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手性流动相添加剂-超高效液相色谱法拆分头孢噻吩对映体

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手性药物高效液相色谱拆分

手性药物高效液相色谱拆分

C S P 法优缺点
优点：分离时间短，而手性选择性和拆分能力
高，多数药物在分离前都不需要进行衍生化反应， 分 离方法直接。
局限性：色谱柱价格昂贵，部分固定相还存在稳
定性差，柱容量低，柱强度差等缺点，且根据不同手 性药物的性质不同，选用的分析方法也不同。
手性流动相( C M P ) 拆分法
又称手性添加剂法，这种拆分法是在流动相中加 入手性试剂，利用手性试剂与各对映体结合的稳定常 数不同，以及药物与结合物在固定相上分配系数的不 同来进行分离。
局限性：是手性试剂需要有高的光学纯度，各对映体的衍生
化速率及平衡常数应一致， 要求衍生化反应迅速、 彻底， 否 则影响定量结果。衍生化和色谱分析过程中应不发生消旋化， 外消旋药物需要有可被衍生化的基团， 此外衍生化法步骤较烦 琐， 衍生化试剂 绝大多数毒性相当大， 而且该方法难以实现 分析的自动化。
该法要求手性试剂及反应产物在化学性质上和 手性上很稳定，在反应及色谱条件下，试剂、手 性药物和反应产物不发生消旋化反应。手性试剂 应具有紫外或荧光吸收等敏感结构， 使生成物具 有良好的可检测性。
一些手性衍生化试剂和应用
CD F法优缺点
优点：可使用已有的非手性同定相， 花费少，通过选用具有
强烈紫外吸收或荧光吸收的手性试剂， 可提高检测敏感度， 而 且多数的衍生化试剂具有良好的对热及水的稳定性。
扑尔敏的拆分
色谱柱： 2 5 0× 4 .6 m m i .d ，(制备醋酸纤维素 酯类液相色谱固定相，涂渍在修饰硅胶表面)， 采用 湿法自行装柱。
色谱条件：以正己烷 一异丙醇的混合溶液( 体积比 为9： 1 ) 作流动相， 流速为 0 . 5 mL ／ m i n ，柱 温3 0 ℃ ,紫外检测波长为2 5 4 n m。

新型高效液相色谱流动相手性添加剂法拆分头孢氨苄对映体

新型高效液相色谱流动相手性添加剂法拆分头孢氨苄对映体
第３ ２ 卷第 ２ 期
２ ０ １ ３年 ６月
中南 民族大学学报（ 自然科学 版）
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｓ ｏ ｕ ｔ ｈ — Ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ｌ ａ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ｆ ｏ ｒ Ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｌｉ ａ ｔ ｉ ｅ ｓ （ Ｎ ａ ｔ ． Ｓ ｃ ｉ ． Ｅ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ）
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高效液相色谱手性流动相添加剂法分离药物对映体

高效液相色谱手性流动相添加剂法分离药物对映体

高效液相色谱手性流动相添加剂法分离药物对映体
曾苏
【期刊名称】《色谱》
【年(卷),期】1995(13)1
【摘要】高效液相色谱手性流动相添加剂法分离药物对映体曾苏（浙江医科大学药物分析教研室杭州３１００３１）１前言生物体内的手性环境如酶、受体、抗体等与药物对映体的生物活性密切相关，使用消旋体药物可能导致错误的药动学行为和作用模式￣［１］。

例如震惊世界的沙立度胺致...
【总页数】1页(P21)
【作者】曾苏
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】TQ460.7
【相关文献】
1.高效液相色谱法分离药物对映体中手性流动相添加剂的应用 [J], 祝艳琳;章靖;田丹碧
2.手性流动相添加剂高效液相色谱法分离苯基琥珀酸对映体 [J], 阮源萍;郑子达;张雪曼;黄培强
3.高效液相色谱手性流动相添加剂法分离扁桃酸和邻氯扁桃酸对映体 [J], 王金朝;曾苏
4.以羧甲基-β-环糊精为HPLC手性流动相添加剂法分离两种手性药物对映体 [J],
刘静;董斌;丁红雨
5.高效液相色谱手性流动相添加剂法分离3种黄酮类化合物对映体 [J], 孙亚男;李彤;马辰
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高效液相色谱手性流动相添加剂法拆分佐匹克隆对映体

高效液相色谱手性流动相添加剂法拆分佐匹克隆对映体

高效液相色谱手性流动相添加剂法拆分佐匹克隆对映体叶祥喜;宋燕西;陈旭涛;季有知;孙璐璐;吴小倩;杜春燕【摘要】以β-环糊精作为手性流动相添加剂,研究了佐匹克隆对映体在反相高效液相色谱系统中的拆分情况.探讨了β-环糊精浓度、流动相中甲醇含量、流动相pH 值、流动相流速及温度等因素对佐匹克隆对映体拆分的影响.通过采用单一变量法对实验条件进行考察,最终得到了佐匹克隆对映体手性拆分的最佳色谱条件.结果表明:当采用Inertsil ODS-SP(5μ.m,4.6 mm×250 mm)色谱柱,甲醇为有机相,流动相为20mmol/L磷酸二氢钾缓冲液(含15 mmol/Lβ-环糊精)-甲醇(85∶15),流速为0.8 mL/min,pH值为5.5,温度为35℃,紫外检测波长为305 nm,进样量为20 μL 时,佐匹克隆对映体得到良好分离,其对映体的保留时间分别为67.42 min和74.48 min,分离度(R)为1.62.该方法操作简单,灵敏度高,拆分效果理想,且比手性固定相法成本低,从而为佐匹克隆对映体的进一步深入研究提供了一种新方法.【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2014(033)004【总页数】4页(P471-474)【关键词】高效液相色谱法;手性流动相添加剂;佐匹克隆;β-环糊精;对映体分离【作者】叶祥喜;宋燕西;陈旭涛;季有知;孙璐璐;吴小倩;杜春燕【作者单位】东华大学环境科学与工程学院,上海201620;东华大学环境科学与工程学院,上海201620;东华大学环境科学与工程学院,上海201620;东华大学环境科学与工程学院,上海201620;东华大学环境科学与工程学院,上海201620;东华大学环境科学与工程学院,上海201620;东华大学环境科学与工程学院,上海201620【正文语种】中文【中图分类】O657.7;TQ460.72佐匹克隆(Zopiclone)是一种安全性较高的速效催眠药，有催眠、镇静、抗焦虑和抗惊厥等作用，以及延长睡眠时间、提高睡眠质量、减少夜间觉醒和早醒次数等效果，且对呼吸系统的抑制作用极小，因而具有次晨残余作用低的特点［1］。

HPLC手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体

HPLC手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体

第27卷第4期 齐 齐 哈 尔 大 学 学 报 Vol.27,No.4 2011年7月 Journal of Qiqihar University July,2011HPLC 手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体卢建国1，王立艳2，苏立强2（1．黑龙江农垦职业学院，哈尔滨150025；2. 齐齐哈尔大学 化学与化学工程学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006）摘要：建立了以羧甲基-β-环糊精为手性流动相添加剂，在反相液谱条件下拆分巴氯芬对映体的方法。

研究了手性添加剂的种类及浓度、流动相组成、pH 值及流速等因素对拆分的影响。

流动相为甲醇、乙腈、水，体积比为90︰5︰5，其中含2.00 g/L CM-β-CD，pH 值5.95，流速0.60 mL/min，检测波长231 nm，分离度为1.31。

该方法简便、快速、相对偏差小。

关键词：羧甲基-β-环糊精；流动相添加剂；高效液相色谱法；巴氯芬；对映体中图分类号：O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：1007-984X(2011)04-0060-03巴氯芬（化学名β-4-氯-γ-氨基丁酸）是应用于临床的选择性GABA B受体激动剂，其化学结构见图1。

目前，临床使用的仍是巴氯芬外消旋体。

据文献报道R(-)-巴氯芬的生理活性是S（+）-巴氯芬的100倍[1]。

现有拆分方法有毛细管电泳法[2]、柱前衍生化法[3]和手性固定相法[4]，但用HPLC 手性流动相添加剂法拆分巴氯芬对映体还未见报道。

本文以羧甲基-β-环糊精（CM-β对映体分离度达1.3，此法无需昂贵的手性柱，也无需繁琐的柱前衍生化，方法简便快速，相对标准偏差小。

1 实验部分1.1 仪器与试剂高效液相色谱（HPLC）系统（大连依利特分析仪器有限公司）：P200Ⅱ高压恒流泵、UV200Ⅱ紫外可变波长检测器、Echrom98色谱工作站；AS3120超声波清洗器（天津奥特赛恩斯仪器有限公司）。

甲醇、乙腈（色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心）；β-环糊精（β-CD，中国医药集团上海化学试剂公司）；羧甲基-β-环糊精（实验室自己合成）；巴氯芬原料药（武汉祥和精细化工有限公司）。

高效液相色谱法测定头孢噻吩钠中的有关物质

高效液相色谱法测定头孢噻吩钠中的有关物质

高效液相色谱法测定头孢噻吩钠中的有关物质
樊后民;王刚林
【期刊名称】《中国药房》
【年(卷),期】2005(016)011
【摘要】目的:建立以高效液相色谱法测定头孢噻吩钠中有关物质的方法.方法:色谱柱为C18,流动相为醋酸钠溶液-乙腈(82:18),流速为1.0ml/min,柱温为30℃,检测波长为254nm.结果:各项专属性试验中,头孢噻吩钠主峰与其它杂质峰均分离较好;3批样品中主要杂质峰面积之和均未超过对照品溶液主峰面积的2倍.结论:本方法简便、准确、重现性好.
【总页数】2页(P860-861)
【作者】樊后民;王刚林
【作者单位】重庆医科大学附属第一医院药剂科,重庆市,400016;重庆医疗器械质量检验中心,重庆市,400015
【正文语种】中文
【中图分类】R927.1
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定注射用阿莫西林钠氟氯西林钠有关物质和含量 [J], 曹晓云;刘海玲
2.反相高效液相色谱梯度洗脱法测定注射用氨苄西林钠舒巴坦钠有关物质 [J], 周明昊;胡楚楚
3.高效液相色谱法测定注射用哌拉西林钠他唑巴坦钠(4:1)含量及有关物质 [J], 周
卫民;李健和;彭六保;曹俊华;罗霞
4.高效液相色谱法测定注射用头孢哌酮钠舒巴坦钠及有关物质的研究 [J], 余晓男
5.高效液相色谱法测定头孢噻吩钠含量和有关物质 [J], 唐倩;杨元娟;杨宪;曾正渝因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效液相色谱法在手性药物拆分中应用

高效液相色谱法在手性药物拆分中的应用纲要：外消旋化合物的手性分别是获取单调对映体的方法之一。

跟着人们对纯光学药物的需求日趋增添，各样手性分别技术得以快速发展。

近几十年来，在这些手性分别技术中，高效液相色谱法( HPLC ) 被公以为是一种强盛、快速、高效的分别技术，它已成功应用于对映体药物的分别剖析和制备中。

HPLC 用于敌手性药物分别的研究已获得很大进展，而且研发了大批可应用于手性小分子和聚合物分别的手性固定相，大大提升HPLC 的手性辨别能力。

本文以HPLC 的手性药物分别为焦点，介绍了近几年高效液相色谱法手性固定相的新发展和应用。

重点词：高效液相色谱法手性药物手性拆分Application of High Performance Liquid Chromatography in Chiral Separation of PharmaceuticalsAbstract：Resolution of racemic compounds is one of the potential ways of obtaining both enantiomers. The increasing demand for enantiopure drugs has led to the development of a variety of stereoselective separation technologies. Among several resolution techniques in the past few decades, high performance liquid chromatography ( HPLC ) is well recognized as a powerful, fast and efficient technique, which has been successfully employed for analysis and preparation of enantiomers of drugs. Enantioseparation by HPLC has significantly advanced, and a large number of chiral stationary phases ( CSPs ) for HPLC have been developed using both chiral small molecules and polymers with chiral recognition abilities. This review focuses on various HPLC methods for chiral separation of pharmaceuticals, many new developments and applications are introduced in chiral stationary phase of HPLC in recent years.Keywords：HPLC; Chiral drug; Chiral separation;引言手性药物是指药物分子构造中引下手性中心后，获取的一对互为实物与镜像的对映异构体，是当前药物研究领域的热门之一。

高效液相色谱手性流动相添加法拆分阿卓乳酸对映体

高效液相色谱手性流动相添加法拆分阿卓乳酸对映体张虎;沈芒芒;童胜强;颜继忠【摘要】采用 C18反相色谱柱，以磺丁基醚-β-环糊精（SBE-β-CD）作为手性流动相添加剂，建立了阿卓乳酸对映体的高效液相色谱拆分方法。

考察了环糊精衍生物类型、手性添加剂浓度、流动相 pH、流速和柱温对手性分离的影响，同时探讨了高效液相色谱采用磺丁基醚-β-环糊精分离阿卓乳酸对映体的分离机制及包结常数，确定了色谱条件为YMC-Pack ODS-A C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5μm），流动相为含25 mmol / L SBE-β-CD 的0.1 mol / L 磷酸盐缓冲液（pH 2.68）-乙腈（90∶10，v / v），流速为0.6 mL / min，柱温为30℃，紫外检测波长为220 nm。

对映体的保留时间分别为26.65和28.28 min，分离度为1.68。

本方法分离度好，简便易行，且比使用手性固定相分离更加经济。

%A method was established for the enantioseparation of atrolactic acids using high performance liquid chromatography with sulfobutyl ether-β-cyclodextrin( SBE-β-CD ) as the chiral mobile phase additive,and a C18 reversed-phase column. The influences of the different types of cyclodextrin derivatives,the concentration of chiral mobile phase additive,pH value of the mobile phase,the flow rate and column temperature on the peak resolution were investiga-ted. The separation mechanism for atrolactic acids by high performance liquid chromatography using chiral mobile phase additive,as well as the formation of inclusion complex between SBE-β-CD and atrolactic acid was studied. In addition,the formation constant was calculated. The enantioseparation was carried out on a reversed-phase column YMC-PackODS-A C 18(250 mm× 4. 6 mm,5 μm)with chiral mobile phase co nsisted of 0.1 mol/L phosphate buffer at pH 2.68 containing 25 mmol/L SBE-β-CD-acetonitrile(90∶10,v/v). The detection wavelength was 220 nm. The flow rate was 0.6 mL/min and the column temperature was 30℃.The retention times of atrolactic acids were 26.65 and 28.28 min,and the peak resolution of 1.68 was achieved. The above established method proves to be a simple and economical way for analytical enanti-oseparation of atrolactic acid with high peak resolution.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2014(000)006【总页数】4页(P612-615)【关键词】高效液相色谱;手性流动相添加法;阿卓乳酸;对映体拆分;磺丁基醚-β-环糊精【作者】张虎;沈芒芒;童胜强;颜继忠【作者单位】浙江工业大学药学院，浙江杭州 310032;浙江工业大学药学院，浙江杭州 310032;浙江工业大学药学院，浙江杭州 310032;浙江工业大学药学院，浙江杭州 310032【正文语种】中文【中图分类】O658阿卓乳酸（atrolactic acid），又名α－甲基扁桃酸，是一种重要的非甾体消炎镇痛药合成中间体（其结构见图1），可用来合成多种2－芳基丙酸类药物中间体［1，2］，其活性成分主要存在于S型异构体中，而R型异构体活性甚微，甚至没有活性［3］。

头孢噻吩手性对映体高效毛细管电泳分离

头孢噻吩手性对映体高效毛细管电泳分离王荣;贾正平;徐丽婷;胡晓丽;李永民;陈立仁;谢华【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2003(031)006【摘要】@@ 1 引言rn`头孢噻吩为第二代头孢菌素,对革兰氏阴性菌有较强的抗菌作用,且具有高度抗β-内酰胺酶性质,可用于治疗敏感菌所致的尿路感染、呼吸道感染、腹膜炎、败血症、心内膜炎、皮肤和软组织感染等.但有胃肠道反应、白细胞减少、转氨酶升高、氮质血症和肾功能减退等副作用.目前国内使用的头孢噻吩对映体为含有两种对映异构体的外消旋体的混合物.对于头孢噻吩手性对映体高效毛细管电泳手性分离未见文献报道.因此,研究它们的手性分离不仅为此类手性药物提供了一种新的手性分离分析方法,而且对了解它们的药理作用、药效以及在临床研究上都具有重要的理论和实际意义.【总页数】1页(P766-766)【作者】王荣;贾正平;徐丽婷;胡晓丽;李永民;陈立仁;谢华【作者单位】中国科学院兰州化学物理研究所,兰州,730000;兰州军区兰州总医院,兰州,730050;兰州军区兰州总医院,兰州,730050;兰州军区兰州总医院,兰州,730050;兰州军区兰州总医院,兰州,730050;中国科学院兰州化学物理研究所,兰州,730000;中国科学院兰州化学物理研究所,兰州,730000;中国科学院兰州化学物理研究所,兰州,730000【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.手性流动相添加剂-超高效液相色谱法拆分头孢噻吩对映体 [J], 孙鹏;高玉玲;王金梅;刘秀娟2.苯磺酸氨氯地平对映体的高效毛细管电泳手性分离 [J], 黄碧云;赵鑫;袁牧;刘夏雯3.高效毛细管电泳法手性拆分盐酸2-氨基萘满对映体 [J], 苗文娟;王述蓉;杨蕾;陈应春;陈聪;叶利明4.高效毛细管电泳法分离八种含氨基手性药物的对映体 [J], 夏小庆;崔华5.高效毛细管电泳法研究美托洛尔、艾司洛尔和维拉帕米的对映体的手性分离 [J], 李学仁;程庆春;杨跃伟;张云斌;尚素芬;王洪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

手性药物对映体的环糊精手性流动相_手性固定相HPLC法拆分

关键词 手性识别 ;环糊精 ;对映体 ;高效液相色谱法
光学异构体药物具有不同的生理作用早已 为人们所熟知 ,例如震惊世界的沙立度胺致畸 事件 ,据研究认为完全由于其 ( S ) 2( - ) 异构体 所致 。目 前 医 药 生 产 中 , 手 性 药 物 已 超 过 50 % ,然而有近 85 %～90 %的手性药物仍以外 消旋体生产出售和使用 。因此建立高专属性 、 高灵敏度 、高分离度的对映体拆分和测定方法 , 对提高药物的活性 、减小副作用 ,深入研究药物 的作用机理等具有重要的理论和实际意义 。
由表 1 可见 ,3 个对映体药物均形成 1 ∶1 的环糊精手性包络物 ,在 8018 两对对映体中 , 对映体 (1) 和对映体 (2) 之间的包络常数是非常 一致的 ,因此表明在β2环糊精对 8018 对映体拆 分过程中 ,只有一个手性中心在起作用 ,而与另 一个手性中心无关 。 3 β2环糊精手性流动相 HPLC 法拆分 8018 , 8021 和 1113 对映体
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药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 1998 ,33 (2) ∶143～147
(A T3) ,99 % ,毒物药物研究所合成并提供 ; 硫 酸阿托品 ,B P ,美国 T &HS 公司 ; 氢溴酸东莨 菪碱 ,Merck 公司 ;去甲基安定 ,对照品 ,中国药 品生物制品检定所 ; 1 , 1’222联萘酚 , Sigma 公 司。
β2环糊精 ,分析纯 ,上海试剂采购供应站 , 经重蒸水 3 次重结晶 、P2O5 真空干燥提纯 。其 他试剂均为国产优级或色谱纯 ,实验用水为二 次石英亚沸蒸馏水 。
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手性流动相添加剂-超高效液相色谱法拆分头孢噻吩对映体孙鹏;高玉玲;王金梅;刘秀娟【摘要】Hydroxypropyl-β-cyclodextrin (HP-β-CD) was chosen as a chiral selector to be added to the mobile phase to achieve separation of enantiomers of cephalothin by UHPLC.Agilent Poroshell 120 SB-C18 (2.1 mm × 100 mm,2.7 μm) chromatographic column was used as stationary phase.A mixture of acetonitrile and 12.0 mmol · L-1 HP-β-CD solution (pH 7.2),mixed in the ratio of 80 to 20,was used as mobile phase with a flow rate of 0.25 mL · min-1.Under the chosen conditions,good baseline separation of the enantiomers of cephalothin was attained,and giving values of RSD's obtained from 6 successive determinations no more than 2.3％.%在流动相中加入手性选择剂羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)实现了用超高效液相色谱法拆分头孢噻吩对映体.所用色谱柱为Agilent Poroshell 120 SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7μm);流动相为乙腈与pH7.2的12.0 mmol·L-1羟丙基-β-环糊精溶液以体积比80:20组成的混合液;流量为0.25 mL·min-1.在所选条件下头孢噻吩的对映体获得基线分离,连续测定6次的相对标准偏差不大于2.3％.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2017(053)002【总页数】3页(P169-171)【关键词】超高效液相色谱法;头孢噻吩;对映体;手性流动相添加剂【作者】孙鹏;高玉玲;王金梅;刘秀娟【作者单位】黑龙江八一农垦大学测试中心,大庆163319;农业部农产加工品质量监督检验测试中心,大庆163319;黑龙江八一农垦大学测试中心,大庆163319;农业部农产加工品质量监督检验测试中心,大庆163319;大庆石化公司质量检验中心,大庆163711;大庆石化公司质量检验中心,大庆163711【正文语种】中文【中图分类】O652.63头孢类抗生素被称为先锋菌素类,其化学结构为在头孢菌素的母核上通过化学方法连接不同的侧链基团而制得的半合成β-内酰胺类抗生素[1]。

头孢类抗菌药物以其抗菌谱广、杀菌活力强、耐酸、耐酶、疗效高、毒副作用相对较小等优点而广泛应用于临床[2-4],为人类战胜各种细菌感染作出了极大贡献。

头孢噻吩为第二代头孢菌素,可用于治疗敏感菌所致的尿路感染、呼吸道感染、腹膜炎、败血症、心内膜炎、皮肤和软组织感染等[5]。

有关头孢菌素类手性药物对映体的分离方法有高效液相色谱法[6-7]、高效毛细管电泳法[8],但已报道的分离方法分离时间长,对分离条件要求苛刻。

因此,研究一种快速分离头孢类对映体的方法,为此类手性药物临床安全提供参考非常必要。

本工作采用手性流动相添加剂-超高效液相色谱法拆分头孢噻吩对映体,方法简便、快速,而且对了解它们的药理作用、药效以及在临床研究上都具有重要的理论和实际意义。

1．1 仪器与试剂Agilent 1290型超高效液相色谱仪,配G4226A型自动进样器、G4212A型二极管阵列检测器(DAD)、G4220A型二元泵、1290保护柱、C.01.05版本Open LAB CDS软件;SK 8200H型超声波清洗机;VORTEX-2型涡旋仪;ML 204型电子分析天平;PE-20型pH计;0.22 μm微孔滤膜。

头孢噻吩溶液:2 g·L-1,称取头孢噻吩(纯度为95%以上) 0.2 g,用流动相定容至100mL。

羟丙基-β-环糊精溶液(水相):12.0 mmol·L-1,称取羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD) 2.83 g,用水定容至100 mL,用0.01 mol·L-1氢氧化钠溶液调节pH为7.2,过0.22 μm水相微孔滤膜。

有机相:乙腈过0.22 μm有机相微孔滤膜,备用。

甲醇、乙腈均为色谱纯,氢氧化钠为优级纯,试验用水为蒸馏水。

1．2 色谱条件Agilent Poroshell 120 SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7 μm),柱温为室温;流动相为乙腈与pH 7.2的12.0 mmol·L-1 HP-β-CD溶液以体积比80∶20组成的混合液,流量0.25 mL·min-1;进量样10 μL;紫外检测波长230 nm。

1．3 试验方法按色谱条件对头孢噻吩溶液进行分离。

2．1 色谱行为头孢噻吩对映体分离色谱图见图1。

2．2 色谱柱的选择试验考察了Agilent Poroshell 120 SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7 μm)和Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.8μm)对分离的影响。

结果发现:XDB-C18色谱柱对头孢噻吩对映体无法达到基线分离,SB-C18色谱柱为未封端柱,XDB-C18色谱柱为封端柱,这是因为SB-C18色谱柱中裸露的硅羟基增加了对头孢噻吩对映体的手性识别作用,实现了更好的分离。

试验选用Agilent Poroshell 120 SB-C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.7 μm)。

2．3 手性选择剂种类及浓度的选择试验分别考察了β-环糊精(β-CD)及HP-β-CD对分离效果的影响。

结果发现:β-CD 对头孢噻吩对映体有手性识别,但不能达到基线分离,HP-β-CD能使头孢噻吩对映体得到很好的分离。

这是因为HP-β-CD与头孢噻吩对映体形成新的氢键,增强了HP-β-CD与头孢噻吩对映体之间的作用,进而增加了HP-β-CD与头孢噻吩对映体的手形识别能力。

试验选择HP-β-CD为手性选择剂。

试验考察了HP-β-CD的浓度为6～18 mmol·L-1时对分离的影响,结果见图2。

由图2可知:随HP-β-CD浓度的增大,头孢噻吩对映体的分离度逐渐增加,当HP-β-CD的浓度为12.0 mmol·L-1时,头孢噻吩对映体的分离度最大。

试验选择HP-β-CD的浓度为12.0 mmol·L-1。

2．4 流动相组成的选择流动相比例是影响对映体分离的又一重要因素。

试验考察了头孢噻吩对映体分别在甲醇-HP-β-CD溶液体系和乙腈-HP-β-CD溶液体系对分离的影响。

结果表明:在甲醇-HP-β-CD溶液体系中,改变流动相的比例,均不能得到很好的分离,故试验选择乙腈-HP-β-CD溶液体系为流动相。

试验还考察了乙腈和12.0 mmol·L-1 HP-β-CD溶液的体积比不同时对分离的影响。

结果表明:当乙腈和12.0 mmol·L-1 HP-β-CD溶液的体积比为80∶20时,头孢噻吩对映体获得基线分离。

试验选择乙腈和12.0 mmol·L-1 HP-β-CD溶液的体积比为80∶20。

2．5 流量的选择试验考察了流量对头孢噻吩对映体分离的影响。

结果表明:流量减慢延长了头孢噻吩对映体与固定相相互作用的时间,可提高分子选择能力,会适当地增大分离度,但流量减慢也会使峰展宽、保留时间延长。

兼顾色谱峰形及分离度,试验选择流动相流量为0.25 mL·min-1。

2．6 水相酸度的选择水相酸度是影响对映体分离的又一重要因素。

试验分别考察了水相pH为3.0,7.0,10.0时色谱峰形及保留时间,兼顾色谱峰形及保留时间,试验初步确定pH在7.0附近。

试验考察了水相pH在6.4～8.0内对分离的影响。

结果表明:头孢噻吩对映体在pH 7.2时,色谱峰形及保留时间均满意。

试验选择水相pH为7.2。

2．7 方法的重现性按色谱条件分离头孢噻吩对映体,连续进样6次,头孢噻吩对映体的保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD)依次为2.0%,2.3%,说明该方法的重现性良好。

本工作采用HP-β-CD为手性流动相添加剂结合超高效液相色谱法拆分头孢噻吩对映体,操作简单、灵敏度高,1 min内完成对映体的分离,且比手性固定相分离经济、快捷、安全,为头孢类对映体的分离提供了有效的参考。

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