动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定

称取样品时称样量按照样品中蛋白质含量多少称取蛋白质（GB 5009.5-2016）试剂：硼酸（20g/L）：50g硼酸+2.5L水NaOH（400g/L）：3瓶氢氧化钠稀释至桶标刻度线甲基红指示剂（1g/L）：0.1g甲基红，95%乙醇稀释至100mL亚甲基蓝指示剂（1g/L）：0.1g亚甲基蓝，95%乙醇稀释至100mL溴甲基绿指示剂（1g/L）：0.1g溴甲酚绿，95%乙醇稀释至100mLB混合指示剂：2份甲基红+1份亚甲基蓝B混合指示剂：1份甲基红+5溴甲酚绿蛋白催化剂：33.3g硫酸铜+500g硫酸钾。

称样：燃烧法：0.1-0.3g 腐竹：粉碎燃烧（糖分较高或脂肪较高的样品可选择1g-1.5g的称取量）淀粉：5g 鸡蛋：1g 奶、血浆、冰棍：3-4g 酱油：1mL 醋：5mL 饮料、口服液：4-5g 调味酱：1-2g 湿饲料：2g 制不匀的饲料、酒糟、草：1g 酒：5mL挥干乙醇胃蛋白酶消化率：称样3-4g，用乙醚脱脂，洗液澄清，室温风干。

称风干试样1g→250mL磨口锥形瓶→150mL水+0.9mL浓盐酸+0.3g胃蛋白酶→盖塞→45℃振摇16h→抽滤→消化→蒸馏→滴定氢氧化钾蛋白质溶解度：称样1g→250mL烧杯→50mL 0.2%KOH→搅拌20min→2700r/min离心10min→取上清液→消化→6432的规定测粗蛋白含量酪蛋白的测定：称0.2g试样→150mL具塞锥形瓶→酸法（0.0200±0.0010gNaHCO3+ 8mL水）或酶法（0.0200±0.0010g三聚磷酸钠 + 8mL水）或膜法（8mL水）→混匀→65-67℃水浴→每隔5min轻摇一次至溶解→冷却加1mL乙酸→混匀，静置5min→加1mL乙酸钠→静置，沉淀，过滤→沉淀物置于消化管→5009.5处理水溶性蛋白质（腐乳）：取样沥干汁液，捏匀称取25g，加少量水煮沸冷却转移250mL容量瓶，定容过滤，吸取10mL置于消化管→5009.5处理。

动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定Hessen was revised in January 2021动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定过滤法参考标准：GB/T 17811-2008一、适用范围二、实验原理已脱过脂的试样,用温热的胃蛋白酶溶液(酶液浓度和用量与酶解试样质量恒定),在恒温、持续不断地振摇或搅拌下消化16小时,过滤分离不溶性残渣,洗涤、干燥,测定残渣的粗蛋白质含量。

同时测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白质含量。

三、实验用品三、实验内容照上法振摇和倒出。

检查瓶子，并用丙酮再次洗涤。

当全部液体通过滤纸后,用洗瓶以少量丙酮洗涤漏斗壁上残渣两次,并抽干。

从布氏漏斗上小心取下载有残渣的滤纸(用滤纸将残渣包裹好),无损地移入100烧杯中并置于105℃烘箱内烘干。

5 粗蛋白质的测定将上述已烘干的滤纸包无损地移入凯氏烧瓶中，按《FOSS 定氮仪测定饲料中粗蛋白含量的方法》测定残渣粗蛋白质的质量分数（ω2）。

同时，称取脱脂风干的样品0.3 g（精确至0.0002 g），直接按《FOSS 定氮仪测定饲料中粗蛋白含量的方法》测定脱脂未酶解的样品中粗蛋白质的质量分数（ω1）。

测定残渣粗蛋白质时应从每个样品残渣粗蛋白质中减去酶液的空白值。

6 计算X- 试样胃蛋白酶消化率，以质量分数计（%）；ω1- 脱脂未酶解的样品中粗蛋白质的质量分数（%）；ω2- 脱脂酶解后的残渣中粗蛋白质的质量分数（%）。

重复性：1每个试样脱脂风干后取两份试料进行酶解，平行测定残渣粗蛋白质的质量分数，以其算术平均值为测定结果（保留三位有效数字），测定结果的相对≤6%；2 每个试样脱脂风干后取两份试料进行平行测定粗蛋白质的质量分数，以其粗蛋质含量允许相对偏差>25% 1％10%<X≤25% 2％≤10% 3％3 每个试样胃蛋白酶消化率测定结果保留三位有效数字。

误差来源及分析误差来源控制方案附录2：盐酸标准溶液的配制与标定参考标准：GB/T601-20021.盐酸标准溶液的配制按下表的规定量取盐酸，注人1000m L 水中，摇匀。

浅谈鱼粉掺假鉴别的5大常用方法鱼粉是一种优质的动物性蛋白质原料，广泛应用于畜禽及水产饲料中。

其蛋白含量高，蛋白质消化率可达90%左右;氨基酸组成齐全、平衡，其中赖氨酸和蛋氨酸含量都较高;钙磷含量较高，比例良好，利用率高;矿物质、维生素等含量也特别丰富，此外还含多种未知生长因子，适口性好，因而在水产饲料生产中具有极其重要的作用。

由于其使用量大，市场价格高，所以掺假掺杂现象特别普遍。

下面介绍一些常规的检测手段，来定性地判断鱼粉的掺假掺杂情况。

常用的方法有感官鉴别法、镜检鉴别法、近红外技术鉴别法、物理鉴别法、化学鉴别法和氨基酸组分测定等鉴别法。

1感官鉴别1.1观察色泽色泽一致没有任何“载体”的，比如鱼骨、鱼片、鱼鳞、鱼眼的一般是配方鱼粉。

1.2闻气味好鱼粉有清香鱼粉气味，掺假鱼粉有腥臭味、氨味、酸败味，掺有植物性木质素类原料的有夹杂的植物味道，掺有其他动物源性饲料的混杂动物气味。

1.3口感口感是识别鱼粉的杀手锏。

好鱼粉入口即化，有清香鱼片的味道，掺假鱼粉则含而不化，有辣味、涩味、苦味、哈喇味等。

1.4触觉拇指与食指轻捻鱼粉，好鱼粉细腻光滑，掺假鱼粉粗劣有细小颗粒。

1.5灼烧正常鱼粉电磁炉烘烤有鱼香味，若有难闻、异臭或者芳香味均为掺假鱼粉。

2镜检鉴别在显微镜下，鱼肉颗粒较大，表面粗糙，具有纤维结构，呈黄色或黄褐色，有透明感，形碎蹄筋，似有弹性;鱼骨(包括鱼刺、鱼头骨)为半透明或不透明的碎块，大小各异，呈白色至白黄色(一些鱼骨屑呈琥珀色)，表面光滑，鱼刺细长而尖，似脊椎状，仔细观察可看到鱼刺碎块中有一大端头或小端头的鱼刺特征，而鱼头骨则呈片状，半透明，正面有纹理，鱼头骨坚硬无弹性;鱼鳞，平坦或卷曲的藻形片状物，近似透明，有一些同心圆线纹;鱼眼，表面碎裂，呈乳色的圆球形颗粒，半透明，光泽暗，较硬。

在鱼粉中和以上特征相差较远的其他颗粒或粉状物多为掺假物，可据掺假物的镜检特征加以鉴别。

2.1植物性原料鱼粉掺假掺大豆皮粉的鱼粉：鱼粉中掺入大豆皮粉，镜下可见豆皮，为黄色或黄色块状物。

体外消化法评定饲料营养价值研究进展对各种饲料的营养价值进行准确评定是配制日粮的关键。

众所周知，评定饲料的营养价值的方法主要有化学分析法、体内法和体外法。

化学分析法是评定饲料营养价值的一种常用方法，如总能、总磷、粗蛋白、粗纤维和粗脂肪等测定方法。

但利用概略养分分析所测得的饲料养分与动物消化吸收养分间存在很大差异，不足以准确地反映出饲料的实际营养价值。

利用动物试验能够比较准确地对饲料营养价值进行评定，但这些方法往往耗时、费力，很难在短时间内对大量的饲料样品进行评价分析，且生物学影响因素多，结果变异较大，重复性差，限制了其实用性。

因此，人们建立了体外法来研究饲料的营养价值。

随着技术的进步和动物消化生理的研究进展，利用动物体外消化模拟技术来研究饲料的营养价值也成为可能。

体外法具有简单、快捷、重演性好等特点，在饲料营养价值评定等方面占有重要地位。

本文就体外法在不同动物上的应用状况、应用中存在的问题及应用前景作以综述，以提高人们对体外法的认识和重视。

体外消化在猪上的应用由于猪个体较大，体外消化所需要的一些消化酶，如胃蛋白酶和胰酶以及小肠液等比较容易获得。

而且一次性获得数量也比较大。

因此，体外消化法在猪上的研究和应用较多。

猪体外消化法有pH法、单酶(比如胃蛋白酶)法、两步法(胃蛋白酶-胰酶法)、三步法(胃蛋白酶-胰酶-碳水化合物法)等，它们都能很好地预测猪饲料的体内消化情况。

利用NaOH不断中和蛋白质水解过程中所产生的H+，使pH保持恒定不变，并记录所用NaOH数量。

利用该方法所测定的31种植物性蛋白质饲料和11种动物性蛋白质饲料体外消化率与猪体内消化率存在显著相关(r=0.85和0.92)。

在对89个日粮样品进行评定时发现，用胃蛋白酶在 pH=1.5的条件下处理饲料样品，有机物质体外消化率与体内消化率相关系数很高(r=0.92)，可以用来预测饲料在猪体内的消化率。

研究员对胃蛋白酶 -胰酶法进行了改进。

在分离已消化养分与残渣时，先利用三氯乙酸将可溶性肽和蛋白质沉淀出来，然后用测定纤维的标准过滤器过滤消化食糜液，分离已消化养分。

几种蛋白原料的体外消化率的测定方法的比较摘要：试验分别采用胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法、肉食性鱼类（如鲈鱼）消化道粗酶提取液消化法和草食性鱼类（如草鱼）消化道粗酶提取液消化法测定了酪蛋白、鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉等7种蛋白质原料的体外消化率。

3种测定方法中，鱼粉的消化率差异不显著（P>0.05）；豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉用两步法和草鱼消化酶法测定的消化率无显著差异（P>0.05）；棉籽粕消化率用两步法测定值高于用消化酶法的测定值，差异极显著（P<0.01）；豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉的消化率用两步法比用鲈鱼消化酶测定的值高，差异极显著（P<0.01）；草鱼消化酶法和鲈鱼消化酶法对酪蛋白的消化率无显著差异（P>0.05），而对于豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉草鱼消化酶法测定值高于鲈鱼消化酶法的测定值，差异极显著（P<0.01）。

结果表明，胃蛋白酶-胰蛋白酶两步体外消化法在测定鱼粉蛋白质消化率时可替代鱼类消化液粗酶消化法，对其它蛋白质原料使用该方法应慎重。

关键词：蛋白质饲料；体外消化率；测定方法消化率是动物从食物中所消化吸收的部分占总摄入量的百分比，是评价饲料营养价值的重要指标之一。

测定饲料消化率主要有两种方法：体外法和体内法。

体内法测定的消化率能够比较真实的反映鱼类对饲料的消化情况。

但体内法测定方法复杂、时间长、费用高，而且对外界环境的要求较高，季节、温度、光照等都会影响消化率测定值。

体外消化法是利用精制的消化酶或研究对象的消化道酶提取液在试管内进行的消化试验，其测定值可近似反映鱼对饲料的消化率。

此法能快速测定原料的相对利用率，为营养师制作配方提供参考[1]。

然而，体外消化法无法反映体内消化的真实情况。

Boisen和Eggum（1991）在胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法中利用标准过滤装置测得饲料蛋白质消化率与鼠和猪的真消化率十分接近，他们认为这种方法测得的蛋白质体外消化率经内源氮校正与回肠末端蛋白质表观消化率高度相关。

动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定过滤法参考标准：GB/T 17811-2008一、适用范围二、实验原理已脱过脂的试样,用温热的胃蛋白酶溶液(酶液浓度和用量与酶解试样质量恒定),在恒温、持续不断地振摇或搅拌下消化16小时,过滤分离不溶性残渣,洗涤、干燥,测定残渣的粗蛋白质含量。

同时测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白质含量。

三、实验用品三、实验内容一份15ml的丙酮进行洗涤，照上法振摇和倒出。

检查瓶子，并用丙酮再次洗涤。

当全部液体通过滤纸后,用洗瓶以少量丙酮洗涤漏斗壁上残渣两次,并抽干。

从布氏漏斗上小心取下载有残渣的滤纸(用滤纸将残渣包裹好),无损地移入100烧杯中并置于105℃烘箱内烘干。

5 粗蛋白质的测定将上述已烘干的滤纸包无损地移入凯氏烧瓶中，按《FOSS 定氮仪测定饲料中粗蛋白含量的方法》测定残渣粗蛋白质的质量分数（ω2）。

同时，称取脱脂风干的样品0.3 g（精确至0.0002 g），直接按《FOSS 定氮仪测定饲料中粗蛋白含量的方法》测定脱脂未酶解的样品中粗蛋白质的质量分数（ω1）。

测定残渣粗蛋白质时应从每个样品残渣粗蛋白质中减去酶液的空白值。

6 计算X- 试样胃蛋白酶消化率，以质量分数计（%）；ω1- 脱脂未酶解的样品中粗蛋白质的质量分数（%）；ω2- 脱脂酶解后的残渣中粗蛋白质的质量分数（%）。

重复性：1每个试样脱脂风干后取两份试料进行酶解，平行测定残渣粗蛋白质的质量分数，以其算术平均值为测定结果（保留三位有效数字），测定结果的相对≤6%；2 每个试样脱脂风干后取两份试料进行平行测定粗蛋白质的质量分数，以其算粗蛋质含量允许相对偏差>25% 1％10%<X≤25% 2％≤10% 3％3 每个试样胃蛋白酶消化率测定结果保留三位有效数字。

误差来源及分析附录2：盐酸标准溶液的配制与标定参考标准：GB/T601-20021.盐酸标准溶液的配制按下表的规定量取盐酸，注人1000m L 水中，摇匀。

饲料营养价值评定研究方法饲料营养价值是指饲料本身所含营养分与这些营养分被动物利用后所产生的营养效果。

饲料中所含有的营养成分是动物维持生命活动与生产的物质基础，一种饲料或者饲粮含的营养分越多、而这些养分又能大部分被动物利用的话，这种饲料的营养价值就高，反之，若饲料或者饲粮所含营养分低、或者虽营养分含量高，但能被动物利用的少，则其营养价值就低。

动物的组织及体外产品都是动物摄取的饲料营养物质在机体内代谢与转化的结果（产物），或者者说是饲料养分在动物体内的沉积。

饲料营养价值的评定也就务必根据饲料中的营养物质含量与饲料中营养物质在动物体内的营养效果，定量分析饲料的营养价值。

本章将要紧讨论饲料营养价值的评定方法、饲料能量与蛋白质营养价值的评定与维生素与矿物元素营养价值的评定。

第一节饲料营养价值的评定方法近一个世纪以来，饲料营养价值要紧通过化学分析、消化试验、代谢试验、平衡试验与饲养试验来评定。

各国学者对评定方法进行了大量的研究与改进，已使饲料营养价值的评定成为许多营养实验室的常规工作之一。

一、化学分析（一）分析用样品的采集与制备样品采集是饲料营养价值评定工作中最重要的一步，采集的样品务必具有代表性，即代表全部被检物质的平均水平。

否则，即使实验室分析的仪器与方法先进、科学，也不能得出科学、公证与有用的结果。

饲料样本的制备在于确保样品十分均匀，在分析时，取任何部分都能代表全部被检测物质的成分。

根据被检物质的性质与检测项目要求，能够用摇动、搅拌、切碎、研磨或者捣碎等方法进行。

互不相溶的液体，分离后分别取样。

（二）饲料养分的表示百分数（%）：是最为常用的表示方法，即表示饲料中某养分在饲料中的重量百分比。

要紧用以表示概略养分、常量元素、氨基酸的含量。

mg/kg：通常用以表示微量元素、水溶性维生素等养分（有的时候还用µg/kg）。

IU（国际单位）：常用以表示脂溶性维生素等在饲料中的含量。

CIU(鸡国际单位，chicken international unit)。

动物性蛋白质饲料动物性蛋白质饲料包括水生动物及其副产品、畜禽加工副产品以及乳产品加工副产物等。

一般来说，动物性蛋白质饲料质量变异程度远大于植物性蛋白质饲料，变异的原因主要是加工原料不同。

粗蛋白质及脂肪含量高，易变质，而且加工过程中易污染变质，掺假机会也大。

在发现维生素B12以前，认为猪禽饲料必须包含一定量的动物性饲料原料。

随着维生素工业的发展及动物营养学研究的深入，动物性饲料已不再是动物日粮必需的组分，但动物性蛋白质饲料仍具有很大的优势：(1)粗蛋白质含量高，为40%～90%，多数在50%以上；一般植物性饲料中缺乏的必需氨基酸在动物性饲料中含量较高，蛋白质生物学价值较高。

(2)碳水化合物含量特别少，不含粗纤维，消化利用率高。

(3)维生素含量丰富，特别是维生素B2、维生素B12含量多。

(4)矿物质含量丰富，比例平衡，利用率高，尤其是钙和磷。

⑤一些动物性饲料中含有未知生长因子，有利于动物生长。

一、鱼粉鱼粉是以全鱼或鱼下脚料(鱼头、尾、鳍、内脏等)为原料，经蒸煮、压榨、干燥、粉碎后的粉状物。

鱼粉分为全鱼粉、普通鱼粉和粗鱼粉。

根据鱼肉颜色，分为白鱼粉和红鱼粉。

以全鱼或鱼加工下脚料为原料加工而成的即为普通鱼粉。

如将加工鱼粉时产生的煮汁浓缩加工，做成鱼汁，添加到普通鱼粉中，经干燥粉碎，所得鱼粉称为全鱼粉。

以鱼加工下脚料为原料制得的鱼粉为粗鱼粉。

世界上产量最多的国家依次是日本、智利、秘鲁和美国等，出口最多的是智利和秘鲁。

国内鱼粉主要产区集中在浙江、上海、福建、山东等省。

国产鱼粉品质差异较大，而进口鱼粉品质相对较稳定。

1.营养成分及特点(1)鱼粉的能量水平主要受脂肪和粗灰分含量的影响，一般在粗脂肪含量合格的情况下，全鱼粉能量水平高，因而很容易搭配成高能量饲料。

一般猪消化能为12.55～13.18MJ/kg，鸡代谢能为11.80～12.38MJ/kg。

(2)鱼粉的粗蛋白质含量高，含量为53.5%～64.5%，而且品质好，消化率高。

胃蛋白酶消化率国标
摘要：
1.胃蛋白酶消化率的定义和重要性
2.胃蛋白酶消化率的测定方法
3.国标对胃蛋白酶消化率的要求
4.胃蛋白酶在实际应用中的效果
5.结论
正文：
一、胃蛋白酶消化率的定义和重要性
胃蛋白酶消化率是指在特定条件下，蛋白质被胃蛋白酶分解的速率。

这个指标对于评估蛋白质的质量和消化率具有重要意义。

在食品、饲料和制药等领域，胃蛋白酶消化率是衡量蛋白质营养价值和消化效果的关键参数。

二、胃蛋白酶消化率的测定方法
胃蛋白酶消化率的测定方法通常采用化学法和生物法。

化学法主要是通过测量蛋白质分解产生的氨基酸含量来推算消化率；生物法则是通过动物实验，观察蛋白质饲料对动物生长和消化的影响来测定消化率。

三、国标对胃蛋白酶消化率的要求
我国标准对胃蛋白酶消化率有严格的要求。

例如，在鱼粉行业，国标规定优质鱼粉的胃蛋白酶消化率应达到90% 以上。

这对于保证鱼粉的质量和饲料的安全性至关重要。

四、胃蛋白酶在实际应用中的效果
胃蛋白酶在实际应用中表现出良好的消化效果。

例如，研究发现，在饲料中添加适量的胃蛋白酶可以提高动物的生长速度和饲料利用率。

此外，胃蛋白酶也被用于治疗人类的消化不良症状，如胃胀、胃痛等。

五、结论
胃蛋白酶消化率是评估蛋白质质量和消化效果的重要指标。

我国对胃蛋白酶消化率的要求严格，这有助于保障食品和饲料的安全性和质量。

动物蛋白质饲料中的胃蛋白酶消化性化学分析方法胃蛋白酶（pepsin）是一种主要存在于动物胃液中的消化酶，广泛用于动物蛋白质饲料的消化性分析。

胃蛋白酶能够水解蛋白质为较小的多肽和氨基酸，为动物消化和吸收提供必要的饲料营养。

因此，胃蛋白酶的活性分析对于饲料蛋白质的消化性能评价和饲料配方的优化具有重要的意义。

胃蛋白酶活性的测定方法有多种，主要包括酶活测定法和酶原测定法。

酶活测定法是指测定胃蛋白酶对特定底物的酶解作用产生的产物或酶活的变化，一般以家兔蛋白作为底物测定胃蛋白酶的活性。

酶原测定法则是通过测定胃蛋白酶的酶原（即胰凝乳蛋白酶原）在一定条件下被激活转化为活性胃蛋白酶，进而测定其活性。

本文将重点介绍酶原测定法。

胃蛋白酶活性的测定方法主要包括以下几个步骤：样品准备：将需要测定的样品加入一定量的缓冲溶液中，将其悬浮均匀。

酶原激活：将酶原加入到样品中，并加入适量的激活剂（一般为酸性溶液），使酶原转化为活性的胃蛋白酶。

反应过程：在合适的温度和时间下，使胃蛋白酶在样品中进行酶解作用。

该过程可以通过测定产物生成、底物的消失或酶活的变化来进行监测。

终止反应：加入适量的终止剂，停止胃蛋白酶的酶解作用。

常用的终止剂有酸性溶液。

产物测定：通过测定产物的含量或测定反应前后底物的消失量，来计算胃蛋白酶的活性。

常用的方法有Bihlman法、Anson法和Wu法等。

胃蛋白酶活性的测定需要注意的点：1.选择合适的底物和激活剂，以确保胃蛋白酶的活性转化和胃蛋白酶的酶解速率。

2.确定合适的反应条件，包括温度、pH值和反应时间等参数。

3.注意控制胃蛋白酶的活性在一定范围内，避免过高或过低的活性对测定结果的影响。

4.重复性测定，多次测定样品的活性，以确保结果准确可靠。

总之，胃蛋白酶的消化性化学分析方法是一项重要的技术，可用于评估动物蛋白质饲料的消化性能。

选择合适的测定方法和条件，严格操作实验步骤，可以得到准确的结果，为饲料配方的优化和动物营养的提高提供有力依据。

饲料/饲料添加剂检测饲料、饲料添加剂中含有大量的有益菌（乳酸菌、双歧杆菌、芽孢杆菌）、复合酶等，作为饲料进入畜禽体内后，能迅速繁殖，一方面投入菌种的代谢物中和肠内毒素，抑制了其它有害菌的生长，另一方面在宿主体内形成了正常微生物菌群，为宿主合成主要的维生素，提供营养和阻止致病菌的入侵。

其有毒有害物质（如六六六、滴滴涕，重金属等）化学性质稳定，不易分解，残留期长，通过饲料原料对饲料的污染最为严重。

因此，对饲料、饲料添加剂生产企业来说，饲料的安全性对于产品品质起到决定性的作用。

本实验室对这些项目的检测已有成熟的技术并具有权威的检测资质。

青岛科标检测研究院生物实验室，主要从事：真菌、细菌及放线菌鉴定；微生物代谢产物的分析检测；申报农业部饲料、生物农药、肥料和生态制剂批准文号的有效检测和咨询工作等，包括渔用、虾用、畜禽用微生物饲料（饲料酵母）的质量检测、饲料添加剂中微生物菌种鉴定和检测、饲用酶制剂中酶活性测定、微生态制剂（饲用、农用、水产用）质量检测、微生物肥料检测及常见菌种的鉴定。

检测项目项目内容微生物微生物细菌总数、霉菌数、酵母菌数、放线菌数、细胞数、有益微生物乳酸菌、嗜酸乳杆菌、芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、双歧杆菌、粪肠球菌、酿酒酵母、光合细菌等有害微生物沙门氏菌、志贺氏菌、大肠菌群、粪大肠菌群、大肠杆菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽孢杆菌、单核细胞增生李斯特氏菌、铜绿假单胞菌等。

生物毒素黄曲霉毒素B1、呕吐毒素（DON）常规理化感观（外观及气味）、粒度、水分、灰分、pH、粗脂肪、粗纤维、盐分、粗蛋白、水溶性氯化物、挥发性盐基氮（TVBN）、混合均匀度、胃蛋白酶消化率、氰化物、亚硝酸盐、三聚氰胺等重金属铅、铬、镉、汞、砷、等农药残留六六六、滴滴涕、敌敌畏瘦肉精莱克多巴胺、盐酸克伦特罗、沙丁胺醇核苷酸GMP、AMP、GMP、UMP、IMP硝基呋喃AMOZ、SEM、AHD、AOZ微量元素钙、铜、铁、镁、锰、锌、硒、氟等维生素d-生物素、维生素D3、维生素E、维生素K3、维生素A、维生素B1、B2、B12、烟酸、叶酸、泛酸、氨基酸赖氨酸、蛋氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝氨酸和酪氨酸等菌种鉴定细菌、霉菌、酵母菌、放线菌电镜检查透射电镜、扫描电镜等菌群多样性分PCR-DGGE、ARDRA分析等析饲料检测相关标准【国内标准】GB5917-1986 配合饲料粉碎粒度配合饲料粉碎粒度测定法GB/T5918-1997 配合饲料混合均匀度配合饲料混合均匀度的测定GB8622-1988 尿素酶活性大豆制品中尿素酶活性测定方法GB10649-1989 微量元素预混合饲料混合均匀度微量元素预混合饲料混合均匀度测定法GB13086-1991游离棉酚饲料中游离棉酚的测定GB/T13090-1999 六六六、滴滴涕饲料中六六六、滴滴涕的测定GB/T14700-1993 饲料中维生素B1 饲料中维生素B1测定方法GB/T14701-1993 饲料中维生素B2 饲料中维生素B2测定方法GB/T14702-1993 饲料中维生素B6 饲料中维生素B6测定方法GB/T15398-1994 赖氨酸饲料中有效赖氮酸测定方法GB/T15399-1994 含硫氨基酸饲料中含硫氨基酸测定方法——离子交换色谱法GB/T15400-1994色氨酸饲料中色氨基酸测定方法——分光光度法GB/T17480-1998 黄曲霉素B1 饲料中黄曲霉素B1的测定酶联免疫吸附法GB/T17481-1999预混料中氯化胆碱预混料中氯化胆碱的测定分光光度法GB/T17776-1999 硫饲料中硫的测定硝酸镁法GB/T17777-1999 钼饲料中钼的测定分光光度法GB/T17778-1999 d—生物素预混料中d-生物素的测定分光光度法GB/T17811-1999 动物蛋白质饲料消化率动物蛋白质饲料消化率的测定胃蛋白酶法GB/T17812-1999 饲料中维生素E 饲料中维生素E的测定高效液相色谱法GB/T17813-1999 复合预混料中烟酸、叶酸复合预混料中烟酸、叶酸的测定高效液相色谱法GB/T17815-1999饲料中丙酸、丙酸盐饲料中丙酸、丙酸盐的测定GB/17816-1999 饲料中总抗坏血酸饲料中总抗坏血酸的测定邻苯二胺荧光法GB/T17817-1999 饲料中维生素A 饲料中维生素A的测定高效液相色谱法GB/T17818-1999 饲料中维生素D3 饲料中维生素D3的测定高效液相色谱法GB/T17819-1999 维生素预混料中维生素B12 维生素预混料中维生素B12的测定高效液相色谱法GB/T18246-2000 饲料中氨基酸饲料中氨基酸的测定GB/T18397-2000复合预混料中泛酸复合预混合饲料中泛酸的测定高效液相色谱法NY438-2001 饲料中盐酸克伦特罗饲料中盐酸克伦特罗的测定GB/T6432-1994 粗蛋白饲料中粗蛋白测定方法GB/T6433-1994 粗脂肪饲料中粗脂肪测定方法GB/T6434-1994 粗纤维饲料中粗纤维测定方法GB/T6435-1986 水分饲料中水分的测定方法GB/T6436-1992 钙饲料中钙的测定方法GB/T6437-1992 磷饲料中总磷量的测定方法GB/T6438-1992 粗灰分饲料中粗灰分的测定方法GB/T6439-1992 水溶性氯化物饲料中水溶性氯化物的测定方法GB/T13079-1999 砷饲料中总砷的测定方法GB/T13080-1991 铅饲料中铅的测定方法GB/T13081-1991 汞饲料中汞的测定方法GB/T13082-1991 镉饲料中镉的测定方法GB/T13083-1991 氟饲料中氟的测定方法GB/T13084-1991 氰化物饲料中氰化物的测定方法GB/T13085-1991 亚硝酸盐饲料中亚硝酸盐的测定方法GB/T13086-1991 游离棉酚饲料中游离棉酚的测定方法GB/T13087-1991 异硫氰酸酯饲料中异硫氰酸酯的测定方法GB/T13088-1991 铬饲料中铬的测定方法GB/T13091-1991 沙门氏菌饲料中沙门氏菌的测定方法GB/T13092-1991 霉菌饲料中霉菌检验方法GB/T13093-1991 细菌总数饲料中细菌总数的测定方法GB/T17480-1999 黄曲霉素B1 饲料中黄曲霉素B1的测定方法酶联免疫吸附法GB/T8381-1987 黄曲霉素B1 饲料中黄曲霉素B1的测定方法GB/T13882-1992 碘饲料中碘的测定方法硫氰酸铁—亚硝酸催化动力学法GB/T13883-1992 硒饲料中硒的测定方法2，3-二氨基萘荧光法GB/T13882-1992 钴饲料中钴的测定方法原子吸收光谱法铁、铜、锰、锌、镁饲料中铁、铜、锰、锌、镁的测定方法原子吸收光谱法。

动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定标准化管理处编码[BBX968T-XBB8968-NNJ668-MM9N]动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定过滤法参考标准：GB/T 17811-2008一、适用范围二、实验原理已脱过脂的试样,用温热的胃蛋白酶溶液(酶液浓度和用量与酶解试样质量恒定),在恒温、持续不断地振摇或搅拌下消化16小时,过滤分离不溶性残渣,洗涤、干燥,测定残渣的粗蛋白质含量。

同时测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白质含量。

三、实验用品1．实验用试剂2．实验用设备三、实验内容重复性：1每个试样脱脂风干后取两份试料进行酶解，平行测定残渣粗蛋白质的质量分数，以其算术平均值为测定结果（保留三位有效数字），测定结果的相对≤6%；2 每个试样脱脂风干后取两份试料进行平行测定粗蛋白质的质量分数，以其算术平均值为测定结果（保留三位有效数字），测定结果的相对偏差应符合：3 每个试样胃蛋白酶消化率测定结果保留三位有效数字。

误差来源及分析附录2：盐酸标准溶液的配制与标定参考标准：GB/T601-2002 1.盐酸标准溶液的配制按下表的规定量取盐酸，注人1000m L水中，摇匀。

2.盐酸标准溶液的标定按下表的规定称取于270-300℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠，溶于50ml.水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，用配制好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2 min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。

同时做空白试验。

3.计算盐酸标准滴定溶液的浓度[c(HCI)].数值以摩尔每升(mol/L表示，按式(2)计算：m- 无水碳酸钠的质量的准确数值，单位为克(g);V1 -盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(ml);V: -空白试验盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(mL)M- 无水碳酸钠的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mol)注意事项：1.灼烧温度不能超过300度，当温度超过300度时无水碳酸钠分解，可将马福炉的温度调至250，等升温稳定后再调至280，或者将马福炉事先升温至280度，待稳定后再放入无水碳酸钠2.无水碳酸钠的称量质量小于0.2g时要用十万分子之一天平称量。

动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020动物性蛋白质饲料胃蛋白酶消化率的测定过滤法参考标准：GB/T 17811-2008一、适用范围二、实验原理已脱过脂的试样,用温热的胃蛋白酶溶液(酶液浓度和用量与酶解试样质量恒定),在恒温、持续不断地振摇或搅拌下消化16小时,过滤分离不溶性残渣,洗涤、干燥,测定残渣的粗蛋白质含量。

同时测定空白和脱脂未酶解试样的粗蛋白质含量。

三、实验用品1．实验用试剂2．实验用设备三、实验内容重复性：1每个试样脱脂风干后取两份试料进行酶解，平行测定残渣粗蛋白质的质量分数，以其算术平均值为测定结果（保留三位有效数字），测定结果的相对≤6%；2 每个试样脱脂风干后取两份试料进行平行测定粗蛋白质的质量分数，以其算术平均值为测定结果（保留三位有效数字），测定结果的相对偏差应符合：3 每个试样胃蛋白酶消化率测定结果保留三位有效数字。

误差来源及分析附录2：盐酸标准溶液的配制与标定参考标准：GB/T601-2002 1.盐酸标准溶液的配制按下表的规定量取盐酸，注人1000m L水中，摇匀。

2.盐酸标准溶液的标定按下表的规定称取于270-300℃高温炉中灼烧至恒重的工作基准试剂无水碳酸钠，溶于50ml.水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红指示液，用配制好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，煮沸2 min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。

同时做空白试验。

3.计算盐酸标准滴定溶液的浓度[c(HCI)].数值以摩尔每升(mol/L表示，按式(2)计算：m- 无水碳酸钠的质量的准确数值，单位为克(g);V1 -盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(ml);V: -空白试验盐酸溶液的体积的数值，单位为毫升(mL)M- 无水碳酸钠的摩尔质量的数值，单位为克每摩尔(g/mol)注意事项：1.灼烧温度不能超过300度，当温度超过300度时无水碳酸钠分解，可将马福炉的温度调至250，等升温稳定后再调至280，或者将马福炉事先升温至280度，待稳定后再放入无水碳酸钠2.无水碳酸钠的称量质量小于0.2g时要用十万分子之一天平称量。