肠道杆菌-志贺菌属
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志贺菌属简介志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌,通称痢疾杆菌。
根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。
CDC分类系统(1989)将生化性状相近的A、B、C群归为一群,统称为A、B、C血清群,将鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均阳性的宋内志贺菌单列出来。
我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢-最为常见。
(一)生物学特性1.形态与染色:革兰阴性短小杆菌,(2~3)μm×(0.5~0.7)μm,无荚膜,无芽胞,无鞭毛,有菌毛。
2.培养特性:需氧或兼性厌氧,液体培养基中呈浑浊生长,在普通琼脂平板和SS培养基上形成中等大小、半透明的光滑型菌落,宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落医学|教育网搜集整理。
3.生化反应:志贺菌属的细菌KIA:K/A、产气-/+、H2S-,MIU:动力-、吲哚+/-、尿酶-,氧化酶-,不产生赖氨酸脱羧酶,氧化酶试验阴性。
4.抗原结构:志贺菌属只有O抗原而无鞭毛抗原,个别菌型及新分离菌株有K抗原。
(二)致病性致病物质:侵袭力:菌毛粘附于肠粘膜上皮细胞,诱导细胞内吞。
内毒素:破坏肠粘膜;肠壁通透性;肠壁植物神经——腹痛,腹泻,里急后重,粘液脓血便。
外毒素(志贺毒素,ST):肠毒素活性;细胞毒活性;神经毒活性。
所致疾病:细菌性痢疾,简称菌痢医学|教育网搜集整理。
1.急性菌痢。
2.中毒性菌痢。
3.慢性菌痢。
传染源为病人和带菌者,经粪口传播。
(三)微生物学检验1.标本采集尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便,选择脓血便或粘液便,必要时可用肛拭子采集。
2.检验办法及鉴定(1)分离培养:取粪便(粘液或脓血部分)或肛拭标本接种GN肉汤增菌及再开展分离培养。
一般同时接种强弱选择性不一样的两个平板。
强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基(SS);弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。
培养18~24h后选取可疑菌落开展下列鉴定。
(2)鉴定1)初步鉴定:挑选可疑菌落3~4个先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。
志贺菌属(痢疾杆菌)
志贺菌属是人类及灵长类动物细菌性痢疾最常见的病原菌,又称痢疾杆菌。
形态与染色:革兰阴性杆菌,无芽孢,无鞭毛,无荚膜,有菌毛。
培养特性:因不发酵乳糖而在肠道选择培养基上为无色透明或者半透明菌落。
抗原构造:菌体(0)抗原,无鞭毛(H)抗原,部分菌株有K抗原,
分类:根据生化反应特征,将志贺菌属分为4群:痢疾志贺菌群(A群),福氏志贺菌群(B群),鲍氏志贺菌群(C群),宋内志贺菌群(D群)。
鉴定:一般标本为粪便和肛拭子。
镜检:革兰阴性杆菌。
分离培养:将标本接与SS平板,麦康凯或伊红亚甲蓝平板,如肠道选择性平板有不发酵乳糖的无色透明或不透明菌落生长,则需要进一步鉴定。
生化鉴定:氧化酶阴性,硝酸盐还原阳性,在克氏双糖(KIA)斜面产碱,底层产酸,不产气,硫化氢为阴性,IMViC结果为-+--,MIU 为--/+-,赖氨酸脱羧酶阴性。
鉴别要点:志贺军属与肠侵袭性大肠埃希菌鉴别:在血清学上有交叉反应,生化特性相近,志贺菌分解葡萄糖产酸不产气,动力试验、赖氨酸脱羧酶、醋酸钠及黏液酸盐试验菌阴性,可与肠侵袭性大肠埃希菌鉴别。
志贺菌属与类志贺邻单胞菌鉴别:可用氧化酶、动力试验鉴别、志贺菌为阴性,后者阳性。
志贺菌属与伤寒沙门菌鉴别:可用动力试验、硫化氢和因子血清09鉴别,志贺为阴性,而沙门阳性。
口腔执业医师基础知识:志贺菌属(痢疾杆菌)2017口腔执业医师基础知识:志贺菌属 (痢疾杆菌)导语:志贺氏菌属(Shigella)是一类革兰阴性杆菌,是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌,通称痢疾杆菌,耐寒,能在普通培养基上生长,形成中等大小,半透明的.光滑型菌落。
在肠道杆菌选择性培养基上形成无色菌落。
一、生物学性状1.形态染色:符合肠杆菌特征,有菌毛,无鞭毛,无动力是本菌与其它肠道致病菌主要区别点。
2.培养特性:肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落。
3.生化反应:葡萄糖(+)、乳糖(-)(宋内志贺菌迟缓发酵乳糖)、H2S(-)、尿素(-)、动力(-)。
4.抗原分类根据O抗原分4群,40余型:①A群痢疾志贺菌(S.dysenteriae 10个血清型)②B群福氏志贺菌(S.flexneri 13个血清型)③C群鲍氏志贺菌(S.boydii 18个血清型)④D群宋氏志贺菌(S.sonnei 1个血清型)。
5.抵抗力:比其它肠杆菌弱,尤其对酸敏感。
二、致病性与免疫性致病物质:1.侵袭力:①菌毛:黏附肠黏膜上皮细胞②Ⅲ型分泌系统穿透上皮细胞并扩散、传播。
2.内毒素:强烈内毒素,作用于局部并可吸附入血引起全身症状。
3.外毒素:A群(Ⅰ、Ⅱ型)产生志贺毒素(ST):(1)肠毒素:类似ETEC毒素、霍乱肠毒素作用水样便。
(2)细胞毒性:对人肝细胞、肠黏膜细胞有毒性,引起变性坏死。
(3)神经毒性:损伤动物神经系统(麻痹、死亡)。
所致疾病细菌性痢疾1.传染源:病人、带菌者;2.传播途径:经口;3.致病机制;4.临床类型:①急性菌痢②中毒性菌痢③慢性菌痢。
免疫力:牢固,易再感染。
三、微生物学检查与防治微生物学检查:1.分离鉴定2.毒力实验3.快速诊断:①免疫染色法②、免疫荧光菌球法③、协同凝集④、PCR。
防治:更有效的疫苗还在研制中,此菌极易出现多重耐药性菌株。
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志贺氏菌检验志贺氏菌属于肠杆菌科,是一种革兰氏阴性菌,会引起肠道感染,引发肠炎,当人出现连续性腹泻、腹痛等症状的时候,就需要考虑是否感染志贺氏菌。
志贺氏菌的传播途径主要是食物和水,比如沙拉、土豆、金枪鱼、虾、奶制品等,在密闭以及不卫生的条件下志贺氏菌会迅速传播,而且经常出现在人员比较密集的地方,比如餐厅、食堂等地。
食源性志贺氏菌的传播主要是因为从事食品工作的人员感染了志贺氏菌,并且将其传播到食物上所引起的,另外,保存食物的温度不当,也可能引起志贺氏菌。
志贺氏菌检验是临床上检验肠道感染疾病的一个重要途径,在检测过程中常用的方法有以下几种。
一、生化鉴定法常规的生化鉴定方法是志贺氏菌检验过程中的常用方法,需要对细菌进行增殖培养、分离、生化试验、血清学检验等步骤来完成,步骤比较繁琐,而且耗时较长,每一次一般只能检验一个样品,但是检测的结果比较准确,检测稳定性较高,假阳性率低。
二、免疫学检验方法免疫学是检验志贺氏菌最快速、准确的方法,特异性较强,而且灵敏度很高,主要的免疫学检验方法有以下几种:第一,酶联免疫法。
这种方法的灵敏度很高,而且简单快速,检测过程比较稳定,可以进行自动化操作,是志贺氏菌检测过程中最快速的一种方法。
但是,使用酶联免疫法进行检验的时候,影响检测结果的因素较多,而且假阳性率高,所以还需要采用其他的方法进行配合检验。
第二,SPA协同凝集法。
这种方法是使用已知标准血清吸附到含A蛋白的金黄色葡萄球菌表面之后,让金黄色葡萄球菌成为吸附抗体的载体,再根据吸附的结果来诊断是否感染志贺氏菌的一种方法。
三、分子生物学方法分子生物学是建立在很多其他的检测技术基础上的,敏感度高、检测快速,而且特意性高,是生物技术革命的一个重要产物,目前在志贺氏菌的检测过程中十分常见。
志贺氏菌的分子生物学检测方法有以下几种:第一,聚合酶链式反应法,比如常规PCR、多重PCR法、实时荧光PCR法和恒温荧光PCR法等。
以恒温实时荧光PCR法为例,这种方法的原理是利用环介导等温扩增反应为原理进行测量的方法,灵敏度很高,与传统的荧光测量方法相比,灵敏度高出2~5个数量级,而且测量十分迅速,荧光反应的时间较短,一般30-60分钟就可以完成荧光反应。
志贺菌属标准操作规程1.概述志贺菌属也是人类主要肠道病原菌之一。
该菌属分为4个群(种):A群为痢疾志贺菌,B群为福氏志贺菌,C群为鲍氏志贺菌,D群为宋内志贺菌。
其中福氏志贺菌为该菌属最为常见的志贺菌。
2.标本类型粪便、肛拭子标本。
3.鉴定3.1 形态染色革兰阴性细小杆菌,大小为1um×(2~4um)。
无芽胞,无荚膜,无动力,无鞭毛,有菌毛。
3.2 培养特性在麦康凯琼脂平板上呈无色透明的小菌落;在SS琼脂平板上因不发酵乳糖而形成无色透明或半透明的较小菌落;在XLD琼脂平板上产生红色的菌落;在HE 琼脂平板上菌落呈淡绿色。
宋内志贺菌在麦康凯琼脂平板上可出现两种菌落,一种粉红色(迟发酵乳糖),另一种无色透明。
3.3 生化反应氧化酶试验阴性,TSI为K/A;发酵葡萄糖、甘露醇,不发酵乳糖、蔗糖;甲基红、硝酸盐还原试验阳性,动力、V-P、枸橼酸盐、H2S、醋酸盐试验均阴性。
3.4 鉴别要点3.4.1 本菌特征SS平板上无色菌落或半透明的小菌落,TSI为K/A,发酵葡萄糖,不发酵乳糖,无动力,尿素酶、H2S试验阴性。
符合上述特性者,可通过血清凝集试验作出诊断。
如血清不凝集,应进一步鉴别。
3.4.2 志贺菌属各菌种的鉴别:见表5-40。
表5-40 志贺菌属各菌种的生物学特性(阳性%)生化试验痢疾志贺菌福氏志贺菌鲍氏志贺菌宋内志贺菌ONPG 30 1 10 90鸟氨酸脱羧酶0 0 2 98乳糖0 1 1 2※甘露醇0 95 97 99海藻糖90 65 85 100吲哚45 50 25 0注:“2※”为迟缓发酵(48h以上)。
3.5操作步骤3.5.1 观察菌落特征,挑取可疑菌落,做TSI试验参见三糖铁标准操作构规程。
3.5.2 血清学鉴定参见志贺菌血清学检测标准操作规程。
3.5.3 从SS琼脂平板上挑取可疑菌落,用微生物鉴定仪或传统生化法进行细菌鉴定。
4. 药敏参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件。
肠杆菌科Enterobacteriaceae1.肠杆菌科:①是一大群寄居于人和动物肠道中的革兰阴性无芽胞杆菌(40种), 常随人与动物粪便排出,广泛分布于水、土壤或腐物中。
②大多为正常菌群或条件致病菌,部分强致病菌。
2 分类:(1)埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、耶尔森菌属:胃肠道感染、增殖、引起症状(2)枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、普罗威登菌属、摩根菌属、欧文菌属、哈夫尼菌属、爱德华菌属(3)其它:肥杆菌属、致病杆菌属、克吕沃尔菌属、拉恩菌属、西地西菌属、塔特姆菌属3. 肠道杆菌的共同特性(1)形态与结构:G-杆菌,多数有鞭毛,大多有菌毛,少数有荚膜或包膜,无芽胞。
(2)培养特性:需氧或兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好,常用肠道选择培养基分离培养。
(3)生化反应:生化反应活泼,乳糖发酵试验在初步鉴别肠道致病和非致病菌时有重要意义,生化反应与致病性成反比。
(4)Ag构造:菌体(O)Ag、鞭毛(H)Ag、表面(K、Vi)Ag、粘附因子(F)Ag (5)变异现象:S-R、H-O、Ag、耐药性、毒素产生、生化反应等(6)传播方式:污染的饮水及食物、经消化道传播。
(7)致病性:菌毛、表面Ag、内毒素、肠毒素等,以肠道症状为主。
(8)抵抗力:不强,加热60℃经30分钟即死亡。
4. 肠道杆菌分离鉴定程序5.肠道选择鉴别培养基(2)其他选择鉴别培养基A. EMB(伊红美兰): 含乳糖,伊红和美蓝是抑菌剂和pH指示剂,可抑制革兰氏阳性菌,在酸性条件下产生沉淀,形成紫黑色菌落或具黑色中心的外围无色透明的菌落。
B. HE培养基:含乳糖、蔗糖和水杨素,胆盐、去氧胆酸钠、溴麝香草酚兰和酸性复红可抑制革兰氏阳性菌;硫代硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生,使菌落中心呈黑色;溴麝香草酚兰和酸性复红为pH指示剂,发酵糖产酸的菌落呈红色,不发酵糖的菌落为蓝色。
选择鉴别培养基C. 麦康凯琼脂MacConkey:含乳糖,牛胆盐可抑制G+菌,中性红是pH指示剂,细菌发酵乳糖产酸时菌落呈粉红色,并在菌落周围出现胆盐沉淀的浑浊圈。