食品中亚硝酸盐含量的测定

实验二食品中亚硝酸盐含量的测定一、实验目的1. 了解亚硝酸盐的危害，掌握测定食品中亚硝酸盐含量的方法。

2. 掌握色谱法和分光光度法的原理和操作方法，学会利用这两种方法测定食品中亚硝酸盐的含量。

二、实验原理1. 亚硝酸盐的危害亚硝酸盐是一种常见的致癌物质，它在在一定条件下可以转化为亚硝胺，而亚硝胺是一种强致癌物。

人体摄入过量的亚硝酸盐会导致亚硝胺的形成，从而增加患癌症的风险。

2. 色谱法测定亚硝酸盐含量色谱法测定亚硝酸盐含量的原理是利用反相色谱分离亚硝酸盐，并通过紫外检测器检测样品中亚硝酸盐的含量。

具体步骤如下：（1）样品制备：将待测样品加入水中，同时加入明矾和硫酸铜，使亚硝酸盐被还原为亚硝酸钠。

（2）色谱柱处理：用反相色谱柱，在样品进样口处注入样品，经过一定的进样残留时间后，以一定的流速进行柱洗脱。

柱洗脱时，先用无机盐水拉平基线，再用有机溶剂进行洗脱。

（3）检测：用紫外检测器检测亚硝酸盐的吸光度，从而得到亚硝酸盐的含量。

分光光度法测定亚硝酸盐含量的原理是利用亚硝酸盐和硫酸铁（Ⅱ）发生化学反应，在一定的酸性条件下生成的重氮化合物与磺基苯二胺反应，生成紫色产物，其最大吸收波长为540 nm。

具体步骤如下：（2）反应：加入磺基苯二胺后，放置反应10-30min，其间温度保持在5℃-25℃之间。

（3）检测：利用分光光度计测定紫色产物在540nm处的吸光度，计算出亚硝酸盐的含量。

三、实验步骤1. 应注意的问题（1）亚硝酸钠充分还原后，一定要在酸性环境下进行测定。

（2）在反应中要控制好温度，以保证反应的准确性。

（3）样品应尽量少受光照，以防止光照影响样品的含量。

2. 实验器材和试剂（1）色谱仪、分光光度计（2）无水乙醇、对乙酰胺、对乙酰苯胺等试剂（3）标准亚硝酸钠（4）食品样品（2）色谱柱处理：将反相柱的一端用具有无机盐的水洗涤，并用有机溶剂过渡洗脱，直到出现白色较少的沉淀为止，这表明柱已达到欧拉。

（1）样品准备：取适量待测样品，加入约150mL的水中，用硫酸酸化使亚硝酸盐转化为硝酸盐，加入对乙酰苯胺拌匀，静置10min。

检测亚硝酸盐含量方法亚硝酸盐是一类常见的食品添加物，也是一种有毒的化学物质。

高浓度的亚硝酸盐对人体健康有害，会引发亚硝酸盐中毒。

因此，对食品中亚硝酸盐含量的检测十分重要。

目前常用的亚硝酸盐含量检测方法主要有以下几种：1. 毛细管电泳法：毛细管电泳法是一种高效、快速、准确的分离和定量分析方法。

该方法通过在毛细管中通入测试样品，利用毛细管内电场作用下的电泳迁移速度的差异，将样品中的亚硝酸盐和其他物质分离开来，并通过检测器检测到亚硝酸盐的浓度。

毛细管电泳法具有检测速度快、分离效果好、灵敏度高等优点。

2. 高效液相色谱法：高效液相色谱法是一种常用的分离和测定技术，具有快速、高效、准确的特点。

该方法通过将样品中的亚硝酸盐与色谱柱分离，然后利用色谱柱上特定的检测器对亚硝酸盐进行测定。

高效液相色谱法具有分离效果好、灵敏度高、准确性好等优点，被广泛应用于食品安全检测领域。

3. 分子光度法：分子光度法是一种通过测定物质吸收、发射或透射光谱特性来确定其浓度的方法。

对于亚硝酸盐的检测，可以利用亚硝酸盐与草酸铁反应生成深红色物质的特性，通过测定样品溶液的吸光度来间接检测亚硝酸盐的含量。

分子光度法具有操作简便、灵敏度高、准确性好等优点，被广泛应用于亚硝酸盐含量的监测。

4. 电化学法：电化学法是一种利用物质在电场或电势梯度下发生的电流、电荷、电容、电阻等变化来检测物质浓度的方法。

对于亚硝酸盐的检测，常用的电化学方法有循环伏安法和方波伏安法。

这些方法通过在电极上加上特定的电压或电流，并通过检测电极上的电信号变化来间接检测亚硝酸盐的含量。

电化学法具有操作简便、响应速度快等特点。

上述的检测方法在实际中可以根据需要选择合适的方法进行使用。

不同的检测方法有着不同的优缺点，因此需要根据实际情况选择合适的方法。

在实际使用中，还需要注意样品的处理、仪器设备的校准和操作人员的技能等因素，以确保检测结果的准确性和可靠性。

此外，由于食品中亚硝酸盐的含量可能会受到多种因素的影响，因此在检测过程中需要注意相关条件的控制，以确保测试结果的准确性。

食品中亚硝酸盐的检测方法方法一：亚硝酸盐快速检测管使用说明：方法原理：按照国标GB/T 5009.33做成的速测管，与标准色卡比较定量。

操作方法：1. 食盐中亚硝酸盐的快速检测及食盐与亚硝酸盐的快速鉴别：用袋内附带小勺取食盐1平勺，加入到检测管中，加入蒸馏水或纯净水至1ml刻度处，盖上盖，将固体部分摇溶，10分钟后与标准色板对比，该色板上的数值乘上10即为食盐中亚硝酸盐的含量mg/ kg，（国标规定食盐（精盐）中亚硝酸盐的限量卫生标准应≤2 mg/kg）。

当样品出现血红色且有沉淀产生或很快退色变成黄色时，可判定亚硝酸盐含量相当高，或样品本身就是亚硝酸盐。

2. 液体样品检测：直接取澄清液体样品1ml加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，找出与检测管中溶液颜色相同的色阶，该色阶上的数值即为样品中亚硝酸盐的含量mg/L（以NaNO2计）。

（牛乳及豆浆也可直接检测，结果不得超过0.25mg/L ，有颜色的液体样品可加入一些活性炭脱色过滤后测定）。

3. 固体或半固体样品检测：取粉碎均匀的样品1.0g或1.0ml至10ml比色管中，加蒸馏水或去离子水（纯净水）至刻度，充分震摇后放置，取上清液（或过滤或离心得到的上清液）1.0ml加入到检测管中，盖上盖，将试剂摇溶，10分钟后与标准色板对比，该色板上的数值乘上10即为样品中亚硝酸盐的含量mg/ kg，L（以NaNO2计）。

如果测试结果超出色板上的最高值，可定量稀释后测定，并在计算结果时乘上稀释倍数（如从10ml比色管中取出1.0mL转入另一支10ml 比色管中，加水至刻度，从中取1.0mL加入到检测管中测定，测试结果乘上100（倍稀释）即为样品中亚硝酸盐的含量。

方法二：通过镀铜镉粒将硝酸盐还原为亚硝酸盐，并测其吸光度来计算牛奶中硝酸盐与亚硝酸盐含量的方法，可以检测市售牛乳中硝酸盐和亚硝酸盐。

方法三：检测硝酸盐有试纸条法，检测亚硝酸盐可应用硝酸根与无水对氨基苯磺酸重氮化再与奈胺偶合呈紫红色染料，根据颜色深浅来判定牛奶中亚硝酸盐的含量。

国标食品中亚硝酸盐的测定
国标食品中亚硝酸盐的测定主要包括以下步骤：
1.取适量待测食品样品。

2.将样品加入烧杯中，加入适量蒸馏水，用搅拌棒搅拌均匀。

3.过滤，将过滤液收集到一瓶中。

4.在一支试管中加入适量过滤液和一定体积的硫酸，混合均匀后静置数分钟，使硝酸盐完全转化为亚硝酸盐。

5.加入苯酚试液，再次混合均匀，然后立即测定吸光度。

6.根据吸光度值，查找国家标准中相应的浓度比对值，计算出亚硝酸盐含量。

注意事项：
1.实验前要制备好所有试剂和标准液，并按照操作规程使用。

2.严格控制样品和试剂的污染，以避免误差。

3.实验室内要保持干净整洁，防止外界污染影响实验结果。

食品中亚硝酸盐含量分析方法引言-)是氮循环的中间产物，不稳定，广泛存在于各类食品中。

另亚硝酸盐(NO2-还是肉类加工中常用的添加剂，具有抑制肉毒梭状芽孢杆菌、使肉制品外，NO2-可使人体正常的血红发色以及增强风味的作用，目前还没有理想的替代物。

NO2蛋白(低铁血红蛋白)氧化成为高铁血红蛋白，发生高铁血红蛋白症，失去血红蛋-也是潜在的致癌物质，白在人体内输送氧的能力，导致出现组织缺氧症状，NO2-还可与仲胺类物质反应，生成具有致癌性的亚硝胺类物质。

因在人胃肠中，NO2-成为食品重要检测项目之一，研究其含量分析方法也变成了热点。

此，NO21. 光度法-的测定中一直占据有十分重要的地位，目前主要的方法有盐酸光度法在NO2萘乙二胺法、格里试剂比色法、催化分光光度法、紫外光度法、荧光法、原子吸收光谱法等。

1．1 盐酸萘乙二胺法-与对氨基苯磺酸反应生成重氮化合物后，再与盐酸萘在弱酸性溶液中，NO2乙二胺偶联生成紫红色的偶氮染料，用分光光度法在540 nm处测定，与标准曲线-含量，不仅简单、方便，而且快捷、比较定量。

检测几种常见腌制蔬菜中的NO2实用，但是此法所用的试剂和显色反应的稳定性差，易受温度和显色时间的影响，并且所用试剂已被确认有明显的致癌作用。

周文斌[1]对泡菜中亚硝酸盐测定方法进行了研究，通过试验发现：在进行泡菜样品中亚硝酸盐提取时，提取的最佳条件是在70℃的水浴中提取30～45 min；样品液中加入2 g活性炭粉，能有效的排除色素和抗坏血酸对亚硝酸盐测定造成的干扰：显色剂先加入2 mL对氨基苯磺酸溶液，5 min后再加入1 mL N-1-萘乙二胺盐酸溶液，使显色稳定。

1．2 格里试剂比色法-，然后用格里试剂比色法原理是在弱碱性条件下，用热水从样品中提取NO2-与对氨基苯磺酸发亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白，过滤后，在弱酸条件下，NO2生重氮化后，再和N-1-萘基乙二胺耦合形成红色偶氮染料，最大吸收波长为538 nm，所选择的显色剂不一样，最大吸收波长也有所不同。

实验十二食品中亚硝酸盐含量测定（格里斯试剂比色法）（—）目的熟悉食品中亚硝酸盐的卫生标准，掌握食品中亚硝酸盐含量测定的基本方法。

（二）原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，在与N－1－萘基乙二胺偶合形成紫红色染料后，与标准比较定量。

（三）试剂实验用水为蒸馏水，试剂不加说明者，均为分析纯试剂。

1．氯化胺缓冲液lL容量瓶中加入500ml水，准确加人20.0ml盐酸，振荡混匀，准确加入50ml氢氧化铵，用水稀释至刻度。

必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至pH9.6～9.7。

2．0.42mol／L硫酸锌溶液称取120g硫酸锌（ZnSO4·7H20），用水溶解并稀释至1000ml。

3. 20g／L氢氧化钠溶液称取20g氢氧化钠用水溶解，稀释至1L。

4. 对氨基苯磺酸溶液称取10g对氨基苯磺酸，溶于700ml水和300ml冰乙酸中，置棕色瓶中混匀，室温保存。

5. 0.1％N－1－萘基乙二胺溶液称取0.lg N－1－荼基乙二胺，加60％乙酸溶解并稀释至100ml，混匀后，置棕色瓶中，在冰箱中保存，一周内稳定。

6. 显色剂临用前将0.1％N－1－萘基乙二胺溶液和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。

7. 亚硝酸钠标准溶液准确称取250.0mg于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500ml容量瓶中，加100ml氯化胺缓冲液，加水稀释至刻度，混匀，在4℃避光保存。

此溶液每毫升相当于500ug的亚硝酸钠。

8．亚硝酸钠标准使用液临用前，吸取亚硝酸钠标淮溶液 1.00ml，置于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5.0ug亚硝酸钠。

（四）仪器1．小型粉碎机2．分光光度计（五）操作方法1．样品处理称取约10.00g（粮食取5g）经绞碎混匀样品，置于打碎机中，加70ml水和12m1 2％氢氧化钠溶液，混匀，用2％氢氧化钠溶液调样品至pH8，定量转移至200ml容量瓶中加10ml硫酸锌溶液，混匀，如不产生白色沉淀，再补加2～5m1 氢氧化钠，混匀。

食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。

过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。

因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。

本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。

实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。

- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。

- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。

实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。

取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。

2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。

得到的溶液即为10%油酸银试剂。

3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。

4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。

5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。

6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。

数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。

标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。

通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。

实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。

2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。

3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。

结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。

这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。

同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。

食品中亚硝酸盐的测原理
亚硝酸盐（Nitrite）是一种常见的食品添加剂，主要用于防腐和抗氧化作用。

测定食品中的亚硝酸盐含量可以采用多种方法，其中常见的方法是亚硼酸-镉还原法和亚硫酸盐法。

1. 亚硼酸-镉还原法：
- 原理：亚硝酸盐与亚硼酸在酸性条件下反应生成氮气。

氮气进一步与镉盐反应生成镉-亚硝酸盐络合物，其颜色可以通过分光光度法测定。

- 测定步骤：
a. 食品样品经适当操作后与酸性亚硼酸溶液反应，将亚硝酸盐还原为氮气。

b. 向溶液中加入过量的硫脲或肼，并加入酸性亚硝酸铋溶液，使其与氮气反应生成红色络合物。

c. 通过分光光度法测定络合物的吸光度，从而确定亚硝酸盐的含量。

2. 亚硫酸盐法：
- 原理：亚硝酸盐与亚硫酸钠反应生成硝酸盐和硫酸盐，通过反应后剩余的亚硫酸盐的浓度来测定亚硝酸盐的含量。

- 测定步骤：
a. 食品样品经适当操作后与亚硫酸钠溶液反应，将亚硝酸盐与亚硫酸钠反应生成硝酸盐和硫酸盐。

b. 使用碘液滴定剩余的亚硫酸盐，直至生成蓝色终点。

c. 根据滴定过程中消耗的碘液的体积，计算亚硝酸盐的含量。

总结而言，测定食品中亚硝酸盐的原理是通过化学反应将亚硝酸盐转化为其他物质，然后利用化学反应的特性或颜色的变化来测定亚硝酸盐的含量。

食品中亚硝酸盐的检测方法
食品中亚硝酸盐的检测方法可以通过以下几种方式进行：
1. 硝酸还原法：该方法是将食品样品经过预处理后，加入硫酸与碘化钾混合后还原生成亚硝酸，再通过测定溶液中的亚硝酸盐含量来确定样品中的亚硝酸盐含量。

2. 色谱法：色谱法是利用高效液相色谱或气相色谱的原理和技术，将食品样品中的亚硝酸盐分离出来，并通过不同检测器来测定其含量。

3. 光谱法：光谱法是通过红外光谱或紫外-可见光谱等光学方法，对食品样品进行扫描或测定，通过峰的强度来确定样品中亚硝酸盐的含量。

4. 电化学法：电化学法是利用电化学技术，将食品样品中的亚硝酸盐转化成电化学信号，再通过电极的测定来确定亚硝酸盐的含量。

需要注意的是，不同的食品样品可能需要不同的预处理方法，以及不同的仪器和设备来进行测定。

同时，还需要根据国家或地区的相关标准来进行测定，以确保测定结果的准确性和可靠性。