大赛璐手性柱-HPLC操作与维护

【色谱柱】色谱柱使用维护色谱柱维护和修理保养1、色谱柱的使用说明：（1）色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特别说明，均为评价报告所示的流动相。

在使用前，确定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。

在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很简单析出，堵塞色谱柱。

（2）流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水可以是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。

假如将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。

另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应当定期清洗或更换。

以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0—8.0，BDSC18适合于碱性化合物，PH值适用范围为 2.0—10.0、当必需要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立刻用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。

（3）样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。

在用正相色谱法分析样品时，全部的溶剂和样品应严格脱水。

2、色谱柱的保存：（1）反相色谱柱每天试验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，试验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。

注意：不能用纯水冲洗柱子，应当在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。

（2）长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必需存于合适的溶剂下。

对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。

储存的温度可以是室温。

3、色谱柱的再生：由于色谱柱是消耗品，随着使用时间或进样次数的加添，会显现色谱峰高降低，峰宽加大或显现肩峰的现象，一般来说可能是柱效下降。

HPLC色谱柱维护指南1.色谱柱的正确使用：-在使用前，检查色谱柱是否有损坏或污染。

如果有损坏，应立即更换。

如果有污染，可以尝试进行洗脱或使用其他清洁方法来恢复柱的性能。

-在使用前，根据分析样品的特性选择合适的色谱柱。

例如，对于高分子化合物的分析，应选择具有较大孔径的色谱柱。

-避免使用超过色谱柱推荐的最大流速和压力。

这样可以避免对色谱柱造成不必要的损害，并延长其使用寿命。

2.色谱柱的存储：-在使用前和使用后，应将色谱柱存储在干燥、清洁的环境中，避免受到湿气、灰尘和其他污染物的影响。

-色谱柱应垂直存放，避免受到外界压力和震动的影响。

-在存储过程中，可以使用柱保护器来保护色谱柱，延长其使用寿命。

3.色谱柱的洗脱：-每天使用前，应进行一次洗脱步骤，以去除可能残留在色谱柱中的污染物。

可以使用适当的洗脱溶剂，如乙腈、甲醇或水进行洗脱。

-洗脱过程中，应用适当的流速和压力，避免对色谱柱造成不必要的压力和损害。

-洗脱后，应进行适当的平衡步骤，以确保色谱柱的稳定性和准确性。

4.色谱柱的保养：-定期进行色谱柱的保养，以确保其良好的性能和稳定。

这包括清洗和再平衡的步骤。

-清洗过程中，可以使用适当的溶剂和清洗方法，如反向流洗、超声波清洗等，以去除色谱柱中的污染物和残留物。

-再平衡过程中，应使用适当的溶剂和流速，以恢复色谱柱的平衡状态。

5.色谱柱的更换：-根据色谱柱的使用寿命和性能变化情况，定期更换色谱柱。

一般来说，当分析结果出现明显的偏差或峰形变化时，应考虑更换色谱柱。

-在更换色谱柱时，应选择合适的替代柱，并根据其使用说明书进行正确的安装和调试。

总之，HPLC色谱柱的维护对于获得准确可靠的分析结果至关重要。

通过正确使用、存储、洗脱、保养和更换，可以延长色谱柱的使用寿命，并确保其良好的性能和稳定运行。

维护高效液相色谱柱的方法如何维护高效液相色谱柱高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）柱是常用的分析仪器之一，通常用于生物、药物、环境等领域的化学分析。

为了保证HPLC柱的正常运行和保持其分离性能，有必要进行定期的维护和保养。

本文将介绍一系列维护HPLC柱的方法，帮助用户保持柱的高效性和延长其使用寿命。

一、准备工作在对HPLC柱进行维护之前，必须先准备工作。

首先，关闭HPLC 系统并关闭进样器。

然后，从色谱柱系统中拆下柱头，将柱塞或过滤垫插上柱头，以防止溶剂蒸发。

接下来，使用注射器将连接器处的溶剂完全抽入柱中，以避免残留溶剂的挥发造成柱内压力不均。

二、柱的清洗与保养1. 柱的清洗(1) 首次使用前的预处理柱在使用之前，首先需要进行预处理。

可将柱用纯溶剂（如醋酸乙酯/甲醇或乙酸乙酯/乙醇等）冲洗，以除去封装过程中可能残留的杂质和填充剂。

(2) 洗脱剂的选择柱的清洗需要使用合适的洗脱剂。

常见的清洗剂为纯溶剂、水、有机溶剂、酸碱溶液等。

根据柱的具体使用情况和分离物质的性质选择清洗剂。

(3) 清洗步骤清洗步骤可分为：预洗、主洗和后洗三步。

预洗：通常使用纯溶剂预洗，以移除柱表面的胶凝物和杂质。

可使用高压注射器将预洗溶剂不断注入柱内，或使用真空抽滤法注入预洗溶剂。

主洗：根据实际需要选择合适的清洗剂。

如果色谱柱上附着了水溶性的物质，可用水洗涤；如果有机溶剂沾附在柱上，可用纯有机溶剂洗涤。

清洗剂的流速可逐渐增加，以增强冲洗效果。

后洗：用纯溶剂进行后洗，以充分冲洗柱内的清洗剂残留物，恢复柱的初始性能。

2. 柱的保养(1) 使用前的条件调整在每次使用HPLC柱之前，需要根据实验需求调整一些条件。

比如，选择适当的温度、洗脱剂浓度、流速等，以提高分离效果和保护柱的寿命。

(2) 样品预处理样品的预处理也是保护柱的重要环节。

柱上堆积的杂质和沉积物会降低色谱分离效果，因此，要尽可能减少样品中的杂质。

色谱柱的使用和维护方法及操作规程色谱是一种分别分析手段，分别是核心，因此担负分别作用的色谱柱是色谱系统的心脏。

对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。

当然，色谱柱的正确使用和维护特别紧要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。

在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。

1、避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。

温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

2、应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然，流动相使用前必需经脱气和过滤处理。

3、一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。

否则反冲会快速降低柱效。

4、选择使用适合的流动相（尤其是pH），以避开固定相被破坏。

有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解，压力上升是需要更换预柱的信号。

5、避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。

保护柱一般是填有相像固定相的短柱。

保护柱可以而且应当常常更换。

6、常常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。

在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50～75ml。

7、避开使用高粘度的溶剂作为流动相；假如使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在试验完毕柱子冲洗干净。

8、进样样品要提纯。

9、严格掌控进样量，不要超载。

10、每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱，好用洗脱本领强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。

当接受盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。

手性柱安全操作及保养规程手性柱又称为手性立柱，是一种用于分离和纯化手性化合物的设备。

它主要由柱体和填料组成，填料可以是固态、液态、气态的，并且能够表现出不同的手性选择性。

手性柱广泛应用于制药、农药、食品化学、天然营养素等领域中，因为手性柱能够通过选择性吸附和分离，将不同手性状况的化合物分离纯化出来，得到更加单一、纯净的品种，从而提高产量和产品功效。

然而，尽管手性柱在生产制造中发挥着巨大作用，但也存在着一定安全风险。

因此，本文将结合手性柱的操作过程和相关保养维护管理规程，为操作人员提供安全操作和使用手性柱的指导。

手性柱的选择选择合适的手性柱是关键的一步，因为不同的手性柱使用时有所不同。

首先，要了解待分离物质的分子结构以及它们的物理化学性质，以便确定手性柱的填料类型。

其次，手性柱的柱体材质也是需要考虑的因素之一，例如钢、碳、陶瓷等。

最后，还需要选择合适的柱体尺寸、填充量、质量等等。

手性柱的组装及连接手性柱的组装和连接标准可以极大地影响其分离效果。

因此，对于手性柱的组装和连接操作必须十分严谨。

下面是手性柱组装及连接的步骤：1.选择合适的手性柱柱体和填料，根据填料数量和类型选择合适的柱体大小。

2.在组装前仔细检查手性柱管道和填料看是否存在污染、破损等问题。

如果存在问题需要及时更换。

3.将填料均匀地注入柱体中，在注入的同时需要轻轻拍打手性柱管道以保证填料填充均匀。

4.填充完毕后，在管道两端涂抹一层密封胶以保证泄漏。

5.使用贴合式法兰密封垫片连接手性柱管道，并使用扳手逐一拧紧螺栓固定。

6.确认手性柱是否牢靠，避免发生漏液和松动情况。

手性柱的操作注意事项在使用手性柱的过程中，人员需要注意一些事项以确保操作的安全。

1. 防止手性柱干燥手性柱的填充材料在干燥的环境下会失去活性，无法发挥其分离效果。

因此，在使用前，必须确保填料保持湿润，避免遭受太阳直接照射和高温等干燥的环境。

2. 防止温度过高手性柱适用的温度范围在5至70°C。

HPLC色谱柱维护指南1.使用前的准备：在使用新柱之前，应仔细阅读厂商提供的使用说明，并按照说明进行预处理。

常见的柱预处理方法包括洗脱非极性物质（如有机溶剂）和平衡柱（使用适当的缓冲溶液或截取样品）。

2.合适的样品制备：样品制备是取得良好色谱效果的关键步骤之一、样品准备包括溶液制备、过滤和去除杂质。

样品中的溶剂残留物和杂质可能会导致色谱柱阻塞或性能下降。

3.使用适当的流动相：选择适当的流动相对于色谱柱的长寿命和稳定性至关重要。

避免使用高浓度的盐溶液、酸或碱性液体，以免对色谱柱产生损害。

同时避免使用流动相中含有悬浮物的溶液，以防止阻塞色谱柱。

4.流速控制：正确控制流速对于维持柱性能非常关键。

过高的流速可能会导致柱压升高，进而损坏柱填料。

过低的流速则可能无法保证分离效果。

一般来说，选择和使用指定柱的工作流速范围。

5.压力控制：HPLC系统中的压力应严格控制在柱的额定压力范围内。

超过柱的额定压力可能引起填料破裂或漏损。

应及时更换柱缓冲器，并保持正确的缓冲液位。

6.尽量避免空气进入：避免空气进入HPLC系统，因为空气中的氧会导致填料老化或衰减。

应确保流动相瓶中气体压强不低于柱缓冲器的液位，并注意维持系统中的正常压力。

7.良好的柱保养：HPLC柱经常使用后，会发生衰减。

所以要选择适当的方法对柱进行保养。

这包括定期反向流洗涤以及在不使用时用适当的溶液封存。

保养柱的方法应符合柱的使用说明。

8.维护记录：建议建立HPLC色谱柱使用记录，以便及时检测柱的性能变化。

记录中可以包括启用日期、使用次数和使用的溶剂类型等重要信息。

根据记录分析，可以判断柱的寿命以及是否需要进行维护或更换。

总结：良好的HPLC色谱柱维护可保持其长期性能和分离效果。

正确使用流动相、控制流速和压力，避免空气进入系统，并定期保养柱，是保持HPLC色谱柱稳定工作的关键措施。

定期记录分析柱的性能变化，可以准确判断柱的寿命并及时调整操作方法。

只有根据实际情况合理维护柱，才能确保色谱分析结果的准确性和可靠性。

手性色谱柱安全操作及保养规程手性色谱柱是一种用于手性化合物分析和分离的高级色谱柱，在实验室中的应用越来越广泛。

为了确保手性色谱柱的正常工作并延长其使用寿命，我们需要掌握手性色谱柱的安全操作规程和保养规程。

本文将详细介绍手性色谱柱的安全操作及保养规程。

手性色谱柱的安全操作规程1. 安装和连接安装手性色谱柱时，应先查看安装位置是否稳定，以确保不会对分析精度造成影响。

使用支架支撑的柱子，要确保支架小臂下方的安全承载力，同时确保柱子垂直放置，避免柱子与流动相的接触位置发生任何改变。

连接方法通常分为手动法和工具法，新人不熟悉连接时可请教其他工作人员或技术人员。

连接手柄时要轻轻拧紧，避免过紧导致出现漏液、卡住或者更换柱子时不能正常拆卸等情况。

2. 样品的准备每个实验操作都需要事先准备标准品或校正样品，并根据需要合理配置流动相。

在选择检测器时，应根据样品的性质和通量要求选择合适的检测器。

在样品制备过程中，应注意不要弄丢样品或污染手性色谱柱。

3. 操作技巧为了得到高质量的分析结果，应掌握一些操作技巧。

在操作时，应保持手机色谱柱的温度稳定，避免突然的温度变化或者过高的温度对柱子的损害。

应根据实验要求慢慢调整流速，避免快速调整对手性色谱柱造成太大的压力。

针对不同的光谱，调整检测器的增益和增益设置。

4. 实验结束处理实验结束后需要进行柱子后续处理，避免对柱子造成损害。

应先停止流动相的进药口，建议在冲洗氮气中断开流除相和燃料进口阀门，在氮气中冲洗至极干，直到不再有气体流出，再把柱子上的残留液排除。

在该流程中，与自己身体有直接联系的任何设备（手套、护眼镜等）都应佩戴好。

手性色谱柱的保养规程手性色谱柱的保养中，可以分为自然保养和人为保养两部分。

1. 手性色谱柱的自然保养柱子在使用过程中，应该仔细保护，避免机械碰撞和震动，确保其环境湿度和温度均衡，并避免阳光直射。

柱子在使用时，应该减少大幅度的温度变化，避免由于突然的温度变化而造成损坏。

一、键合手性柱简介多糖涂敷型手性柱，如CHIRALPAK®AD-H/CHIRALPAK®AS-H/CHIRALCEL®OD-H/CHIRALCEL®OJ-H等，其涂敷在硅胶表面上的各种衍生物有可能被一些有机溶剂溶解或溶胀。

因此，可用作流动相组分及样品溶解液的溶剂非常有限。

通过化学键合的方法将多糖衍生物固定在硅胶表面而制得的键合型手性固定相，即可克服涂敷型手性固定相的不足之处。

为了满足市场的需求，大赛璐公司凭借多年的研究成果和独有的技术，已推出了新一代化学键合型手性色谱柱系列：CHIRALPAK®IA，CHIRALPAK®IB和CHIRALPAK®IC。

CHIRALPAK®IA是将淀粉-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5 µm），相应的涂敷型色谱柱是CHIRALPAK®AD （CHIRALPAK®AD-H）；CHIRALPAK®IB 是将纤维素-3,5-二甲苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5 µM）, 相应的涂敷型色谱柱是CHIRALCEL®OD （CHIRALCEL®OD-H）；CHIRALPAK®IC将纤维素-3,5-二氯苯基氨基甲酸酯键合在硅胶表面（5 µM）（注意：相应的涂敷型色谱柱没有商品化）。

其化学结构式如下图所示。

新一代化学键合型手性柱具有下列特点：·通用于所有液相色谱流动相·新分离选择性·样品溶解液没有任何限制·高柱效高分离性能·柱寿命长，可再生·操作方便，简单，灵活新一代共价键合手性柱不仅可以使用那些常用在涂敷型手性柱上的流动相体系，如烷烃/醇类，更为重要的是还适用于诸如乙酸乙酯、四氢呋喃、甲基叔丁基醚、二氯甲烷、三氯甲烷等这些不适宜用在涂敷型手性柱上的溶剂。

大赛璐手性柱AD-H、OD-H操作常见问题及解决办法1.正相手性色谱柱AD-H、OD-H使用前需要注意什么?将正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H接上液相色谱仪之前先要保证液相色谱系统中的所有管路均为正相流动相。

如果液相系统里面是反相溶液，比如水/乙腈=50/50(v/v)。

那么需要先用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路（包括所有溶剂入口、六通阀、检测器等），然后用正相流动相冲洗液相的所有管路，最后再接上正相手性色谱柱；如果液相系统的反相流动相中含有缓冲盐，要先用纯水冲洗HPLC系统，然后用无水乙醇或者无水异丙醇冲洗液相的所有管路，最后用正相流动相冲洗。

2.正相手性色谱柱中保存液是什么?正相手性色谱柱AD-H、AS-H、OD-H、OJ-H中的保存液是正己烷/异丙醇=90/10(v/v)。

其它手性色谱柱的保存液请查阅使用说明书上的说明。

3.新柱CHRALPAK IA和CHRALPAK IB与原来的大赛璐手性柱有什么区别？CHRALPAK IA和CHRALPAK IB是将多糖衍生物共价键合在硅胶上，而大赛璐原来的手性柱固定相都是将多糖衍生物涂敷在硅胶表面的。

正因为是共价键合，所以CHRALPAK IA和CHRALPAK IB柱能使用任何液相流动相，比如四氢呋喃、氯仿、丙酮、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯等。

CHRALPAK IA和CHRALPAK IB与大赛璐原有的正相柱相比，扩大了溶剂选择的范围，增加了新的分离选择性，在原来大赛璐手性色谱柱上分不开的化合物有可能在CHRALPAK IA和CHRALPAK IB上得以分开。

4.CHIRALPAK AD-H、CHIRALPAK AS-H、CHIRALCEL OD-H、CHIRALCEL OJ-H四款正相色谱柱的区别是什么？区别是固定相的种类不同。

CHIRALPAK AD-H、AS-H的硅胶表面涂敷的是直链淀粉衍生物；CHIRALCEL OD-H、OJ-H的硅胶表面涂敷的是纤维素衍生物。

公司标准操作规程编号：STD-SOP－EM－033－00题目液相色谱柱使用维护与保养规程颁发部门分析测试中心制定日期审核日期批准日期分发分析测试中心研发部目的：建立HPLC色谱柱使用、维护与保养规程范围：HPLC色谱柱职责：分析测试中心对本规程的实施负责正文：1.色谱柱的构造色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝等组成。

2.液相色谱柱的使用：色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。

但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。

2.1样品的前处理：2.1.1最好使用流动相溶解样品。

2.1.2使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。

2.1.3使用0.45μm（或0.45μm以下）的过滤膜过滤除去微粒杂质。

2.2流动相的配制：液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：2.2.1流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。

2.2.2流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。

2.2.3流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。

2.2.4流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。

如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。

2.2.5流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。

2.2.6在流动相配制好后，一定要进行脱气。

除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

2.3流动相流速的选择：因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。

Nov 2005 Page 1请在使用色谱柱前仔细阅读本《使用手册》填料结构： 5 μ硅胶表面涂布有纤维素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]出厂保存溶剂： 正己烷 / 异丙醇（90:10 v/v ）该色谱柱在出厂之前都已经通过了检测，检测条件、结果和批号信息请查阅“出厂检测报告”。

警 告 ：将色谱柱接到色谱仪之前，必须先用合适的溶剂冲洗流路（包括流通阀和定量环）。

有些溶剂（比如丙酮、氯仿、DMF 、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF ）会破坏手性固定相的结构。

如果使用的是自动进样器，进样间隔的冲洗液也必须更换成合适的溶剂。

150 x 4.6 mm ID 250 x 4.6 mm ID分析柱250 x 10 mm ID半制备柱250 x 20 mm ID半制备柱流动相方向 参照色谱柱标签上的箭头典型流速• 1.0 ml/min不要超过 1.5 ml/min5.0 ml/min 不要超过7.0 ml/min 18 ml/min 不要超过25 ml/min 柱压范围‚ < 50 Bar (约700 psi)ƒ 不要超过100 Bar (约1400 psi)温度0 to 40°C• 最大流速也和流动相粘度（流动相成分）有关，必须小心不能超过柱压上限。

流动相 250 x 4.6 mm ID 150 x 4.6mm ID 250 x 10 mm ID 250 x 20 mm ID 烷烃/醇类 90:101.0 to 1.5 ml/min 5.0 to 7.0 ml/min 18 to 25 ml/min100% 乙醇0.5 ml/min2.0 to3.0 ml/min5.0 to 8.0 ml/min100% 异丙醇0.2-0.3 ml/min1.0 ml/min3.0 to 5.0 ml/minR =手性柱 CHIRALCEL ® OD-H使用手册33‚柱压指色谱柱压降，即接上柱子后系统的压力与未接柱子时系统压力的差值。

关于手性色谱柱的使用解读
手性色谱柱是由具有光学活性的单体，固定在硅胶或其它聚合物上制成手性固定相。

通过引入手性环境使对映异构体间呈现物理特征的差异，从而达到光学异构体拆分的目的。

要实现手性识别，手性化合物分子与手性固定相之间至少存在三种相互作用。

这种相互作用包括氢键、偶级-偶级作用、π-π作用、静电作用、疏水作用或空间作用。

手性分离效果是多种相互作用共同作用的结果。

这些相互作用通过影响包埋复合物的形成，**位点与分析物的键合等而改变手性分离结果。

由于这种作用力较微弱，因此需要仔细调节、优化流动相和温度以达到好的分离效果。

手性柱的使用途径
1、手性分离重要的是选择一根好的手性柱，做手性分析的都知道，大赛璐的手性柱根据用途分为多种不同的型号，大家熟悉的可能是OD-H。

有四种填料，对应的色谱柱分别是OD、AD、OJ和AS，粒径10um，后来填料粒径变为5um，就是卖的多、使用范围广的柱子，分别是OD-H、AD-H、OJ-H和AS-H，在柱子名称后边加“-H”，意思应该是“”，这些柱子都只能做正相使用。

2、为了在反相色谱中使用，开发的柱子在相应的色谱柱名称中添加了一个“R”，上述色谱柱都属于涂覆型填料，不耐溶剂，使用起来受样品溶解性的限制。

而近开发的键合相手性柱，可以使用几乎所有的常见溶剂做流动相，新的溶剂还提供了新的选择性，进而提升了色谱柱的分离能力，主要是IA、I B和IC，其中IA对应AD-H，IB对应OD-H，IC是新开发的填料。

和反相柱的发展趋势一样，大赛璐的手性柱也通过减小粒径来获得更高的柱效，的手性柱填料粒径是3um。