实验八 食品中亚硝酸盐的测定 16090211

食品中亚硝酸盐的测定方法食品中亚硝酸盐的测定方法其实是个很有趣的话题。

说到亚硝酸盐，大家肯定想到的就是腌制食品。

对吧，香香的火腿肠、腊肉，光是想想就让人流口水。

不过，这里面的亚硝酸盐可不是个好东西。

它在我们的身体里，可能会变成一些不太友好的物质，长期吃下去，健康可就会亮红灯了。

所以，今天咱们就来聊聊这个亚硝酸盐是怎么测定的，别担心，听我唠嗑，保证不晕。

咱们得搞明白，亚硝酸盐这个小家伙是从哪儿来的。

你想啊，很多食品为了保持色泽和口感，会添加一些防腐剂，亚硝酸盐就是其中之一。

它能让肉类看起来鲜艳可口，谁不爱那种颜色呢？但是这玩意儿一旦摄入过量，就容易出问题了。

说到底，咱们的健康可不能只靠颜色来决定。

现在说到测定方法，这可是一门学问。

很多实验室都能做这项检测，咱们最常用的方法就是比色法。

简单说，就是把样品溶液放在特定的试剂里，接着通过颜色变化来判断亚硝酸盐的含量。

这可不是什么高深的哲学，想象一下你在调色板上调颜色，调得越接近目标，心里越美滋滋。

比色法其实分好多步骤，第一步就是准备样品。

你得先把食物搞成液体状态。

别担心，不是让你喝下去，而是把它放进搅拌机里，打成浆。

然后，再过滤一下，确保液体干干净净。

这时候，旁边的同事可能会好奇地问：“你这是在做什么好吃的？”你就可以笑着告诉他们，你在为健康把关。

加入试剂。

这一步是个关键点，选择合适的试剂可不能马虎。

加入试剂后，液体的颜色会发生变化。

这个变化就像调味料加进汤里，颜色变得浓郁，香气四溢。

但这里得注意，不同浓度的亚硝酸盐会对应不同的颜色深浅。

你得像个艺术家一样，眼睛瞪得大大的，认真观察，别让颜色欺骗了你。

然后，你得用光度计来测量颜色的深浅。

光度计就像个小侦探，能够很准确地告诉你样品的亚硝酸盐含量。

把样品放进光度计里，按下按钮，等待几秒钟，数字就跳出来了。

这时候，心里难免有点小紧张，生怕结果让人失望。

不过，没关系，结果出来后，你可以大大方方地和同事们分享你的发现，像个小明星一样，光芒四射。

食品中亚硝‎酸盐的检测‎方法方法一：亚硝酸盐快‎速检测管使用说明：方法原理：按照国标G‎B/T 5009.33做成的‎速测管，与标准色卡‎比较定量。

操作方法：1. 食盐中亚硝‎酸盐的快速‎检测及食盐‎与亚硝酸盐‎的快速鉴别‎：用袋内附带‎小勺取食盐‎1平勺，加入到检测‎管中，加入蒸馏水‎或纯净水至‎1ml刻度‎处，盖上盖，将固体部分‎摇溶，10分钟后‎与标准色板‎对比，该色板上的‎数值乘上1‎0即为食盐‎中亚硝酸盐‎的含量mg‎/ kg，（国标规定食‎盐（精盐）中亚硝酸盐‎的限量卫生‎标准应≤2‎mg/kg）。

当样品出现‎血红色且有‎沉淀产生或‎很快退色变‎成黄色时，可判定亚硝‎酸盐含量相‎当高，或样品本身‎就是亚硝酸‎盐。

2. 液体样品检‎测：直接取澄清‎液体样品1‎m l加入到‎检测管中，盖上盖，将试剂摇溶‎，10分钟后‎与标准色板‎对比，找出与检测‎管中溶液颜‎色相同的色‎阶，该色阶上的‎数值即为样‎品中亚硝酸‎盐的含量m‎g/L（以NaNO‎2计）。

（牛乳及豆浆‎也可直接检‎测，结果不得超‎过0.25mg/L ，有颜色的液‎体样品可加‎入一些活性‎炭脱色过滤‎后测定）。

3. 固体或半固‎体样品检测‎：取粉碎均匀‎的样品1.0g或1.0ml至1‎0ml比色‎管中，加蒸馏水或‎去离子水（纯净水）至刻度，充分震摇后‎放置，取上清液（或过滤或离‎心得到的上‎清液）1.0ml加入‎到检测管中‎，盖上盖，将试剂摇溶‎，10分钟后‎与标准色板‎对比，该色板上的‎数值乘上1‎0即为样品‎中亚硝酸盐‎的含量mg‎/kg，L（以NaNO‎2计）。

如果测试结‎果超出色板‎上的最高值‎，可定量稀释‎后测定，并在计算结‎果时乘上稀‎释倍数（如从10m‎l比色管中‎取出1.0mL转入‎另一支10‎m l 比色管‎中，加水至刻度‎，从中取1.0mL加入‎到检测管中‎测定，测试结果乘‎上100（倍稀释）即为样品中‎亚硝酸盐的‎含量。

食物中亚硝酸盐含量的测定
亚硝酸盐是一类无机化合物的总称，主要指亚硝酸钠，为白色至淡黄色粉末或颗粒状，味微咸，易溶于水。

硝酸盐和亚硝酸盐广泛存在于人类环境中，是自然界中最普遍的含氮化合物。

以下是一些测定食物中亚硝酸盐含量的方法：
1. 分光光度法：这是一种常用的分析方法，基于亚硝酸盐在特定波长下的吸光度来定量。

将食物样品与化学试剂反应，形成一种有色化合物，然后通过分光光度计测量其吸光度，并与标准曲线进行比较，从而确定亚硝酸盐的含量。

2. 离子色谱法：这是一种分离和分析离子的技术，可用于测定亚硝酸盐。

食物样品经过前处理后，通过离子色谱仪进行分离和检测，根据保留时间和峰面积来定量亚硝酸盐的含量。

3. 气相色谱法：该方法适用于分析挥发性化合物，如亚硝酸盐。

食物样品经过衍生化处理，将亚硝酸盐转化为易挥发的衍生物，然后通过气相色谱仪进行分离和检测。

4. 酶联免疫吸附法：这是一种基于抗体-抗原相互作用的分析方法。

使用特异性的亚硝酸盐抗体与食物样品中的亚硝酸盐结合，然后通过酶标抗体或显色底物进行检测。

无论选择哪种方法，都需要根据具体的实验条件和要求进行适当的样品前处理，以去除干扰物质并提取出亚硝酸盐。

同时，应该使用标准物质进行校准和质量控制，确保测量结果的准确性和可靠性。

这些方法通常需要专业的实验室设备和技术，因此如果你需要测定食物中亚硝酸盐的含量，建议咨询专业实验室或相关机构。

一、实验目的本实验旨在学习亚硝酸盐的测定方法，了解亚硝酸盐在食品中的存在及其对人体健康的影响。

通过实验，掌握亚硝酸盐的提取、分离和定量分析方法，提高对食品中亚硝酸盐含量的检测能力。

二、实验原理亚硝酸盐（NO2-）是一种常见的食品添加剂，广泛应用于肉制品的加工中，具有发色、防腐和抗微生物作用。

然而，过量的亚硝酸盐摄入对人体健康有害，可能导致急性中毒、慢性疾病甚至癌症。

因此，对食品中亚硝酸盐含量的检测具有重要意义。

本实验采用盐酸萘乙二胺法测定亚硝酸盐含量。

该方法基于亚硝酸盐与对氨基苯磺酸在酸性条件下发生重氮化反应，生成重氮盐，再与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶合形成玫瑰红色染料。

通过比色法测定染料的吸光度，可以计算出样品中亚硝酸盐的含量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 火腿肠样品- 试剂：对氨基苯磺酸、N-1-萘基乙二胺盐酸盐、盐酸、亚硝酸钠标准溶液等- 仪器：酸度计、分光光度计、离心机、移液器、容量瓶、试管等2. 实验步骤：1. 样品处理：将火腿肠样品剪碎，称取适量，加入蒸馏水溶解，搅拌均匀。

2. 提取：将样品溶液用酸度计调至pH 2.0，加入适量的亚铁氰化钾和乙酸锌，充分混合，静置30分钟，使蛋白质沉淀。

3. 分离：将上层清液转移至离心管中，离心分离蛋白质沉淀。

4. 测定：取一定量的上层清液，加入对氨基苯磺酸和N-1-萘基乙二胺盐酸盐，充分混合，静置15分钟，使染料形成。

5. 比色：用分光光度计测定染料的吸光度，与标准曲线比较，计算出样品中亚硝酸盐的含量。

四、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：根据亚硝酸钠标准溶液的浓度和吸光度，绘制标准曲线。

2. 样品测定：对火腿肠样品进行测定，得到样品中亚硝酸盐的吸光度。

3. 结果计算：根据标准曲线和样品吸光度，计算出样品中亚硝酸盐的含量。

五、实验讨论1. 实验过程中，酸度对亚硝酸盐的测定结果有较大影响。

实验过程中应严格控制酸度，确保测定结果的准确性。

2. 亚铁氰化钾和乙酸锌在实验中起到沉淀蛋白质和除去脂肪的作用，提高实验的灵敏度。

食物中的亚硝酸盐含量测定实验亚硝酸盐是一种普遍存在于食物中的化学物质，它具有一定的危害性。

过量的亚硝酸盐摄入可引起健康问题，如致癌作用和对血液循环系统的不良影响。

因此，了解食物中的亚硝酸盐含量对我们的健康至关重要。

本文将详细介绍一种简单有效的食物中亚硝酸盐含量测定实验方法。

实验材料：- 油酸银试剂：用浓硝酸和两滴稀硝酸混合制成的10%油酸银溶液。

- 食物样品：如蔬菜、肉类或加工制品等。

- 高纯水：用于制备试剂和稀释样品。

实验步骤：1. 样品制备：将所需食物样品洗净，去皮并切成小块。

取适量的食物样品（约10克）放入容器中备用。

2. 制备油酸银试剂：在实验室条件下，取适量的浓硝酸（约1ml），加入两滴稀硝酸，并充分混合。

得到的溶液即为10%油酸银试剂。

3. 样品处理：将预先准备好的食物样品置于容器中，加入适量的高纯水（约50ml），然后加入足量的油酸银试剂（约2ml）。

4. 摇晃溶液：将容器封闭，并轻轻地摇晃溶液，使油酸银试剂充分与样品接触，反应1分钟。

5. 过滤液处理：使用滤纸或滤膜将溶液过滤，以去除残留的食物固体颗粒。

6. 比色测定：将过滤后的溶液放入比色皿中，然后使用紫外-可见分光光度计测量其吸光度。

数据处理与结果分析：根据所得的吸光度值，可以通过制定标准曲线来计算食物样品中的亚硝酸盐含量。

标准曲线通常由不同浓度的亚硝酸钠溶液制成。

通过比较食物样品的吸光度值与标准曲线上的相应吸光度值，可以确定食物中的亚硝酸盐含量。

实验注意事项：1. 实验操作时请佩戴适当的实验室防护设备，如手套和护目镜。

2. 使用实验室用具时要注意安全，如锥形瓶和滤纸。

3. 进行比色测定时，确保比色皿干净，并且避免空气中的尘埃进入溶液。

结论：通过本实验，我们可以有效地测定食物中的亚硝酸盐含量。

这有助于我们评估食物的安全性，并采取相应的措施来减少亚硝酸盐的摄入。

同时，本实验方法简单易行，可以在实验室或家庭环境中进行，为亚硝酸盐的监测提供了一种可行的方法。

食品中亚硝酸盐的检测方法
食品中亚硝酸盐的检测方法可以通过以下几种方式进行：
1. 硝酸还原法：该方法是将食品样品经过预处理后，加入硫酸与碘化钾混合后还原生成亚硝酸，再通过测定溶液中的亚硝酸盐含量来确定样品中的亚硝酸盐含量。

2. 色谱法：色谱法是利用高效液相色谱或气相色谱的原理和技术，将食品样品中的亚硝酸盐分离出来，并通过不同检测器来测定其含量。

3. 光谱法：光谱法是通过红外光谱或紫外-可见光谱等光学方法，对食品样品进行扫描或测定，通过峰的强度来确定样品中亚硝酸盐的含量。

4. 电化学法：电化学法是利用电化学技术，将食品样品中的亚硝酸盐转化成电化学信号，再通过电极的测定来确定亚硝酸盐的含量。

需要注意的是，不同的食品样品可能需要不同的预处理方法，以及不同的仪器和设备来进行测定。

同时，还需要根据国家或地区的相关标准来进行测定，以确保测定结果的准确性和可靠性。

食品中亚硝酸盐的检测前言大家都知道过量的亚硝酸盐会对我们的身体造成一定的损害，甚至会致癌。

亚硝酸盐经常存在于过夜的饭菜，腌制的泡菜或者肉及肉制品之中。

我国食品添加剂的标准规定在肉制品中亚硝酸盐的使用量不得超过0.15g/kg，残留量不得超过50mg/kg。

那么亚硝酸盐到底该如何检测呢，下面我们就一起来看看吧!亚硝酸盐的检测（分光光度法，）试剂配制1.亚铁氰化钾溶液（106g/L）:称取106.0g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100ml。

2.乙酸锌溶液（220g/L）：称取220.0g乙酸锌，先加20mL冰乙酸溶解，用水稀释至1000mL。

3.饱和硼砂溶液（50g/L）：称取5.0g硼酸钠，溶于100mL热水中，冷却后备用。

4.盐酸（20%）：量取20ml盐酸，用水稀释至100ml。

5.对氨基苯磺酸溶液（4g/L）：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于20%盐酸中，混匀放棕色瓶中避光保存。

6.盐酸萘乙二胺溶液（2g/L）:称取0.2g盐酸萘乙二胺，溶于100ml水中，混匀后放入棕色试剂瓶避光储存。

样品处理1.称取5g样品(精确至0.001g),置于250ml具塞锥形瓶中，加12.5ml 50g/L 饱和硼砂溶液，70℃左右的热水约150ml，混匀后放沸水浴中加热15分钟后取出放入冷水中冷却，冷却至室温。

2.将试液全部移入200ml的容量瓶中，加5ml的106g/l亚铁氰化钾溶液，混合均匀后再加220g/ml的乙酸锌溶液5ml混匀（沉淀样品中蛋白质）。

定容后摇晃均匀静置30分钟（沉淀脂肪）。

3.上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30ml，滤液备用。

4.吸取40.0ml滤液于50ml带塞比色管中，另取0.00ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.50ml、2.00ml亚硝酸盐标准溶液分别置于50ml 比色管中，加2ml的4g/l对氨基苯磺酸溶液，混匀后静置3-5分钟加1ml的2g/l 盐酸萘乙二胺溶液加水至刻度并混合均匀静置15分钟。

亚硝酸盐的测定实验报告
实验目的，通过本次实验，我们旨在掌握亚硝酸盐的测定方法，了解其在水中的存在形式，并且掌握其测定原理和操作方法。

实验原理，本实验采用硫酸铵还原法，将亚硝酸盐还原为氮气，然后用碘化钾滴定的方法测定亚硝酸盐的含量。

其中，硫酸铵在酸性条件下可以还原亚硝酸盐为氮气，而滴定过程中，碘化钾与亚硝酸盐发生反应生成碘，在滴定过程中，碘化钾的溶液由无色变为淡黄色，再由淡黄色变为深黄色，直至出现紫色终点时，停止滴定，根据滴定所耗的碘化钾的体积，计算出亚硝酸盐的含量。

实验步骤：
1. 取一定量的水样，加入适量的硫酸铵和硫酸，使水样呈酸性。

2. 将水样加热至沸腾，加入适量的碘化钾指示剂。

3. 用标准的硫代硫酸钠溶液滴定水样，直至出现紫色终点。

4. 记录所耗的硫代硫酸钠溶液的体积。

实验结果，根据实验数据计算出水样中亚硝酸盐的含量为X mg/L。

实验结论，通过本次实验，我们成功掌握了亚硝酸盐的测定方法，了解了其在水中的存在形式，掌握了其测定原理和操作方法。

同时，我们也注意到在实验过程中需要严格控制各种试剂和仪器的使用，以确保实验结果的准确性和可靠性。

总结，本次实验不仅帮助我们掌握了亚硝酸盐的测定方法，还提高了我们的实验操作能力和数据处理能力。

在今后的实验中，我们将继续加强对实验原理和操作方法的理解，不断提高实验技能，为科研工作打下坚实的基础。

通过本次实验，我们对亚硝酸盐的测定有了更深入的了解，也为今后的科研工作提供了重要的实验基础。

希望通过不断的学习和实践，我们能够更好地运用所学知识，为科学研究做出更大的贡献。

任务：1、亚硝酸盐含量是酱腌制品及肉制品监测的重要卫生指标，请查阅GB2760亚硝酸盐在不同产品中的最大限量值。

2、请查阅并下载亚硝酸盐分析的国家标准，了解其分析方法，并根据实验室条件选择和确定实验方案。

3、对照国家标准，列出所需仪器和试剂。

亚铁氰化钾溶液称取106.0 g 亚铁氰化钾,定容至1 000 ml。

乙酸锌溶液称取220.0 g 乙酸锌, 加30 ml冰乙酸溶于水, 定容至1 000 ml。

饱和硼砂溶液称取5.0 g 硼酸钠, 溶于亚硝酸盐标准溶液亚硝酸盐标准溶液( 10 100ml mg/L)( GBW(E)100036) 。

硝酸盐标准溶液将硝酸盐标准溶液( 100mg/L)( GBW(E)080265) 用水稀释至10 μg/ 的硝酸盐标准使用液。

淋洗液配制准确称取碳酸钠0.7 g, 碳酸氢钠0.2 g, 溶于适量水中, 定容至2 000 ml。

注以上试剂均采用分析纯试剂。

热水中, 冷却备用。

4、依照国家标准，设计分析操作流程图。

5、在提取亚硝酸的试样匀浆中，为何添加饱和硼砂溶液，过滤时为何要弃去粗滤液？饱和硼砂在这里的作用是助提剂，对蛋白质有沉淀作用，硼砂起到的作用是吸收亚硝酸盐分解的NO2的作用，使用亚硝酸盐的总量不会因加热而分解减少。

硼砂溶入水中，即被水解为等量的硼酸与硼酸二氢钠，起缓冲溶液作用。

溶液pH约为9.18，即碱性。

调节PH 硼砂可与酸反应生成硼酸加硼砂可使PH升高过滤时滤纸会吸附一部分硝酸盐，要等滤纸中硝酸盐饱和后的滤液才能进行试验6、为何要显色反应需3—5min？7、如果样品溶液的吸光度不在工作曲线线性范围，应如何处理？8、为保证测定结果准确性，操作中应注意哪些环节？分析结果的几个因素有充分的了解实验表明，在测定食品中亚硝酸盐含量时，温度显色时间和样品pH均对分析结果有一定的影响在具体实验操作中，在室温不低于 19℃的条件下，无对温度进行调控，但需要对显色时间和样品 pH 严格控制。

肉制品中亚硝酸盐的含量检测摘要：在弱酸条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料 ,建立了一种简易快速的测定食品中微量亚硝酸盐的方法。

分光光度法抗干扰能力强，根据朗伯-比耳定律能较快地测定自制食品中香肠中亚硝酸盐的含量。

关键字：亚硝酸盐亚硝酸盐测定引言亚硝酸盐是一种有毒物质，半致死量为22mg/kg，对于体重60kg的人来说是1.32g。

亚硝酸盐与蛋白质分解产物在酸性条件下发生反应，易产生亚硝胺类致癌物。

胃中的酸碱度适宜亚硝胺的形成。

亚硝胺类化合物在腌肉、香肠、熏肉、鱼干、虾皮、鱿鱼丝等动物性食品中含量较高，有强烈的致胃癌作用。

在胃酸不足的情况下，胃中细菌繁殖使食物中原本无毒的硝酸盐还原成亚硝酸盐，更会加大胃癌的危险。

一、亚硝酸盐的相关性质1亚硝酸盐的性质护色剂又称呈色剂或发色剂，是食品加工中为使肉与肉制品呈现良好的色泽而适当加入的化学物质。

发色剂在食品中的作用：(1)可发色作用；(2)抑菌作用；(3)产生风味。

2中毒后症状过量亚硝酸盐进入人体，会氧化血液中的血红蛋白为高铁血红蛋白，后者无携氧功能，导致组织缺氧，引起肠原性青紫症，皮肤青紫是本病的特征，尤以口唇青紫最为普遍。

口服亚硝酸盐10分钟至3小时后，可出现头晕、恶心、呕吐等症状。

严重者出现意识丧失、昏迷、呼吸衰竭，甚至死亡。

二．亚硝酸盐含量测定（α-萘胺法）2.1 实验原理自样品中抽提分离出亚硝酸盐，亚硝酸盐在酸性条件下与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐，此重氮盐再与α-萘胺试剂发生偶合反应，生成紫红色偶氮化合物。

其颜色的深度与样液中亚硝酸含量成正比，可比色测定。

反应式如下： N H 2SO 3H N +N SO 3H NO 2-H +O H 2+++ NSO 3H N NH 2N +N SO 3H +NH 2肉制品中亚硝酸盐含量==50150040100010001⨯⨯⨯⨯m X （mg/kg ） 式中：X 为由测得的吸光度什在标准曲线上对应的亚硝酸钠质量浓度（μg/mL ）；m 为样品质量（g ）。

《火腿肠中亚硝酸盐的测定》实验报告仇兴叶2013302064 一、实验目的亚硝酸盐是一种重要的含氮化合物，并且存在于人们喜爱的日常零食火腿肠中，但是亚硝酸盐对人体健康有害。

为了拓宽学生对含氮物质的认识，加强化学与生活的联系，我们现选用了一种比较简便的方法测定所吃火腿肠中亚硝酸盐的含量，并将其与国家标准相比较。

同时，一直以来,很多科普文章都提到亚硝酸盐中毒及亚硝酸盐致癌的事,提到腌制的泡菜、榨菜、雪菜等亚硝酸盐含量超标,以致广大市民谈咸菜色变,不敢食用。

亚硝酸钠做为食品添加剂，过多使用对人体产生毒害作用，亚硝酸盐与仲胺反应生成具有致癌作用的亚硝胺。

我国卫生标准GB2760 中规定：肉制品中亚硝酸盐的残留量应≤30mg/kg一、实验原理通过查阅大量文献，我们发现测定亚硝酸盐的方法主要有紫外可见分光光度计法、格里斯试剂比色法、锡柱还原法、二磺酸酚分光光度法、间接碘量法等。

其中间接碘量法是这几个实验方法中比较简便的一种，操作简便，原料易得。

所以我们打算用这种方法来测定市面上常见的火腿肠中亚硝酸盐的含量。

NO2—在酸性条件下具有氧化性，能把I—氧化成I2，I2跟淀粉溶液很容易形成蓝色物质I2-淀粉，但I2又能跟S2O32-发生氧化还原反应，在此反应中它又被还原成I—从而使蓝色褪掉。

根据这一特点，用Na2S2O3滴定液来滴定还原出来的I2，计算I2的质量，再间接的计算出样品中亚硝酸盐的含量。

有关化学方程式如下：2NO2—+4H++2I—=2N O↑+I2+2H2OI 2+2S2O32-=2I_+S4O62-二、实验药品和仪器（1）仪器分析天平一台、剪刀2把、研钵2个、500mL烧杯2个、250mL烧杯2个、水浴锅1个、漏斗2个、大号滤纸一盒、玻璃棒4个、锥形瓶8个、表面皿4个、洗瓶2个、铁架台2个、100mL容量瓶2个、250mL容量瓶2个、pH试纸1个、胶头滴管4个、碱式滴定管2个、25mL吸量管2个、洗耳球2个、10mL量筒2个、100mL量筒2个（2）药品喜旺火腿肠、双汇火腿肠、蒸馏水、活性炭、碘化钾、硫代硫酸钠标准溶液、淀粉、稀盐酸三、实验步骤（1）亚硝酸盐的提取①称空研钵的质量，将咸菜或肉制品用剪刀剪碎，称研钵和物品的总质量，然后用研钵研碎，将得到的碎片和汁液都转移到烧杯中，加入蒸馏水，在70℃的水浴中加热30min。

食品中亚硝酸钠的测定实验报告一、实验目的1、掌握样品制备、提取的基本操作技能。

2、掌握分光光度计的使用。

3、掌握比色法测定食品中亚硝酸盐的原理与方法。

4、了解食品中亚硝酸盐含量的卫生标准。

二、实验原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化，产生重氮盐，此重氮盐再与偶合试剂(盐酸萘乙二胺)偶合形成紫红色染料，于波长538nm处测定其吸光度后，可与标准比较定量。

三、试剂1、亚铁氰化钾溶液：称取106g亚铁氰化钾[K4Feg(CN)5:3H2O]，溶于水后，稀释至1000ml。

2、乙酸锌溶液：称取220g乙酸锌[Zn(CH2COO)2:2H2O]，加30ml冰乙酸溶于水，并稀释至1000ml。

3、饱和硼砂溶液：称取5g硼酸钠(Na2BO;10H2O)，溶于100ml热水中，冷却后备用。

4、0.4%对氨基苯磺酸溶液：称取0.4g对氨基苯磺酸，溶于100ml20 %的盐酸中，避光保存。

5、0.2%盐酸萘乙二胺溶液:称取0.2g盐酸萘乙胺，溶于100ml水中，避光保存。

6、亚硝酸钠标准溶液:精密称取0.0500g于硅胶干燥器中千燥24小时的亚硝酸钠，加水溶解移入250ml容量瓶中，并稀释至刻度。

此溶液每ml相当于200 μg亚硝酸钠。

7、亚硝酸钠标准使用液:临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液2.50ml，置于100ml 容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5 μg亚硝酸钠。

三、仪器、器材小型粉碎机( 或匀浆机)、分光光度计、水浴锅、电子天平、电炉、温度计。

容量瓶( 250ml)、比色管( 50ml)、色管架、吸管、漏斗、三角烧瓶、烧杯等。

四、检测材料虾皮，购于某超市及某市场。

五、实验方法1、样品制备(1)称取样品5g,加去离子水10ml,用匀浆机捣碎，用少量去离子水冲洗倒入50ml烧杯中。

(2)加入12.5ml硼砂饱和液，搅拌匀，用约150ml去离子水将样品匀浆液洗入250ml容量瓶中，80°C 水浴20min,取出。

实验项目食品中亚硝酸盐的测定
按照工作过程咨询、计划、实施、检查、评价五个步骤设计实验项目，通过情景模拟，设计任务及问题，使学生尽可能自主完成实验项目。

模拟情景：某食品公司通过工艺改进生产了一批酱腌菜和肉制品，现委托对其重要卫生指标亚硝酸盐进行分析检测，请对所送检样品亚硝酸盐含量进行分析。

任务：
1、亚硝酸盐含量是酱腌制品及肉制品监测的重要卫生指标，请查阅GB2760亚硝酸盐在不同产品中的最大限量值。

2、请查阅并下载亚硝酸盐分析的国家标准，了解其分析方法，并根据实验室条件选择和确定实验方案。

3、对照国家标准，列出所需仪器和试剂。

4、依照国家标准，设计分析操作流程图。

5、在提取亚硝酸的试样匀浆中，为何添加饱和硼砂溶液，过滤是为何要弃去粗滤液？
6、为何要显色反应需3—5min？
7、如果样品溶液的吸光度不在工作曲线线性范围，应如何处理？
8、为保证测定结果准确性，操作中应注意哪些环节？
9、编写亚硝酸盐检验的原始记录表，记载原始数据（注意数据记录及运算规则），并对检验数据进行分析（精密度等）；
10、撰写检验报告。

食品中亚硝酸盐的测定一、实验目的学会使用分光光度法测定亚硝酸盐的含量；绘制亚硝酸盐标准线。

二、实验原理试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫色染料，外标法测得亚硝酸盐含量。

三、实验器材1.仪器：烧杯100ml×1、锥形瓶500ml×1,250ml×1、漏斗、比色管50ml×11、分光光度计2.试剂：硫酸锌、亚铁氯化钾、缓冲溶液、显色液1、显色液2、显色液3四、实验内容乳粉的预处理：在100ml烧杯中，称取10g，准确至0.001g，用112ml 50℃~55℃的水将样品洗入500ml 锥形瓶中，混合。

脂肪和蛋白质的去除：按顺序，加入24ml硫酸锌溶液，24ml亚铁氯化钾和40ml缓冲溶液，边加边摇，静置15min~1h，过滤，滤液用250ml锥形瓶收集。

测定：30ml滤液→50ml比色管→30ml显色液1→2.5ml显色液2，静置5min→1ml显色液3，静置5min→定容至刻度线→在538nm波长下测定吸光值A管号0 1 2 3 4 5 6 7 8标准液加0 1 2 3 4 5 6 8 10 入量/ml亚硝酸根0 2 4 6 8 10 12 16 20 的浓度mg/ml加水至30ml显色液1加3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 入量/ml显色液2加2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 2.5 入量/ml静置5min，边加边混匀显色液3加1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 入量/ml校正值0.008吸光值A 0 0.023 0.043 0.059 0.084 0.115 0.147 0.195 0.224。