型号，大家熟悉的可能是OD-H。

有四种填料，对应的色谱柱分别是OD、AD、OJ和AS，粒径10um，后来填料粒径变为5um，就是卖的多、使用范围广的柱子，分别是OD-H、AD-H、OJ-H和AS-H，在柱子名称后边加“-H”，意思应该是“”，这些柱子都只能做正相使用。

2、为了在反相色谱中使用，开发的柱子在相应的色谱柱名称中添加了一个“R”，上述色谱柱都属于涂覆型填料，不耐溶剂，使用起来受样品溶解性的限制。

而近开发的键合相手性柱，可以使用几乎所有的常见溶剂做流动相，新的溶剂还提供了新的选择性，进而提升了色谱柱的分离能力，主要是IA、I B和IC，其中IA对应AD-H，IB对应OD-H，IC是新开发的填料。

和反相柱的发展趋势一样，大赛璐的手性柱也通过减小粒径来获得更高的柱效，的手性柱填料粒径是3um。

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色谱柱应用
色谱柱广泛应用于化学分析、生物分析、食品安全、环境监测等领域。

以下是色谱柱的一些常见应用：
1. 气相色谱柱（GC柱）：用于气相色谱分析，常用于分析挥
发性有机化合物、石油化学品、环境污染物、药物代谢产物等。

2. 液相色谱柱（LC柱）：用于液相色谱分析，常用于分离和
分析溶解性有机化合物、药物、天然产物、生物分子等。

3. 离子色谱柱（IC柱）：用于离子色谱分析，常用于分析水
中的离子、金属离子、营养成分、废水中的离子等。

4. 极性色谱柱：用于分析极性化合物，常用于分离和分析多酚类化合物、天然产物、药物代谢产物等。

5. 手性色谱柱：用于分离和分析手性化合物，常用于药物合成分离、食品中的手性分析等。

6. 大孔径色谱柱（GPC柱）：用于分析和分离高分子化合物，常用于聚合物、蛋白质、多肽等的分析。

7. 唐氏色谱柱：用于分析水溶性营养成分、有机酸、多酚类化合物等。

这些仅是色谱柱的一些应用领域和例子，随着科学技术的发展，色谱柱在不同领域的应用还在不断拓展和创新。

chiralpak agp色谱柱使用说明书全文共四篇示例，供您参考第一篇示例：Chiralpak AGP色谱柱是一种广泛应用于手性分离技术中的色谱柱。

它具有高度选择性和分离效果，适用于对手性化合物的分离和纯化。

本说明书将详细介绍Chiralpak AGP色谱柱的使用方法、操作步骤和注意事项，帮助用户正确、高效地使用该色谱柱。

一、产品简介Chiralpak AGP色谱柱是一种手性色谱柱，其固定相是α-糖蛋白，具有良好的手性识别性能。

该色谱柱适用于对具有多种手性中心的化合物进行分离，可以分离出绝大多数的对映异构体。

Chiralpak AGP色谱柱广泛应用于医药、化工、生物工程等领域，并得到了广泛的认可和应用。

二、使用方法1. 样品制备在进行色谱分离之前，需要充分制备样品溶液。

样品溶液的制备应当遵循常规的色谱分离要求，确保样品的纯度和稳定性。

2. 色谱条件设置根据待分离手性化合物的特性，设置合适的色谱条件。

包括流动相的选择、流速的控制、柱温的设定等。

在使用Chiralpak AGP色谱柱时，一般建议使用对映体选择性增强剂以提高分离效果。

3. 样品进样将经过制备的样品溶液通过自动进样器或手动进样器进入色谱柱，确保样品进样的均匀性和准确性。

4. 色谱分离设置好色谱条件后，开始进行色谱分离操作。

注意控制好流速和柱温，保证分离效果。

在分离过程中可根据需要调整实验条件，以获得最佳的分离效果。

5. 数据分析根据实验结果，进行数据分析和结论得出。

需要注意的是，Chiralpak AGP色谱柱的分离结果可能受到许多因素的影响，包括进样量、流速、溶剂选择等，因此对实验条件的严格控制非常重要。

三、注意事项1. 在使用Chiralpak AGP色谱柱之前，应先仔细阅读相关的产品说明书和技术资料，了解其特性和适用范围。

2. 在进行实验操作时，需佩戴适当的防护设备，保护好实验人员的安全。

3. 使用过程中避免碰撞和震动，避免柱子受到损坏。