中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋(NGAL)

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。

往预先包被中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。

用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平。

用纯化的大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL），再与HRP标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）浓度。

试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：4500ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶23ml×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白在妇产科领域的研究进展作者：姜亚倩毛冰昆付安冉卢克新来源：《中国现代医生》2022年第05期[摘要] 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）是一种敏感的早期疾病预测指标，在急慢性肾损伤方面作用尤为突出，属于脂质运载蛋白lipocalin家族中的一员，且该指标已逐渐用于临床。

NGAL与机体的多种生理病理过程联系紧密，与炎症免疫应答、信号转导、细胞分化及肿瘤的发生发展、胰岛素抵抗等过程密切相关。

近年来，国内外研究学者在实验中发现NGAL与子痫前期（PE）、妊娠糖尿病（GDM）、早产等妊娠相关疾病有着密切相关性，考虑其发生发展可能与机体的炎症反应、糖脂代谢及胰岛素抵抗有关。

因此类妊娠疾病对母儿影响较大，该指标的应用将有助于疾病的早发现早治疗，从而改善母婴结局。

本文现将中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）在妇产科领域的研究进展作一综述。

[关键词] 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白;子痫前期;妊娠糖尿病;早产[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2022）05-0189-03[Abstract] Neutrophil gelatinase-associated lipocalin （NGAL） is a sensitive predictor for early disease. As a member of lipocalin family， NGAL plays a prominent role in acute and chronic kidney injury and has been gradually used in clinical practice. NGAL is closely related to a variety of physiological and pathological processes in human body， and is closely related to processes such as inflammatory immune response， signal transduction， cell differentiation， tumorigenesis and progression， and insulin resistance. In recent years， domestic and foreign researchers have found in experiments that NGAL is closely related to pregnancy-related diseases such as preeclampsia （PE）， gestational diabetes mellitus （GDM）， and premature delivery. It is considered that its occurrence and development may be related to the body’s inflammatory response， glucose and lipid metabolism and insulin resistance. Therefore， pregnancy-like diseases have a greater impact on mothers and children， and the application of this predictor will help early detection and treatment of diseases， thereby improving the outcome of mothers and babies. This article reviews the research progress of NGAL in the field of obstetrics and gynecology.[Key words] Neutrophil gelatinase-associated lipocalin; Preeclampsia; Gestational diabetes mellitus; Premature delivery中性粒細胞明胶酶相关脂质运载蛋白（neutrophil gelatinase-associated lipocalin，NGAL）作为脂质运载蛋白lipocalin家族的新成员，是一种新型炎症指标，也是一种脂肪细胞因子。

医疗器械产品技术要求编号中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）测定试剂盒（胶乳免疫比浊法）1.产品型号/规格及其划分说明1试剂组成试剂1：Tris-HCl缓冲液0.05mol/L；试剂2：NGAL抗体（具体浓度依据抗体效价确定），聚苯乙烯微球≤1%（w/v）。

2校准品组成校准品：NGAL蛋白、新生牛血清、稳定剂<0.1%。

浓度范围：校准品1：0.0ng/mL、校准品2：150.0±30.0ng/mL、校准品3：600.0±120.0ng/mL、校准品4：1500.0±300.0ng/mL、校准品5：3000.0±600.0ng/mL、校准品6：5000.0±1000.0ng/mL，批特异，具体定值见标签。

3质控品的组成质控品：NGAL蛋白、新生牛血清、稳定剂<0.1%。

浓度范围：质控品1（50.0～250.0）ng/mL、质控品2（300.0～700.0）ng/mL，批特异，具体定值见标签。

1.2型号规格1)试剂1：1×30mL、试剂2：1×10mL；2)试剂1：1×30mL、试剂2：1×10mL、校准品：6×1mL（6个浓度）、质控品：2×1mL（2个水平）；3)试剂1：2×30mL、试剂2：2×10mL；4)试剂1：2×30mL、试剂2：2×10mL、校准品：6×1mL（6个浓度）、质控品：2×1mL（2个水平）；5)试剂1：2×60mL、试剂2：2×20mL；6)试剂1：1×18mL、试剂2：1×6mL、校准品：6×1mL（6个浓度）、质控品：2×1mL（2个水平）；7)200测试/盒（试剂1：1×30mL、试剂2：1×10mL）。

中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）检测的临床应用中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）是lipocalin家族新成员，NGAL 浓度越高急性肾损伤（AKI）越严重，随着血NGAL浓度的下降，AKI也得到恢复；同时在慢性肾损伤中，尿NGAL可以成为肾小管间质损害的早期标志物；通过NGAL检测可明确反映中性粒细胞活化、内皮细胞受损等病理过程，对于ICU患者常见危重病症发展有相应指示作用。

本文就NGAL在临床诊断中的应用研究近况作一综述。

标签：中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）；急性肾损伤（AKI）；慢性肾损伤；重症监护室（ICU）中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）1993年在人中性粒细胞中被发现，是细胞化学趋化物N-甲基蛋异亮苯丙肽受体之一，是可正常表达于中性粒细胞、肾小管上皮细胞、肝实质细胞、血管上皮细胞等的一种分泌性糖蛋白。

研究表明[1]，NGAL是诊断肾损伤最有效的生物学标志之一，肾损伤时由肾小管上皮细胞所分泌，其分泌量与各种肾脏疾病相关。

本文现就NGAL在临床诊断中的应用研究近况综述如下。

1 在急性肾损伤（AKI）诊疗中的应用正常生理情况下NGAL水平较低，肾缺血或毒素急性损伤肾小管时，NGAL 高表达从而诱导肾小管-间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡，以保护肾组织免受攻击。

高水平的NGAL促进肾小管上皮细胞再生修复，使肾功能得以恢复。

AKI 患者肾皮质小管、血和尿液中均发现大量NGAL堆积，可在损伤后3h的血和尿液中检测到，早于尿N-乙酰-β-葡萄糖苷酶、β2微球蛋白及血肌酐的改變。

被认为是AKI一种新的预测标志物，对于早期诊断、评估疾病严重程度、治疗监测有重要临床价值[2]。

1.1在冠状动脉搭桥手术后AKI中的应用冠状动脉搭桥手术后肾脏并发症及病死率较高，AKI发生率为 1.4%～19.50%，一旦发生肾衰竭，病死率高达15%～30%，围术期对肾损害早期诊疗十分重要[2]。

ngal胶体金法
NGAL胶体金法是一种快速检测试剂，可以定量地测定人体尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的含量。

这个检测方法主要用于人急性肾脏损伤的辅助诊断。

NGAL胶体金法使用的是一种胶体金标记技术，用胶体金作为示踪剂，通过免疫反应来检测NGAL。

这种方法具有快速、简单、准确的优点。

要使用NGAL胶体金法，需要准备以下物品：
1.NGAL定量检测试剂卡（包含胶体金标记的抗NGAL抗体）。

2.干燥剂（用于保持试剂卡的干燥）。

3.铝箔袋（用于包装试剂卡）。

4.样本收集器，例如尿杯等。

5.计时器。

6.移液器（用于吸取和滴加尿液样本）。

7.测试仪（用于读取试剂卡上的结果）。

使用步骤如下：
1.在使用试剂卡之前，请先详细阅读说明书。

2.从铝箔袋中取出试剂卡，避免触摸试剂卡的反应区。

3.将干燥剂放在试剂卡的背面，以保持试剂卡的干燥。

4.使用计时器记录时间，然后将试剂卡插入测试仪中。

5.用移液器吸取尿液样本，然后滴加在试剂卡的样品区。

6.等待反应时间（一般为10分钟），然后从测试仪中取出试剂
卡。

7.观察试剂卡上的结果，根据说明书的判读标准来判断NGAL的含量。

需要注意的是，NGAL胶体金法是一种定性检测方法，只能判断NGAL的存在与否，不能判断其含量高低。

如果需要更准确的定量检测，建议采用其他检测方法，例如ELISA等。

此外，NGAL并不是急性肾脏损伤的特异性标志物，其阳性结果需要结合临床情况进行判断。

一种新的肾损伤标志物—中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的临床意义中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白( neutrophil gelatinaseassociated lipocalin，NGAL) ，又称人脂质运载蛋白2( lipocalin 2，Ln2) 或噬铁蛋白( siderocalin) ，是人脂质运载蛋白家族中的一个新成员。

近年来，NGAL 作为一种新的肾损伤标志物倍受关注。

1、NGAL 的生物学特性NGAL 是1993 年Kjeldsen 等［1］研究中性粒细胞时发现的一种特殊颗粒组分，与明胶酶 B 即基质金属蛋白酶9( matrixmetalloproteinase-9，MMP-9) 密切相关。

人类NGAL 基因定位于第9 号染色体长臂( 9q34) ，全长5 869 bp，包括1 695bp 的5'端非转录区、178 bp 的3'端非转录区及由7 个外显子和6 个内含子构成的 3 696 bp 的原初转录区; 其相对分子质量为25 000 bp。

血小板活化因子( PAF) 、白三烯-B4( LT-B4)和N-甲酸基-甲硫氨酸-亮氨酸-苯丙氨酸( N-formyl-Met-Leu-Phe) 等是NGAL 的配体［2］。

在生理状态下，中性粒细胞、肾小管上皮细胞、肺泡巨噬细胞、支气管上皮黏液细胞等分泌少量NGAL，而脑和周围神经、结肠、子宫和卵巢、胎盘、甲状腺等组织细胞中NGAL 的表达呈阴性。

NGAL 的生理功能尚不完全清楚，可能参与不同的生理、病理过程，涉及胚胎发育、细胞分化、肿瘤的发生发展、细胞凋亡、炎症免疫应答、脂质代谢等。

在胚胎期，NGAL 发挥类似生长因子的作用，参与各类组织发育、生长及分化，促进乳腺癌、食管癌等肿瘤细胞增殖。

NGAL 与MMP-9 以二硫键形成12 500 bp 的复合物，延长MMP 的蛋白水解活性，促进MMP-9 对细胞基底膜的降解，从而浸润周围基质，介导癌细胞转移。

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）产品货号：E-EL-H6127产品规格：96T/48T/24T/96T*5Elabscience®人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human NGAL(Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

用途该试剂盒用于体外定量检测人血清、血浆或其它相关生物液体中NGAL浓度。

检测原理本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。

用抗人NGAL抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的人NGAL会与包被抗体结合。

后依次加入生物素化的抗人NGAL抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗人NGAL抗体与结合在包被抗体上的人NGAL结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。

加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。

用酶标仪在450 nm波长处测OD值，NGAL浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中NGAL 的浓度。

试剂盒组成及保存未拆封的试剂盒可在2-8℃保存一周；如果一周以后才使用试剂盒，请拆开试剂盒并按照下表中的条件分别保存各组分。

试剂体积以实际发货版说明书为准。

相关试剂在分装时会比标签上试验所需自备物品1.酶标仪(450 nm波长滤光片)2.高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL3.37℃恒温箱，4.双蒸水或去离子水5.吸水纸6.加样槽样品收集方法(具体处理方法可参考官网：/List-detail-241.html) 1.血清：全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20分钟，取上清即可检测。

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白怎么样？中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白是怎么样？一个人如果拥有了健康的体魄、心理和文化，是值得非常自豪的事情。

身体的思想的和文化的健康，为我的成长道路铺就了一条阳光灿烂的大道，为我今后幸福的人生打下了良好的基础。

拥有健康的身体，应该从一点一滴做起！如：不偏食、不厌食、不挑食！并且要做到每天体育锻炼！还有多喝水，多吃水果。

下面为大家介绍中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白怎么样？中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白是在包括肾小管在内的一些组织器官的中性粒细胞和上皮细胞中表达的小分子蛋白。

NGAL在肾脏中的表达会因不同原因的肾损伤而显著升高，并且释放到尿液和血液中。

NGAL水平可在肾损伤的2小时内升高，因此被作为早期敏感的肾损伤生物标志物。

目的探讨中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)在体外循环术后急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)早期诊断中应用。

方法选择120例进行体外循环手术的先天性心脏病患者,体外循环结束后第一个12 h内采集尿样及血样1次/2 h,此后3 d 内采集1次/12 h,采用ELISA方法对尿样中NGAL进行定量分析,同时测定血清肌酐基线水平,并在术后相应时间点检测血清肌酐水平,血清肌酐比基线水平增加50%以上为发生AKI的标准。

结果术后3 d内有21例发生不同程度AKI,发生率17.5%,AKI组在体外循环术后各时间点尿NAGL浓度都显著升高,以术后2~6 h最为显著,两组比较有显著性差异,对术后2 h的尿NAGL浓度在界限值为100μg/L时进行ROC分析,尿NAGL在AKI诊断中的敏感性和特异性分别为96%和93%。

结论尿NAGL可以作为体外循环术后AKI的预测指标,在诊断AKI时较血清肌酐早,有利于早期对AKI进行预防和干预。

急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)作为体外循环术后常见的严重的并发症之一,其发生率为6%～15%,而一旦发生AKI,其中需要透析治疗患者病死率达20%～60%[1]。