实验六 食品中亚硝酸盐含量测定

肉制品中亚硝酸盐的含量检测摘要：在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料 ,建立了一种简易快速的测定食品中微量亚硝酸盐的方法。

分光光度法抗干扰能力强，根据朗伯-比耳定律能较快地测定自制食品中香肠中亚硝酸盐的含量。

关键字：亚硝酸盐亚硝酸盐测定引言亚硝酸盐是一种有毒物质，半致死量为22mg/kg，对于体重60kg的人来说是1.32g。

亚硝酸盐与蛋白质分解产物在酸性条件下发生反应，易产生亚硝胺类致癌物。

胃中的酸碱度适宜亚硝胺的形成。

亚硝胺类化合物在腌肉、香肠、熏肉、鱼干、虾皮、鱿鱼丝等动物性食品中含量较高，有强烈的致胃癌作用。

在胃酸不足的情况下，胃中细菌繁殖使食物中原本无毒的硝酸盐还原成亚硝酸盐，更会加大胃癌的危险。

一、亚硝酸盐的相关性质1亚硝酸盐的性质护色剂又称呈色剂或发色剂，是食品加工中为使肉与肉制品呈现良好的色泽而适当加入的化学物质。

发色剂在食品中的作用：(1)可发色作用；(2)抑菌作用；(3)产生风味。

2中毒后症状过量亚硝酸盐进入人体，会氧化血液中的血红蛋白为高铁血红蛋白，后者无携氧功能，导致组织缺氧，引起肠原性青紫症，皮肤青紫是本病的特征，尤以口唇青紫最为普遍。

口服亚硝酸盐10分钟至3小时后，可出现头晕、恶心、呕吐等症状。

严重者出现意识丧失、昏迷、呼吸衰竭，甚至死亡。

二．亚硝酸盐含量测定（α-萘胺法）2.1 实验原理自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与α-萘胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。

其颜色的深度与样液中亚硝酸含量成正比，可比色测定。

反应式如下： N H 2SO 3H N +N SO 3H NO 2-H +O H 2+++ NSO 3H N NH 2N +N SO 3H +NH 2肉制品中亚硝酸盐含量==50150040100010001⨯⨯⨯⨯m X （mg/kg ） 式中：X 为由测得的吸光度什在标准曲线上对应的亚硝酸钠质量浓度（μg/mL ）；m 为样品质量（g ）。

2.测定 2.测定 吸取上述滤液40ml 50ml容量瓶中 同时吸取0.0 40ml于 容量瓶中， 0.0、 吸取上述滤液40ml于50ml容量瓶中，同时吸取0.0、 0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸 0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸 钠标准使用液（相当于0.0 1.0、2.0、3.0、4.0、 0.0、 钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠 的亚硝酸钠） 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠）分别置于 50ml容量瓶中 各加水至25ml 容量瓶中， 25ml处 50ml容量瓶中，各加水至25ml处。在样品管及标准管 中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml 0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml， 中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml，混匀后静置 分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2% 0.2%盐 3～5分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2%盐 酸萘乙二胺溶液2ml 加水至刻度，摇匀，静置15 2ml， 15分 酸萘乙二胺溶液2ml，加水至刻度，摇匀，静置15分 钟后， 1cm的比色皿 以零管调节零点， 的比色皿， 钟后，用1cm的比色皿，以零管调节零点，于波长 538nm处 测吸光度， 538nm处，测吸光度，绘制标准曲线并查出待测液的 亚硝酸盐含量。 亚硝酸盐含量。
40 250
—测定时吸取样品液的体积与样品定容体 测定时吸取样品液的体积与样品定容体 积之比。 积之比。
六、注意事项 1.盐酸萘乙二胺有致癌的作用，使用时注意安全。 1.盐酸萘乙二胺有致癌的作用，使用时注意安全。 盐酸萘乙二胺有致癌的作用 2.显色后稳定性与室温有关， 2.显色后稳定性与室温有关，一般显色温度为 显色后稳定性与室温有关 15～30℃时 20～30分钟内比色为好 15～30℃时，在20～30分钟内比色为好。

对未来研究的展望
01
深入研究影响因素
未来研究可进一步探讨食品加工、保存过程中影响亚硝酸盐含量的各种
因素，为优化食品加工工艺和储存条件提供理论依据。
02 03
开发快速检测方法
针对现有测定方法存在的操作繁琐、耗时较长等问题，未来可研究开发 更加快速、简便的亚硝酸盐含量检测方法，以满足现场快速检测的需求 。
结果展示
03
将处理后的数据以表格、图表等形式展示，便于直观比较和分
析。
结果分析与讨论
样品间比较
比较不同样品间的亚硝酸盐含量差异，分析可能的原因。
与标准值比较
将测定结果与国家标准或行业标准进行比较，评估样品的合规性 。
结果可靠性分析
根据实验方法、操作过程等因素，分析结果的可靠性。
误差来源及改进措施
06 结论与展望
实验结论总结
成功建立测定方法
本研究成功建立了准确、可靠的 食品中亚硝酸盐含量的测定方法 ，为食品安全监管提供了有力支 持。
验证方法准确性
通过对实际样品进行检测，验证 了本测定方法的准确性和实用性 ，表明该方法可用于实际生产和 监管中的亚硝酸盐含量著差异，可能与 食品加工方式、保存条件等因素 有关。
试剂
包括显色剂、缓冲液、掩 蔽剂等，用于优化实验条 件和提高测定准确性。
实验仪器与设备
分光光度计
用于测定吸光度，从而 计算亚硝酸盐含量。
恒温水浴锅
用于控制实验温度，保 证反应在恒定温度下进
行。
离心机
用于分离样品中的固体 和液体成分，便于后续
测定。
移液器及吸头
用于准确移取液体样品 和标准溶液。
实验原理与方法
第二季度
第三季度

亚硝酸盐的测定(格里斯试剂比色法)一、原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与N-1-萘基乙二胺偶合形成紫红色染料，与标准比较定量。

二、试剂氯化胺缓冲液：1L容量瓶中加入500mL水，准确加入20.0mL盐酸，振荡混匀，准确加入50mL氢氧化铵，用水稀释至刻度。

必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9.6~9.7。

硫酸锌溶液（0.42mol/L）：称取120g硫酸锌（ZnSO4·7H2O），用水溶解，并稀释至1000mL。

（国标方法用）。

乙酸锌溶液：称取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL。

10.6%亚铁氰化钾溶液。

氢氧化钠溶液(20g/L)：称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1 L。

对氨基苯磺胺酸溶液：称取10g对氨基苯磺酸，溶于700 mL水和300 mL 冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。

N-1-萘基乙二胺溶液（1g/L）：称取0.1gN-1-萘基乙二胺，加60%乙酸溶解并稀释至100mL，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。

显色剂：临用前将N-1-萘基乙二胺溶液（1g/L）和对氨基苯磺胺酸溶液等体积混合。

亚硝酸钠标准溶液：准确称取250.0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500mL容量瓶中，加100mL氯化铵缓冲液，加水稀释至刻度混匀，在4℃避光保存。

此溶液每毫升相当于500μg的亚硝酸钠。

亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液1.00mL，置于100 mL 容量瓶中，加水稀释至刻度此溶液每毫升相当于5.0μg亚硝酸钠。

三、操作方法1、样品处理（本实验用）称取约10.00g（粮食取5g）经绞碎混匀细碎样品，置于研钵中，加5-10mL 氢氧化钠溶液(20g/L)，充分研磨成浆状，加约70mL水转移入200 mL容量瓶中，慢慢加入5 mL乙酸锌和5 mL亚铁氰化钾溶液，混匀。

置60℃水浴中加热10min，取出后冷至室温，加水至刻度混匀。

实验项目食品中亚硝酸盐的测定
按照工作过程咨询、计划、实施、检查、评价五个步骤设计实验项目，通过情景模拟，设计任务及问题，使学生尽可能自主完成实验项目。

模拟情景：某食品公司通过工艺改进生产了一批酱腌菜和肉制品，现委托对其重要卫生指标亚硝酸盐进行分析检测，请对所送检样品亚硝酸盐含量进行分析。

任务：
1、亚硝酸盐含量是酱腌制品及肉制品监测的重要卫生指标，请查阅GB2760亚硝酸盐在不同产品中的最大限量值。

2、请查阅并下载亚硝酸盐分析的国家标准，了解其分析方法，并根据实验室条件选择和确定实验方案。

3、对照国家标准，列出所需仪器和试剂。

4、依照国家标准，设计分析操作流程图。

5、在提取亚硝酸的试样匀浆中，为何添加饱和硼砂溶液，过滤是为何要弃去粗滤液？
6、为何要显色反应需3—5min？
7、如果样品溶液的吸光度不在工作曲线线性范围，应如何处理？
8、为保证测定结果准确性，操作中应注意哪些环节？
9、编写亚硝酸盐检验的原始记录表，记载原始数据（注意数据记录及运算规则），并对检验数据进行分析（精密度等）；
10、撰写检验报告。

食品中亚硝酸盐含量的测定
一、实验目的 1.掌握样品制备、提取的基本操作技能。 1.掌握样品制备、提取的基本操作技能。 掌握样品制备 2.进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法。 2.进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法。 进一步熟练掌握分光光度计的结构和使用方法 3.掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法。 3.掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法。 掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理和方法 二、实验原理 样品经沉淀分离蛋白质，除去脂肪后， 样品经沉淀分离蛋白质，除去脂肪后，在弱酸的条 件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应， 件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应，生成 重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合， 重氮化合物，再与盐酸萘乙二胺偶合，形成紫红色的
2.测定 2.测定 吸取上述滤液40ml 50ml容量瓶中 同时吸取0.0 40ml于 容量瓶中， 0.0、 吸取上述滤液40ml于50ml容量瓶中，同时吸取0.0、 0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸 0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸 钠标准使用液（相当于0.0 1.0、2.0、3.0、4.0、 0.0、 钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠 的亚硝酸钠） 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠）分别置于 50ml容量瓶中 各加水至25ml 容量瓶中， 25ml处 50ml容量瓶中，各加水至25ml处。在样品管及标准管 中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml 0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml， 中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml，混匀后静置 分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2% 0.2%盐 3～5分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2%盐 酸萘乙二胺溶液2ml 加水至刻度，摇匀，静置15 2ml， 15分 酸萘乙二胺溶液2ml，加水至刻度，摇匀，静置15分 钟后， 1cm的比色皿 以零管调节零点， 的比色皿， 钟后，用1cm的比色皿，以零管调节零点，于波长 538nm处 测吸光度， 538nm处，测吸光度，绘制标准曲线并查出待测液的 亚硝酸盐含量。 亚硝酸盐含量。

一、实验目的本实验旨在学习亚硝酸盐的测定方法，了解亚硝酸盐在食品中的存在及其对人体健康的影响。

通过实验，掌握亚硝酸盐的提取、分离和定量分析方法，提高对食品中亚硝酸盐含量的检测能力。

二、实验原理亚硝酸盐（NO2-）是一种常见的食品添加剂，广泛应用于肉制品的加工中，具有发色、防腐和抗微生物作用。

然而，过量的亚硝酸盐摄入对人体健康有害，可能导致急性中毒、慢性疾病甚至癌症。

因此，对食品中亚硝酸盐含量的检测具有重要意义。

本实验采用盐酸萘乙二胺法测定亚硝酸盐含量。

该方法基于亚硝酸盐与对氨基苯磺酸在酸性条件下发生重氮化反应，生成重氮盐，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶合形成玫瑰红色染料。

通过比色法测定染料的吸光度，可以计算出样品中亚硝酸盐的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 火腿肠样品- 试剂：对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺盐酸盐、盐酸、亚硝酸钠标准溶液等- 仪器：酸度计、分光光度计、离心机、移液器、容量瓶、试管等2. 实验步骤：1. 样品处理：将火腿肠样品剪碎，称取适量，加入蒸馏水溶解，搅拌均匀。

2. 提取：将样品溶液用酸度计调至pH 2.0，加入适量的亚铁氰化钾和乙酸锌，充分混合，静置30分钟，使蛋白质沉淀。

3. 分离：将上层清液转移至离心管中，离心分离蛋白质沉淀。

4. 测定：取一定量的上层清液，加入对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺盐酸盐，充分混合，静置15分钟，使染料形成。

5. 比色：用分光光度计测定染料的吸光度，与标准曲线比较，计算出样品中亚硝酸盐的含量。

四、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据亚硝酸钠标准溶液的浓度和吸光度，绘制标准曲线。

2. 样品测定：对火腿肠样品进行测定，得到样品中亚硝酸盐的吸光度。

3. 结果计算：根据标准曲线和样品吸光度，计算出样品中亚硝酸盐的含量。

五、实验讨论1. 实验过程中，酸度对亚硝酸盐的测定结果有较大影响。

实验过程中应严格控制酸度，确保测定结果的准确性。

2. 亚铁氰化钾和乙酸锌在实验中起到沉淀蛋白质和除去脂肪的作用，提高实验的灵敏度。

食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。

过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。

因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。

本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。

实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。

- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。

- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。

实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。

取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。

2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。

得到的溶液即为10%油酸银试剂。

3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。

4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。

5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。

6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。

数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。

标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。

通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。

实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。

2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。

3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。

结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。

这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。

同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。

测 定 步 骤
样品处理
样品测定：取25ml比色管，依次加入
样品
标 准 曲 线
1
2
0
1
2
3
4
5
标准溶液（ml）
0
0.4
0.8
1.2
1.6
2.0
亚硝酸钠（ug）
0
2
4
6
8
10
样品滤液（ml）
10.0
10.0
NH4Cl （ml）
4.5
60%乙酸（ml）
2.5
显色剂（ml）
加乙酸后立即加5.0ml显色剂
食品中亚硝酸盐限量指标GB2762-2005
食品
限量（NaNO2计）（mg/kg）
粮食（大米、面粉、玉米）
3
蔬菜
4
鱼类
3
肉类
3
蛋类
5
酱腌菜
20
乳粉
2
食盐（以NaCl计）
2
食品中亚硝酸盐含量测定
实验目的： 熟悉食品中亚硝酸盐含量的卫生标准 掌握食品中亚硝酸盐含量测定的基本方法 实验原理：格里斯试剂比色法
食品中亚硝酸盐含量测定
食物中亚硝酸盐的来源
肉类：肉品加工时过量添加硝酸盐与亚硝酸盐 蔬菜： 硝态氮肥施用过多的蔬菜：甜菜、莴苣、菠菜及萝卜、菠菜、芹菜、大白菜、小白菜、圆白菜、生菜、韭菜、甜菜、菜花、萝卜叶、灰菜、芥菜等－－一般摄入并无大碍 儿童等敏感人群胃肠机能紊乱、贫血、蛔虫症等消化功能欠佳，肠道内细菌将硝酸盐转化为亚硝酸盐 隔夜熟菜、霉变腐烂蔬菜 暴腌菜：尤其是加盐量少于12%、气温高于20℃腌制7～8天后达到高峰，一般腌后20天下降 苦井水：硝酸盐转化，尤其是在并在不洁器具中放置过久 误食：误作食盐或食碱

实验4食品中亚硝酸盐测定（盐酸萘乙二胺法）一、实验原理制品中加入的亚硝酸盐产生的亚硝基与肌红蛋白反应，生产色泽鲜红的亚硝基肌红蛋白，使肉制品有美观的颜色。

同时亚硝酸盐也是一种防腐剂，可抑制微生物的增殖。

由于蛋白质代谢产物中仲胺基与亚硝酸反应能够生成具有很强毒性和致癌性的亚硝胺，因此，亚硝酸盐的使用量及在制品中的残留量均应按标准执行。

亚硝酸盐的测定方法主要是重氮偶合比色法，此外可与荧光胺偶合，测定其荧光吸收强度，或衍生后用气相色谱法测定。

自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下，与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与盐酸2—萘乙二胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。

其颜色的深度与样品种亚硝酸含量成正比，故可比色测定。

二、试剂和器材①饱和硼砂溶液：5g硼酸钠溶于100mL热的重蒸水中，冷却备用。

②亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水，并稀释至1000mL。

③乙酸锌溶液：称取220g乙酸锌，加30mL冰醋酸溶于水，并稀释至1000mL。

④果蔬抽提液：溶解50g氯化汞和50g氯化钡于1000mL重蒸水中，用浓盐酸调整到pH值为1。

⑤氢氧化铝乳液：溶解125g硫酸铝于1000mL重蒸水中，滴加氨水使氢氧化铝全部沉淀。

用蒸馏水反复洗涤，真空抽滤，直至洗液分别用氯化钡溶液检验不发生浑浊。

取下沉淀物，加适量重蒸水使之呈薄糨糊状，捣拌均匀备用。

⑥0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20%的盐酸溶液中，闭关保存。

⑦0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL重蒸水中。

⑧亚硝酸钠标准溶液（5微克每毫升）：精确称取0.1000g亚硝酸铵，以重蒸水定容到500mL。

再吸取此溶液25mL，以重蒸水定容到1000mL，此工作液每毫升含亚硝酸钠5微克。

分光光度计，组织捣碎机。

三、试验步骤1、样品处理果蔬类样品用组织捣碎机打浆。

称取适量浆液（视式样中硝酸盐含量而定，如青刀豆取10g，桃子、菠萝取30g），置于500mL容量瓶中。

⑦亚硝酸钠标准使用溶液：临用前，吸取亚硝酸钠 标准溶液5.00 ml, 置于100 ml容量瓶中，加水稀释 至刻度。此溶液每ml相当于10ug亚硝酸钠。
四、实验步骤
1.样品处理 称取经绞碎并混合均匀的样品20克于100ml烧杯中， 加硼砂饱和溶液40ml，搅拌均匀后，以70℃以上的热 水100～150ml将样品全部洗入250ml容量瓶中，放入沸 水浴中加热15分钟，取出冷却后，边转动容量瓶边加 入亚铁氰化钾溶液20ml，摇匀后，再加入醋酸锌溶液 20ml，以沉淀蛋白质。然后，加水至刻度，混匀，放 置半小时后，弃去上层脂肪，清液用滤纸或脱脂棉过 滤，弃去初滤液5～10ml，滤液备用。
2.测定 吸取上述滤液40ml于50ml容量瓶中，同时吸取0.0、 0.1、0.2、0.3、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml亚硝酸 钠标准使用液（相当于0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 8.0、12.0、16.0、20.0ug的亚硝酸钠）分别置于 50ml容量瓶中，各加水至25ml处。在样品管及标准管 中分别加入0.4%对氨基苯磺酸溶液4ml，混匀后静置 3～5分钟，然后又在各管及标准管中分别加入0.2%盐 酸萘乙二胺溶液2ml，加水至刻度，摇匀，静置15分 钟后，用1cm的比色皿，以零管调节零点，于波长 538nm处，测吸光度，绘制标准曲线并查出待测液的 亚硝酸盐含量。
④0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺 酸，溶于100 ml 20%的盐酸中，避光保存。
⑤0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺, 溶于100 ml水中，避光保存。
⑥亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000g于硅胶干 燥器中干燥24小时亚硝酸钠，加水溶解移入500 ml容 量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200ug亚 硝酸钠。

食品中亚硝酸盐的测定实验报告一、实验目的实验旨在通过化学方法测定食品中亚硝酸盐的含量，以了解食品的安全性，保障公众健康。

亚硝酸盐是一种常见的食品添加剂，适量添加有助于保持食品的色泽和口感，但过量添加或使用不当可能导致人体健康问题。

因此，准确测定食品中亚硝酸盐的含量非常重要。

二、实验原理亚硝酸盐采用盐酸萘乙二胺法测定。

试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,外标法测得亚硝酸盐含量。

三、试剂（一）、试剂配制（以下试剂均为实验室协助配置）1、亚铁氰化钾溶液(106g/L):称取106.0g亚铁氰化钾,用水溶解,并稀释至1000mL。

2、乙酸锌溶液(220g/L):称取220.0g乙酸锌,先加30mL冰乙酸溶解,用水稀释至1000mL。

3、饱和硼砂溶液(50g/L):称取5.0g硼酸钠,溶于100mL热水中,冷却后备用。

4、对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL20%盐酸中,混匀,置棕色瓶中,避光保存。

5、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶于100mL水中,混匀,置棕色瓶中,避光保存。

（二）、标准溶液配置1、亚硝酸钠标准溶液(200μg/mL,以亚硝酸钠计):准确称取0.1000g于110 ℃~120 ℃干燥恒重的亚硝酸钠,加水溶解,移入500mL容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀。

2、亚硝酸钠标准使用液(5.0μg/mL):临用前,吸取2.50mL亚硝酸钠标准溶液,置于100mL容量瓶中,加水稀释至刻度。

说明：其中亚硝酸钠标准溶液为实验室配置，同学们需要自行配置亚硝酸钠标准使用液。

四、仪器和设备1、天平:感量为0.1mg和1mg2、分光光度计3、滤纸4、100mL容量瓶1个5、200mL容量瓶1个6、带塞50mL比色管8根（其中6管做标曲，1管是牛奶样品，1管是样品）7、移液管（1mL、2mL、5mL、10mL）五、实验步骤1、样品预处理：液体乳样品:称取试样90g(精确至0.001g),置于250mL具塞锥形瓶中,加12.5mL饱和硼砂溶液,加入70 ℃左右的水约60mL,混匀,于沸水浴中加热15min,取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。

食物亚硝酸盐测评报告尊敬的读者，本次对食物中的亚硝酸盐进行测评的报告分析如下：1. 实验目的：本次实验的目的是对食物中的亚硝酸盐含量进行测试，以确保其符合相关的安全标准。

亚硝酸盐是一种常见的食品添加剂，用于防止细菌滋生并增强食物的颜色、味道和质感。

然而，高含量的亚硝酸盐可能会对人体健康造成不良影响，因此其含量需要被严格控制。

2. 实验方法：为了测试食物中的亚硝酸盐含量，我们采用了一种常规的分析方法。

首先，我们选取了不同种类的食物样本，如鱼类、肉类和蔬菜等。

然后，我们使用化学试剂来与食物样本中的亚硝酸盐发生反应，并根据反应的程度来确定亚硝酸盐的含量。

最后，我们使用仪器设备对反应结果进行定量分析，并得出食物中的亚硝酸盐含量。

3. 实验结果：根据我们的实验结果，我们发现不同食物样本中的亚硝酸盐含量有所不同。

鱼类和肉类样本中的亚硝酸盐含量较高，而蔬菜样本中的含量较低。

这可能是因为鱼类和肉类在生鲜保存过程中更容易产生亚硝酸盐，而蔬菜则相对稳定。

4. 结论与建议：通过本次实验，我们得出的结论是，食物中的亚硝酸盐含量需要被注意和控制。

消费者在购买食物时应选择符合相关安全标准的产品，并尽量减少食用高含量的亚硝酸盐食物。

此外，食品生产商也应加强对食品加工过程中亚硝酸盐的合理使用和控制。

其可以通过采用较低的亚硝酸盐添加剂浓度、增加原料的新鲜度和加强食品卫生管理来减少亚硝酸盐的含量。

总之，食物中亚硝酸盐含量的测试是确保食品安全的重要环节，需要得到关注和重视。

只有通过严格控制亚硝酸盐含量，我们才能保证食品的质量和食品安全对消费者的重要性。

希望本次食物亚硝酸盐测评报告能对您有所帮助。

谢谢阅读！此致，敬礼。

亚硝酸盐的测定实验报告亚硝酸盐的测定实验报告引言：亚硝酸盐是一种常见的无机化合物，广泛存在于自然界和生活中的各种环境中。

它可以通过多种途径进入人体，对人体健康造成潜在的威胁。

因此，准确测定亚硝酸盐的含量对于环境监测和食品安全至关重要。

本实验旨在通过一种简单、快速且准确的方法测定亚硝酸盐的含量。

实验方法：实验所需材料有：亚硝酸钠溶液、硫酸、硫酸铁、硫酸钴、硫酸钡。

首先，取一定量的待测液体样品，加入适量的硫酸铁和硫酸钴，使其与亚硝酸盐发生反应生成深蓝色络合物。

然后，用硫酸钡沉淀法将络合物沉淀下来，通过称重的方式确定亚硝酸盐的含量。

实验结果：经过实验测定，得到了待测液体样品中亚硝酸盐的含量为X mg/L。

讨论：本实验采用的方法是一种经典的亚硝酸盐测定方法，其原理是利用亚硝酸盐与硫酸铁和硫酸钴反应生成深蓝色络合物，然后用硫酸钡沉淀法将络合物沉淀下来。

这种方法简单易行，且准确度较高。

然而，由于实验条件和操作的不同，测定结果可能存在一定的误差。

在实际应用中，亚硝酸盐的测定对于环境保护和食品安全具有重要意义。

亚硝酸盐是一种常见的水污染物，其来源主要包括化肥、农药、工业废水等。

高浓度的亚硝酸盐会对水生生物产生毒性影响，同时也会对人体健康造成潜在威胁。

因此，通过准确测定亚硝酸盐的含量，可以帮助我们评估水体的污染程度，并采取相应的措施进行治理。

此外，亚硝酸盐还存在于食品中，特别是含有动物蛋白质的食品。

当含有亚硝酸盐的食品与胃酸反应时，会生成亚硝酸，进而与胃酸中的胆红素反应生成致癌物质亚硝基胆红素。

因此，对食品中亚硝酸盐含量的测定对于食品安全至关重要。

准确测定食品中亚硝酸盐的含量可以帮助我们评估食品的安全性，并采取相应的措施保护消费者的健康。

结论：通过实验测定，得到了待测液体样品中亚硝酸盐的含量为X mg/L。

本实验采用的方法简单、快速且准确，适用于亚硝酸盐含量的测定。

亚硝酸盐的测定对于环境保护和食品安全具有重要意义，可以帮助我们评估水体和食品的安全性，保护人体健康。

食品中亚硝酸盐测定实验(总2页)-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除实验4 食品中亚硝酸盐测定（盐酸萘乙二胺法）一、实验原理制品中加入的亚硝酸盐产生的亚硝基与肌红蛋白反应，生产色泽鲜红的亚硝基肌红蛋白，使肉制品有美观的颜色。

同时亚硝酸盐也是一种防腐剂，可抑制微生物的增殖。

由于蛋白质代谢产物中仲胺基与亚硝酸反应能够生成具有很强毒性和致癌性的亚硝胺，因此，亚硝酸盐的使用量及在制品中的残留量均应按标准执行。

亚硝酸盐的测定方法主要是重氮偶合比色法，此外可与荧光胺偶合，测定其荧光吸收强度，或衍生后用气相色谱法测定。

自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下，与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与盐酸2—萘乙二胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。

其颜色的深度与样品种亚硝酸含量成正比，故可比色测定。

二、试剂和器材①饱和硼砂溶液：5g硼酸钠溶于100mL热的重蒸水中，冷却备用。

②亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾溶于水，并稀释至1000mL。

③乙酸锌溶液：称取220g乙酸锌，加30mL冰醋酸溶于水，并稀释至1000mL。

④果蔬抽提液：溶解50g氯化汞和50g氯化钡于1000mL重蒸水中，用浓盐酸调整到pH值为1。

⑤氢氧化铝乳液：溶解125g硫酸铝于1000mL重蒸水中，滴加氨水使氢氧化铝全部沉淀。

用蒸馏水反复洗涤，真空抽滤，直至洗液分别用氯化钡溶液检验不发生浑浊。

取下沉淀物，加适量重蒸水使之呈薄糨糊状，捣拌均匀备用。

⑥0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100mL20%的盐酸溶液中，闭关保存。

⑦0.2%盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100mL重蒸水中。

⑧亚硝酸钠标准溶液（5微克每毫升）：精确称取0.1000g亚硝酸铵，以重蒸水定容到500mL。

再吸取此溶液25mL，以重蒸水定容到1000mL，此工作液每毫升含亚硝酸钠5微克。

食品中亚硝酸盐的测定
（生物03班 C 组 梁炜珊 欧阳健 茹艺）
一、实验步骤：
1、样品处理：称取5g 度样置于50ml 烧杯，加入12.5ml 硼砂饱和液混匀，70℃左右，约300ml 的水将试样洗入500ml 容量瓶中，沸水洛15min ，冷却，边转动边加5ml 亚铁氰化钾，摇匀5ml 醋酸锌，沉淀蛋白质，加水至刻度摇匀放置0.5h ，除去上层脂肪，滤纸过滤得到清液弃去，得到30ml 初滤液备用。

2、加样：
3
二、实验结果 1、实验数据：
2、计算结果：
我们组测得标准曲线如图，得出一次函数公式y = 0.1366x - 0.0023，且测出待测滤液的吸光度是0.092，得出滤液中含有的相当亚硝酸标准溶液体积0.69ml,即3.45ug,再根
据计算公式
2
1V V =
6
1，X=
1000
2
1100⨯⨯
⨯V V m C ，最后算得试样中亚硝酸盐含量X=0.414。

课程：生物产品分析姓名：曹龙刚学号：09229****实训项目六食品中亚硝酸盐含量的测定一、实验目的（1）熟悉掌握样品制备，提取的基本操作技能；（2）进一步学习并熟练地掌握分光光度计的使用方法和技能；（3）学习盐酸萘乙酸二胺比色法测定亚硝酸盐的原理及操作要点。

二、实验原理样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对安吉苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，其最大吸收波长为550nm，可测定吸光度并标准比较定量分析。

三、试剂1、亚铁氰化钾溶液：称取106克K4Fe9(CN)5·3H2O溶于水后，稀释至1000毫升。

2、乙酸锌溶液：称取220克Zn(CH2C00)2·2H20，加30毫升冰乙酸溶于水，并稀释至1000毫升。

3、饱和硼砂溶液：称取5克 Na2B07·10H20)，溶于100毫升热水中。

4、0.4％对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶于100毫升20％的盐酸中。

5、0.2％盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中。

6、亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，加水溶解移入500毫升容量瓶中，并稀释至刻度。

此溶液每毫升相当于200微克亚硝酸钠。

7、亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。

四、仪器可见分光光度计，50ml容量瓶，移液管五、方法步骤1.样品处理：称取10.0g经绞碎混匀的火腿肠，置于50ml烧杯中，加8ml硼砂饱和液，搅拌均匀，然后一面转动一面加入3ml亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入3ml乙酸锌溶液，以70℃左右约 100ml水将火腿肠洗入500ml容量瓶内，水浴15min,冷却，加水至刻度，摇匀，放置30min，用滤纸过滤清液，弃去初滤液30ml，滤液备用。

2.测定吸取40ml上述滤液于50ml容量瓶中，另吸取0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5、2.0、2.5ml亚硝酸钠应用液，分别置于9个50ml容量瓶中。