中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白参考值范围确定资料

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光定量免疫分析方法的建立及临床应用周齐洋１，廉倩倩２，梁　辰３，冯　杰３，颜光涛３（１．江苏省医疗器械检验所，江苏南京２１００１２；２．苏州长光华医生物医学工程有限公司，江苏苏州２１５１６３；３．解放军总医院第一医学中心医学检验中心，北京１００８５３）ＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．１０．０２６收稿日期：２０２０ ０４ １９；修回日期：２０２０ ０７ ０９基金项目：国家科技支撑计划（编号：２０１５ＢＡＫ４５Ｂ０１）通讯作者：颜光涛，研究员。

研究方向：标记免疫分析技术。

Ｅ ｍａｉｌ：ｙｇｔ３０１＠１６３．ｃｏｍ摘要：目的　建立一种双抗体夹心法定量检测人尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｇｅｌａｔｉｎａｓｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｉｐｏｃａｌｉｎ，ＮＧＡＬ）的化学发光免疫分析方法。

方法　以磁颗粒 链酶亲和素 生物素为固相分离系统，生物素标记１株鼠单抗ＮＧＡＬ，吖啶酯标记另１株鼠单抗 ＮＧＡＬ，建立ＮＧＡＬ定量免疫分析方法。

结果　此分析方法功能灵敏度高于３ｎｇ／ｍＬ；批内不精密度不超过５％，批间不精密度不超过８％；线性范围为１０～１５００ｎｇ／ｍＬ；参考区间上限为１３０ｎｇ／ｍＬ；尿液样本中可能存在的干扰物如丙酮、白蛋白、胆红素等对结果的干扰不超过５％；尿液样本２～８℃常规储存１～３周检测水平变化幅度小于２０％；与Ａｂｂｏｔｔ的ＮＧＡＬ免疫试剂相比，斜率达０．９６１１，相关系数０．９９３８。

结论　该ＮＧＡＬ化学发光定量检测方法，性能优良，适合临床推广使用。

关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白；　急性肾损伤；　肌酐；　尿样储存稳定性中图分类号：Ｒ ３３１ 文献标识码：ＡＴｈｅＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＣｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｆｏｒＮｅｕｔｒｏｐｈｉｌＧｅｌａｔｉｎａｓｅＡｓｓｏｃｉａｔｅｄＬｉｐｏｃａｌｉｎＺＨＯＵＱｉｙａｎｇ１，ＬＩＡＮＱｉａｎｑｉａｎ２，ＬＩＡＮＧＣｈｅｎ３，ＦＥＮＧＪｉｅ３，ＹＡＮＧｕａｎｇｔａｏ３（１．ＪｉａｎｇｓｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃａｌＤｅｖｉｃｅＴｅｓｔｉｎｇ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００１２，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｕｚｈｏｕＨｙｂｉｏｍｅＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＣｏ．，ＬＴＤ，Ｓｕｚｈｏｕ２１５１６３，Ｃｈｉｎａ；３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒｏｆｔｈｅＰＬＡＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００８５３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｄｏｕｂｌｅａｎｔｉｂｏｄｙｓａｎｄｗｉｃｈｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｆｏｒｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｇｅｌａｔｉｎａｓｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｉｐｏｃａｌｉｎｉｎｈｕｍａｎｕｒｉｎｅｓａｍｐｌｅｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＵｓｉｎｇｍａｇｎｅｔｉｃｐａｒｔｉｃｌｅ ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ｂｉｏｔｉｎａｓｔｈｅｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ，ｏｎｅｍｏｕｓｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ ＮＧＡＬｗａｓｌａｂｅｌｅｄｗｉｔｈｂｉｏｔｉｎ，ｗｈｉｌｅａｎｏｔｈｅｒｍｏｕｓｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ ＮＧＡＬｗａｓｌａｂｅｌｅｄｗｉｔｈａｃｒｉｄｉｎｅｅｓｔｅｒ，ａｎｄａｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｍｅｔｈｏｄｆｏｒＮＧＡＬｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｉｓａｓｓａｙｗａｓｂｅｌｏｗ３ｎｇ／ｍＬ，ｔｈｅｉｎｔｒａ ｂａｔｃｈａｎｄｔｏｔａｌｐｒｅｃｉｓｉｏｎｗｅｒｅｌｅｓｓｔｈａｎ５％ａｎｄ８％，ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｗａｓ１０ １５００ｎｇ／ｍＬ，ａｎｄｔｈｅｕｐｐｅｒｌｉｍｉｔｏｆｒｅｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌｗａｓ１２８ｎｇ／ｍＬ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｏｔｈｅｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ（ａｃｅｔｏｎｅ，ａｌｂｕｍｉｎ，ｂｉｌｉｒｕｂｉｎ，ｅｔｃ）ｉｎｕｒｉｎｅｓａｍｐｌｅｓｃａｕｓｅｄｎｏｍｏｒｅｔｈａｎ５％ｃｒｏｓｓ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｔｈｅｒａｎｇｅｏｆｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｕｒｉｎｅｓａｍｐｌｅｓｄｅｔｅｃｔｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓｌｅｓｓｔｈａｎ２０％ｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆ２ ８℃ｆｏｒ１ ３ｗｅｅｋｓ．ＷｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＡｂｂｏｔｔＮＧＡＬａｓｓａｙ，ｔｈｅｓｌｏｐｅｗａｓ０．９６１１ａｎｄｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｗａｓｏｖｅｒ０．９９３８．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｓｔｕｄｉｅｄＮＧＡＬｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｈａｓａｎｅｘｃｅｌｌｅｎｔｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｇｅｌａｔｉｎａｓｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｉｐｏｃａｌｉｎ；　Ａｃｕｔｅｋｉｄｎｅｙｉｎｊｕｒｙ；　Ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ；　Ｕｒｉｎｅｓａｍｐｌｅｓｔｏｒａｇｅｓｔａｂｉｌｉｔｙ６５７１ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｏｃｔ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．１０ 急性肾损伤（ａｃｕｔｅｋｉｄｎｅｙｉｎｊｕｒｙ，ＡＫＩ）是指各种原发性或继发性损伤因素导致的肾脏结构的改变、肾功能下降以及最终肾衰竭的整个过程。

中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）检测的临床应用作者：刘津李海平马淑慧来源：《医学信息》2014年第22期摘要：中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）是lipocalin家族新成员，NGAL浓度越高急性肾损伤（AKI）越严重，随着血NGAL浓度的下降，AKI也得到恢复；同时在慢性肾损伤中，尿NGAL可以成为肾小管间质损害的早期标志物；通过NGAL检测可明确反映中性粒细胞活化、内皮细胞受损等病理过程，对于ICU患者常见危重病症发展有相应指示作用。

本文就NGAL在临床诊断中的应用研究近况作一综述。

关键词：中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）；急性肾损伤（AKI）；慢性肾损伤；重症监护室（ICU）中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）1993年在人中性粒细胞中被发现，是细胞化学趋化物N-甲基蛋异亮苯丙肽受体之一，是可正常表达于中性粒细胞、肾小管上皮细胞、肝实质细胞、血管上皮细胞等的一种分泌性糖蛋白。

研究表明[1]，NGAL是诊断肾损伤最有效的生物学标志之一，肾损伤时由肾小管上皮细胞所分泌，其分泌量与各种肾脏疾病相关。

本文现就NGAL在临床诊断中的应用研究近况综述如下。

1 在急性肾损伤（AKI）诊疗中的应用正常生理情况下NGAL水平较低，肾缺血或毒素急性损伤肾小管时，NGAL高表达从而诱导肾小管-间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡，以保护肾组织免受攻击。

高水平的NGAL促进肾小管上皮细胞再生修复，使肾功能得以恢复。

AKI患者肾皮质小管、血和尿液中均发现大量NGAL堆积，可在损伤后3h的血和尿液中检测到，早于尿N-乙酰-β-葡萄糖苷酶、β2微球蛋白及血肌酐的改变。

被认为是AKI一种新的预测标志物，对于早期诊断、评估疾病严重程度、治疗监测有重要临床价值[2]。

1.1在冠状动脉搭桥手术后AKI中的应用冠状动脉搭桥手术后肾脏并发症及病死率较高，AKI发生率为1.4%～19.50%，一旦发生肾衰竭，病死率高达15%～30%，围术期对肾损害早期诊疗十分重要[2]。

大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平。

用纯化的大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL），再与HRP标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：4500ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶23ml×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

肾功能及肾损伤标志物——中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）解析中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）是lipocalin的一种，最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种小分子量分泌性蛋白，现代研究表明，NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志物之一。

NGAL的合成及分布NGAL由肾小管细胞、中性粒细胞等细胞类型合成，它标志性的存在于循环内，可被肾小球自由滤过，并被肾小管上皮细胞截获降解。

肾功能异常时，引起肾小管上皮细胞损伤，分泌大量的NGAL，大量NGAL通过诱导肾小管间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡从而保护肾组织免受炎性细胞的损害，以此诱导肾小管上皮细胞再生。

NGAL在肾脏中的表达会因多种原因的肾损伤而显著升高，并且释放到尿液和血浆中。

正常情况下，NGAL在尿液和血浆中维持一个较低水平，而肾损伤时则在非常短的时间（2-4h左右）急速升高。

NGAL在AKI中的应用NGAL用于AKI 的早期诊断急性肾功能损伤( AKI) 时血、尿NGAL浓度会迅速升高，2h最为明显( 比临界值升高几十至几百倍)，而血清肌酐( sCr) 、尿酶等传统指标往往要在24～72h 后才明显升高，因而NGAL可用于AKI 的早期诊断。

大量研究证明，肾脏在顺铂诱导的肾脏急性损伤后约2h 就能在尿中检测到NGAL，而检测出血肌酐明显改变要在等到3-4 d后，同样在肾脏急性缺血再灌注损伤后3h在尿中也能检测到NGAL。

儿童心脏手术后发生急性肾功能衰竭的患者在手术后2h血、尿NGAL的浓度明显升高，而血肌酐明显升高则要等到1～3d 后。

NGAL可用于AKI的鉴别诊断尿NGAL可鉴别AKI、肾前氨血症、慢性肾病和正常肾功能病人。

NGAL可用于AKI的危险分层ICU诊断中NGAL能够预测急性肾损伤的严重程度；NGAL对不同程度的AKI诊断体现出高灵敏性和特异性。

NGAL可用于AKI临床结果的预测（发病率、死亡率等）评估预后，NGAL 可作为AKI 的预后指标之一。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的单克隆抗体制备及化学发光免疫定量检测试剂研究齐家龙;邵佳;彭宽;黄明聪;邓丽雯;李少伟;张军;夏宁邵;顾颖【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2015(000)004【摘要】目的：获得中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ NGAL）的单克隆抗体，并对其应用于化学发光定量试剂进行研究。

方法利用原核表达系统表达的NGAL重组抗原，经过Ni2＋-金属螯合层析纯化后用于免疫6～8周龄的雌性BALB／c 小鼠，完成免疫程序后将其脾脏细胞与杂交瘤细胞进行融合，通过间接法ELISA筛选抗NGAL的单克隆抗体，并结合Western blot鉴定抗体与天然NGAL的反应性。

结果获得了由原核表达系统表达的NGAL重组抗原，具有较高的纯度，可形成二硫键交联的二聚体形式；重组抗原具有较好的免疫原性，免疫小鼠多抗血清效价达106以上；筛选获得30株单克隆抗体，其中单抗23C12、38D10的EC50分别为0.034、0.022 g／mL；经NGAL标准品及临床尿液样本初步筛选，由38D10／23C12-SAE组成的抗体配对能够很好的适用于基于化学法发光的免疫反应定量检测试剂的开发；尿液阳性样本与阴性样本检测结果显示具有显著的统计学差异（P＜0.001）；对病患组定量结果与Abbott公司的尿NGAL 测定试剂盒（化学发光微粒子免疫检测法）的相关系数大于0.97，线性范围为10～1500 ng／mL，检测灵敏度为0.63 ng／mL。

结论本研究成功制备了NGAL 重组抗原，获得了NGAL特异单克隆抗体，并开发了NGAL化学发光免疫定量试剂，该试剂检测能力与国际主流试剂相当。

%Objective To obtain monoclonal antibodies ( mAbs ) against neutrophil gelatinase-associated lipocalin( NGAL ) and a chemiluminescense immune quantification assay based one paired mAbs.Methods Six-to-eight weeks old female BALB/c mice were immunized with the purified recombinant human NGAL antigen( rhNGAL) that was produced by the Escherichia coil expression system.The spleen was fused with hybridoma for screening anti-NGAL monoclonal antibodies by indirect ELISA.Western blot was implemented to identify the reactivity with native NGAL. Results The rhNGAL antigen was found to form disulfide cross-linked dimers and present excellent immunogenicity.The reaction titer of the immune serum of NGAL immunized mice was about 106.Thirty mAbs were screened by indirect ELISA, hereinto;the EC50 values ofmAb23C12 and 38D10 were 0.034 g/mL, 0.022 g/mL respectively.The antibodies pair, 38D10/23C12-SAE labeled with AcridiniumEster(AE), were shown to work well in chemiluminescense immune response quantitative detection which was screened by NGAL standardand clinical urine samples.This detection can resolve positive and negative samples with a statistically significant difference (P<0.0001).And the correlation coefficient R2between NGAL quantitative results&nbsp;and that of the Abbott's NGAL chemiluminescence immune assay kit was greater than 0.97.The detection linear range was 10-1500 ng/mL, analytical sensitivity of the method was 0.63 ng/mL.Conclusion Highly purified rhNGAL antigen and specific anti-NGAL monoclonal antibodies are generated in this study.The detection capability of method is comparable with that of the international commercial kit.【总页数】5页(P5-9)【作者】齐家龙;邵佳;彭宽;黄明聪;邓丽雯;李少伟;张军;夏宁邵;顾颖【作者单位】畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102;畅厦门万泰凯瑞生物技术有限公司，福建厦门361000;畅厦门万泰凯瑞生物技术有限公司，福建厦门 361000;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102; 畅厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院，福建厦门361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102; 畅厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院，福建厦门 361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102; 畅厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院，福建厦门 361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102; 畅厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院，福建厦门 361102【正文语种】中文【中图分类】S853.7【相关文献】1.胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用 [J], 孙丽;牛国平2.抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白单克隆抗体的研制及其检测试剂的初步应用 [J], 唐曙明;杨自华3.中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光定量免疫分析方法的建立及临床应用 [J], 周齐洋;廉倩倩;梁辰;冯杰;颜光涛4.中性粒细胞相关脂质运载蛋白、中性粒细胞相关脂质运载蛋白/基质金属蛋白酶-9复合物在心血管疾病中的研究进展 [J], 熊政;张阳扬;李群星;赵新华;邵杨歌;尹德录5.中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒（胶乳免疫比浊法）检测性能验证 [J], 蔡爱华;李启平;陈丽娟;李静沛;李伟华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白———早期诊断急性肾损伤的生物标志物梁冰红△(综述),何敏华3(审校)(大理学院附属医院儿科,云南大理671000)中图分类号:R692 文献标识码:A 文章编号:100622084(2009)2323540203 摘要:急性肾损伤即以往的急性肾衰竭,具有高发病率及病死率,干预时机的掌握对其转归及预后起着重要影响;但目前缺少有效的早期诊断方法。

本文对早期诊断急性肾损伤最有前景的生物标志物之一,中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白进行综述,主要介绍它的生物学性质、对早期诊断的作用及其存在的局限性,旨在为临床早期预测提供帮助。

关键词:急性肾损伤;中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白;生物标志物Neutroph il Gel a ti n a se2a ssoc i a ted L i poca li n:an Early D i a gnosis B i omarker of Acute K i dney I n jury　L I ANG B ing2hong,HE M in2hua.(D epart m ent of Pediatrics,the Affiliated Hospital of D ali U niversity,D ali 671000,China)Abstract:Acute kidney injury,als o named acute kidney failure in the past,has high morbidity and mor2 tality,Opportune intervene of the disease is i m portant f or its p r ognosis,however,effective method for early di2 agnostic is lacking.This paper p r ovides a brief revie w of the research p r ogress in the r oles of neutr ophil gelati2 nase2ass ociated li pocalin,one of the most p r om ising bi omarkers,for the early diagnosis of acute kidney inju2 ry.This p r ovides assistance for the early p redicti on of the disease in clinic.Key words:Acute kidney injury;Neutr ophil gelatinase2ass ociated li pocalin;B i omarker 急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)以往被称为急性肾衰竭,是住院患者的常见并发症,其发病率逐年上升。

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）产品货号：E-EL-H6127产品规格：96T/48T/24T/96T*5Elabscience®人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human NGAL(Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其它相关生物液体中NGAL浓度。

检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。

用抗人NGAL抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的人NGAL会与包被抗体结合。

后依次加入生物素化的抗人NGAL抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗人NGAL抗体与结合在包被抗体上的人NGAL结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。

加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。

用酶标仪在450 nm波长处测OD值，NGAL浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中NGAL 的浓度。

试剂盒组成及保存未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒并按照下表中的条件分别保存各组分。

试剂体积以实际发货版说明书为准。

相关试剂在分装时会比标签上试验所需自备物品1.酶标仪(450 nm波长滤光片)2.高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL3.37℃恒温箱，4.双蒸水或去离子水5.吸水纸6.加样槽样品收集方法(具体处理方法可参考官网：/List-detail-241.html) 1.血清：全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20分钟，取上清即可检测。