下载文档原格式
微生物的实验室培养一、教学目标(一)知识与技能了解有关培养基的基础知识;掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术(二)过程与方法分析实验思路的确定和形成的原因,分析实验流程,对比前面的实验设计,归纳共性,分析差异,增加印象(三)情感、态度与价值观:形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神二、学情分析学生基础较差,对教材理解力较为困难,因此授课应注重基础知识的把握。
三、重点难点教学重点:培养基的分类、成分及用途及无菌技术的操作教学难点:无菌技术的操作四、教学过程活动1【导入】导入【PPT】用不同微生物不同菌落颜色制造出来的有生命的艺术品(微生物的美)什么是菌落?什么是培养基?【PPT】自制艺术培养基、有杂菌的培养基简单说明消毒、灭菌一、培养基的配制:【问题】实验室中需要培养基去培养我们想要的微生物,如何评价培养基的制作是否合格?PPT呈现几个固体培养基图片:①倒平板溅到壁上的培养基②有杂菌菌落的培养基学生分析原因,教师总结:1、水、碳源、氮源、无机盐等营养物质是否符合微生物的生理习性。
(如自养微生物提供无机碳源、固氮微生物提供无机氮源等等)2、倒平板时不要溅到壁上,在酒精灯火焰旁进行且动作要快3、培养基灭菌情况如何(未接种的培养基在恒温箱中培养1-2d 后无菌落生长)4、培养基的放置方式(倒置原因)(课前已将培养基配制并灭菌完毕)活动2【活动】平板划线法接种培养基制作合格后,如何将微生物接种到培养基上?本实验的目的是为了获得某种微生物的单个菌落,也就是纯化某种微生物。
(回顾微生物艺术品的图片,给学生点提示)(一)平板划线法:PPT呈现实验步骤,某些步骤后带有问题,学生边做实验边思考:(实验前让学生检查实验器材)实验前提示:1.酒精灯火焰和火焰周围1-2cm范围分别有什么作用;2.板书划线方法。
(教师可演示)①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环,并打开酵母菌的菌种试管的棉塞。
课题1 微生物的实验室培养-人教版选修1 生物技术实践教案教学目标•了解微生物实验室培养的基本原理和方法•学习操作无菌实验的技能•熟悉使用化学试剂和实验器材的方法和注意事项教学重点学生能够熟练地进行微生物实验室培养和无菌实验操作，掌握实验过程的基本方法和注意事项。
教学难点如何正确进行微生物实验室培养和无菌实验，保证实验的准确性和安全性。
教学过程一、实验目的和原理1.实验目的：了解微生物实验室培养的基本原理和方法，掌握无菌实验操作技巧，学会使用化学试剂和实验器材。
2.实验原理：微生物实验室培养是把微生物放在适宜的环境中，使其得到营养、生长和繁殖的过程，一般有两种方法：液体培养和固体培养。
无菌实验是指在无微生物干扰和污染的条件下进行实验操作，通常需要采用灭菌和消毒等技术。
二、实验器材和试剂•实验器材：培养皿、试管、移液管、显微镜等。
•试剂：琼脂、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、碘酒、70%酒精等。
三、实验步骤1.实验前准备：清洗试管、培养皿等实验器具，准备所需试剂和培养物。
2.培养基制备：称取适量的琼脂和磷酸盐缓冲液，加入蒸馏水，加热至琼脂完全溶解，然后进行灭菌消毒。
3.杂菌检测：将准备好的培养基倒在培养皿上，放置在恒温箱中，观察是否有杂菌的生长。
4.微生物接种：采用无菌技术，将培养物移植至培养基表面和内部，标明不同的培养条件和试验目的。
5.培养条件：培养箱中的温度、湿度和光照条件要根据不同的微生物种类进行调节和控制。
6.观察和记录：观察微生物在培养基上的生长情况和形态特征，进行记录和统计分析。
7.鉴定和鉴别：采用显微镜等检测技术，进行微生物的鉴定和鉴别，以确定其种类和特性。
四、实验注意事项1.操作过程中要注意使用无菌技术，避免微生物污染。
2.实验室要保持干净卫生，经常清洗和消毒实验器材和环境。
3.对于具有毒性的试剂，要注意正确配制和储存，避免误用和事故发生。
4.操作结束后，要清洗和消毒实验器材和实验环境，保证实验室的安全和卫生。
教学准备1. 教学目标了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术2. 教学重点/难点无菌技术的操作3. 教学用具4. 标签教学过程微生物生存的环境和营养物质一.培养基：思考：微生物“吃”什么？碳源、氮源、水、无机盐1.基本成分：自养微生物CO2、CO32-、HCO3-无机碳源：⑴碳源有机碳源：牛肉膏、蛋白胨等异养微生物NH4＋、NO3-（为硝化细菌提供N源和能源）⑵氮源有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含CHON的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源微生物生存的环境和营养物质一.培养基：碳源、氮源、水、无机盐1.基本成分：维生素、碱基等（生长因子）2.特殊营养：（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）3.pH、氧气的需求：4.种类：物理性质：液体培养基固体培养基化学成分：天然培养基合成培养基牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。
5. 配制原则⑴目的明确：根据微生物的种类、培养目的选择原料自养型：不加碳型（CO2碳源）异养型：⑵营养全面、浓度适宜、比例恰当加入缓冲剂⑶适宜的pH值：细菌偏碱，真菌偏酸防止外来杂菌的污染二.无菌技术：1.消毒与灭菌：强烈的理化方法，杀死所有微生物（包括芽孢、孢子）;较为温和理化方法，杀死部分有害菌体（不包括芽孢、孢子）思考请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。
如果需要，请选择合适的方法。
（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手2.无菌范围：操作者的手、衣着消毒实验用具灭菌实验操作过程酒精灯旁操作二.大肠杆菌的纯化培养：㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基㈡纯化大肠杆菌：1.纯化大肠杆菌的方法：平板划线法和稀释涂布平板法⑴平板划线法：划3个平板（重复实验）1个不划线（空白对照）⑵稀释涂布平板法课题成果评价（一）培养基的制作是否合格如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。
《微生物的实验室培养》教学设计-优秀教案2.1《微生物的实验室培养》一、基础知识(一）培养基人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。
1.根据外观的物理状态,培养基的种类包括培养基和培养基等。
在液体培养基中加入凝固剂后，制成琼脂固体培养基。
微生物在固体培养剂表面生长，形成肉眼可见的。
2.根据培养基中化学成分的不同，可分为培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）和培养基。
培养基是通过加入准确称量的高纯度化学试剂与蒸馏水配制而成的培养基，如培养细菌用的葡萄糖铵盐培养基。
合成培养基的优点是化学成分及其含量明确、实验的可重复性好，缺点是配制繁琐，成本较高。
3.按照培养基的用途，培养基可分为基础培养基、培养基和培养基。
选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以不需要的微生物生长，所需要的微生物的生长，培养、分离出特定微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入；选择培养金黄色葡萄球菌，可在培养基加入；若在培养基中加入，即可抑制细菌和放线菌的生长，将真菌分离出来；无氮培养基不含氮元素，可用于选择能的细菌）4.培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分。
异养微生物只能利用（有机物、无机物）作碳源，也是能源。
5.在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供________的条件。
（二）无菌技术1.获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①对实验操作的、操作者的衣着和手进行清洁和。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在____________________附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_________________相接触。
2.消毒和灭菌（1）消毒是指使用____________________________________仅杀死物体表面或_________的部分微生物（不包括______和_______）。
人教版高中生物选修一专题2课题1微生物的实验室培养教学案含解析.微生物的实验室培养1.培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质。
2．消毒的目的是杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
3．实验室常用煮沸消毒法、巴氏消毒法和使用紫外线或化学药剂进行消毒，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌等。
4．固体培养基的配制过程为：计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板。
5．微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
6．长期保存菌种可以采用甘油管藏法。
一、培养基1．概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。
2．种类：(按物理性质分)3．营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、无菌技术1．获取纯净培养物的方法.消毒灭菌较为温和强烈物体表面或内部的部分微生物物体内外所有的微生物不能能(2)常用方法：[连线]三、大肠杆菌的纯化培养1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(1)操作步骤：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板(2)倒平板的方法及注意事项：①请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：丙→乙→甲→丁。
②甲、乙、丙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
③丁中的操作需要等待平板冷却凝固才能进行。
2．纯化大肠杆菌(1)纯化原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。
.(2)接种方法：①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。
..(3)培养：将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37_℃恒温箱中，培养12.h和24.h后，分别观察、记录。
四、菌种的保存[连线]1．不同培养基的具体配方不同，但一般都含(..)A．碳源、磷酸盐和维生素B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素解析：选C.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还应考虑pH、特殊营养物质及O2等条件。
2.1微生物的实验室培养教案（人教版选修1）•课标要求进行微牛物的分离和培养。
用大肠杆菌为材料进行平面培养，分离菌落。
•课标解读1.了解有关培养基的基础知识。
2.进行无菌技术的操作。
3.进行微牛物的培养。
•教学地位本课题介绍了最基本的微牛物技术，是开展其他两个课题的基础。
只有掌握了本课题所介绍的基本技术，才能完成本专题的其他课题。
同时，本课题小学习的无菌操作技术也有助于学习“植物组织培养技术”。
培养基的配置、微牛物的分离都是微牛物相关实验的必备操作技术。
•教法指导1.对于培养基的教学，首先介绍培养基的分类，在介绍液体培养基和固体培养基吋，教师可提供实物或图片，以加深学牛印象，并比较二者呈现不同物理状态的原因。
根据教材屮培养基配方的实例，以资料分析的形式，让学牛结合必修1屮“构成细胞的元素”这一•角度来分析培养基小为什么需要具备这些基本成分。
2.无菌技术的教学，首先应该结合学牛的牛活经验，让学牛意识到在我们H常牛活的环境屮，微牛物无处不在，在微牛物的培养过程屮，极有可能将环境屮的微牛物带入培养物屮，由此强调无菌操作的重耍性。
无菌操作贯穿整个微牛物实验屮，无论是培养基的配置、微牛物的接种，还是微牛物的培养，每--步都要注意无菌操作，熟练、规范的掌握无菌操作技术是成功培养微牛物的关键。
3.常用的消毒、灭菌的方法部分的教学，可先让学生阅读相关内容，然后建立比较表格，通过比较，理解并记忆消毒和灭菌的区别、二者的适用范围及具体操作方法。
可通过教材的旁栏思考题进行检测、巩固。
•新课导入建议专题1学习的传统发酵技术，所用的微牛物来自材料自身携带或者空气，教师可介绍工业发酵技术，所利用的微牛物是优良的菌种，而且是经过培养、纯化的菌种，然后设问：如何培养微生物？如何保证所使用的微生物屮没有混入其他微牛物？对人体健康有害的微牛物如何防止其扩散？这些问题不必给出答案，通过这些问题可引入本课题的学习。
•教学流程设计学牛课前预习：阅读教材比3 20,填写【课前自主导学】，完成“思考交流1、2”。
高中生物 2.1微生物的实验室培养导学案新人教版选修11、掌握培养基的配制、分装方法,简述有关培养基的基础知识。
2、说出灭菌和消毒的概念及两者的区别。
3、简述常用的消毒与灭菌方法。
4、掌握实验室灭菌方法及技术,进行无菌技术操作。
预学案一、培养基1、概念:人们按照微生物对①营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质叫培养基。
可分为液体培养基和②固体培养基。
2、营养构成:各种培养基一般都含有水、③碳源、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长对④pH 、特殊营养物质以及氧气的要求。
二、无菌技术1、获得纯净培养物(1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行⑤清洁和消毒。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行⑥灭菌。
(3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在⑦酒精灯火焰附近进行。
(4)实验操作时应避免⑧已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
2、消毒和灭菌(1)消毒是指使用较为⑨温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部⑩一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。
常用的方法有煮沸消毒法和巴氏消毒法。
(2)灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物。
常用的方法有:灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。
三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。
四、纯化大肠杆菌1、微生物接种最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
2、平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
3、稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
探究案知识点一:培养基1、培养基的组成成分有哪些?你知道培养微生物时,除必需的营养成分外,还需要怎样的条件?2、培养基的分类依据有哪些?分为哪些种类?3、如何区分选择性培养基、鉴别培养基?分别有何作用?4、配制培养基需要遵守哪些原则?知识点二:无菌技术与大肠杆菌的纯化培养1、请你为以下器皿或材料选择恰当的灭菌方法。
新人教版生物选修1课题1《微生物的实验室培养》学案【课程目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作基础知识一、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
【补充2】培养基包括哪些营养成分：碳源、氮源、水、无机盐、生长因子等，蔗糖是提供碳源的，也就是提供能源的，琼脂是凝固剂氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一)获得纯净培养物的关键是，具体操作如下： 1．对实验操作的、操作者的和进行。
2．将用于微生物培养的、和等器具进行。
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
(二)消毒和灭菌1．消毒是指。
常用的方法有、、消毒法。
2．灭菌是指。
常用的方法有：、、灭菌。
分别适用于那些用具？〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止实验操作----大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。
高中生物 2.1微生物的实验室培养导学案1新人教版选修1一、学习目标：1、了解有关培养基的基础知识2、掌握无菌操作技术3、了解纯化大肠杆菌的基础知识二、学习重点、难点：了解有关培养基的基础知识；掌握无菌操作技术三、学法指导：小组交流合作一对一检查通关四、自主学习一基础知识1、培养基（1）培养基的种类包括培养基和培养基等。
（2）培养基的化学成分一般都含有、、、四类营养成分，（3）在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对、以及等的要求。
例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加；培养霉菌时需要将培养基的PH调至；培养细菌时需要将培养基的PH调至；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件2、无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是。
避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：① ② ③ ④ （2）消毒是指灭菌是指（3）实验室常用的消毒方法是，此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用、等。
常用的灭菌方法有、、，此外，实验室里还用或进行消毒。
二实验操作1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤：→ → → →倒平板（2）倒平板的过程【思考】⑴培养基灭菌后，需要冷却到50左右，才能用来倒平板。
你用什么方法来估计培养基的温度？⑵为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？⑶平板冷凝后，为什么要将平板倒置？⑷在倒平板的过程中，如果不小心瘵培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？2、纯化大肠杆菌（1）微生物接种的方法中最常用的是和。
平板划线法是指。
稀释涂布平板法是指。
（2）平板划线的操作步骤如下：① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦【思考】①为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？②在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？③在作第二次以及其后的划线操作是赤什么总是从上一次划线的末端开始划线？（3）系列稀释操作步骤：① ② ③ （4）涂布平板操作步骤：① ② ③ ④ 三菌种的保存为了保持菌种的纯净，需对菌种进行保藏。
《微生物的实验室培养》教学设计1 教学目标确立知识目标：列举培养基的种类等基础知识，说明培养基配方及作用；概述无菌技术。
能力目标：尝试培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。
熟练规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。
情感态度价值观方面：体验制作牛肉膏蛋白胨培养基，培养纯化大肠杆菌的方法；实验过程，体验实验操作领悟实验原理，交流实验体会；形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
2、教学重难点：无菌技术的操作。
由于微生物在自然界分布广泛，在实验室培养微生物除了要为微生物提供合适的营养和环境条件外，还需要确保其他微生物无法混入。
因此，实验时针对培养基、操作者、用于培养的器皿、接种工具等使用不同的方法进行消毒灭菌处理。
在“无菌”的条件下接种和培养，获得纯净培养物，才能成功培养微生物。
可见无菌技术是微生物培养过程的关键。
教学中可联系医疗和生活实际深入理解无菌技术。
3 教学实施建议（1）拟定实验计划微生物实验室培养需要在无菌条件下进行，实验技术要求高。
对本课题教学组织采用实验探究的模式，注重微生物实验基本操作和技能的训练。
采用课上和课下统筹安排，理论和实践并举，在操作中理解原理，利用原理指导实践。
基于此，对本实验教学安排如下：实验计划教学目标教师活动学生活动设计意图第一课时学习有关培养基的知识和无菌技术提供相关材料，进行基础知识介绍明确实验原理通过讲解，设计表格进行知识归纳第二课时学习有关制备牛肉膏、蛋白胨固体培养基的方法；进行制备牛肉膏、蛋白胨培养基、倒平板操作提供实验器具，和培养基配方，指导学生操作进行实验培养基和器皿灭菌，倒平板操作尝试配制培养基及倒平板第三课时进行实验室纯化大肠杆菌操作介绍平板划线和稀释涂布平板原理，并指导学生接种操作利用各小组自己配制的培养基在无菌条件下接种大肠杆菌操作尝试利用牛肉膏蛋白胨培养基接种大肠杆菌并纯化培养第四课时培养观察、展示成果，分析原因和课题延伸组织交流和介绍菌种保藏观察记录结果并进行分析观察并分析成功和失败原因，拓展视野（2）理解实验原理：实验原理是实验所遵循的科学道理，具体地说它是进行实验设计和操作的理论依据。
课题1微生物的实验室培养【课程目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作基础知识一、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
b5E2RGbCAP〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
p1EanqFDPw二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：(一>获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行。
2．将用于微生物培养的、和等器具进行。
DXDiTa9E3d3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
(二>消毒和灭菌1．消毒是指。
常用的方法有、、消毒法。
2．灭菌是指。
常用的方法有：、、灭菌。
分别适用于那些用具？〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止RTCrpUDGiT实验操作----大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。
一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：、、、、。
〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？2．倒平板：待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是：①在火焰旁右手拿，左手；②使锥形瓶的瓶口；③左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖。
④待平板冷却凝固后，将平板。
〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？〖思考8〗倒平板的目的是什么？〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么？，试管为什么要加塞棉塞？二、纯化大肠杆菌微生物接种：最常用的是法和法。
另外还有穿刺接种和斜面接种等。
1．平板划线法是的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
其操作步骤是：①将在酒精灯火焰上灼烧直至。
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。
③将菌种试管口通过火焰达到的目的。
④将冷却的接种环伸入到。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环，盖上皿盖，不要划破培养基。
⑦灼烧接种环，冷却后从划线。
重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。
注意不要将相连。
5PCzVD7HxA⑧将平板培养。
〖思考11〗取菌种前灼烧接种环的目的是什么？为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是？jLBHrnAILg最后灼烧接种环的目的是？在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是？2．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将进行培养。
当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。
xHAQX74J0X系列稀释操作：①取盛有mL水的无菌试管6支，编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。
③从101倍液中吸取mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。
依此类推。
〖思考12〗系列稀释操作的注意事项是什么？〖思考13〗涂布平板操作的步骤是什么？结果分析与评价1 培养未接种培养基的作用是什么？，若有菌落形成，说明什么？2 在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？3 培养12h和24h后的菌落大小？；菌落分布位置？原因？〖思考14〗在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因？〖思考15〗频繁使用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什么？典例精析【例1】下列关于微生物营养的说法，正确的是……………………………………( >A ．同一种物质不可能既作碳源又作氮源B ．凡是碳源都能提供能量c ．除水以外的无机物仅提供无机盐 D ．无机氮源也能提供能量【例2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌………( >LDAYtRyKfE A ．接种针、手、培养基 B ．高压锅、手、接种针C ．培养基、手、接种针D ．接种针、手、高压锅 【例3】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是………………………( >A ．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B ．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯C ．待培养基冷却至50℃左右时进行倒平板D．待平板冷却凝固约5～10 min后将平板倒过来放置【例4】下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是A.防止杂菌污染B.消灭杂菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌D.灭菌必须在接种前◇◇知识拓展3．消毒与灭菌的区别消毒是一种采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。
例如一些常用的对皮肤、水果、饮用水进行药剂消毒的方法；对啤酒、牛奶、果汁和酱油等进行消毒处理的巴氏消毒法，等等。
Zzz6ZB2Ltk 灭菌是采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。
例如各种高温灭菌措施等。
dvzfvkwMI1 4．微生物的营养类型异养微生物生命活动所需要的能源，主要靠有机物氧化分解释放能量，碳源是异养微生物的主要能源物质，碳源对异养微生物来说，不仅可为机体提供构成细胞物质，而且为机体提供完成整个生理活动所需能量。
某些异养微生物也可以光能作为能源，例如红螺菌，在环境中没有有机物的条件下，它可以利用光能，把环境中的CO2合成为自身有机物；在有有机物存在的条件下，可以利用有机物进行生长，其代谢类型为兼性营养型细菌。
依微生物生长所需碳源的性质以及所需能源，将微生物的营养类型归纳如下：rqyn14ZNXI各类微生物所需碳源和能源的比较在生产实践和社会生活中，我们可以利用某些微生物碳源的特殊性来解决环境污染、粮食危机等问题。
我们可以利用某些细菌、放线菌、酵母菌以石油作为碳源的原理，消除石油污染。
运用某些细菌可以分解、利用氰化物、酚等有毒物质的原理处理有毒物质。
研究开发以纤维素、石油、CO2等作为碳源和能源的工业微生物，缓解粮食危机。
EmxvxOtOco自养微生物和异养微生物类型的划分，主要依靠能否以CO2作为生长的主要或唯一碳源，而不是决定于氮源。
例如异养微生物最常用的氮源是无机氮源中的铵盐和硝酸盐。
SixE2yXPq5【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
6ewMyirQFL【补充】培养基的配制原则：①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。
②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。
例如：碳氮比4∶1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3∶1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。
kavU42VRUs③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。
知识拓展题<1）该培养基所含的碳源是-----------------，其功能是---------------------------。
y6v3ALoS89<2）该培养基所含的氮源是-----------------，其功能是---------------------------。
M2ub6vSTnP<3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是---------------------------。
0YujCfmUCw<4）该细菌在同化作用上的代谢类型是---------------<5）该培养基用来鉴别的细菌是<）A霉菌 B大肠杆菌 C 酵母菌 D 乳酸菌基础自测一、选择题、1．下列有关培养基的叙述正确的是……( >A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B．培养基只有两类：液体培养基和固体培养基C．固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌2.不同培养基的具体配方不同，但一般都含( >A．碳源、磷酸盐和维生素 B．氮源和维生素C．水、碳源、氮源和无机盐 D．碳元素、氧元素、氢元素、氮元素3．获得纯净培养物的关键是……………( >A．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B．接种纯种细菌C．适宜环境条件下培养 D．防止外来杂菌的入侵4．下列常用的无菌操作中错误的是……( >A．用酒精擦拭双手 B．用氯气消毒水源 c．实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D．玻璃器皿(吸管、培养皿>可用酒精擦拭5．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( >A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板6．有关倒平板的操作错误的是…………( >A．将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B．使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰c．将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D．等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7．有关平板划线操作正确的是…………( >A．使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B．打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞c．将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D．最后将平板倒置，放人培养箱中培养8．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是…( >A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C．再放在适宜条件下培养 D．结果都可在培养基表面形成单个的菌落9．涂布平板操作需要用到………………( >A．接种环、滴管、酒精灯 B．接种环、移液管、酒精灯C．涂布器、移液管、酒精灯 D．涂布器、接种环、酒精灯10．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是……………( >A．对比观察培养基有没有被微生物利用 B．对比分析培养基是否被杂菌污染C．没必要放人未接种的培养基 D．为了下次接种时再使用11关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量12．作为自养生物唯一碳源的是<）A糖类 B 石油 C 二氧化碳 D 花生粉饼13．大肠杆菌的代谢类型是<）A 自养需氧 B异氧严格厌氧 C异养需氧 D 异养兼性厌氧14．菌种保藏应控制的条件是<）<1）湿度<2）低温<3）干燥<4）有光<5）隔绝空气<6）适当有氧A<1）<4）<6） B<2）<3）<6） C<1）<5）<6） D<2）<3）<5）15．下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是<）A含碳有机物 B蛋白胨 C含碳无机物 D花生粉饼等天然物质16．平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是<）A利于大肠杆菌的接种 B防止杂菌污染C利于培养的冷却 D 防止皿盖冷却水倒流入培养基17。
