下载文档原格式
一、实训目的本次实训旨在通过实验操作，使学生掌握亚硝酸盐的测定方法，了解亚硝酸盐在食品中的存在形式及其对人体健康的影响，提高学生的实验技能和数据分析能力。
二、实训时间2023年10月25日三、实训地点化学实验室四、实训仪器与试剂1. 仪器：- 高速离心机- 分光光度计- 电子天平- 磁力搅拌器- 容量瓶（100mL、50mL）- 试管- 移液管（1mL、10mL）2. 试剂：- 亚硝酸钠标准溶液- 对氨基苯磺酸溶液- N-1-萘基乙二胺盐酸盐溶液- 硫酸溶液- 氨水- 食品样品五、实验原理亚硝酸盐在食品中主要存在于腌制肉类、鱼类等加工食品中，其含量对人体健康有重要影响。
本实验采用比色法测定食品中亚硝酸盐的含量。
其原理是：在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，生成的重氮盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成紫红色偶氮染料，通过测定吸光度，可以计算出亚硝酸盐的含量。
六、实验步骤1. 样品处理：- 称取适量的食品样品，加入适量的硫酸溶液，用高速离心机离心分离。
- 取上清液备用。
2. 标准曲线的绘制：- 取一系列不同浓度的亚硝酸钠标准溶液，按照实验步骤进行操作。
- 测定吸光度，以亚硝酸钠浓度（mg/L）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：- 按照实验步骤，对处理后的样品进行测定。
- 测定吸光度。
4. 结果计算：- 根据标准曲线，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
七、实验结果与分析1. 标准曲线：- 通过绘制标准曲线，得出线性回归方程：y = 0.0486x + 0.0013，R² =0.9969。
2. 样品测定结果：- 根据实验结果，样品中亚硝酸盐的含量为2.5mg/kg。
3. 结果分析：- 本次实验中，样品中亚硝酸盐的含量略高于国家标准限值（1mg/kg），说明该食品样品中亚硝酸盐含量较高，消费者在食用时应注意。
八、实验总结1. 通过本次实训，我们掌握了亚硝酸盐的测定方法，了解了亚硝酸盐在食品中的存在形式及其对人体健康的影响。
可编辑修改精选全文完整版实验六流动注射分光光度法测水样中的亚硝酸盐1 实验目的了解流动注射分光光度法的基本原理方法及其实验注意事项；熟练掌握流动注射分光光度法测定水样中的亚硝酸盐的实验操作。
2 实验原理2.1方法原理流动注射分光光度法的基本原理是在把一定体积的试样溶液注入到一个流动着的、非空气间隔的试剂溶液（或水）载流中。
被注入的试样溶液与载流中的试剂混合、反应，在反应盘管中形成一个区域。
进入流通检测器进行测定分析及记录。
在酸性介质中，水中的亚硝酸盐与磺胺反应生成重氮盐，再与盐酸萘乙二胺偶联生成红色染料，于540 nm波长处测定吸光值。
2.2仪器原理FIA 基本流路系统一般包括:载液驱动系统、注入阀或进样器、微型反应器、流通式检测器( 折光计、比色计、紫外/可见分光光度计、离子选择电极、原子吸光光度计、荧光计等) 、信号记录装置[1]。
其中蠕动泵驱动载液以恒定流率流过细微的管路;注入阀将一定体积的样品溶液重现地注入载液中;微型反应器则使注入的样品带在其中适当地分散, 并与载液( 或试剂) 中某些组分进行反应, 生成能使检测器产生适量响应值的产物;检测器和信号记录装置测量和记录下响应值数据。
FIA的三大要素：试样注入：通过进样阀实现控制进样体积或进样时间；试样带受控分散：反应盘管中完成；时间控制的高度再现：由泵和流路转换阀决定可在非平衡状态下检测。
泵：用于驱动载流通过细管；进样阀：重现地定量注入样品；转换阀：进行流路切换较少使用；转换阀：进行流路切换较少使用；反应器（管）：样品带在其中分散并与载流试剂中的组份反应，包括空管式反应器、填充床反应器以及单珠串反应器；检测器：检测样品带在分散过程中的反应情况，包括分子光谱检测器、原子光谱检测器、电化学检测器以及质谱检测器；输出一般为一个峰一次进样。
其特点主要包括：简单、方便、精确、重现、快速、可处理大量样品、样品和试剂用量少、可在平衡和非平衡状态下完成测定、密闭、减少污染和不安全因素。
一、实验目的本实验旨在学习亚硝酸盐的测定方法，了解亚硝酸盐在食品中的存在及其对人体健康的影响。
通过实验，掌握亚硝酸盐的提取、分离和定量分析方法，提高对食品中亚硝酸盐含量的检测能力。
二、实验原理亚硝酸盐（NO2-）是一种常见的食品添加剂，广泛应用于肉制品的加工中，具有发色、防腐和抗微生物作用。
然而，过量的亚硝酸盐摄入对人体健康有害，可能导致急性中毒、慢性疾病甚至癌症。
因此，对食品中亚硝酸盐含量的检测具有重要意义。
本实验采用盐酸萘乙二胺法测定亚硝酸盐含量。
该方法基于亚硝酸盐与对氨基苯磺酸在酸性条件下发生重氮化反应，生成重氮盐，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶合形成玫瑰红色染料。
通过比色法测定染料的吸光度，可以计算出样品中亚硝酸盐的含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 火腿肠样品- 试剂：对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺盐酸盐、盐酸、亚硝酸钠标准溶液等- 仪器：酸度计、分光光度计、离心机、移液器、容量瓶、试管等2. 实验步骤：1. 样品处理：将火腿肠样品剪碎，称取适量，加入蒸馏水溶解，搅拌均匀。
2. 提取：将样品溶液用酸度计调至pH 2.0，加入适量的亚铁氰化钾和乙酸锌，充分混合，静置30分钟，使蛋白质沉淀。
3. 分离：将上层清液转移至离心管中，离心分离蛋白质沉淀。
4. 测定：取一定量的上层清液，加入对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺盐酸盐，充分混合，静置15分钟，使染料形成。
5. 比色：用分光光度计测定染料的吸光度，与标准曲线比较，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
四、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据亚硝酸钠标准溶液的浓度和吸光度，绘制标准曲线。
2. 样品测定：对火腿肠样品进行测定，得到样品中亚硝酸盐的吸光度。
3. 结果计算：根据标准曲线和样品吸光度，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
五、实验讨论1. 实验过程中，酸度对亚硝酸盐的测定结果有较大影响。
实验过程中应严格控制酸度，确保测定结果的准确性。
2. 亚铁氰化钾和乙酸锌在实验中起到沉淀蛋白质和除去脂肪的作用，提高实验的灵敏度。
食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。
过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。
因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。
本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。
实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。
- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。
- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。
实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。
取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。
2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。
得到的溶液即为10%油酸银试剂。
3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。
4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。
5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。
6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。
数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。
标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。
通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。
实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。
2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。
3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。
结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。
这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。
同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。
实验课题：用分光光度法测香肠中亚硝酸盐的含量一、实验人员二、实验目的测定香肠中亚硝酸盐的含量。
三、实验原理亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定。
利用碱性的硼砂将脂肪从样品中分离，利用乙酸锌及亚铁氤化钾使蛋白质变性分离。
试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，利用分光光度法来测定，最大吸收波长为540nm。
根据朗伯比尔定律，并结合工作曲线，可以得到香肠中亚硝酸盐的含量（mg/kg）。
四、试剂和材料除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯水，为GB/T 6682规定的二级水或去离子水。
1、双汇王中王香肠一根（净含量：50g）2、乙酸锌溶液（220g/L）：称取11g乙酸锌，先加1.5mL冰醋酸溶解,用水稀释至50 mL。
3、亚铁氤化钾溶液（106 g/L）:称取5.3 g亚铁氤化钾，用水溶解，并稀释全 50mL。
4、饱和硼砂溶液（50g/L）:称取2.50 g硼酸钠，溶于50mL热水中，冷却后备用。
5、亚硝酸钠标准溶液（10 “g /mL）6、对氨基苯磺酸溶液（1.0%）7、盐酸萘乙二胺溶液（0.3%）五、仪器和设备1、天平：感量为0.1mg和1mg2、研钵3、分光光度计4、电热炉5、50ml烧杯1个、500ml容量瓶1个、50m容量瓶10个、胶头滴管、各个规格的移液管、玻璃棒六、实验步骤（一）试样的预处理：1、取全部，用研钵制成匀浆备用。
2、称取5 g（精确至0.1 g）制成匀浆的试样置于50 mL烧杯中，加12.5 mL 饱和硼砂溶液，搅拌均匀，以70 C左右的水约300 mL将试样洗入500 mL容量瓶中，80^加热15 min，取出置冷水浴中冷却，并放置全室温。
3、在振荡上述提取液时加入5 mL亚铁氤化钾溶液，摇匀，再加入5 mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。
加水至刻度，摇匀，放置30 min,除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤（用移液管吸取中间澄清的部分）。
实验六、奶粉中亚硝酸盐的测定一、实验目的1.掌握样品制备、提取的基本操作技能。
2.进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法。
3.掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法。
二、仪器与试剂1仪器①分光光度计；②比色管、移液管、容量瓶等常用玻璃仪器2试剂①亚铁氰化钾溶液：称取10.6g亚铁氰化钾溶于水，并定容至100ml。
②乙酸锌溶液：称取22.0g乙酸锌，加30ml冰醋酸，溶于水并定容至100ml。
③硼砂饱和溶液：称取5g硼砂溶于100 ml热水中，冷却后备用。
④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100 ml 20%的盐酸中，避光保存。
⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100 ml水中，避光保存。
⑥亚硝酸钠标准溶液：准确称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。
此溶液每毫升相当于200μg的亚硝酸钠；⑦亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL，置于100mL 容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10.0μg亚硝酸钠。
三、原理样品经沉淀分离蛋白质，除去脂肪后，在弱酸的条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应，生成重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合，形成紫红色的的染料，其颜色的深浅与亚硝酸盐的含量成正比，可与标准比较定量。
通过分光光度计比色测定，计算出样品中亚硝酸盐的含量。
四、实验步骤准确称取奶粉2.50克于50ml烧杯中，加硼砂饱和溶液6.3ml，以70℃以上的热水100～150ml将样品搅拌均匀后，全部洗入250ml容量瓶中，放入沸水浴中加热15分钟，取出冷却后，边转动容量瓶边加入亚铁氰化钾溶液2.5ml，摇匀后，再加入乙酸锌溶液2.5ml，以沉淀蛋白质。
然后，加水至刻度，混匀，放置半小时后，弃去上层脂肪，清液用滤纸或脱脂棉过滤，弃去初滤液5～10ml ，滤液备用2测定 吸取上述滤液20ml 于25ml 带塞比色管中，同时吸取0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ml 10.0ug/mL 的亚硝酸钠标准溶液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ug/25mL 的亚硝酸钠）分别置于25ml 比色管中。
中华人民共和国国家标准水质亚硝酸盐氮的测定分光光度法本标准等效采用ISO 6777-1984《水质亚硝酸氮测定分子吸收分光光度法》。
本标准根据我国标准的格式对ISO6777-1984标准技术上稍作修改和补充。
1 适用范围本标准规定了用分光光度法测定饮用水、地下水、地面水及废水中亚硝酸盐氮的方法。
1.1测定上限当试份取最大体积（50 ml）时，用本方法可以测定亚硝酸盐氮浓度高达0.20 mg/L。
1.2最低检出浓度采用光程长为10 mm的比色皿，试份体积为50 ml，以吸光度0.01单位所对应的浓度值为最低检出限浓度，此值为0.003 mg/L。
采用光程长为10 mm的比色皿，试份体积为50 ml，最低检出浓度为0.001 mg/L。
1.3灵敏度采用光成长为10 mm的比色皿，试份体积为50 ml时，亚硝酸盐氮浓度c N=0.20 mg/L,给出的吸光度约为0.67单位。
1.4干扰当试样pH>11时，可能遇到某些干扰，遇此情况，可向试份中加入酚酞溶液（3.12）一滴，边搅拌边逐滴加入磷酸溶液（3.4），至红色刚消失。
经此处理，则在加入显色剂后，体系pH值为1.8±0.3，而不影响测定。
试样如有颜色和悬浮物，可向每100 ml试样中加入2ml氢氧化铝悬浮液（3.9），搅拌，静置，过滤，弃去25 ml初滤液后，再取试份测定。
水样中常见的产生明显干扰的物质有氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和三价铁离子。
2原理在磷酸介质中，pH值为1.8时，试份中的亚硝酸根离子与4-氨基苯磺酰胺（4-aminobenzene sulfonamide）反应生成重氮盐，它再与N-（1-萘基）-乙二胺二盐酸盐[N-(1-naphthyl)-1,2-diaminoethane dihydrochlo-ride)]偶联生成红色染料，在540 nm波长处测定吸光度。
如果使用光程长为10 mm的比色皿，亚硝酸盐氮的浓度在0.2 mg/L以内其呈色符合比尔定律。
泡菜中亚硝酸盐的检验实验报告姓名：学号：实验组员：实验日期：实验原理1.腌制食品中一般都含有一定量的亚硝酸盐，由于亚硝酸盐有害健康，故国家对食品中亚硝酸盐的含量有严格规定。
腌菜中亚硝酸盐的来源。
蔬菜在腌制和贮藏初期，亚硝酸盐含量较低，但由于发酵初期杂菌(肠杆菌科细菌和真菌等)的硝酸盐还原酶作用，蔬菜中大量硝酸盐被转化为亚硝酸盐，使亚硝酸盐含量急剧增加。
随着发酵体系中氧气的减少，乳酸菌的生长导致pH值降低，杂菌的繁殖受限甚至死亡，乳酸菌逐渐演变为优势菌群。
由于乳酸菌代谢产生的乳酸及乳酸菌自身的酶系统，使相当一部分亚硝酸盐被降解，也削弱了还原硝酸盐的能力。
至发酵结束时，亚硝酸盐含量降至最低点，甚至消失。
亚硝酸盐的显色原理。
在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，重氮盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶合形成玫瑰红色染料，产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比，测定样品的吸光值，可大致估算出待检测样品中的亚硝酸盐的含量。
补充标准曲线的制作和使用原理。
原理：在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N萘基乙二胺盐酸盐结合生成玫瑰红溶液 ,利用分光光度计可以测定该溶液的吸光值。
测定出亚硝酸盐标准液的吸光值后 ,结合Excel软件可以拟合出亚硝酸盐标准曲线，得到吸光值对应亚硝酸钠浓度的函数关系。
根据样品显色液的吸光值 ,比对函数，就可以计算出样品中的亚硝酸盐的含量。
步骤：1）用分别取0、0.5ml、1 ml、3 ml、5 ml标准样液，分别加入4.5ml氯化铵、2.5ml60%乙酸、5ml显色液，25ml容量瓶定容到25ml。
2）然后在黑暗中静置25分钟，3）利用分光光度计分别测其在550nm的光照射下的吸光度，以亚硝酸盐的浓度为横轴，吸光度为纵轴，借助excel绘制标准曲线。
实验目的1．学习利用吸光度定量测量物质含量2．学习标准曲线的制作和使用3．直观体验食品检测的流程实验材料和药品泡菜汁、蒸馏水、抽滤装置、分光光度计、氢氧化钠、硫酸锌、亚硝酸钠、氯化铵、乙酸、显色液实验步骤1.制作标准曲线（1）分别取0、0.5ml、1 ml、3 ml、5 ml标准样液，分别加入4.5ml氯化铵、2.5ml60%乙酸、5ml显色液，25ml容量瓶定容到25ml。
分光光度法测亚硝酸盐的实验报告一、实验目的亚硝酸盐是一类无机化合物的总称，常见的有亚硝酸钠和亚硝酸钾。
在食品加工和储存过程中，亚硝酸盐常被用作防腐剂和发色剂。
然而，过量摄入亚硝酸盐对人体健康有潜在危害，可能导致中毒甚至致癌。
因此，准确测定食品、水样等中的亚硝酸盐含量具有重要意义。
本次实验旨在掌握分光光度法测定亚硝酸盐的原理和操作方法，并能够对实验结果进行准确分析。
二、实验原理分光光度法是基于物质对光的选择性吸收而建立的分析方法。
在本实验中，亚硝酸盐在盐酸酸化的条件下与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，然后再与 N(1-萘基)乙二胺盐酸盐偶合生成紫红色的偶氮染料。
该偶氮染料在 538nm 波长处有最大吸收峰，其吸光度与亚硝酸盐的浓度成正比，通过测定吸光度即可计算出亚硝酸盐的含量。
三、实验仪器与试剂1、仪器可见分光光度计电子天平容量瓶（50mL、100mL、500mL）移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）比色管（50mL）玻璃棒烧杯（50mL、100mL、500mL）2、试剂亚硝酸钠标准储备液（500μg/mL）：准确称取 01232g 于硅胶干燥器中干燥 24h 的亚硝酸钠，用水溶解并定容至 500mL。
亚硝酸钠标准使用液（50μg/mL）：吸取 500mL 亚硝酸钠标准储备液于 500mL 容量瓶中，用水稀释至刻度。
对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称取 04g 对氨基苯磺酸，溶于 100mL 20%盐酸中，避光保存。
N(1-萘基)乙二胺盐酸盐溶液（2g/L）：称取 02g N(1-萘基)乙二胺盐酸盐，溶于 100mL 水中，避光保存。
盐酸溶液（20%）：量取 20mL 浓盐酸，用水稀释至 100mL。
四、实验步骤1、标准曲线的绘制分别吸取 000、020、040、060、080、100、150、200mL 亚硝酸钠标准使用液于 50mL 比色管中，各加水至 25mL。
分别加入 2mL 对氨基苯磺酸溶液，摇匀，静置 3-5min。
亚硝酸盐亚硝酸盐（NO2--N）是氮循环的中间产物，不稳定。
根据水循环条件，可被氧化成硝酸盐，也可被还原成氨。
亚硝酸盐可使人体正常的血红蛋白（低铁血红蛋白）氧化成为高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋白在体内输送氧的能力，出现组织缺氧的症状。
亚硝酸盐可于仲胺类反应生成具致癌性的亚硝胺类物质，在pH值较低的酸性条件下，有利于亚硝胺类的形成。
水中亚硝酸盐的测定方法通常采用重氮—偶联反应，使生成红紫色染料。
方法灵敏、选择性强。
所用重氮和偶联试剂种类较多，最常用的，前者为对氨基苯磺酰胺和对氨基苯磺酸，后者为N-（1-萘基）-乙二胺和α-萘胺。
亚硝酸盐在水中可受微生物等作用而很不稳定，在采集后应尽快进行分析，必要时以冷藏抑制微生物的影响。
一、N-（1-萘基）-乙二胺光度法GB7493--87 概述1.方法原理在磷酸介质中，pH值为 1.8±0.3时，亚硝酸盐与对氨基苯磺酰胺反应，生成重氮盐，再与N-（1-萘基）-乙二胺偶联生成红色染料。
在540nm波长处有最大吸收。
2．干扰及消除氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高铁离子有明显干扰。
水样呈碱性（pH≥11）时，可加酚酞溶液为指示剂，滴加磷酸至红色消失。
水样有颜色或悬浮物，可加氢氧化铝悬浮液并过滤。
3．方法的适用范围本方法适用于饮用水、地面水、地下水、生活污水和工业废水中亚硝酸盐的测定。
最低检出浓度为0.003mg/L；测定上限为0.20 mg/L 亚硝酸盐氮。
仪器分光光度计试剂实验用水均为不含亚硝酸盐的水。
（1）无亚硝酸盐的水：于蒸馏水中加少许高锰酸钾晶体，使呈红色，再加氢氧化钡（或氢氧化钙）使呈碱性。
置全玻璃蒸馏器中蒸馏，弃去50ml初馏液，收集中间约70%不含锰的馏出液。
亦可于每升蒸馏水中加1ml浓硫酸和0.2ml硫酸锰溶液（每100ml水中含36.4g Mn.H20），加入1-3ml 0.04%高锰酸钾溶液至呈红色，重蒸馏。
（2）磷酸（ρ=1.70 g/ml）（3）显色剂：于500ml烧杯内，置于250ml水和50ml磷酸，加入20.0g对氨基苯磺酰胺。
一、泡菜制作过程中亚硝酸盐是怎么产生和分解的？1、亚硝酸盐的含量的测定2、泡菜制作过程中微生物的消长规律3、泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量变化规律二、泡菜中亚硝酸盐含量测定中若干问题1、关于亚硝酸盐2、亚硝酸盐中毒机理3、实验目的4、实验原理5、实验试剂6、问题与讨论附：香肠中亚硝酸盐的测定步骤三、泡菜中亚硝酸盐含量测定前样品处理情况分析1、样品处理（浙科版）2、检测亚硝酸盐的步骤注意一、泡菜制作过程中亚硝酸盐是怎么产生和分解的？1、亚硝酸盐的含量的测定原理：亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸和N-l-萘基乙二胺结合形成玫瑰红色化合物。
用比色法可估算亚硝酸盐含量，用分光光度计（光电比色法）可进行定量测定亚硝酸盐含量。
结果：亚硝酸盐的含量变化都表现为先增加后下降的趋势。
2、泡菜制作过程中微生物的消长规律在开始腌制泡菜时，乳酸菌含量很少，坛内有氧环境有利于一些杂菌如硝酸盐还原菌的繁殖，这些细菌可以促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，但随着腌制时间的增加，乳酸菌也大量繁殖，对硝酸盐还原菌产生一定的抑制作用，使其生长繁殖受影响，造成泡菜中亚硝酸盐含量又有所下降。
3、泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量变化规律在腌制过程中，亚硝酸盐的含量随温度升高而增加，使用食盐的浓度对其影响也很大，食盐浓度为5％、温度37℃左右，产生的亚硝酸盐最多。
腌制的2～4天，亚硝酸盐含量有所增加，7～8天含量最高，以后逐渐下降，20天后明显下降。
亚硝酸盐降解的原因是乳酸菌本身具有亚硝酸盐还原酶，但在一般环境中处于较低的水平，随着亚硝酸盐的含量增加，可以诱导亚硝酸盐还原酶的合成，使亚硝酸盐得以分解。
二、泡菜中亚硝酸盐含量测定中若干问题教材研究：亚硝酸盐含量的测定通常有种方法，教材中出现的是分光光度法测定亚硝酸盐，即用盐酸萘乙二胺分光光度法测定亚硝酸盐的含量。
该方法具有应用广泛、灵敏度高、选择性好、准确度高、分析成本低、操作简便、快速的特点。
一、关于亚硝酸盐亚硝酸盐俗称“硝盐”，是含氮化合物的一类。
食品中亚硝酸盐的测定实验报告一、实验目的实验旨在通过化学方法测定食品中亚硝酸盐的含量，以了解食品的安全性，保障公众健康。
亚硝酸盐是一种常见的食品添加剂，适量添加有助于保持食品的色泽和口感，但过量添加或使用不当可能导致人体健康问题。
因此，准确测定食品中亚硝酸盐的含量非常重要。
二、实验原理亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定。
试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,外标法测得亚硝酸盐含量。
三、试剂（一）、试剂配制（以下试剂均为实验室协助配置）1、亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取106.0g亚铁氰化钾,用水溶解,并稀释至1000mL。
2、乙酸锌溶液(220g/L):称取220.0g乙酸锌,先加30mL冰乙酸溶解,用水稀释至1000mL。
3、饱和硼砂溶液(50g/L):称取5.0g硼酸钠,溶于100mL热水中,冷却后备用。
4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL20%盐酸中,混匀,置棕色瓶中,避光保存。
5、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100mL水中,混匀,置棕色瓶中,避光保存。
（二）、标准溶液配置1、亚硝酸钠标准溶液(200μg/mL,以亚硝酸钠计):准确称取0.1000g于110 ℃~120 ℃干燥恒重的亚硝酸钠,加水溶解,移入500mL容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。
2、亚硝酸钠标准使用液(5.0μg/mL):临用前,吸取2.50mL亚硝酸钠标准溶液,置于100mL容量瓶中,加水稀释至刻度。
说明：其中亚硝酸钠标准溶液为实验室配置，同学们需要自行配置亚硝酸钠标准使用液。
四、仪器和设备1、天平:感量为0.1mg和1mg2、分光光度计3、滤纸4、100mL容量瓶1个5、200mL容量瓶1个6、带塞50mL比色管8根（其中6管做标曲，1管是牛奶样品，1管是样品）7、移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）五、实验步骤1、样品预处理：液体乳样品:称取试样90g(精确至0.001g),置于250mL具塞锥形瓶中,加12.5mL饱和硼砂溶液,加入70 ℃左右的水约60mL,混匀,于沸水浴中加热15min,取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。
(六)亚硝酸盐氮、硝酸盐氮分类号：W6-5一、填空题1．亚硝酸盐是氮循环的中间产物，在水系中很不稳定，在含氧和微生物作用下，可氧化成，在缺氧或无氧条件下被还原为。
①答案：硝酸盐氨直至氮2．水中亚硝酸盐的主要来源为生活污水中的分解。
此外化肥、酸洗等工业废水和中亦可能有亚硝酸盐排入水系。
①答案：含氮有机物农田排水3．分光光度法测定水中亚硝酸盐氮时，水样应用玻璃瓶或塑料瓶采集。
采集后要尽快分析，不要超过h，若需短期保存(1～2d)，可以在每升水样中加入40mg 并于2～5℃保存。
①答案：24 氯化汞4．分光光度法测定水中亚硝酸盐氮时，若水样有悬浮物和颜色，需向每100m1试样中加入2ml ，搅拌，静置，过滤，弃去25ml初滤液后，再取试样测定。
①答案：氢氧化铝悬浮液5．分光光度法测定水中硝酸盐氮时，水样采集后，应及时进行测定。
必要时，应加硫酸使pH ，于4℃以下保存，在h内进行测定。
②答案：＜2 246．酚二磺酸分光光度法测定水中硝酸盐氮，当水样中亚硝酸盐氮含量超过0.2mg／L时，可取100m1水样，加入1m1 0.5mol／L的，混匀后，滴加至淡红色，保持15min不褪为止，使亚硝酸盐氧化为硝酸盐，最后从硝酸盐氮测定结果中减去亚硝酸盐氮量。
②答案：硫酸溶液0.02mol／L高锰酸钾溶液7．目前的自动在线检测仪测定水中硝酸盐氮多使用法和法。
③答案：紫外电极8．紫外分光光度法适用于和中硝酸盐氮的测定。
③答案：清洁地表水未受明显污染的地下水9．紫外分光光度法测定硝酸盐氮时，采用和进行处理，以排除水样中大部分常见有机物、浊度和Fe3+、Cr6+对测定的干扰。
③答案：絮凝共沉淀大孔中性吸附树脂二、判断题1．水中硝酸盐是在有氧环境下，各种形态的含氮化合物中最稳定的氮化合物，亦是含氮有机物经无机化作用的最终分解产物。
( )答案：正确2．利用重氮偶联反应测定水中亚硝酸盐时，明显干扰物质为氯胺、氯、硫代硫酸盐、聚磷酸钠和高(三价)铁离子。
亚硝酸盐的测定(格里斯试剂比色法)
一、原理
样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N-1-萘基乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。
二、试剂
氯化胺缓冲液：1L容量瓶中加入500mL水，准确加入20.0mL盐酸，振荡混匀，准确加入50mL氢氧化铵，用水稀释至刻度。
必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9.6~9.7。
硫酸锌溶液（0.42mol/L）：称取120g硫酸锌（ZnSO4·7H2O），用水溶解，并稀释至1000mL。
（国标方法用）。
乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。
10.6%亚铁氰化钾溶液。
氢氧化钠溶液(20g/L)：称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1 L。
对氨基苯磺胺酸溶液：称取10g对氨基苯磺酸，溶于700 mL水和300 mL 冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。
N-1-萘基乙二胺溶液（1g/L）：称取0.1gN-1-萘基乙二胺，加60%乙酸溶解并稀释至100mL，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。
显色剂：临用前将N-1-萘基乙二胺溶液（1g/L）和对氨基苯磺胺酸溶液等体积混合。
亚硝酸钠标准溶液：准确称取250.0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加100mL氯化铵缓冲液，加水稀释至刻度混匀，在4℃避光保存。
此溶液每毫升相当于500μg的亚硝酸钠。
亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液1.00mL，置于100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度此溶液每毫升相当于5.0μg亚硝酸钠。
三、操作方法
1、样品处理（本实验用）
称取约10.00g（粮食取5g）经绞碎混匀细碎样品，置于研钵中，加5-10mL 氢氧化钠溶液(20g/L)，充分研磨成浆状，加约70mL水转移入200 mL容量瓶中，慢慢加入5 mL乙酸锌和5 mL亚铁氰化钾溶液，混匀。
置60℃水浴中加热10min，
取出后冷至室温，加水至刻度混匀。
放置0.5h ，干燥滤纸过滤，弃去初滤液20 mL ，收集滤液备用。
1、样品处理（国标中步骤）
称取约10.00g （粮食取5g ）经绞碎混匀样品，置于打碎机中，加70mL 水和12mL 氢氧化钠溶液(20g/L)，混匀，用氢氧化钠溶液(20g/L)或盐酸溶液（6mol/L ）调样品pH=8，定量转移至200 mL 容量瓶中，加10 mL 硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色深沉，再补加2~5 mL 氢氧化钠，混匀。
置60℃水浴中加热10min ，取出后冷至室温，加水至刻度混匀。
放置0.5h ，滤纸过滤，弃去初滤液20 mL ，收集滤液备用。
2、测定
1)亚硝酸盐标准曲线的制备：吸取0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL 亚硝酸钠标准使用液（相当于0，2.5，5，10，15，20，25μg 亚硝酸钠），分别置于25mL 带塞比色管中。
于标准管中分别加入4.5mL 氯化铵缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加入5.0mL 显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min ，用1cm 比色杯（灵敏度低时可换2cm 比色杯），以零管调节零点，于波长550nm 处测吸光度，绘制标准曲线。
低含量样品以制备低含量标准曲线计算，标准系列为：吸取0，0.4，0.8，
1.2，1.6，
2.0mL 亚硝酸钠标准使用液（相当于0，2，4，6，8，10μg 亚硝酸钠）。
2)样品测定：吸取10.0mL 上述滤液于25mL 带塞比色管中，于管中分别加入
4.5mL 氯化铵缓冲液，加2.5mL60%乙酸后立即加入
5.0mL 显色剂，加水至刻度，混匀，在暗处静置25min ，用1cm 比色杯（灵敏度低时可换2cm 比色杯），以零管调节零点，于波长550nm 处测吸光度。
同时做试剂空白.
3、计算
1000110001
22⨯⨯⨯=V V m m X X ——样品中亚硝酸盐的含量，mg/kg ；
M 1——样品质量，g ；
M 2——测定用样液中亚硝酸盐的质量，μg 。
V
——样品处理液总体积，mL；
1
——测定用样液体积，mL。
V
2
结果的表述：报告算术均值的二位有效数。
