实验一 鱼类饲料的总消化率及其
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《淡水渔业》2004年第34卷第3期收稿日期:2003-08-17作者简介:邝雪梅(1964-),女,重庆人,湛江海洋大学讲师,从事鱼类养殖的教学及科研工作。
草鱼肠道对4种饲料蛋白质氨基酸消化和吸收率的比较分析邝雪梅 杨 文 潘欢欢 封承辉(湛江海洋大学,广东湛江 524088) 摘 要 采用离体消化方法,利用草鱼肠道消化酶作为酶源,在水解7h 后,用茚三酮方法测定水解液中生成的氨基酸总量,以生成的氨基酸量占消化前饲料蛋白质量的百分比表示氨基酸离体消化率。
4种饲料的氨基酸消化率分别为鱼粉64.56%、豆粕88.73%、菜粕75.03%、棉粕81.00%,显示出草鱼对3种植物饲料蛋白质的氨基酸消化率高于鱼粉的结果。
关键词 氨基酸,消化,吸收,草鱼 本文的主要目的在于通过离体酶解反应得到草鱼肠道在相同的条件下对不同饲料原料的氨基酸消化率,建立以氨基酸消化率的作为饲料蛋白质可消化性的离体消化率试验方法。
同时按照离体酶解方法制备饲料原料的酶解溶液作为灌注液,再通过肠道的离体灌注试验,定量地比较分析草鱼对不同饲料蛋白质酶解液中的氨基酸整体的吸收速度和吸收率,在相同条件下比较分析草鱼对不同饲料蛋白质原料的氨基酸消化率和肠道对酶解液中氨基酸的吸收速度和吸收率差异,并对试验方法进行探讨。
1 实验材料和方法1.1 饲料原料选择进口鱼粉、豆粕、菜粕、棉粕共4种常规蛋白质饲料原料,原料经过植物粉碎机粉碎后全部通过80目标准筛。
1.2 氨基酸离体消化率测定方法1.2.1 用于离体消化的消化酶制备取在水族箱中经过配合饲料养殖2周的草鱼(Ctenopharyngodon idellus )15尾,平均体重190克左右,常规解剖得到肠道,滤纸吸干后称重。
按照肠道重量10倍加入pH 7.4、0.2mol /L 的磷酸缓冲液,玻璃匀浆器匀浆,冷冻离心机在-4~2℃、10000r /min 离心20min ,取上清液冰箱冷冻保存备用。
实验一 鱼类饲料的总消化率及其蛋白质消化率的测定一、 实验目的掌握用外源指示剂Cr 2O 3间接测量鱼、虾饲料消化率的基本方法。
二、原 理与饲料均匀混合的外源指示剂Cr 2O 3,完全不被动物吸收而随粪便排出。
根据指示剂及蛋白质(或其他营养成分)在食物及粪便中的含量变化,饲料的总消化率和蛋白质的消化率由如下两式给出:饲料总消化率:D(%)=[1-'B B] ×100蛋白质消化率:D(%)=[1- 'A A ×'B B] ×100A 、A’分别为饲料粪便中的粗蛋白含量;B 、B’分别为饲料和粪便中的Cr 2O 3 含量三、实验材料1.试验鱼 可根据实际情况选择实验鱼的种类。
但用易驯化、习惯实验环境的鱼类(如金鱼、锦鲤、罗非鱼等)较好。
体重20~25g ,每试验组10尾。
2.水族箱 每试验组配50~1001容积的水族箱2个,一个作投饲槽、一个作排泄槽。
3. 充氧设备 每水族箱配微型充气泵一台4. 集粪工具 每组配虹吸管1支、漏斗2个及玻璃纤维若干5. 小捞网1个6. 100目分样筛1个7. 100ml 凯式烧瓶2只8. 100ml 容量瓶1个,10ml 容量瓶10个9.刻度移液管l 套。
10.凯氏定氮装置1套。
11.分光光度计一台。
一、 试验饲料的制备试验饲料的组成可用第二章表2—7的典型配方。
但其中的酪蛋白和明胶用优质鱼粉代为简便起见,也可直接使用市售鱼用饲料,经重新粉碎后使用。
全部试验饲料要统—制作。
所有干性原料要经粉碎,并通过100目筛。
化学纯Cr 2O 3,也要经过100目筛。
按每千克干饲料的1%准确称取Cr 2O 3,与少量的干性原料混合,分四级逐步扩大到全部干性饲料组分,充分混合均匀,混合操作可在大白搪瓷盆进行。
因Cr 2O 3为绿色,所以从盆壁上是否留有团状绿色痕迹来判断混合的均匀程度,若有必要,可进行均匀度检查,变异系数要求小于5%。
饱食量:在适宜的条件下,使空腹的鱼虾群一次性吃饱,其摄食量称为饱食量。
摄食率:单位时间(一昼夜)单位体重的鱼虾体的摄食量,称为摄食率。
吸收:是指摄入的饲料经消化系统的物理,化学,微生物消化后被消化道上皮吸收的过程消化性:即饲料被动物消化的性质和程度消化力:即动物的消化能力消化率:动物从食物中所消化吸收的部分占总摄入量的百分比。
评价饲料营养价值重要指标不同动物的消化力不同,其对同一种饲料的消化率也不同最适摄食理论:动物`总是设法获得净可能大的净能摄入量。
所以启示为:饲料颗粒不仅大小合适,而且要均匀。
鱼虾才会摄食较大的颗粒以获得最大的净能摄入量动物的吸收方式:扩散,过滤,主动运输,胞饮作用(最原始,细胞直接吞噬食物微粒)过滤:消化道壁膜可以看作是一种过滤器。
消化管内压足够大时,即行消化鱼类的消化酶:1 蛋白质分解酶`:大部分鱼类的胃能分泌胃蛋白酶和胃酸;胰脏能分泌多种蛋白酶种类如胰蛋白酶,糜蛋白酶2 脂肪分解酶:胰脏是脂肪酶和酯酶的在主要分泌器官3糖类分解酶:主要有淀粉酶和麦芽糖酶。
草食性及杂食性动物比肉食性动物具有更高的糖酶活性影响消化率的因素:(动物,饲料,饲养水平,温度:温度适当增高,酶活性变强,消化率升高)1 动物:a 动物种类b年龄和个体差异如幼龄动物,消化功能不健全c动物的生理状态2 饲料:a饲料种类b化学成分营养物质含量:(1蛋白质含量高,消化率高,有利消化液的分泌和养分的充分消化。
2粗纤维含量高,消化率低3饲料的抗营养因子:是饲料本身含有的或者是从外界进入饲料中的阻碍养分消化的微量成分)各种营养物质间的相互作用,会体现着消化率上。
如氧化脂肪会降低Protein的消化率饲料的加工调质(加工参数),各种方法对饲料养分消化率军产生影响,因种而异(1粉碎:一定范围内,越细,消化率高。
适度的磨碎有利于单胃动物,对饲料的干物质,能量等消化提高2 加热调质温和的加热调质可以使蛋白质变性,抗营养因子失活,利于消化)3饲养管理技术(饲养水平:饲喂量大。
收稿日期:2001-02-135淡水渔业62001年第31卷第3期草鱼对九种饲料的干物质、蛋白质和脂肪的表观消化率罗 莉 林仕梅 叶元土 (西南农业大学水产系,重庆400716)摘要 本试验采用外源指示剂(C r2O 3),测定了草鱼种对玉米、麦麸、次粉、米糠、标粉、小麦、大麦、玉米糟和稻谷九种能量饲料的干物质、粗蛋白和粗脂肪的表观消化率。
试验结果表明:草鱼对九种能量饲料的干物质表观消化率大小顺序为:小麦(88117%)>标粉(79139%)>玉米(77157%)>麦麸(62167%)>玉米糟(62161%)>次粉(61164%)>大麦(59197%)>稻谷(51121%)>米糠(47141%);粗蛋白表观消化率大小顺序为:小麦(87106%)>米糠(76136%)>麦麸(73120%)>次粉(71153%)>玉米糟(70199%)>标粉(67103%)>玉米(641543%)>稻谷(64133%)>大麦(59136%);粗脂肪表观消化率大小顺序为:小麦(82149%)>玉米糟(78132%)>标粉(75122%)>玉米(73109%)>稻谷(58199%)>次粉(53122%)>麦麸(52142%)>大麦(50109%)。
关键词 草鱼 饲料原料 蛋白质 脂肪 消化率消化率是指被动物消化吸收的养分占食入养分的百分率。
无论对饲料原料,还是全价配合饲料,消化率都是评定其营养价值高低的重要参数之一。
在水产养殖业大力发展,和作为我国主要淡水经济鱼类的草鱼,其市场售价日益下降的今天,配制能满足草鱼需要的营养平衡饲料,并尽可能提高配合饲料的可消化性、可利用性,以降低饲料系数和草鱼养殖饲料成本,这便成了众多营养研究者、饲料生产者和养殖户共同关心的问题。
然而,配制营养平衡的饲料的一个重要前提是要了解饲料原料的消化率。
水产动物表观消化率测定方法
水产动物表观消化率测定方法是一种研究定量评价水产动物摄食、消化和吸收能力的评价
技术。
它的优点包括准确性高、简单易行等,已被广泛应用于水产品质和饲料效果的测定。
一般来说,水产动物表观消化率的测定分两步进行:(1)给实验动物进行饲喂,并记录
饲喂量;(2)取试验鱼清洗乾净,然后利用重质平衡法测量鱼体质量及内物质量。
针对水产动物消化率测定,一般采用经典的“组间法”,该方法需要设立多组实验,将每组
实验动物编号,然后饲给实验动物同一种饲料,记录饲喂量和出粪量,并且每隔一段时间(如3-4天)取鱼清洗干净,用干重计测量出鱼体干重,然后计算当前测量体毛的质量,
最后得到该实验鱼群的消化率。
另外,对于新品种,或者对比新饲料配方测定表观消化率,采用经典“加倍步梯法”,此方
法可以节省实验时间,提高实验效率,不仅测定水产动物的表观消化率,而且还可以确定饲料的表观消化率,从而实现健康的食物配给。
总之,水产动物表观消化率测定方法集简单易行、准确可靠等优点,是一种有效的评价水产动物摄食、消化和吸收能力的方法,在与消化系统相关的标准制定过程中具有重要的意义。
大黄鱼的饵料消化吸收与生物利用率研究大黄鱼是一种常见的海水鱼类,其肉质鲜美,营养丰富,深受人们的喜爱。
然而,了解大黄鱼的饵料消化吸收与生物利用率对于饲养管理和鱼类养殖业的发展具有重要意义。
饵料消化吸收是指大黄鱼摄食饵料后,经过消化道的一系列化学和生物过程,将饵料中的营养物质转化为鱼体所需要的能量和生长物质的过程。
在这个过程中,饵料中的蛋白质、脂肪、碳水化合物等营养成分会被分解、吸收,并转化为鱼体所需的能量和生物活性物质。
饵料消化吸收的研究可以从以下几个方面展开:首先,研究消化器官的结构和功能。
大黄鱼的消化道主要包括口腔、食管、胃和肠道等器官。
通过研究这些器官的形态结构、解剖特点和生理功能,可以了解大黄鱼对饵料的处理和利用能力。
其次,研究饵料成分的消化和吸收情况。
饵料中的蛋白质、脂肪、碳水化合物等营养成分在消化道中会经历酶解、吸收等一系列过程。
通过研究饵料成分在不同消化器官中的分解和转化规律,可以了解饵料成分对大黄鱼生长和健康的影响。
另外,研究消化酶的种类和活性。
消化酶是促进饵料消化和吸收的重要因素,包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等。
通过分析不同阶段的大黄鱼消化道中的消化酶的种类和活性变化,可以了解饵料消化吸收过程中酶的作用和调控机制。
此外,研究消化道微生物群落的组成和功能。
消化道微生物对鱼类的饵料消化和营养吸收起着重要作用。
研究大黄鱼消化道微生物群落的组成和功能,可以了解微生物对饵料消化和营养利用的贡献,并为调控饵料消化过程提供理论依据。
最后,研究大黄鱼对不同饵料的利用效率。
不同饵料的成分差异会影响大黄鱼对饵料的消化吸收效率和生物利用率。
通过研究不同饵料在不同阶段的饵料利用效率,可以为合理选择饵料、优化饵料组配提供科学依据。
总之,大黄鱼的饵料消化吸收与生物利用率研究涉及多个方面的内容,从消化器官的结构和功能,饵料成分的消化和吸收情况,消化酶的种类和活性,消化道微生物群落的组成和功能,以及大黄鱼对不同饵料的利用效率等方面进行综合研究。
鲤鱼鱼种对饲料蛋白质和氨基酸的消化率的研究
侯永清
【期刊名称】《饲料工业》
【年(卷),期】1996(17)9
【摘要】本试验以三氧化二铬为指示剂,以无氮日粮为对照,采用粪分析法,研究了鲤鱼鱼种对几种单一饲料的蛋白质和氨基酸的真消化率。
试验结果表明:以三氧化二铬为指示剂,采用粪分析法测定鲤鱼对饲料蛋白质和氨基酸的真消化率的方法是行之有效的方法;酪蛋白和豆粕的蛋白质消化率及氨基酸消化率显著地高于秘鲁鱼粉(P<0.01),前两者之间差异不显著。
【总页数】3页(P18-20)
【关键词】鲤鱼;鱼种;饲料蛋白质;氨基酸;消化率
【作者】侯永清
【作者单位】武汉食品工业学院
【正文语种】中文
【中图分类】S963.811.6
【相关文献】
1.肉毒碱对鲤鱼春片鱼种饲料脂肪消化率的影响 [J], 丛盟盟;吕玲;王绍露;陈勇
2.肉毒碱对鲤鱼春片鱼种饲料总消化率的影响 [J], 陈勇;毕克伍;黄权;张东鸣
3.鲤鱼饲料蛋白质的表观消化率与真消化率 [J], 杨秋玲
4.肉毒碱对鲤鱼夏花鱼种饲料总消化率的影响 [J], 陈勇;吴莉芳;张东鸣;王淑萍
5.鲤鱼种饲料中最适蛋白质含量的研究 [J], 贾志诚;钱启杰;王玉玲;王建华;武金星因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
几种蛋白原料的体外消化率的测定方法的比较摘要:试验分别采用胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法、肉食性鱼类(如鲈鱼)消化道粗酶提取液消化法和草食性鱼类(如草鱼)消化道粗酶提取液消化法测定了酪蛋白、鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉等7种蛋白质原料的体外消化率。
3种测定方法中,鱼粉的消化率差异不显著(P>0.05);豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉用两步法和草鱼消化酶法测定的消化率无显著差异(P>0.05);棉籽粕消化率用两步法测定值高于用消化酶法的测定值,差异极显著(P<0.01);豆粕、菜籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉的消化率用两步法比用鲈鱼消化酶测定的值高,差异极显著(P<0.01);草鱼消化酶法和鲈鱼消化酶法对酪蛋白的消化率无显著差异(P>0.05),而对于豆粕、菜籽粕、棉籽粕、酵母粉和玉米蛋白粉草鱼消化酶法测定值高于鲈鱼消化酶法的测定值,差异极显著(P<0.01)。
结果表明,胃蛋白酶-胰蛋白酶两步体外消化法在测定鱼粉蛋白质消化率时可替代鱼类消化液粗酶消化法,对其它蛋白质原料使用该方法应慎重。
关键词:蛋白质饲料;体外消化率;测定方法消化率是动物从食物中所消化吸收的部分占总摄入量的百分比,是评价饲料营养价值的重要指标之一。
测定饲料消化率主要有两种方法:体外法和体内法。
体内法测定的消化率能够比较真实的反映鱼类对饲料的消化情况。
但体内法测定方法复杂、时间长、费用高,而且对外界环境的要求较高,季节、温度、光照等都会影响消化率测定值。
体外消化法是利用精制的消化酶或研究对象的消化道酶提取液在试管内进行的消化试验,其测定值可近似反映鱼对饲料的消化率。
此法能快速测定原料的相对利用率,为营养师制作配方提供参考[1]。
然而,体外消化法无法反映体内消化的真实情况。
Boisen和Eggum(1991)在胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法中利用标准过滤装置测得饲料蛋白质消化率与鼠和猪的真消化率十分接近,他们认为这种方法测得的蛋白质体外消化率经内源氮校正与回肠末端蛋白质表观消化率高度相关。
建鲤对7种饲料原料中营养物质的表观消化率梁丹妮;姜雪姣;刘文斌;秦钦;夏薇【摘要】本试验旨在研究建鲤(Cyprinus carpio var. Jian)对鱼粉、肉骨粉、豆粕、花生粕、棉籽粕、菜籽粕和玉米干酒糟及其可溶物(DDGS)7种常用饲料蛋白质原料中干物质、粗蛋白质、氨基酸、总磷和总能的表观消化率.营养物质表观消化率采用基础饲料(基础饲料Ⅰ、Ⅱ)和试验饲料(按基础饲料和待测原料7︰3的比例配制)测定,以0.5%的三氧化二铬(Cr2O3)为外源指示剂.选用平均体重为(200.0±4.7) g的建鲤240尾,随机分为8组,每组3个重复,每个重复10尾.从8组中随机选取1组为对照组,饲喂基础饲料;其余为试验组,饲喂试验饲料.试验分为2个阶段,第1阶段(1~4周)采用基础饲料Ⅰ,用于干物质、粗蛋白质、氨基酸和总能表观消化率的测定;第2阶段(5~8周)采用基础饲料Ⅱ,用于总磷表观消化率的测定.结果表明,各试验原料的干物质表观消化率在35.44%~71.10%之间,其中花生粕和豆粕的干物质表观消化率(分别为71.10%和65.15%)显著高于其他原料(P<0.05).各试验原料的粗蛋白质表观消化率在60.31%~88.75%之间,其中豆粕的粗蛋白质表观消化率最高,而最低的为玉米DDGS,并且豆粕和花生粕的粗蛋白质表观消化率显著高于其他原料(P<0.05).本研究中总磷的表观消化率相对较低,最高的为玉米DDGS(38.69%),最低的为肉骨粉(6.52%).从总体上来看,鱼粉、豆粕和花生粕的单个氨基酸及总氨基酸的表观消化率均处在较高水平,而肉骨粉和玉米DDGS的单个氨基酸及总氨基酸的表观消化率均处在较低水平.由此可知,对建鲤而言,豆粕和花生粕是较好的植物性蛋白质原料.【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2010(022)006【总页数】7页(P1592-1598)【关键词】建鲤;蛋白质;氨基酸;总磷;表观消化率【作者】梁丹妮;姜雪姣;刘文斌;秦钦;夏薇【作者单位】南京农业大学动物科技学院,江苏省水产动物营养重点实验室,南京,210095;南京农业大学动物科技学院,江苏省水产动物营养重点实验室,南京,210095;南京农业大学动物科技学院,江苏省水产动物营养重点实验室,南京,210095;江苏省淡水水产研究所,南京,210017;南京农业大学动物科技学院,江苏省水产动物营养重点实验室,南京,210095【正文语种】中文【中图分类】S963随着水产养殖的规模化和集约化,对水产饲料的需求不断扩大。
2龄青鱼对7种饲料原料中营养物质的表观消化率明建华;叶金云;张易祥;谢骏;杨霞;邵仙萍【摘要】本试验旨在研究2龄青鱼对国产鱼粉、蝇蛆粉、玉米蛋白粉、大豆粕、花生粕、棉籽粕和菜籽粕中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、总磷、总能和氨基酸的表现消化率.试验饲料由70%基础饲料和30%待测饲料原料组成,并以0.5%的三氧化二铬(Cr2O3)为外源指示剂.选取平均体重为(190.98±1.81)g的2龄青鱼216尾,随机分成8组,每组3个重复,每个重复9尾鱼.对照组试验鱼饲喂基础饲料,试验组试验鱼随机饲喂1种试验饲料.饲喂1周后采用自排法收集粪便待测.结果表明:7种饲料原料中干物质、粗蛋白质、粗脂肪、总磷、总能和总氨基酸的表观消化率的范围分别为61.68%~84.42%、81.44%~ 93.49%、64.41%~ 97.38%、39.94%~78.74%、70.47%~ 89.52%和83.57%~96.42%.在7种饲料原料中,玉米蛋白粉的于物质和总磷的表观消化率最高,而大豆粕的粗蛋白质、粗脂肪、总能和总氨基酸的表观消化率最高;棉籽粕的干物质、总磷和总能的表观消化率最低,蝇蛆粉的粗蛋白质和玉米蛋白粉的粗脂肪的表观消化率也最低.7种饲料原料中粗蛋白质表观消化率与总氨基酸表观消化率的变化趋势一致,且均以棉籽粕和蝇蛆粉较低.由此可见,2龄青鱼对大豆粕的利用效果最佳,其次是花生粕与国产鱼粉,这二者相当;玉米蛋白粉和菜籽粕也是2龄青鱼较好的植物性蛋白质源,可适量添加用于降低饲料成本;2龄青鱼对棉籽粕和蝇蛆粉中粗蛋白质和总氨基酸的表观消化率均较低,应控制其在饲料中的用量.【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2014(026)001【总页数】9页(P161-169)【关键词】2龄青鱼;饲料原料;营养物质;表观消化率【作者】明建华;叶金云;张易祥;谢骏;杨霞;邵仙萍【作者单位】湖州师范学院生命科学学院,湖州313000;农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室,中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,无锡214081;湖州师范学院生命科学学院,湖州313000;湖州师范学院生命科学学院,湖州313000;农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室,中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,无锡214081;湖州师范学院生命科学学院,湖州313000;湖州师范学院生命科学学院,湖州313000【正文语种】中文【中图分类】S963在水产饲料的生产中,测定养殖动物对饲料原料的表观消化率是评定饲料原料营养价值的重要手段,也是编制营养均衡、成本合理的渔用配合饲料配方的重要步骤[1-2]。
测定鱼类对饲料消化率的一种简易方法
刘炳钦;廖绍龙
【期刊名称】《淡水渔业》
【年(卷),期】1981(000)001
【摘要】研究饲料的营养价值,特别是人工配合饲料,首先必须知道各种饲料的营养成分的种类和含量,仅靠营养分析的结果还不能说明饲料的真正营养效价。
因此需要测定鱼类对饲料的消化率,以正确评价饲料的营养价值.
【总页数】3页(P13-15)
【作者】刘炳钦;廖绍龙
【作者单位】国家水产总局珠江水产研究所
【正文语种】中文
【中图分类】S816
【相关文献】
1.养殖鱼类对干啤酒糟和发酵啤酒糟饲料的表观消化率 [J], 李小霞;柳碧薇;雷小婷;胡文锋;潘庆
2.黄粉虫虫粪在鱼类配合饲料中的消化率测定及应用前景 [J], 张延华;师吉华;马国红;潘晓玲;王爱英;卢红
3.几种饲料原料的猪氨基酸回肠末端表观消化率和真消化率的测定 [J], 王旭;谯仕彦;刘明;王金荣
4.测定鱼类饲料原料营养成分消化率的计算方法 [J], 游文章;雍文岳
5.鸭饲料氨基酸消化率的测定及去盲肠对氨基酸消化率的影响 [J], 沈涛;王康宁
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实验一 鱼类饲料的总消化率及其
蛋白质消化率的测定
一、 实验目的
掌握用外源指示剂Cr 2O 3间接测量鱼、虾饲料消化率的基本方法。
二、原 理
与饲料均匀混合的外源指示剂Cr 2O 3,完全不被动物吸收而随粪便排出。
根据指示剂及蛋白质(或其他营养成分)在食物及粪便中的含量变化,饲料的总消化率和蛋白质的消化率由如下两式给出:
饲料总消化率:D(%)=[1-'B B
] ×100
蛋白质消化率:D(%)=[1- 'A A ×'B B
] ×100
A 、A’分别为饲料粪便中的粗蛋白含量;
B 、B’分别为饲料和粪便中的Cr 2O 3 含量
三、实验材料
1.试验鱼 可根据实际情况选择实验鱼的种类。
但用易驯化、习惯实验环境的鱼类(如金鱼、锦鲤、罗非鱼等)较好。
体重20~25g ,每试验组10尾。
2.水族箱 每试验组配50~1001容积的水族箱2个,一个作投饲槽、一个作排泄槽。
3. 充氧设备 每水族箱配微型充气泵一台
4. 集粪工具 每组配虹吸管1支、漏斗2个及玻璃纤维若干
5. 小捞网1个
6. 100目分样筛1个
7. 100ml 凯式烧瓶2只
8. 100ml 容量瓶1个,10ml 容量瓶10个
9.刻度移液管l 套。
10.凯氏定氮装置1套。
11.分光光度计一台。
一、 试验饲料的制备
试验饲料的组成可用第二章表2—7的典型配方。
但其中的酪蛋白和明胶用优质鱼粉代为简便起见,也可直接使用市售鱼用饲料,经重新粉碎后使用。
全部试验饲料要统—制作。
所有干性原料要经粉碎,并通过100目筛。
化学纯Cr 2O 3,也要经过100目筛。
按每千克干饲料的1%准确称取Cr 2O 3,与少量的干性原料混合,分四级逐步扩大到全部干性饲料组分,充分混合均匀,混合操作可在大白搪瓷盆进行。
因Cr 2O 3为绿色,所以从盆壁上是否留有团状绿色痕迹来判断混合的均匀程度,若有必要,可进行均匀度检查,变异系数要求小于5%。
混合均匀程度决定试验的成败。
平均每组制作200g 饲料。
二、 投饲与粪便采集
把试验鱼置于投饲槽、充气,用试验饲料暂养3天。
每天清理粪便及残饵,并适量换水。
停食数小时后,再一次投足量试验饲料让鱼群饱食。
然后,用捞网把鱼捕到条件完全相同的排泄槽。
开始观察排粪,排粪后及时用虹吸管收取,经玻璃纤维过滤,收集烘干,保存作分析用。
虹吸过程尽量不要把条状粪便弄破。
为了获得可靠的结果,通常要同时作三个重复组,或把排粪后的鱼再移回投饲槽喂饱,再移到排泄槽,再收集粪便,如此重复两次。
但这里仅为了掌握基本方法、收集足够供分析的粪便即可(约300mg 干品)。
三、样品分析
对干燥至恒重的饲料及粪便样品,进行粗蛋白及Cr2O3的定量分析。
粗蛋白分析按生物化学实验中的凯氏定氮法进行。
下面介绍Cr2O3的湿式灰化定量法。
精确称量样品50一l00mg(含Cr2O31—3mg)置于l00ml凯氏烧瓶中,加浓硝酸(比重1.42)5ml,加热氧化约20min,当溶液中产生白色固形物时,停止加热。
放冷后,徐徐注入3ml过氯酸(70%),加热使溶液从绿色经黄色而急变为褐色,再继续加热l0min放冷,以蒸馏水定容至l00ml。
于波长350nm处测量光密度,以蒸馏水作对照。
标准曲线的制定:精确称量5mg分析纯Cr2O3,用与样品一样的方法消化,但最后以蒸馏水定容至10ml,作为母液。
每毫升Cr2O3 0.5mg。
从母液中分别吸取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8相0.9ml于10ml的容量瓶中,用蒸馏水分别定容至l0ml,便得到相当1:l00ml溶液中含Cr2O3为0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0和4.5mg的浓度系列溶液。
同样在350nm处测量其光密度。
根据浓度和光密度值的关系制作标准曲线;并可用回归分析的方法把二者的相关关系建立起来。
根据样品的光密度值在标准曲线L或用回归方程获得样品中Cr2O3的含量。
四、消化率的计算及不同实验组间的结果比较
根据凯氏定氮法测得的饲料及粪便的蛋白质水平,以及以上获得的Cr2O3数据,用上述计算公式,便可靠出饲料的总消化率及蛋白质消化率。
因为不同试验组所用的试验饲料一样,试验鱼及试验条件相似,方法相同,所以其结果有很强的可比性。
各试验组可将试验结果与其他组的结果进行比较,并予讨论。