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结核病的实验室诊断方法及评价耐多药结核病的实验室诊断条件：因耐多药结核分枝杆菌的生物危险性，1）需P2及以上实验室，目前我院实验室条件基本具备即将投入运行，2）日常培养及涂片用的生物安全柜滤膜已超出使用年限，工作人员生物安全得不到保障，应定期予以更换。
耐多药结核分枝杆菌主要以结核分枝杆菌体外药物敏感性测定作为其诊断依据。
因此其基础是培养，只有培养出阳性结核分枝杆菌才能进一步通过结核分枝杆菌体外药物敏感性测定诊断是否为耐多药结核分枝杆菌。
1.已进人临床常规应用的测定方法:目前包括绝对浓度法、比例法及应用BACTEC460、BACTEC 960、BacT/ ALERT 3D、ESPII等仪器系统快速检测结核分枝杆菌的药物敏感性。
其中:绝对浓度法以最低抑菌浓度或以无生长为终点作为判断标准，是我国目前普遍采用的方法;比例法以是否能够抑制99%的细菌生长作为判断标准，是世界卫生组织推荐使用的方法;后四种仪器方法则是比例法的特化，其特点是以细菌的代谢过程指示细菌生长状况。
2.处于研究探索阶段的测定方法:此类方法很多，抗性比例法、Etests法、噬菌体生物扩增法、液体变色培养基测定法、荧光素酶测定法、硝酸盐还原试验等。
3分子生物学方法对结核分枝杆菌耐药性检测已有一些进入临床检测。
基因突变是引起抗结核药物耐药性的最主要的原因。
多种以PCR 为基础的分子生物学技术用于检测与耐药相关基因的突变，作为快速耐药性检测方法在实验室或临床得到开展。
这些方法具体包括：主要是DNA序列分析法，聚合链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP），另外还包括基因芯片技术、异质性双链构象分析、变性梯度凝胶电泳、线性探针杂交技术、RNA/RNA错配检测技术和分子灯塔技术等。
由于结核分枝杆菌的耐药性与基因突变的确切关系未完全阐明，检测耐药相关基因的分子生物学方法虽然能快速准确地检测到耐药相关基因的突变，但由于判断药物敏感性时存在固有的缺陷，检测结核分枝杆菌耐药性的基因型鉴定法不能完全替代表型鉴定法。
BACTEC 960培养液抗酸涂片细菌形态观察在分支杆菌菌型鉴定中的意义吴小珍;张莹蓉;乐军【期刊名称】《中国防痨杂志》【年(卷),期】2003(025)0z1【摘要】目的:观察分支杆菌在BACTEC960培养仪中的生长特点和涂片细菌抗酸形态,提供初步快速鉴定分支杆菌的实验室方法,从而提高分支杆菌的鉴定水平.方法:收集我院住院病人痰,脑脊液,胸水,尿液标本共计1544份,经前处理后分别接种MGIT培养基及对硝基基甲酸PNB培养基,置BACTEC960快速培养仪和37C培养箱,待培养仪出现阳性示警后,取出MGIT培养管,吸取培养物直接涂片,作抗酸染色和革兰氏染色形态学检查.结果:MGIT培养管内培养物清淅,有片状或团状沉淀物,涂片分支杆菌为长链状排列,PNB不生长.……【总页数】1页(P61)【作者】吴小珍;张莹蓉;乐军【作者单位】上海市肺科医院检验科,200433;上海市肺科医院检验科,200433;上海市肺科医院检验科,200433【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.BACTEC MGIT 960培养管内浑浊生长抗酸杆菌的分析 [J], 杨翰;党丽云;崔晓利;尤震宇;谈小文;刘元2.Bactec960等三种分支杆菌分离培养方法的临床应用评价 [J], 张辉;叶飞;罗涛;何福凯;罗槑;朱玛3.BACTEC MGIT 960和BACT/ALERT 3D系统快速培养和鉴定痰中抗酸杆菌 [J], 杨松;张耀亭;胡晓明4.BACTEC MGIT 960系统与改良罗氏培养基抗酸分枝杆菌药敏结果的评估 [J], 陈小蓉;张侠;茅惠娟5.噬菌体裂解法与BACTEC-960法在结核分支杆菌中的快速检测中 [J], 叶飞;张辉;罗涛;罗槑因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
糖尿病合并结核感染的结核分枝杆菌检测分析目的分析糖尿病合并结核感染利用不同结核分枝杆菌检测方法进行检测的效果。
方法选择该院2018年1—6月中的100例糖尿病合并结核感染患者，收集患者痰标本分别应用4种不同方法进行结核分枝杆菌检测，分析检测结果。
结果100份痰涂片经涂片法检测的阳性率为27%，经快速培养法检测的阳性率为38%，经噬菌体法检测的阳性率为37%，经PCR法检测的阳性率为39%，涂片法阳性率明显低于其他3种方法（P＜0.05）。
结论噬菌体生物扩增法和荧光定量PCR法相较涂片法和培养法能够更准确、迅速完成结核分枝杆菌检测，可推广用于糖尿病合并结核感染的诊断中。
标签：糖尿病；结核感染；结核分枝杆菌；检测结核病属于一类多发的慢性疾病，对患者健康有严重影响，糖尿病被认为是结核病的易感者，15%左右的肺结核患者伴发糖尿病，大部分都是先出现糖尿病，再出现肺结核[1]。
研究发现，糖尿病患者出现结核病的可能性要高出正常人群多倍[2]。
合并糖尿病的结核病患者发病急，病变主要为干酪渗出病变，应用抗结核病治疗会导致比较明显的不良反应，不良反应会引发糖尿病相关并发症，提升病变的复发率，增加耐药结核病患者比重[3]。
所以针对糖尿病合并结核感染患者，做好早期的诊断具有重要意义，该研究具体以该院2018年1—6月中收治的100例糖尿病合并结核感染患者的100份痰标本为对象，分析4种不同方法进行结核分枝杆菌检测的效果，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料以该院中的100例糖尿病合并结核感染患者的痰标本作为检测对象，应用法国生物梅里埃公司生产的BacT/ALERT 3D系统和试剂；选择英国BIOTEC Lab 公司生产的噬菌体生物扩增法快速检测结核分枝杆菌试剂盒（FAST Plaque TBTM）；选择达安基因公司生产的荧光定量PCR诊断结核菌试剂盒。
1.2 方法处理痰标本：收集好痰标本后，选择部分进行金胺O荧光染色涂片，其他的给予NALC-NAOH法前处理，完成处理后将2 mL PBS加入，重悬沉淀，分别实施噬菌体生物扩增、荧光定量PCR、快速培养。
微生物自动化检测题库1-0-7问题：[单选,A2型题,A1A2型题]利用生化反应鉴定细菌是根据（）A.细菌酶活性差异B.细菌毒素活性差异C.细菌酶含量差异D.细菌毒素种类的差异E.细菌分解代谢产物的差异根据细菌的不同生物学性状及其代谢产物的差异，可采用多种生化反应系统鉴定细菌。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪项不是全自动微生物鉴定仪和药敏仪（）A.VITEK-ⅡB.WalkAway-40C.VITEK-ATBD.VITEK-AMSE.Sensititre全自动微生物鉴定和药敏系统有VITEK-Ⅱ、WalkAway-40、VITEK-AMS、E.Sensititre。
VITEK-ATB不是全自动的。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]接种后的API试条一般经多少度孵育18~24h可以观察结果（）A.30～40℃B.35～37℃C.36～38℃D.37～39℃E.32～35℃接种后的API试条一般经35～37℃孵育18～24h可以观察结果。
/ 天使投资人问题：[单选,A2型题,A1A2型题]下列血培养系统中哪一种既可检测普通细菌又可以检测分枝杆菌（）A.BACTEC9240B.BactAlert3DC.BACTEC960D.VITEKE.MiccroscanBactAlert3D是既可检测普通细菌又可以检测分枝杆菌的血培养系统。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]运用API系统进行细菌的鉴定，下列哪一项是不需要的（）A.API反应试条B.添加试剂C.操作规程D.编码本或电脑软件E.微量发酵管API鉴定系统中不需要微量发酵管。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪一种血培养仪没有采用荧光探测技术（）A.BactAlertB.VitalC.BACTEC9120D.Mini-vitalE.BACTEC9240BactAlert是根据反射光的强弱改变来检测的，没有应用荧光检测技术。
问题：[单选,A2型题,A1A2型题]关于血培养的运送和处理，下列哪一种是错误的（）A.血培养抽取后，立即送到微生物实验室B.如不能立即送往实验室，置4℃冰箱冷藏C.如不能立即送往实验室，置35～37℃孵箱中D.如暂不能立即送往实验室，可放室温保存E.实验室接受到培养瓶，应立即置35～37℃孵箱中或血培养仪中A、C、D、E均正确，血培养抽取后切记，一定不要放4℃冰箱冷藏。
PCT检测在全身和局部细菌感染诊断中的临床应用慕月晶;王伟佳;严海忠;徐全中;阚丽娟;欧阳能良;黄燕华;张秀明【摘要】目的：评价血清降钙素原（PCT）定量检测在全身和局部细菌感染诊断中的临床应用价值。
方法采用美国临床实验室标准化协会（CLSI）颁布的EP15-A2文件验证罗氏Cobas E601电化学发光免疫检测系统（简称Cobas E601）检测PCT的精密度和准确度，保证仪器条件符合实验要求。
收集全身和局部细菌感染住院患者697例，联合分析患者血培养、痰培养、中段尿培养和脑脊液培养数据及其血清PCT结果，比较全身感染和局部感染及不同部位感染患者血清PCT的变化趋势，并分析革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌感染机体PCT的表达差异情况。
结果 Cobas E601检测PCT具有良好的重复性，总变异系数（CV）＜3．59％，与定值校准品的偏差＜5．0％，符合临床检测要求。
血清PCT水平在全身和局部感染患者中均升高，且全身感染患者PCT水平明显高于局部感染患者（P＜0．05）；在局部感染中，呼吸系统、泌尿系统和神经系统感染组间血清PCT水平差异无统计学意义（P＞0．05）。
在全身感染中，革兰阴性杆菌感染患者血清PCT水平高于革兰阳性球菌感染患者（P＜0．05）；在局部感染中，此2类细菌感染患者血清PCT水平差异无统计学意义（P＞0．05）。
结论血清PCT水平在全身感染和局部感染患者样本中均升高，在局部感染中不能通过血清PCT水平鉴别革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌的感染。
%Objective To evaluate the clinical application significance of serum procalcitonin(PCT)quantitation determination in the diagnosis of systemic and local bacterial infections.Methods The Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI)EP15-A2 document was employed to verify the precision and accuracy of PCT determination by Roche Cobas E601 chemiluminescenceanalyzer (Cobas E601)and ensure instrument conditions being complied with the requirement of experiment.A total of 697 patients with systemic and local bacterial infections were enrolled.The results of serum PCT determination,blood culture,sputum culture,middle-urine culture and cerebrospinal culture were used to compare the change trends of serum PCT for systemic and local bacterial infections and for different-part infections.The difference of PCT in Gram-positive cocci and Gram-negative bacilli infections was analyzed.Results Cobas E601 had good repeatability,and the total coefficient of variation (CV)was <3.59%.The fixed calibration bias was <5 .0% and met the clinical determination requirements.For serum PCT,there was significance for systemic and local bacterial infections with having increasing serum PCT level(P<0.05).For local bacterial infection,there was no statistical significance for respiratory system,urinary system and nervous system infections (P>0.05 ).For systemic bacterial infection,there was higher serum PCT level for patients with Gram-negative bacilli infection than with Gram-positive cocci infection (P<0.05 ).For local bacterial infection,there was no statistical significance for patients with Gram-negative bacilli infection and Gram-positive cocci infection (P>0.05 ).Conclusions In patients with systemic and local bacterial infections,serum PCT level has high expression,and serum PCT level can not identify local bacterial infection Gram-negative bacilli and Gram-positive cocci infections.【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】4页(P17-20)【关键词】降钙素原;全身感染;局部感染;革兰阴性杆菌;革兰阳性球菌【作者】慕月晶;王伟佳;严海忠;徐全中;阚丽娟;欧阳能良;黄燕华;张秀明【作者单位】中山大学附属中山医院检验医学中心，广东中山528403;中山大学附属中山医院检验医学中心，广东中山528403;中山大学附属中山医院检验医学中心，广东中山528403;中山大学附属中山医院检验医学中心，广东中山528403;中山大学附属中山医院检验医学中心，广东中山528403;中山大学附属中山医院检验医学中心，广东中山528403;中山大学附属中山医院检验医学中心，广东中山528403;中山大学附属中山医院检验医学中心，广东中山528403【正文语种】中文【中图分类】R446.5The clinical application of PCT in the diagnosis of systemic and local bacter ial infectionsMU Yuejing, WANG Weijia, YAN Haizhong, XU Quanzhong, KAN Lijuan, OU YANG Nengliang, HUANG Yanhua, ZHANG Xiuming.(Center of Laboratory Medicine, Zhongshan Hospital Affiliated to Sun Yat-sen University, Guangdong Zhongshan 528403, China)Key words: Procalcitonin；Systemic bacterial infection； Local bacterial infection； Gram-negative bacillus；Gram-positive coccus降钙素原(procalcitonin ，PCT)是一种由甲状腺Ce-细胞、肺或肠道的神经内分泌细胞分泌的蛋白质。
应用MTD试剂盒对HIV/AIDS患者结核分枝杆菌复合群进行快速检测的临床应用价值探讨【中图分类号】r183.3 【文献标识码】b 【文章编号】1672-3783（2012）10-0318-02【摘要】目的比较和评价结核分枝杆菌直接检测（mtd）方法在aids合并疑似结核感染试验组和非aids的结核待排对照组中的应用，同时与涂片抗酸染色、bact/alert 3d 360 mp结核分枝杆菌快速培养联合tb-dna pcr方法进行比较。
方法采用mtd、直接涂片镜检、结核培养联合tb-dna pcr 3种方法，平行检测127例aids 试验组和25例tb对照组患者的肺部样本。
结果mtd法检测阳性aids试验组29.13%（48/127）、对照组44.00%（11/25），经卡方检验差异有统计学意义（x2=7，p0.05（x2=3.6957）。
25例tb 对照组的敏感性分别为，涂片：40.00%（10/25），培养联合tb-dna：44.00%（11/25），mtd：44.00%（11/25），3种方法间的敏感性无显著性差异， p>0.05（x2=0.1125）。
（3）将127例aids试验组患者与25例tb对照组患者mtd法检测进行比较，结果显示mtd法检测敏感度分别为29.13%、44.00%，mtd在两组患者中的阳性检出率有显著性差异，p<0.05（x2=7）。
3 讨论mtd系统的临床应用，目前国内文献报道尚少。
该系统的基本原理是采用转录主导扩增法（tma）扩增特异性核糖体rna（rrna）和杂交保护分析法（hpa）筛选，最后以化学发光仪定性检测结核分枝杆菌复合群的rrna，利用核酸探针检测目的基因的检测方法。
用于检测抗酸染色（afb）涂片阳性和阴性标本中结核分枝杆菌复合群的rrna的体外诊断方法，由于rrna仅存在于活的生物体内，故mtd阳性具有结核分枝杆菌活菌诊断价值。
由于rrna为单链结构，脆弱易降解，故不易造成环境污染。
结核分枝杆菌诊断技术的发展及目前临床应用的新型诊断技术产品分析快速准确地诊断出结核分枝杆菌感染是控制和治疗结核病的前提和关键。
多年来，结核杆菌的诊断技术在不断地发展和创新，近年来，一些针对结核杆菌检测的新方法陆续被报道，一些新型的诊断技术产品也陆续上市。
本资料综述了结核杆菌的主要诊断方法，并对目前国际市场上广泛应用的商业化诊断技术产品进行了简要分析。
标签：结核分枝杆菌；诊断技术；分析Advance in diagnosis techniques of Mycobacterium tuberculosis and analysis of new diagnostic technologies and products in clinical applicationFENG?Meimei1??SU?Wenqin21.Haikou VTI Biological Institute,Haikou 570311,China;2.Department of Pharmacy,Hainan Medical College,Haikou 571199,China[Abstract] Fast and accurate diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection is the key and prerequisite to control and treatment tuberculosis.For many years,the diagnostic techniques of Mycobacterium tuberculosis have been developing and innovating.In recent years,some new techniques for Mycobacterium tuberculosis detection were reported and some new diagnostic products have been listed.This paper reviewed the main diagnosis techniques of Mycobacterium tuberculosis,and analysed briefly the commercialized diagnostic products which are used widely in the international market now.[Key words] Mycobacterium tuberculosis;Diagnosis;Analysis结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis，MTB）是引起结核病的病原菌，可侵犯全身各器官，以肺结核最多见。
